AFLP标记在植物遗传多样性研究中的应用

遗传多样性是生物多样性的基础。AFLP技术由于具有众多分子生物学分析方法无法比拟的特点,近几年来在遗传多样性研究中广泛应用,就其在植物种质鉴定、遗传图谱构建、目的基因定位、遗传多态性检测、群体遗传结构、分子标记辅助育种等方面的应用进行了综合评述,并对AFLP的原理、特点及发展前景进行了阐述。     

芹菜AFLP遗传多样性分析

为了了解中国芹菜(Apium gra-veolens L.)栽培品种的亲缘关系,利用AFLP技术对24份芹菜种质资源的遗传多样性进行了分析,从81个引物中筛选出8个AFLP选择性扩增引物,共扩增出395个位点,其中多态性位点245个(59.88%)材料间遗传相似系数变化范围为0.385～0.987,在遗传相似系数为0.6水平上,聚类分析结果可将供试材料分为3类,中国目前栽培的多数芹菜品种的亲缘关系较近,聚类结果与地域来源和形态特征有一定对应关系。     

刺槐无性系遗传多样性的AFLP分析

采用AFLP分子标记技术对53个刺槐无性系进行遗传多样性和亲缘关系分析。结果显示：8对引物共检测出1230条谱带,其中有1218条为多态带,占总谱带的9902%;特异性条带有203条,其中缺失带为11条,通过特异性条带可鉴别83%的刺槐无性系;聚类分析将刺槐种质分成5组,来源相同的无性系并未严格聚在一起,未形成明显的地理变异模式。     

应用AFLP分析7种警犬的遗传多样性

以7个警犬品种DNA池为试验材料,首次建立了稳定的犬基因组扩增片断长度多态性(AFLP)指纹图谱检测方法.应用25对选择性引物组合对7个警犬品种进行AFLP分析,其中21对引物组合共扩增出清晰的条带5081条,得到特异性标记75个;并根据UPGMA法对7个警犬品种进行聚类分析.     

应用AFLP方法研究中国大豆的遗传多样性

本试验采用ＡＦＬＰ技术，研究了６１份来自中国四个不同大豆生态区的栽培和野生大豆材料的遗传多样性。８对ＡＦＬＰ引物共检测到５６９条谱带，平均为７１条。２７３条为多态性谱带，其中１７２条多态性谱带只出现在栽培大豆，２４９条则只属于野生大豆。不同的引物组合检测多态性谱带的能力有很大差异，变幅为１７－５１条，Ｅａａｇ／Ｍｃｔｃ是十分高效的引物组合，通过该引物组合所有６１份材料都能被区分。聚类分析能清楚地将     

松江鲈群体遗传多样性的AFLP分析

利用AFLP分子标记技术对辽宁鸭绿江水域丹东段和河北秦皇岛渤海海域两个松江鲈Trachidermus fasciatus群体的遗传多样性进行分析研究。结果表明:用6对选择性引物,从两个群体的63个个体共扩增出360个位点,多态位点214个;松江鲈丹东和秦皇岛两群体的多态位点比率为50.28%、50.00%,平均杂合度和Shannon s指数分别为0.1690、0.1733和0.2534、0.2592,说明两个群体遗传多样性在同一水平上;Shannon s指数和AMOVA分析均显示松江鲈的遗传变异主要来自于群体内个体间,而群体间无明显的遗传分化;松江鲈UPGMA系统树没有依据群体分别聚类,未出现明显分支,无明显遗传差异;群体的显性基因型频率分布显示两个群体的遗传结构相似。     

山东省紫椴遗传多样性AFLP分析

对山东省5个地区的62份紫椴单株进行遗传多样性的AFLP分析．结果表明：9对引物共产生1370条多态带,多态带比例为99．70％,平均Nei’s基因多样度和平均香农信息指数分别为0．2132、0．3405,供试材料遗传多样性较高,共产生182条特异性条带,据此可将82．3％的紫椴单株辨别出来,表明AFLP在分子水平上具有鉴别紫椴单株的潜力;单株间相似系数为0．3911-0．7953,平均值为0．5761,在相似性系数为0．60处,可将62个单株分成12组,分组情况与来源没有严格的一致性．     

云南辣木资源遗传多样性的AFLP分析

为了揭示云南栽培辣木的遗传多样性和亲缘关系,为国内辣木种质资源的进一步有效开发与利用提供依据,采用AFLP技术对27份云南栽培辣木材料进行了遗传多样性分析,筛选得到9对条带清晰、多态性高的引物,共扩增出946条条带;其中,多态性条带913条,平均每对引物扩增条带105条,多态性条带101条,多态性位点频率为96.19%,表明云南栽培辣木具有较为丰富的遗传多态性。27份材料间遗传相似系数变化范围为0.657 5～0.838 3。UPGMA聚类结果表明：27份材料可分为6类,来自同一栽培区域的材料并没有聚在一起,具有相同性状的材料也没有聚在一起,表明栽培辣木种群内遗传分化较大,遗传背景复杂,相关性状和遗传的关系仍需进一步研究。     

彩叶桂新品种‘紫嫣公主’遗传多样性的AFLP和SSR分析

以长叶木犀为对照,采用AFLP和SSR方法,研究了彩叶桂花(Osmanthus fragrans)新品种‘紫嫣公主’与其他木犀的遗传关系。筛选出55对AFLP引物和17个SSR,分别产生了1103个和45个扩增产物,其中多态性占AFLP的92.29%,占SSR的62.2%。在群体水平上,有效等位基因的数量从0.76到1.11不等,Shannon指数从0到0.11不等,表明桂花品种的遗传基础较窄。‘紫嫣公主’与其他桂花品种的遗传相似性在0.58～0.80。UPGMA聚类分析结果表明,‘紫嫣公主’属于银桂品种群。本研究结果可为桂花种质资源的保护和新品种选育提供新的分子依据。     

AFLP引物组合数对准确分析马缨杜鹃遗传多样性的影响

利用5、7、9、11和13对AFLP引物组合对4个居群马缨杜鹃遗传多样性进行分析,探讨不同引物组合数量对其遗传多样性参数指标的影响。结果表明：随着引物组合数量的增加,紫溪山居群遗传多样性的各参数指标变化趋势一致, 5对引物组合检测结果略高于其他引物组合数,但差异不显著,其余3个居群的变化规律不明显;不同引物组合数量对居群间遗传距离无显著影响,UPGMA聚类结果完全相同。由此可见,选用5对引物组合对马缨杜鹃进行遗传多样性分析就能够提供较为准确的结果。     

部分耐冬山茶栽培品种的AFLP分析

 【目的】从分子水平分析耐冬山茶品种间的遗传关系,探讨其品种分类问题。【方法】利用荧光AFLP技术,采用8对EcoRⅠ/Mse 1引物对耐冬山茶16个品种及2个变异类型、5个山茶南方品种、2个云南山茶品种进行AFLP分析,得到清晰的相关AFLP谱带。【结果】在所测试的30个样品基因组中,8对AFLP引物共获得1 062条清晰的谱带,记录了987条多态性带,多态性带占总带数的92.9%,按照非加权算术平均数聚类法(UPGMA)构建树状分支图。【结论】耐冬山茶与南方山茶的亲缘关系较近;可将耐冬山茶品种分成6个亲缘关系不同的组,表明耐冬山茶有丰富的遗传变异。     

98份甘蔗种质资源遗传多样性的AFLP分析

【目的】甘蔗蔗糖产量约占中国食糖总量的92%。具有遗传多样性的甘蔗种质资源是甘蔗杂交育种的基础,杂交亲本的选择和组合的选配是杂交育种成败的关键,研究98份种质的遗传多样性及亲缘关系,为甘蔗杂交组合选配和种质创新提供参考依据。【方法】采用CTAB法提取甘蔗幼叶基因组DNA,利用扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism,AFLP）分子标记技术,对来源于10个国家的98份种质资源的基因组DNA进行酶切、连接、预扩增、选择性扩增,选择性扩增产物在5%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离,银染显色。电泳结果得到“0,1”矩阵,使用POPGENE 32软件计算每对引物的多态性条带数、多态性比率、多态信息量、有效等位基因数、遗传多样性指数等指标,同时使用NTSYS pc-V. 2.1计算种质间遗传相似系数,根据相似性系数进行UPGMA（unweighted pair group method analysis）聚类分析和PCA（principal component analysis）主效应分析,对甘蔗种质资源进行分类。【结果】采用云南省甘蔗遗传改良重点实验室筛选出的10对引物组合共扩增出1 392条谱带,其中多态性条带为1 344条,多态性条带比率为96.55%,平均每对引物扩增出139.2个位点和134.4个多态性位点。98份种质的相似性系数在0.484-0.929,平均为0.734,多态信息量为0.2495,每个位点的有效等位基因数为1.4092,平均多样性指数为0.3890,遗传相似性系数最高的是KN90-418和KN90-455,达到0.929,最低的是云蔗94-375和IS76-126,为0.484。根据遗传相似性系数进行聚类分析,在遗传相似性系数0.64处切割时,可划分为4个类群,第I类群有5份澳大利亚种质,包括IK76-48、IS76-126、IK76-22、SES309和E.SARPET;第II类群有1份澳大利亚种质是IS76-199;第III类群有3份种质,包括KN93-06、90-110-9和BURMA;第IV类群有89份种质,在遗传相似性系数0.79处切割时,可将第Ⅳ类群划分为9个亚群（A、B、C、D、E、F、G、H和I）。基于Jaccard系数用PCA法对98份甘蔗种质AFLP标记结果进行主效应分析,主效应分析显示了不同种质的分类位置,分子主效应分析结果与分子聚类结果一致,集中在一个区域的种质亲缘关系较为紧密,澳大利亚种质位置较为分散,最分散材料为蔗茅属和细茎野生种。【结论】98份种质资源的遗传基础差异较小,亲缘关系较近,其中,澳大利亚种质遗传多样性相对较丰富。90-110-9、KN93-06和粤糖00-236较为特殊,在杂交组合选配中应给予重点关注。     

分子标记在当归属植物遗传多样性研究中的应用

介绍了我国当归属植物资源,并系统阐述了RAPD、ISSR及ITS等分子标记在当归属植物种质资源鉴定及遗传多样性研究中的应用进展.同时指出,应用分子标记研究当归属植物的遗传多样性对当归属的科学分类及新品种选育等具有指导意义.     

利用ISSR和AFLP标记分析石斛种质资源的遗传多样性

本研究利用ISSR和AFLP两种分子标记对51个药用石斛材料（包括35个铁皮石斛种质资源）进行遗传多样性研究。利用ISSR标记筛选出6条引物,共扩增出79条带,平均每条引物扩增条带数约为13.17条,多态条带比率都达到100%。利用AFLP标记筛选出5对引物,共扩增207条带,其中206条具多态性,多态性比率高达99.52%。两标记分析获得的群体种系间关系与变异基本一致,且群体内的分化较小,群体间的分化较大,群体间的基因流动较小。所得到的聚类图表明：ISSR和AFLP标记技术能有效地将研究材料分开,且基本反映了它们之间的亲缘关系,说明两种标记均适合用于石斛植物的遗传多样性研究。     

Genetic Diversity Within a Jackfruit （Artocarpus heterophyllus Lam.） Germplasm Collection in China Using AFLP Markers

Jackfruit is cross-pollinated and mostly seed propagated, a wide range of variation exists in fruit quality. With the development of efficient vegetative propagation methods, excellent genotypes selected from these seed propagated seedlings will gradually replace other genotypes in jackfruit producing areas. In this study, genetic diversity of 50 jackfruit accessions from three provinces in China was analyzed based on amplified fragment length polymorphic （AFLP） markers. A total of 320 unambiguous bands were produced by eight primer combinations, and 65 （20.3%） of them were polymorphic. Genetic similarity coefficients ranged from 0 to 0.9841, with an average of 0.5000, indicating a moderate genetic diversity in this collection. The dendrogram derived by unweighted pair group method with arithmetic mean algorithm （UPGMA） analysis revealed five groups, and no correlation between genetic relationship and geographical origin were found. Accessions of soft and firm flesh type were not clustered into distinct groups, neither could yearly bearing once, or twice fruit accessions. This study has provided useful information for collection and preservation of jackfruit germplasm worldwide.     

基于AFLP分子标记的核桃核心种质的构建

【目的】构建核桃核心种质以便更好地保存、评价和利用丰富的核桃种质资源。【方法】利用AFLP分子标记,对131份核桃原始种质采用逐步聚类法建立候选核心种质,比较不同候选核心种质的多态性位点数、多态性位点百分率,结合形态学指标及地理来源,最终确定核桃核心种质,并进行评价。【结果】建立的核桃核心种质保留了原始种质10%的样品,分别为河北的天桥1号、陕西的西洛2号和西林1号、山西的晋龙1号、山东的丰辉、辽宁的辽宁8号和辽73013、新疆的温185、河南的绿波、北京的北京746、美国引进品种维纳、日本引进品种清香和朝鲜的品种安边1号。根据遗传多样性评价结果,与原始种质相比,核心种质的多态性位点保留率为75.4%。【结论】构建的核桃核心种质能较大程度地代表原始种质的遗传信息,符合核心种质要求。     

苦荞种质资源AFLP标记遗传多样性分析

 【目的】从分子水平研究苦荞种质资源的遗传多样性,为综合评价苦荞种质资源提供依据。【方法】用筛选出的20对AFLP引物,对14个不同地理来源的165份苦荞种质进行遗传多样性分析。【结果】共扩增出938条清晰的条带,其中314（33.48%）条呈多态性,平均每对引物组合的条带数和多态性带数分别为46.9个和15.7个。不同地理来源苦荞种质的Shannon-Weaver多样性指数为0.1093～0.2661,四川资源群最高,青海、云南和甘肃/宁夏等资源群次之,湖南资源群最低。利用Popgen Ver.1.32软件,依不同地理来源苦荞资源群间Nei′s遗传一致度可聚类成5个组,聚类结果与苦荞地理分布相关。基于Structure 2.2软件分析,165份苦荞资源分为5大组群,并与Popgen Ver.1.32聚类结果呼应得较好,其中云南和四川资源的群体结构最复杂,最为多样化,分别被聚到了5个组群中。【结论】苦荞类群的亲缘关系以及遗传多样性与其地理分布有一定相关性。     

基于表型和分子标记分析 24 份巴戟天遗传多样性

【目的】广东省德庆县是道地药材巴戟天的产地,该文对广东德庆不同地区的 24 份巴戟天进行了种质资源的遗传多样性分析。【方法】以德庆县各地收集来的 24 份巴戟天资源为研究对象,使用主成分分析和SRAP、CDDP 两种分子标记方法对 24 份巴戟天材料进行遗传多样性分析。【结果】在表型分析中,基于主成分分析的聚类图发现,官圩镇和高良镇、凤村镇和高良镇分别聚类至 4 个类群中。此外,18 对 SRAP 引物组合和 16 条CDDP 引物扩增后分别获得 100 条和 98 条总条带,其中 SRAP 多态性条带为 50 条,多态性比率达 50%,平均遗传相似系数（GS）为 0.87,遗传相似系数变化范围为 0.71~0.97;CDDP 多态性条带为 80 条,条带之间多态性比率达79.0%, 各种质间遗传系数范围为0.71~0.96,平均遗传相似系数为 0.86,且当系数为 0.82 时,两种分子标记结果均表明高良镇、官圩镇和凤村镇的种质之间具有一定的相似性。【结论】结合表型和分子标记聚类结果,高良镇和官圩镇、高良镇和凤村镇的亲缘关系最近,SRAP 和 CDDP 两种分子标记方法对巴戟天遗传多样性的结果具有一定的差异,而联合分析可以更好地反映巴戟天遗传多样性研究及其资源的系统发育关系。