水貂肠炎病毒分子检测技术与基因工程疫苗研究进展

水貂肠炎病毒（MEV）是一种自主复制性的最小的动物DNA病毒。研究表明,MEV是引起水貂病毒性肠炎的病原体,能够引起水貂剧烈腹泻,具有较高的发病率和死亡率。随着对水貂肠炎病毒研究的不断深入,目前已经在病毒病原学、结构与非结构蛋白、感染机制、诊断与疫苗防控等方面取得很大进展。文章主要针对MEV分子检测新技术与基因工程疫苗等方面进行了综述。     

犬瘟热综合诊断技术

概述了犬瘟热的临床症状、剖检变化、细胞生物学与分子生物学诊断方法。在细胞生物学方面,对犬瘟热的诊断主要依靠病毒分离鉴定、电镜检查、包涵体检查、中和试验等。随着分子生物学的发展,对犬瘟热的诊断从细胞水平发展到分子水平,国内外相继建立起CDV核酸杂交和RT-PCR诊断技术,与传统方法相比其特异性和敏感性更高。     

犬瘟热综合诊断技术

概述了犬瘟热的临床症状、剖检变化、细胞生物学与分子生物学诊断方法。在细胞生物学方面,对犬瘟热的诊断主要依靠病毒分离鉴定、电镜检查、包涵体检查、中和试验等。随着分子生物学的发展,对犬瘟热的诊断从细胞水平发展到分子水平,国内外相继建立起CDV核酸杂交和RT-PCR诊断技术,与传统方法相比其特异性和敏感性更高。     

水貂阿留申病毒检测方法研究进展

水貂阿留申病是由水貂阿留申病毒引起的以浆细胞增多为主要特征的慢性、消耗性、病毒性传染病。主要侵害水貂的免疫系统,导致机体免疫系统紊乱引起的器官衰竭,病死率极高,严重损害了水貂养殖产业的经济利益,该病存在于绝大多数养殖水貂的国家和地区。目前,能有效预防该病的疫苗尚未研制成型,该病的防控已成为水貂养殖领域的世界性难题,在防控方面主要采取淘汰检疫阳性水貂的办法。论文主要针对目前该病在国内外检测方法的特点和流行情况进行阐述,以期为水貂阿留申病快速检测方法的建立及水貂阿留申病的有效防控提供参考。     

鸭瘟病毒实验室检测方法研究进展

鸭瘟是危害养鸭业的一种重要传染病。本文概述了鸭瘟病毒(DPV)实验室检测方法的研究进展。在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、ELISA法、血清中和试验等病毒特异性抗原及其抗体的检测等。在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起的PCR技术、实时荧光定量RT-PCR技术、LAMP技术和核酸杂交技术等。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考。     

水貂阿留申病概述

主要对水貂阿留申病的病原学、流行病学、致病机理、临床症状、病理变化、诊断和防制等方面进行了概述,以便对该病诊断和防制提供参考。     

禽偏肺病毒实验室检测方法研究进展

禽偏肺病毒实验室检测方法包括:在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、ELISA法等病毒特异性抗原及其抗体的检测等;在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起来的RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR、LAMP和核酸杂交技术等。本文在综述各种检测方法研究进展的同时,比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考。     

水貂阿留申病病毒研究进展

水貂阿留申病(Aleutian mink disease, AMD)是由水貂阿留申病病毒(Aleutian mink disease virus, AMDV)引起的水貂的重要传染性疾病之一,深入开展对AMDV的研究对于该病的防控有重要意义。AMDV基因组全长约为4.8 kb,主要编码2种结构蛋白和3种非结构蛋白,它们在病毒复制、增殖及致病过程中发挥重要作用。AMDV的复制依赖于代谢活跃的细胞,对于幼貂,病毒感染肺泡Ⅱ型细胞会造成急性致死性肺炎,感染巨噬细胞则会引起成年水貂患高丙种球蛋白血症和免疫复合物介导的肾小球肾炎等慢性进行性疾病。笔者从AMDV侵入细胞的受体途径、诱导细胞凋亡途径及病毒复制等方面对其致病机理进行阐述。AMDV在全世界范围内广泛流行,现有的检测方法主要分为血清学诊断方法和分子生物学诊断方法。目前,尚未开发出安全有效的针对AMDV的商品化疫苗,随着生物学技术的快速发展,在灭活疫苗、DNA疫苗和亚单位疫苗的研制上有所进展;抗病毒的新方法,如筛选AMDV耐受貂,提高水貂免疫力和靶向适配体技术为AMD的防控提供了新思路。文章从AMDV编码蛋白功能、病毒细胞嗜性与复制、临床表现...     

番鸭呼肠孤病毒检测技术研究进展

番鸭呼肠孤病毒病是危害养鸭业的一种重要传染病。本文概述了番鸭呼肠孤病毒(MDRV)实验室检测方法的研究进展。在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、ELISA法、血清中和试验等病毒特异性抗原及其抗体的检测等。在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起的RT-PCR技术、实时荧光定量RT-PCR技术、LAMP技术和核酸杂交技术等。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考。     

犬瘟热病毒实验室检测方法研究进展

概述了犬瘟热病毒实验室检测方法的研究进展。在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、动物回归试验、包涵体检查、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等。在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起核酸杂交技术、RT-PCR法和实时荧光定量PCR法等。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考。     

检测水貂出血性肺炎绿脓杆菌的比色LAMP法的建立与应用

为了快速有效检测水貂出血性肺炎病原绿脓杆菌,本研究结合金属指示剂HNB特性建立了快速检测绿脓杆菌比色LAMP法。根据绿脓杆菌外毒素A基因设计引物,建立了检测LAMP法;并且对该方法进行了特异性、灵敏性分析;同时进行了初步应用。结果显示,该方法特异性强,灵敏性好,可检测167CFU/mL的菌体,对病貂肺脏检出率高。结果表明,该比色LAMP法可以有效地检测水貂出血性肺炎绿脓杆菌。     

G＋B＋C三个血清型绿脓杆菌灭活疫苗大规模接种后的不良反应和保护效果观察

观察绿脓杆菌的G＋B＋C三个血清型制备的灭活疫苗大规模接种后的速发接种反应及保护性效果观察.用绿脓杆菌G＋B＋C三个血清型制备的疫苗以小鼠和水貂为实验室观察组,同时设定阴性对照,观察疫苗免疫后的速发接种反应;在养殖场,选择常年因绿脓杆菌引起的水貂出血性肺炎的养殖户,采用预防免疫和发病期紧急预防接种两种方式,并回访保护效果.在实验室对水貂和小鼠皮下接种疫苗,接种后7～21 d观察接种部位和解剖小鼠检查病理学变化,没有出现任何异常反应.从2012年和2013年共制备的5个批次14万头份的疫苗,在对临床推广应用的回访中,只有一个养殖户少量水貂出现接种部位化脓,经查是由于注射部位的肌肉吸收性降低而引起,对预防接种的10万头份中,接种后没有发生绿脓杆菌引起的出血性肺炎,在对4万头份的由于绿脓杆菌引起出血性肺炎的紧急接种中,在5～10 d达到控制本病的目的.结论：G＋B＋C三个血清型绿脓杆菌疫苗速发接种反应发生率低,预后良好,无论是预防接种还是发病后紧急接种,均具有较好的保护性.     

Effect of infectious dose and season on development of hemorrhagic pneumonia in mink caused by Pseudomonas aeruginosa

Hemorrhagic pneumonia is an acute and fatal disease of farmed mink caused by Pseudomonas aeruginosa. The pathogenesis of this disease has not yet been resolved. Mink are the only animals known to be susceptible to acute, contagious, and fatal lung infections caused by P. aeruginosa. The purpose of this study was to investigate the correlation between dose-response and season of infection and to clarify whether Danish mink are carriers of P. aeruginosa on their nasal mucosa during the season for hemorrhagic pneumonia. To elucidate the pathogenesis of the disease, an infectious dose-response trial was carried out on adult mink and mink kits, both in the season for hemorrhagic pneumonia (November) as well as out of season (July). It proved difficult to infect mink via the intra-nasal route. Only 4 out of 60 infected mink developed clinical disease and were euthanized, all of them in November, illustrating that predisposing factors in the mink itself and not infectious dose might be crucial for disease development. We were able to culture P. aeruginosa from the nasal cavity of the clinically healthy experimental mink 8 d after inoculation. This indicated that the mink can carry P. aeruginosa on their nasal mucosa without developing the disease. It was not possible, however, to culture P. aeruginosa from the nasal cavity of clinically healthy mink obtained from farms in November, which indicates that the organism is not a normal part of the nasal mucosal flora of mink.     

Pseudomonas pneumonia of mink: pathogenesis, vaccination, and serologic studies

Fulminating pneumonia was produced in mink by the intratracheal administration of Pseudomonas aeruginosa. The sequence of pulmonary lesions was focal inflammation, focal necrosis, and widespread inflammation and necrosis. Secondary lesions of peracute hemorrhage and necrosis were the result of bacterial spread via the airways. Invasion of vessel walls by P aeruginosa was a terminal event and was secondary to bacillary invasion and necrosis of adjacent tissues. Regional (lymphatic) and systemic spread of bacteria followed the development of pulmonary lesions, but there was little morphologic evidence of tissue damage in other organs. Immunofluorescence studies showed that P aeruginosa antigen was dispersed within pulmonary cells and was free in the lung parenchyma. Mink surviving beyond postinfection hour 60 had a macrophage infiltration into limited pulmonary lesions. A vaccine trial was conducted with P aeruginosa lipopolysaccharides (LPS) used as antigen, and an enzyme-linked immunosorbent assay was used to detect antibody. Antibody was detected in mink after vaccination with LPS or natural exposure. Mink with antibody to LPS, from vaccination or naturally acquired, were resistant to experimental infection.     

水貂杯状病毒生物学特性研究进展

水貂杯状病毒（calicivirus）为杯状病毒科成员,能够引起水貂出血性肺炎和胃肠炎等,该病在中国河北、山东等水貂养殖大省暴发并流行,致死性较高,已有学者从血性肺炎病例中分离并鉴定病毒。作者从水貂杯状病毒的分类地位、生物学特性、致病机理和疫病防制等方面进行了综述。     

水貂绿脓杆菌分离株的血清型分析和Eric-PCR指纹图谱多样性研究

为了掌握山东地区水貂出血性肺炎流行情况,从2012年山东省内多个养貂社区进行水貂出血性肺炎流行病学调查。从病貂中分离获得48株绿脓杆菌,分别测定了分离株的生化特性、血清型以及部分菌株对小鼠与水貂的半数致死量（LD50）,同时运用Eric-PCR方法对分离进行了进行分型。结果显示,48株分离菌株与标准菌株生化特性基本一致,血清型G型为36株,血清型Ⅰ型为7株,血清型C型为4株;48株分离株大多数对恩诺沙星最敏感;动物试验显示,48株分离株对小鼠与水貂均能致病,所选4株分离株对小鼠与水貂的LD50有差异,且水貂对所选菌株显著敏感于小鼠;分子分型分为13个基因型。结果表明,该地区水貂出血性肺炎病原呈现遗传多样性。本试验为水貂出血性肺炎的防治提供了理论依据。     

猪流行性腹泻病毒检测方法研究进展

介绍了猪流行性腹泻病毒实验室检测方法的研究进展,在细胞生物学方面,主依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等检测方法;在分子生物学方面,主依靠核酸杂交技术、RT—PCR法和实时荧光定量RT—PCR法等检测方法。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者提供参考。     

兔绿脓假单胞菌性肺炎的诊断与防治

本文报道近年来我省某试验养兔场兔群中流行一种生前以呼吸困难、口鼻出现血样分泌物症状,死后剖检以肺组织变性坏死为特征的疫情,经临床观察、实验诊断、病理剖检和病理组织学检查、流行病学调查及动物致病性实验研究,鉴定为绿脓假单胞菌(Ps.aeruginosa)引起的肺炎,该病特点传染快、死亡率高。通过流行病学调查,探索该病发病流行规律,为防治本病提供科学依据。     

禽网状内皮组织增生症病毒检测方法研究进展

禽网状内皮组织增生症（Reticuloendotheliosis,RE）是危害养禽业的一种重要病毒性肿瘤病。本文概述了禽网状内皮组织增生症病毒（REV）实验室检测方法的研究进展。在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等。在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起的PCR、荧光定量PCR、LAMP技术及斑点分子杂交等。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考。