十字花科蔬菜提取物对草莓专化型尖孢镰刀菌的抑菌活性研究

为研究不同十字花科植物提取物的抑菌活性,采用菌丝生长速率法,测定芥菜、茼蒿、甘蓝、油菜和雪里蕻提取物对草莓枯萎病原菌菌丝生长的抑制作用。结果表明,5种十字花科植物提取物均对草莓专化型尖孢镰刀菌有一定抑制作用,随提取物浓度降低,抑菌率呈现降低的趋势,浓度为1 g/mL时下提取物的抑菌率可达到73.13%～82.33%。通过毒力方程的测定,茼蒿的EC₅₀为0.413 0 g/mL,对尖孢镰刀菌抑制效果最好,芥菜、雪里蕻和油菜EC₅₀为0.473 5～0.491 5 g/mL,这3种植物提取液毒力相当,甘蓝的EC₅₀最高,对病原菌抑制效果最弱。进一步可利用十字花科植物之间的化感作用合理安排与草莓轮、间作,减轻草莓枯萎病病害发生,为草莓枯萎病防治和植物源农药先导化合物的研发提供技术依据。     

蒲公英有效成分抑菌试验研究

为研究蒲公英的抑菌作用,采用K-B纸片扩散法,以蒲公英为原料,用浸提法、水提法和醇提法的3种蒲公英浸出液滤纸片对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、黑曲霉、宛氏拟青霉的抑菌作用进行了研究。结果表明:蒲公英对以上细菌和真菌均有抑菌作用,对细菌的抑制作用强于真菌,对金黄色葡萄球菌抑制效果最强,对黑曲霉最弱;在3种提取方法中浸提物的抑菌作用最小,醇提物抑菌作用最明显。     

没食子酸对金黄色葡萄球菌抑菌活性及机制研究

以金黄色葡萄球菌为供试菌,利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,细胞膜渗透性测定,SDS-PAGE蛋白谱变化等方法对没食子酸的抑菌活性及其机制进行研究,进而验证没食子酸的药效作用。实验结果显示,没食子酸对金黄色葡萄球菌作用其抑菌圈直径为13mm;其对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.01mg.mL-1;当药物作用5h时,实验组的电导率与对照组相比增加了6.38%;大分子的OD值随着作用时间的增加而逐渐增大,当培养至8h时,实验组大分子物质吸光值的变化率达到最大,比对照组增加了74.4%。SDS-PAGE蛋白谱变化实验表明,没食子酸对金黄色葡萄球菌作用20h后,其总蛋白量没有明显变化。上述结果表明,没食子酸对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌活性,能影响金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性。其抑菌机制是通过破坏细菌细胞膜的完整性来实现的。     

桦褐孔菌菌核提取物对细菌抑菌活性研究

采用纸片法研究了桦褐孔菌的水、甲醇、丙酮、氯仿、石油醚提取物对大肠杆菌ERcat、EnR￡、ATCC25923和金黄色葡萄球菌ATCC25923、O41ermc的抑制作用。结果表明:桦褐孔菌各提取物对大肠杆菌ERcat、ATCC25923和金黄色葡萄球菌O41ermc均有不同程度的抑制作用。其中甲醇提取物在10mg·mL-1浓度下对大肠杆菌ERcat的抑菌效果最好,抑制率高达84.1%;石油醚提取物对除大肠杆菌EnR￡以外的其它供试菌株均表现出显著的抑菌活性。另外,浓度为10mg·mL-1的丙酮提取物对大肠杆菌EnR￡的生长有一定的抑制作用;浓度2.5mg·mL-1的甲醇提取物和浓度10mg·mL-1的石油醚提取物对金黄色葡萄球菌ATCC25923的抑菌作用较为明显。     

粗毛纤孔菌提取物的抗氧化和抑菌活性研究

采用福林酚法和NaNO2-Al(NO3)3比色法分别测定了粗毛纤孔菌子实体70%乙醇提取物中的多酚和黄酮,含量分别为(64.02±0.73)μg/mg和(5.74±0.13)μg/mg;并对70%乙醇提取物及主要化合物Hispidin的抗氧化和抑菌活性进行了测定。结果表明:70%乙醇提取物和Hispidin具有强烈的清除DPPH和·OH自由基活性的作用,在浓度为200mg/kg时清除率分别与BHA相当,清除率达到90%左右;采用K-B纸片扩散法测定了70%乙醇提取物及Hispidin对大肠杆菌Escherichia coli ATCC8099、金黄色葡萄球菌Staphyloccocus aureus ATCC6538、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的抑制活性,结果除70%乙醇提取物高剂量(40.96mg/mL)对大肠杆菌的抑制率达到40.35%,其余均没有明显活性。     

42种药用植物甲醇提取物对番茄灰霉病菌抑菌活性的研究

运用菌丝生长速率抑制法测定了42种植物甲醇提取物对番茄灰霉病的抑菌活性。试验结果表明,心籽绞股蓝、海南五针松、水马桑3种植物提取物对番茄灰霉病菌的抑菌作用较好,在5mg/mL浓度下抑制率分别为83.68%,76.21%,60.88%;并进一步测定心籽绞股蓝、海南五针松及水马桑对番茄灰霉病的毒力,其EC50分别为1.000mg/mL,3.275mg/mL及5.050mg/mL。心籽绞股蓝表现出对番茄灰霉病菌有较好的抑制作用,但其抑菌活性成分还需进一步深入研究。     

地枇杷抑菌物质提取及抑菌活性研究

以地枇杷为试材,在单因素试验基础上,采用正交实验方法优化地枇杷中抑菌物质的乙醇回流提取工艺,利用牛津杯法检测提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、宋内志菌、白假丝酵母菌的抑菌效果,探讨了热力、紫外线对其抑菌活性的影响。结果表明:乙醇回流法的最佳提取工艺为65%乙醇、料液比1∶10g·mL~(-1),75℃水浴加热0.5h。提取物对金黄色葡萄球菌抑菌效果最好,对白假丝酵母菌无抑菌作用。随着提取物浓度的增加,其抑菌作用随之增强,对热力、紫外线有一定的稳定性。     

青天葵总黄酮抗氧化及抑菌活性

以青天葵为试材,乙醇为溶剂,对青天葵进行总黄酮提取;采用清除羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基和测定总还原能力的方法来评价青天葵总黄酮抗氧化活性;并通过测定其对6种试验菌的最低抑菌浓度来考察其抑菌活性。结果表明:青天葵黄酮提取液对羟自由基的清除优于同浓度的抗坏血酸溶液,清除DPPH自由基的IC50是17.4μg·mL~(-1),清除超氧阴离子自由基的IC50是95.5μg·mL~(-1),还原能力稍弱于抗坏血酸;对白色念珠球菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯氏菌的抑制作用较强,最低抑菌浓度均为0.25mg·mL~(-1)。     

小蓟不同提取物离体抑菌活性研究

以黑曲霉、青霉、绵霉为试材,用滤纸片和孢子萌发法,观察菊科植物小蓟提取物对供试3种果蔬致病真菌的抑制效果。结果表明:提取物对3种致病菌的生长发育具有一定抑制作用,其对青霉抑制效果最显著,绵霉次之,黑曲霉对提取物最不敏感;3种致病菌对不同提取物的反应也不同,水提物对青霉菌丝生长和孢子萌发抑制作用最强,而绵霉和黑曲霉则对小蓟100%乙醇提取物表现较为敏感。     

迷迭香精油对几种植物病原菌的抑菌活性研究

采用生长速率法和抑菌圈法测定了迷迭香精油对甜瓜蔓枯病菌、西瓜炭疽病菌、甜瓜灰霉病菌、甜瓜枯萎病菌、梨树腐烂病菌、柑橘黑腐病菌、油菜菌核病菌、蚕豆轮纹病菌和桃细菌性穿孔病菌的抑菌活性.结果表明:迷迭香精油对8种病原真菌都具有很好的抑菌活性,其EC50分别为843.9914、1 084.2372、483.9457、1 735.5866、1 011.7869、901.2150、356.8803、1 197.3657 μL/L;对桃细菌性穿孔病菌也具有一定的抑菌活性,浓度为100 mL/L时,抑菌圈直径为1.00 cm,最低抑菌浓度为1 000 μL/L.     

腐霉利与苦参丙酮提取液对番茄灰霉病菌的联合毒力测定

采用抑制菌丝生长速率法测定了腐霉利和苦参丙酮提取物对番茄灰霉病的联合毒力。结果表明:腐霉利和苦参丙酮提取液以4种配比都对该病原菌有一定的增效作用,其中腐霉利和苦参提取液配比是0.4∶0.6时,增效为1.3,盆栽试验中的增效比为1.2,确定配比0.4∶0.6为最佳浓度比例。     

中药渣堆肥中拮抗真菌的筛选、鉴定

以发酵后的中药渣为试材,采用稀释涂布平板法进行初筛,通过平板对峙法进行复筛,研究了具有拮抗特性真菌的形态学特征、生理生化特征、18S rDNA分子生物学特征,并检验了拮抗真菌对立枯丝核菌的抑制能力,以期资源化利用中药渣中有生防作用的菌种资源。结果表明:从中药渣中得到了7株对立枯丝核菌有抑制作用的拮抗真菌,F-1为柠檬青霉,F-2为黄曲霉,F-3为塔拉木霉菌,F-4为棘曲霉,F-5为深褐娭姆斯菌,F-6为烟曲霉,F-7为Albifimbria viridis。其中,F-3可产IAA;F-7可以解有机磷。     

几个抗疫病性不同的辣椒材料抗病基因同源序列的分离与比较

 根据已克隆抗病基因的保守序列设计简并引物, 对9 个不同抗、感疫病的辣椒种质材料基因组DNA 进行抗病基因同源性序列的特异PCR 扩增, 经序列测定和同源性分析发现14 个抗病基因同源性序列(RGAs) 与辣椒抗疫病作用相关, 其中B 引物扩增的8 个RGAs 与烟草抗花叶病基因N 、拟南芥抗丁香假单菌基因RPS2 和亚麻抗锈病基因L6 的同源性较高, 属于广谱(细菌、病毒、真菌) 抗病基因同源序列; C 引物扩增的6 个RGAs 与番茄抗叶霉病基因Cf2 和Cf9 有较高的同源性, 与抗疫病作用密切相关。研究还发现, 高感疫病的辣椒基因组中也存在抗疫病相关RGAs , 这与已报道的辣椒抗疫病微效QTLs 位点则来于感病亲本基因组的研究结论一致。     

十五味中草药醇提液的抗真菌活性研究

选择丁香、麻黄、艾叶等15味中草药的乙醇提取液,利用滤纸片扩散法测试其对果蔬贮藏保鲜中常见的灰霉菌、青霉菌、毛霉菌及酵母菌4种真菌的抑菌作用,并将筛选出的5味中草药醇提液进行1∶1∶1配伍,测定其复配液对供试菌种的抑菌作用,同时对其稳定性进行初步研究。结果表明:15味中草药中,丁香、紫丹参、厚朴、苦参、迷迭香5种醇提取液抗真菌效果较好;确定了DZM(丁香、紫丹参、迷迭香)、ZHK(紫丹参、厚朴、苦参)、HKM(厚朴、苦参、迷迭香)组合是抗真菌效果较好的复配液。     

牛心朴子提取物抑菌效果研究

采用菌丝生长速率法测定了3种牛心朴子提取物对番茄早疫病菌和番茄灰霉病菌的抑制作用。结果表明,当供试浓度为500mg/L时,牛心朴子总生物碱、牛心朴子甾体皂苷和牛心朴子总黄酮对番茄病原菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中牛心朴子总生物碱的抑菌活性最高,抑制率可达85%以上。牛心朴子总生物碱对番茄早疫病菌和番茄灰霉病菌的EC50分别为84.3471mg/L和135.8679mg/L。牛心朴子总生物碱可作为植物源杀菌剂进一步研究开发。     

马铃薯早疫病拮抗菌的筛选及其代谢产物的抑菌活性

以马铃薯早疫病病原菌茄链格孢菌(Alternaria solani)为指示菌,通过平板对峙法,筛选出菌株及其发酵滤液对马铃薯早疫病病原菌均具有较强拮抗作用的生防菌株BAF-6;通过形态特征、生理生化特性鉴定以及16S r DNA序列分析,该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。菌株发酵滤液经60~80℃热处理,抑菌活性均在95%以上;紫外线照射8 h或在p H值为2~10的酸碱环境下,发酵滤液的抑菌活性稳定;经蛋白酶处理后抑菌活性仍达50%以上。     

4种胡椒科植物粗提物对灰葡萄孢的抑菌活性

在离体条件下比较了胡椒科荜茇、假蒟、黑胡椒、白胡椒4种植物乙醇提取物对灰葡萄孢的抑菌活性。结果表明:4种植物乙醇提取物对灰葡萄孢发育各阶段具有较强的抑制作用。白胡椒乙醇提取物对菌丝生长的抑制作用最强,EC_(50)为0.007 9 g·m L~(-1),其次为荜茇、黑胡椒和假蒟;当浓度为0.5 g·m L~(-1)时,荜茇和假蒟的乙醇提取物对灰葡萄孢产孢量抑制作用最强,抑制率分别为92.8%和92.0%;黑胡椒和白胡椒乙醇提取物对灰葡萄孢孢子萌发的抑制作用强于荜茇和假蒟;4种植物粗提物浓度高于0.062 5 g·m L~(-1)时,均能完全抑制灰葡萄孢菌核产生。     

万寿菊精油杀菌素对西瓜枯萎病菌的抑菌作用及对西瓜幼苗的影响

采用田间试验和生物测定方法,研究了人工合成的万寿菊精油杀菌素对西瓜枯萎病菌和西瓜幼苗生长的影响。结果表明:0.5μg/mL万寿菊精油杀菌素24、48、72、144 h的抑制率分别为100%、76.7%、59.9%、56.8%;当浓度大于1.5μg/mL时抑制率达100%;10μg/mL万寿菊精油杀菌素处理西瓜幼苗的致萎指数得到显著降低,差异达显著水平(P<0.05);20μg/mL万寿菊精油杀菌素处理的西瓜枯萎病菌,大分子量的蛋白含量增多,小分子量的蛋白含量减少,但过氧化物酶的条带数没有变化;50μg/mL万寿菊精油杀菌素处理的西瓜苗叶片中3d后MDA含量减少差异显著(P<0.05),4d后过氧化物酶活性逐渐升高差异达显著水平(P<0.05),5d后差异极显著(P<0.01)。含药培养基上生长的西瓜枯萎病菌的果胶酶活性降低,呼吸强度明显提高,细胞膜通透性增大,几丁质酶活性稍高于对照。此杀菌素可用以预防和控制西瓜枯萎病,为西瓜枯萎病的综合防治提供一种新的方法和途径。     

辣椒疫霉菌粗毒素对叶片组织超微结构的影响

 在辣椒疫霉菌作用下, 辣椒3叶期叶组织细胞超微结构发生了显著的变化, 质膜内陷, 叶绿体膜、线粒体膜和核膜结构破坏; 细胞器基质的电子密度下降; 叶绿体基粒片层肿胀, 排列紊乱; 线粒体嵴消失, 出现空泡化。     

枸杞叶枯病拮抗芽孢杆菌的筛选、鉴定及防效

为获得对枸杞叶枯病有较强拮抗作用的芽孢杆菌,从农田土壤中,分离、纯化得到151株芽孢杆菌,经病原真菌定向筛选得到1株对枸杞叶枯病菌拮抗活性较好的菌株LKYLW-1,其对枸杞叶枯病菌的抑菌带宽15.2 mm,采用平板对峙法、孢子萌发法和田间药效试验测定LKYLW-1的抑菌作用。结果表明:菌株LKYLW-1对枸杞叶枯病菌菌丝有致畸作用;菌株LKYLW-1发酵液对孢子萌发有抑制作用,EC50为9.35 mL·L-1;该菌株对枸杞叶枯病具有较好的治疗和预防效果。通过形态学特征、理化分析及16S rDNA序列分析对菌株LKYLW-1进行了鉴定,检测了其代谢产物,研究发现菌株LKYLW-1为萎缩芽孢杆菌Bacillus atrophaeus,其在代谢过程中可产生纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶等抑菌物质;证明菌株LKYLW-1在枸杞叶枯病防治中具有潜在的利用价值。