赤霉素高产菌株筛选及发酵条件优化

以15株产赤霉素的藤仓赤霉菌(Gibberella fujikuroi)为出发菌株,对其脂肪酶活性、制霉素抗性、固态发酵效率进行了比较分析,以期选育出赤霉素发酵生产的优良菌株。结果表明:筛选出2株遗传稳定性好、生产效率高的菌株GA-YJ1704、GA-YJ1715,其发酵效价分别为4.67、4.77 g·kg^-1(干基)。该研究结果对赤霉素固态发酵生产的实现具有重要意义。     

树舌灵芝复合诱变选育漆酶高产菌株

以一株产漆酶树舌灵芝的菌丝片段为试材,利用紫外线和硫酸二乙酯逐级诱变;采用愈创木酚显色圈初筛突变菌株,并通过摇瓶复筛对优势菌株产酶能力进行验证,以期选育稳定高产漆酶菌株。结果表明:最终诱变获得一株遗传稳定的高产突变株,与原始菌株相比,漆酶活性提高63.3%,同时发酵周期缩短1 d。     

紫外线诱变青霉P-M1选育柚苷酶高产菌株研究

采用紫外线对野生型柚苷酶产生菌青霉P-M1进行诱变处理以提高柚苷酶的产量,经过初步筛选最佳诱变条件为:孢子悬液(107个/mL)稀释度为10-5,15 W紫外灯,垂直照射距离为30 cm,处理时间为5 min.通过透明圈初筛和摇瓶复筛选育出一株柚苷酶高产菌株青霉PU-15,酶活达到334.3 U/mL,比出发菌株提高了137.4%,将其连续传代10次测定遗传稳定性,结果显示稳定性良好,是一株比较理想的柚苷酶高产菌株.     

高产D-核糖菌株选育

以枯草芽孢杆菌转酮醇酶变异株为出发菌株,运用物理和化学相结合的方法进行复合诱变,将出发菌株在紫外灯下照射后加入硫酸二乙酯置于摇床上诱变,再加入硫代硫酸钠终止反应。选出多个诱变后菌株,进行初筛和复筛,反复几次,以未经处理的菌株做对照,对突变株进行多次传代和D-核糖发酵试验,选育出D-核糖高产突变株。     

侧耳属原生质体诱变的研究

为了进行侧耳属种间原生质融合的研究就必须获得稳定的遗传标记菌株.在遗传标记菌株的筛选中,抗药性标记菌株要比营养缺陷型标记菌株的筛选快速、方便而实用.用抗药性标记菌株进行细胞融合,形成的融合子就会具有双重抗性标记.在生产上,这样的菌株除了能高产优质外,还会具有双重抗逆性.为此,我们对侧耳属两个种的原生质体分别进行了紫外线诱变,获得了两株抗多菌灵和一株抗丙硫咪唑的抗药性变菌株.     

低能N~+离子注入诱变选育云芝高产抗病菌株的研究

应用低能N+离子注入筛选所得高产抗病融合云芝菌株原生质体进行诱变,以获得一株产量更高,抗病性更强,适用于栽培的诱变菌株。试验确定了低能N+离子注入的适宜参数:注入剂量为9×1014ions/cm2,注入能量20 KeV,靶室真空度10-3Pa,以5 s脉冲式注入,间隔时间为15 s。离子注入后,筛选酯酶同工酶酶谱存在显著差异和拮抗实验呈阳性的突变菌株,分别以液体发酵生物量及固体栽培子实体转化率、对病菌平均抗性水平为初筛和复筛标准,经遗传稳定性实验验证,筛选到了一株云芝高产抗病菌株,其子实体产量较对照菌株提高了10.3%,抗病水平提高了5%。结果表明:低能N+离子束注入是一种较为理想的云芝诱变育种手段。     

辣椒疫霉菌对甲霜灵的抗性风险研究

通过对安徽省各地辣椒疫霉菌对甲霜灵抗性进行监测和室内抗性诱导, 结果发现: 野生辣椒疫霉菌株中敏感、中抗和抗性菌株分别占 63.2%、30.4% 和 6.4%, 说明敏感菌株是安徽省辣椒疫霉菌的优势种群, 但 EC50 测定结果表明安徽的辣椒疫霉菌对甲霜灵的敏感性群体水平上已出现不同程度的分化; 室内药剂直接诱变容易获得抗性突变株, 且抗性水平可较其敏感亲本高近 1 000 倍, 说明辣椒疫霉菌对甲霜灵存在较大的抗药性风险, 据此, 讨论了相应的抗药性治理对策。     

平菇山大1号紫外诱变育种研究

通过对平菇“山大 1号”原始菌株的担孢子收集、UV诱变以及突变菌株的出菇性能、抗杂菌能力测试研究 ,从 45个突变菌株中筛选出了 2株很有潜力的菌株。 6号菌株株形美观 ,抗杂菌能力强、转潮快 ,生物学效率较原始菌株提高了约 3 4.3 %,达 177.1%;3号菌株表现为无孢突变 ,为平菇新品种的研究开发提供了一个很好的出发菌株     

紫外诱变选育多聚赖氨酸高产菌株的研究

以实验室筛选的一株白色链霉菌B-215为出发菌株,采用紫外诱变的方式对其进行菌株选育.通过紫外诱变,得到一株ε-聚赖氨酸产量为0.75 g/L的突变株BU-215,比未诱变的产量提高20.97%.其发酵液抑菌圈的H/C(抑菌圈直径与滤纸片直径之比)为1.56,比对照菌株高25.81%.     

60Co-γ射线与ARTP复合诱变选育蛹虫草高产菌株

以实验室保存的蛹虫草菌株("BY2")为出发菌株,采用^60Co-γ射线与ARTP复合诱变方法对其进行处理,经过初筛、复筛及稳定性试验,研究了诱变菌株的菌落特征及子实体产量,以期获得蛹虫草高产菌种。结果表明:经复合诱变处理,筛选出3株高产突变株,其子实体产量与出发菌株相比提高率分别为32.27%、36.00%和33.87%。通过突变菌株的遗传稳定性及工厂化生产测试,BY2-1122菌株是传代稳定性较好的菌株,其子实体产量明显高于现行生产菌株,增幅达17.3%。研究表明,利用^60Co-γ射线与ARTP复合诱变选育蛹虫草,可以获得高产子实体菌株。     

高效液相色谱法测定无核白葡萄赤霉素残留

为建立高效液相色谱法测定无核白葡萄果实中赤霉素含量（残留）的方法,样品采用冷甲醇萃取,超声波提取,离心后上清液经0.45 um 滤膜过滤,滤液用 HPLC 紫外检测器测定。色谱条件为以 A（0.05%磷酸水溶液）/B（乙腈）（A / B：80%/20%）为流动相,ZORBAX Extend C18柱,柱温为30℃,紫外检测器波长210 nm。结果表明：该法线性良好,相关系数r＞0.999,精密度在0.86%～3.43%范围之内,平均回收率89.83%。本方法快速、可靠、灵敏,可为测定无核白葡萄果实中赤霉素含量提供参考。     

利用HPLC法对香蕉根中四种内源激素测定方法的优化

研究了高效液相色谱法测定香蕉根中4种内源激素:赤霉素(GA3)、3-吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)和玉米素(ZT)的最佳条件。采用Agilent ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)进行分离测定。结果表明:GA3、IAA、ABA测定的最佳条件是甲醇∶乙腈∶磷酸缓冲液(pH 3.5)为15∶20∶65为流动相,检测波长为210nm。ZT测定最佳条件为:甲醇∶乙腈∶磷酸缓冲液(pH 3.5)为15∶15∶70为流动相,波长265nm。4种激素的进样量为20μL,流速为1mL/min,柱温为35℃。选用外标法进行了定量测定。试验结果表明其回收率高,是一种快速有效的测定方法。     

赤霉素对‘凯特芒’花期调控试验

在不同起始时间对‘凯特芒’喷施不同浓度的赤霉素,研究赤霉素对攀西地区‘凯特芒’花期调控影响。试验表明：从起始处理时间11月30日开始喷施0．005％～0．01％赤霉素推迟‘凯特芒’花期效果较好,花序出现期推迟22～42d,始花期推迟4～11d,盏花期推迟7～12d,单株成花率为100％;在起始处理时间A1、A2下,喷施浓度≥0．01％赤霉素‘凯特芒’单株成化率下降。     

Influence of coadministration of β-mercaptoethanol and nitroglycerin on cell viability of peripheral blood-derived endothelial progenitor cells in patients with coronary heart disease

AIM: To observe the effects and mechanisms of nitroglycerin (NTG) on cell viability and β-mercaptoethanol (β-ME) on ameliorating nitrate tolerance of peripheral blood-derived endothelial progenitor cells (EPCs) in coronary heart disease (CAD) patients.METHODS: We studied 75 patients with diagnosis of coronary artery disease who were assigned to control group and NTG group. EPCs were evaluated by flow cytometry. Vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A) and peroxynitrite anion (ONOO^-) production were measured by ELISA. EPCs were cultured in vitro with NTG and β-ME stimulation. The cell viability was determined by MTT assay. The levels of VEGF-A, ONOO^- and reactive oxygen species (ROS) were measured by ELISA and DCFH-DA assay. The protein levels of Akt,p-Akt,endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and p-eNOS were determined by Western blot. RESULTS: Compared with the control group, the circulating EPCs levels were significantly lowered, plasma ONOO^- production was vitally increased, but there was a markedly decrease of VEGF-A production in the patients treated with excess NTG(P<0.05). Moderate dose of NTG increased the viability of EPCs, VEGF-A production, and phosphorylated protein levels of Akt and eNOS. Excess NTG was shown to reverse the effect of moderate dose of NTG, but β-ME improved the adverse effect of excess NTG. CONCLUSION: Moderate dose of NTG effectively promotes EPCs viability by PI3K/Akt/eNOS signaling pathway and β-ME improves NTG-induced tolerance by reducing oxidative stress and up-regulating the PI3K/Akt/eNOS signaling pathway.     

马铃薯真菌病害拮抗菌株鉴定及初步应用

针对马铃薯真菌病害发生严重、多种病害混合发生、缺乏安全有效防治方法的问题，对前期筛选出的高效拮抗 菌株BA-26 进行分类鉴定，研究其胞外代谢产物的稳定性，明确防病促生作用。通过形态特征、生理生化特性鉴定以及 16S rDNA 序列分析，BA-26 菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens），该菌株对8 种马铃薯病原真菌均表现出 较强的拮抗作用，对茄链格孢菌（Alternaria solani）、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、燕麦镰刀菌（Fusarium avenaceum） 的抑菌率大于80%；胞外代谢产物经100 ℃处理30 min、紫外照射8 h、pH 2～10 酸碱处理、蛋白酶处理1 h 后，相对抑菌 率均维持在80% 以上；室内抑菌活性测定结果表明BA-26 滤液对茄病镰刀菌的抑制率为91.3%；盆栽试验中，每盆施用 20 mL 浓度为4.0×10⁹ cfu · mL^-1 的BA-26 发酵液使马铃薯根长、须根数、株高、叶片中叶绿素含量分别显著增加32.07%、 111.94%、48.0%、19.6%。表明解淀粉芽孢杆菌BA-26 对马铃薯真菌病害抑菌谱宽，胞外代谢产物稳定性强，有较强的防病 促生作用，具有开发为马铃薯专用生防菌剂的潜力。     

松口蘑 Tm-3 菌株的紫外诱变育种

对松口蘑(Tricholorna matsutake)Tm-3出发菌株进行紫外诱变处理，将茵丝体生长快且茂盛的诱变菌株进行初筛和复筛，比较茵丝体生长量和胞内多糖产量．筛选出诱变株Tm-3-21为胞内多糖发酵的优质菌株，其胞内多糖产量达0．67mg／mL，得率是9．41％，比出发菌株提高1．19倍。     

外源赤霉素对青花菜茎尖内源激素含量的影响

以不同浓度赤霉素（GA）分别在青花菜花芽分化前20 d（播后40 d）和花芽分化后10 d（播后70 d）叶面各喷施1次,研究外源GA对青花菜茎尖内源激素含量的影响。结果表明,青花菜生长发育过程与植株内源激素含量变化密切相关,在花芽分化期茎尖IAA、GA1/3含量保持较低的水平和适宜的iPAs含量有利于花芽分化,而在现蕾期保持适宜水平的IAA、GA1/3含量及较低水平的iPAs含量则有利于花球的形成。外源GA明显地影响了青花菜茎尖内源激素的平衡,GA处理在花芽分化期和现蕾期均抑制了茎尖IAA合成,降低了茎尖IAA含量;较低浓度的GA处理在花芽分化期可增加茎尖GA1/3含量,浓度升高反而降低其含量,但在现蕾期正好相反;GA处理在花芽分化期促进了iPAs含量的升高,而且浓度越高iPAs含量也越高,但在现蕾期低浓度GA处理可提高茎尖iPAs含量,而浓度过高反而导致iPAs含量下降。     

Effects of nebulized nitroglycerin on acute hypoxic pulmonary hypertension and myocardial impairment in newborn piglets

AIM: To investigate the effects of nebulized nitroglycerin(NTG) on pulmonary, systemic hemodynamics and myocardial impairment during pulmonary hypertension induced by hypoxia in piglets. METHODS: Twenty-four piglets (5-7 days old) were randomly divided into four groups: ① sham group; ② model group;③ NTG1 group; ④ NTG2 group. Mean artery pressure (MAP) and mean pulmonary artery pressure (MPAP) were monitored continuously. Serum CK-MB and cTnI were measured intermittently. Apoptotic cells were detected with TUNEL method. Myoglobin (Mb) and connexin 43 (Cx43) staining were studied by immunohistochemistry. RESULTS: After nebulization, MPAP in NTG1 group and NTG2 group were significantly lower than that in model group (P<0.05 and P<0.01, respectively). Five hours after hypoxia, serum cTnI in NTG1 group and NTG2 group were both significantly lower than that in model group (P<0.01). The percentage of apoptotic cells in NTG2 group was significantly lower than that in model group (P<0.05). Immunohistochemistry method results showed that the expression of Mb and Cx43 in NTG1 group and NTG2 group were both significantly stronger than those in model group (P<0.01 and P<0.05, respectively). CONCLUSION: NTG nebulization produces a selective pulmonary vasodilation either during or after the exposure of hypoxia and improves myocardial impairment in acute hypoxic newborn piglets.