用显微光度计对不同细胞DNA含量的测定

显微光度计可以直接测量单细胞内核酸、蛋白质和酶的含量,每条染色体的 DNA 量和带数以及免疫反应中结合抗体的定量等。我们用 Univar 显微光度计比较了吸收扫描法和荧光法的效果。实验测定了小麦和大麦根尖细胞、鸡血细胞,镰刀菌孢子和酵母菌不同生长阶段的细胞。结果表明吸收扫描法测定小麦六倍体、四倍体和二倍体 DNA 含量,其比值为3.2:2.1:1。荧光测定酵母菌子囊孢子 DNA 含量(任意值)为462.61,营养细胞为914.38,两个子囊孢子核结合后为925.08。对大细胞(植物)两种方法效果都好。对小细胞(微生物)荧光法较吸收扫描法更为稳定。     

7200型可见分光光度计测定磷酸氢钙中磷含量

现行行业标准HG2636-94中磷酸氢钙中磷的测定方法是重量法。但它操作繁琐费时,为适应教学科研和生产对其分析的快捷要求,笔者通过反复地实验,运用国标GB/T6437-92的方法用7200型可见分光光度计测定磷酸氢钙中磷含量。1原理先将试样中有机物用盐酸和浓硝酸(1∶1)破坏,使含磷试样溶解,在酸性溶液中,用钒钼酸铵处理,生成黄色的(NH4)3PO4NH4VO3·16MoO5,在波长420nm下进行比色测定。2仪器和试剂2.1仪器7200型可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司);分析天平(感量0.0001g);电热干燥箱(天津泰斯特LA-101,可控制温度为0～240℃)。2.2试…     

分光光度计法测定紫菜中铝的含量

采用湿法对紫菜样品进行消解,比色法测定紫菜中铝的含量。在优化试验条件下,测定铝线性范围为0-8．00μg,相对标准偏差3．5％．加标回收率为93．5％-96．8％,该法操作简便、快速、精密度高,目前已经被大量用于食品中铝含量的测定。     

小麦叶片叶绿素含量测定的分光光度计法

采用分光光度计法测定小麦叶片叶绿素含量,比较干鲜2种状态下小麦叶片叶绿素含量。结果表明:在失水、不失绿情况下,小麦叶片叶绿素含量不受影响。     

原子吸收分光光度计在土壤磷测定中的应用

由于磷元素的原子吸收在真空紫外区,且极易形成氧化物,所以目前用原子吸收法测定磷存在很多困难.但磷形成络合物后对可见光有分子吸收,因此,若在原子吸收分光光度计燃烧室中装上比色杯,则可利用原子吸收分光光度计优良的光路系统测定磷络合物的分子吸收,并进行定量.本文就此进行了探讨.     

白术真菌病害的分离鉴定

2011年6— 8月份在浙江磐安地区采集到白术病害根、茎和叶片样本,经过室内分离试验得到4个根茎真菌分离物（分别记为R1~R4）与8个叶片真菌分离物（分别记为L1～L8）。依据科赫法则进行致病性测定,R1,R2为白术茎腐病病原菌,L3为白术叶斑病病原菌。通过形态学观察及分子鉴定方法确定R1为尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum,R2为半裸镰刀菌Fusarium incarnatum,L3为长柄链格孢菌Alternaria longipes。     

应用原子荧光分光光度计测定土壤中汞的方法

运用AFS-2202双道原子荧光分光光度计测定土壤总汞含量.采用硫酸-硝酸-高锰酸钾消化土壤样品,以1%硼氢化钾作为还原剂,在5%硫酸-硝酸(1:1)介质中用AFS-2202双道原子荧光分光光度计进行测定.汞的检出限为0.01 mg·kg-1,回收率为95.0%～105.0%.     

药剂防治高山红景天根腐病初步研究

调查发现，从长白山引种至辽宁省栽培的高山红景天根茎腐烂十分严重，蔓延迅速．１～２年生植株发病率为３０％～４０％，３～４年生植株死亡率高达８０％～９０％。由发病区采集典型病株，在病健交界处取样，以组织分离法分离纯化，鉴定为高山红景天根腐病，属尖镰孢菌（ＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌｏｏｈｔ）引起。根据室内抑菌试验结果，进行田间药剂试验。试验结果表明，使用杀菌剂进行防治高山红景天根腐病，可以抑制极腐病的发展，有减轻根腐病的作用。     

适用于rDNA ITS分析的兰属菌根真菌培养及DNA提取方法

为探讨兰属植物与其共生真菌之间专一性关系,采用覆盖纤维素滤膜于PDA培养基的方法培养兰属菌根真菌,提取其DNA后用于rDNA ITS分析。在培养过程中克服PDA液体培养及固体培养获得菌丝体少的缺点,操作方便,获得大量菌丝体;采用改进的提取植物基因组DNA的SDS方法提取真菌的DNA,通过提高缓冲液的pH值、增加EDTA的浓度以提高DNA的提取效果。结果表明,此培养方法及改进的DNA提取方法均简便易行,提取的DNA产量高、质量较好;可满足菌根真菌rDNA ITS分析的要求。     

景天属植物叶绿体DNA与核DNA分步提取方法研究

[目的]研究景天属植物叶绿体DNA与核DNA分步提取方法.[方法]以景天属植物佛甲草、八宝景天、华北景天、费菜和垂盆草为研究材料,进行叶绿体DNA和核DNA的分步提取,通过琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增进行检测.[结果]改进后的方法提取的核DNA和叶绿体DNA的质量好,纯度高.以叶绿体DNA和核DNA为模板进行PCR扩增均得到理想的条带,扩增率为100％,重复性好.[结论]该研究为叶绿素DNA和核DNA的提取提供了新的思路.     

一种简易有效的提取真菌DNA化学改良方法

[目的]探索适合真菌基因组DNA提取的有效方法。[方法]以酵母茵（Hansenula sp.HS07A）和青霉菌（Penicillium sp.HS07）为供试菌株,分别采用煮沸裂解法、石英砂研磨法、研磨和反复研磨冻融法和化学改良法提取其基因组DNA,比较这4种方法的提取效果。[结果]化学改良法提取基因组DNA,除去了机械破壁过程,减少了机械力对DNA造成的破坏,运用阴离子去污剂SIB提取DNA安全、价廉,能有效、完整地提取高质量的基因组DNA,凝胶电泳条带清晰、无弥散,以此基因组DNA作为目的片段的PCR扩增模板,扩增效果优于改良前的方法,并且这种方法也适合多种真菌和细菌基因组DNA的提取。[结论]化学改良法是提取真菌基因组DNA的有效方法。     

DNA条形码技术在真菌上的研究与应用

DNA条形码技术通过标准化的小片段DNA序列对物种进行快速鉴定分析,在动植物和微生物分类鉴定中得到广泛应用,而在真菌鉴定研究中相对滞后.综述了DNA条形码的起源、发展及其在真菌研究中的应用,并探讨分析了DNA条形码技术存在的问题以及未来的发展.     

细胞核DNA在研究杨属植物遗传中的应用

综述了细胞核DNA在杨属植物遗传进化、分类系统、基因流、杂种鉴定及遗传多样性等方面的研究应用。     

应用型本科院校微生物学实验教学内容的改革

微生物学是生命科学类专业中应用性很强的一门课程。当前微生物学实验教学中部分存在基础性实验分散,针对此情况,我校尝试对现有教学内容进行优化,使学生充分提高动手能力和实验兴趣,培养科研思维,从而更好地实现应用型人才培养目标。     

披针叶黄华生物碱成分分析

[目的]研究披针叶黄华生物碱的具体种类及含量.[方法]采用生物碱系统提取、硅胶柱层析分离及重结晶技术从披针叶黄华干草粉中分离生物碱,并用GC-MS对总碱和结晶进行测定.[结果]分离出2种生物碱结晶Ⅰ和结晶Ⅱ,总碱中含有7种喹诺里西啶生物碱,结晶Ⅰ为黄华碱,结晶Ⅱ为Tetrahydrodeoxoargentamin.[结论]该试验为进一步研究披针叶黄华动物中毒的毒性毒理提供了理论依据.     

一种制备富含多糖丝状真菌基因组DNA的方法

采用改进CTAB法提取的红曲霉、镰刀菌和微小毛霉基因组DNA数量和质量都较为理想,DNA产量在90～130 μg·g-1湿菌体,大小均在21kb.4℃可保存4～6个月.用该方法提取的基因组DNA为PCR扩增的模板,扩增结果稳定、准确.分别用限制性内切酶SacⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶解红曲霉M34均能得到较为均一的完全酶切带.该方法快速、简便,成本低,适合富含色素和多糖的真菌的基因组DNA的提取.此外,还适合真菌分子育种等的筛选和样本量大的PCR检测.     

烟草高分子量核DNA提取方法比较

高分子量(HMW)核DNA的制备是构建BAC文库关键环节之一。为构建高质量的烟草BAC文库,作者研究了一次选择法和二次选择法提取烟草高分子量核DNA的效果。研究结果表明:虽然二次选择法得到的高分子量核DNA浓度较低,但此法省略了对细胞核连续3￣5次的漂洗,而且得到含DNA的凝胶块(plugs)数量是用一次选择法的3倍,因此得到高分子量DNA的总量更高;同时二次选择法得到的plugs纯度更高,排除了酶切时细胞杂质对HMWDNA的干扰,此外在节约材料等方面也优于一次选择法。