外源基因转化受体系统高效再生体系的建立

以紫花苜蓿无菌苗的茎段为外植体,通过正交试验,得到了以改良SH(SH大量元素 B5微量元素) 2,4-D1.5mg/L KT1.0mg/L,蔗糖浓度为3%的培养基为最佳的脱分化培养基,最佳的胚状体培养基为改良SH KT0.5mg/L,蔗糖浓度为2%,并建立了紫花苜蓿的高效再生体系,为后续外源基因的导入奠定了良好的基础。     

华东葡萄广西-2花药胚状体诱导与再生植株的研究

为了提供葡萄转抗病基因功能验证及遗传转化研究的再生技术体系,以中国野生华东葡萄(V.pseudoretic-ulata)感白粉病株系广西-2的花药为试材,进行了体细胞胚诱导与再生体系的建立,并探讨了次生胚的诱导与畸形萌发胚状体正常成苗的方法。结果表明,广西-2花药在B5+6-BA4.0mg·L-1+2,4-D0.7mg·L-1+CH1.0g·L-1+PVP1.0g·L-1+蔗糖30.0g·L-1培养基上继代3个月,可诱导胚性愈伤组织产生;B5+6-BA4.0mg·L-1+CH1.0g·L-1+PVP1.0g·L-1+蔗糖15.0g·L-1培养基有利于胚状体形成;胚状体在1/2B5+CH1.0g·L-1+PVP1.0g·L-1+蔗糖15.0g·L-1的液体培养基比相同成分固体培养基中早萌发14d左右;已萌发胚状体在WPM+IBA0.15mg·L-1+AC0.5g·L-1+蔗糖15.0g·L-1培养基上可以生根成苗;MS+6-BA1.5mg·L-1+IBA0.2mg·L-1+蔗糖30.0g·L-1培养基有利于畸形萌发胚状体正常成苗。发育早期胚状体在B5+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1+CH1.0g·L-1+PVP1.0g·L-1+蔗糖30.0g·L-1培养基上可形成次生胚。     

不同倍性葡萄品种的快繁效率差异分析

以四倍体"玫瑰香"、四倍体"巨玫"、二倍体"玫瑰香"3种不同倍性的葡萄品种为试材,采用组培快繁技术,研究了采样时间、启动继代培养、生根诱导、练苗移栽等过程对快繁效率的影响,以期为优良葡萄品种的快速繁殖提供参考依据。结果表明:最适田间取样时间为5月中旬,诱导和继代最适培养基分别如下。改良MS+6-BA 1.1mg·L~(-1);改良MS+6-BA 1.1mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1),在相同培养条件下,四倍体"玫瑰香"和四倍体"巨玫"不定芽增殖倍数高于二倍体"玫瑰香",在生根培养过程中二倍体"玫瑰香"表现出优于四倍体"玫瑰香"及四倍体"巨玫"的生根能力,最适生根培养基分别为1/2MS+NAA0.30mg·L~(-1)、1/2MS+IAA 0.50mg·L~(-1)和1/2MS+IBA 0.10mg·L~(-1),练苗最适基质为蛭石∶泥炭(1∶1)的混合基质,成活率可达90%以上。     

瑞特姆油葵再生体系的建立

以瑞特姆油葵无菌苗的茎尖、下胚轴、子叶、真叶为外植体,1/2MS培养基为基本培养基,研究不同激素水平对油葵愈伤组织形成和芽再生及生根的影响。结果表明:KT激素诱导的愈伤组织多为蓬松的绿色,芽再生率相对较高;外植体中破坏生长点的茎尖再生率最高;诱导芽的最佳配方为:MS+KT0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,芽分化率可达75%;理想的生根培养基的配方为:1/2MS+IBA0.5 mg/L,生根率达到80%。     

三个基因型黄瓜品种未授粉子房胚状体诱导及植株再生研究

以3个品种黄瓜的未授粉子房为外植体,进行胚状体诱导和植株再生研究.结果表明:3个品种都获得了再生植株.不同品种、不同热处理时间和不同TDZ浓度以及外植体的切割方式对胚状体诱导率都有影响.不同品种及不同6-BA和NAA浓度组合对植株的再生率有影响.热处理3 d,外植体为条状,TDZ浓度在0.06～0.08 mg/L时这3个品种的胚状体诱导率较高.NAA浓度为0.05 mg/L,6-BA浓度为0.4～0.6 mg/L时有利于胚状体分化植株.     

灰枣高效再生体系的建立

以新郑红枣“灰枣”（Ziziphus jujuba cv．Huizao）的茎段为外植体，分别进行了启动诱导、快速繁殖和壮苗生根研究，并且获得了完整的再生植株。结果表明：5～7月份是外植体取材的最佳季节。外植体启动诱导的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋IAA0．1mg／L＋AC0．1g／L，启动率可达72．7％。将诱导出的芽苗转入MS＋6-BA1．5mg／L＋IAA0．1mg／L＋GA3 2mg／L培养基中，pH为6．5时，其增殖系数达7．8。以1／2MS＋IBA 1．5me,／L＋IAA0．3mg／L培养基诱导生根，生根率90．3％。生根苗大田移栽成活率达80％以上。     

西瓜未成熟胚高效再生体系的建立

为了建立西瓜高效遗传转化的再生体系,以西瓜杂交品种‘秀玲’、自交系‘97103’和野生种质‘PI296341’的未成熟胚为外植体,分析了基因型、未成熟胚发育时间和植物生长调节剂等因素对体外再生率的影响,获得了西瓜离体培养再生植株。结果表明,以授粉后24 d的西瓜未成熟胚为外植体,在MS+SH维生素+6-BA2.2 mg·L-1培养基上,‘秀玲’、‘97103’和‘PI296341’的未成熟胚外植体能够诱导出不定芽,不定芽诱导率为87.78%、82.78%和86.11%,不定芽在MS+SH维生素+6-BA 0.2 mg·L-1+IAA 0.02 mg·L-1培养基上伸长、展叶,在MS+IBA 1.0mg·L-1的培养基上诱导生根得到完整的再生植株。以未成熟胚为外植体获得再生植株的途径,可为西瓜遗传转化提供有效的受体系统。     

酿酒葡萄‘神索’体胚发生及再生体系遗传稳定性分析

 以酿酒葡萄‘神索’未成熟合子胚为外植体, 通过植物生长调节剂、光照、温度等因素的控制, 研究了葡萄体胚的产生、保存及植株再生。结果表明, 以NN为基本培养基, 诱导胚性愈伤组织的适宜植物生长调节剂水平是1.0 mg·L ^{- 1} 2,4-D; 诱导体胚的生长调节剂水平是1.0 mg·L ^-1 NAA + 0.5 mg·L ^{- 1} BA, 体胚诱导率为37.5%; 5℃微光条件, 适宜体胚的保存; 体胚成熟及植株再生的植物生长调节剂水平是0.05 mg·L ^{- 1} NAA + 0.5 mg·L ^{- 1} BA, 成苗率为42.1%。利用流式细胞仪并结合染色体计数对体胚及再生植株细胞核DNA含量及染色体鉴定表明, 体胚细胞染色体存在一定的变异, 而体胚再生植株倍性稳定, 细胞核DNA含量及染色体数与供体母株一致。     

合欢离体培养及高效再生体系的建立

以合欢种子和当年生枝条为材料,研究了合欢离体培养及再生体系,探讨了不同激素组合对合欢愈伤组织的产生、分化及生根的影响,筛选出高效产生愈伤组织培养基为MS+BA2mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L;分化培养基为MS+BA1mg/L+NAA0.1mg/L;有利于生根的培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L,以上培养基均加30g/L蔗糖、8g/L琼脂。     

苜蓿高频再生体系的建立

以10个品种苜蓿无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同培养基、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导率及分化率的影响。结果表明:国产苜蓿下胚轴外植体愈伤组织分化率最高;愈伤组织诱导最适培养基为MS盐+UM维生素+2mg/L 2,4-D+0.25mg/L KT+2g/L水解酪蛋白+6g/L琼脂+30g/L蔗糖;愈伤组织最适分化培养基为MS+0.5mg/L KT+0.1mg/L NAA;最适生根培养基为1/2MS。     

薄皮甜瓜高效再生体系的建立

对"G24"和"甘甜一号"薄皮甜瓜材料5～7d苗龄的子叶、下胚轴、根尖、真叶以及不同6-BA浓度下不定芽诱导情况进行了研究,建立了高效稳定的再生体系并对生根以及移栽等条件进行了初步研究。结果表明:2份薄皮甜瓜材料在不定芽的诱导方面差异不大,"G24"不定芽的发生频率达到97.2%,"甘甜一号"为91.6%;最适宜作为甜瓜组织培养的外植体材料为子叶近胚轴端,其不定芽诱导率可达95%以上;不定芽诱导中最适6-BA浓度为1.0mg/L。     

山新杨高效组培再生体系的建立

以山新杨(P.davidiana×P.bolleana)叶片为外植体,1/2MS为基本培养基,对适合山新杨叶片再生的生长调节剂6-BA和NAA进行研究。结果表明:适宜山新杨叶片分化培养基是1/2MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;继代抽茎培养基是1/2MS+NAA 0.08 mg/L+6-BA 0.1 mg/L;最佳生根培养基是1/2MS+IBA 0.3 mg/L。     

甜瓜再生体系的建立

以‘鑫福999’甜瓜5 d龄无菌苗的子叶、下胚轴、真叶为外植体,研究了添加6-BA、IAA和2,4-D的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽的发生和丛生芽生根的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最适外植体为子叶,由子叶诱导的愈伤组织生长速度最快、品质最好、数量最多,最适愈伤组织的诱导培养基为MS+IAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L。最适宜诱导丛生芽的外植体为子叶,最适丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0 mg/L,最适生根培养基为MS培养基。     

萱草再生体系技术建立的研究

以萱草的根茎为材料,进行愈伤组织诱导和分化,试管苗的生根、移栽和移植的研究,建立萱草再生体系技术。结果证明:MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L+2,4-D0.1mg/L是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS+NH_4H_2PO_450mg/L+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L是愈伤组织增殖继代培养的理想培养基;MS+AgNO_30.5mg/L+GA_30.5mg/L+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;1/2MS+NAA0.1mg/L+IAA0.2mg/L是不定芽生根培养的理想培养基。在河沙中试管苗易移栽成活;移植到花坛中的试管苗根系发达、生长旺盛。     

Micro-Tom番茄离体再生条件的选择

以Micro-Tom番茄子叶和下胚轴为外植体进行离体组织培养,研究了不同激素及浓度对愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响。结果表明:培养基组成为MS+2.0mg/LZR+0.5mg/LIAA+3%蔗糖最有利于愈伤组织和不定芽的形成;诱导不定芽生根的理想培养基为1/2MS+1.5%蔗糖+0.2mg/LIBA。     

茄子子叶下胚轴离体再生体系建立

以3份茄子材料无菌苗子叶和下胚轴为外植体,研究其在MS附加不同浓度6-BA和NAA的培养基上的分化情况.结果表明:在不同培养基上,茄子子叶和下胚轴均能诱导出愈伤组织和分化形成不定芽,但不定芽诱导率存在明显差别,诱导3份材料下胚轴愈伤组织形成和芽分化的最佳培养基均为:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,子叶因品种不同有较大差异,紫色长棒茄芽分化最佳生长调节物质组合是6-BA 1.0 mg/L-+NAA 0.5 mg/L;紫红线茄是6-BA2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;紫黑短棒茄是6-BA 3.0 mg/L-+NAA 0.5 mg/L.     

番茄植株再生体系的建立

选用杂交番茄早丰(07-13)为材料,以下胚轴、子叶作为外植体,根据控制单一变量与多重比较的原则,设计添加不同种类和不同浓度的植物生长物质的培养基配方,建立了一套简便有效地番茄再生体系。结果表明:愈伤组织的诱导及增殖,以配方MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA0.3 mg/L为佳;诱导不定芽的分化,以培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L为佳;生根培养基以MS+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L为佳,生根率高且根粗壮。     

秋子梨叶片高效再生体系的构建

以秋子梨(Pyrus ussuriensis M.)叶片为外植体,NN69为基本培养基,研究了秋子梨组织培养高效再生体系。结果表明:噻隆(TDZ)对秋子梨叶片不定芽的诱导效果显著高于6-苄基腺嘌呤(6-BA)和激动素(KT),吲哚丁酸(IBA)和吲哚乙酸(IAA)的诱导效果显著高于萘乙酸(NAA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)。其中,适合秋子梨叶片不定芽再生的最佳培养基为NN69+TDZ 3.0mg/L+IBA 0.3mg/L,再生率和再生芽数分别为100.0%和8.47个;适合秋子梨不定根诱导的最佳培养基为1/2MS+IBA 0.5mg/L,生根率为45.5%,生根条数为2.24条。     

兰州百合高效再生体系的建立

以兰州百合新鲜鳞片为试材进行高效再生体系的研究。结果表明：兰州百合中层、内层鳞片比外层鳞片容易再生不定芽,更适于作为外植体。鳞片在MS+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA 的诱导培养基上再生频率最高,可达90%;不定芽在MS+0.8 mg·L^-1 6-BA+0.05 mg·L^-1 NAA 的增殖培养基上增殖率最高,平均每芽新增芽4.5 个;不定芽在MS+0.8 mg·L^-16-BA+0.05 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 AC 的壮苗生根培养基上鳞茎的膨大倍数最高,生根数量较多,小苗长势优,移栽后成活率达98% 以上。