马铃薯干腐病优势病原菌Fusarium sambucinum 分子检测技术的建立

马铃薯干腐病是马铃薯最重要的贮藏期病害之一,现已成为马铃薯贮藏期烂窖的重要原因。实现病原菌的快速检测对病害诊断和科学防控具有重要的实践意义。本研究基于镰刀菌翻译延伸因子序列设计了一对检测接骨木镰刀菌Fusarium sambucinum的特异引物Fs-F/Fs-R。该特异引物可从接骨木镰刀菌中获得309bp的特异性扩增片段,而其他种类镰刀菌及马铃薯重要病害病原菌中均无此片段,说明该引物具有专一性。该体系的灵敏度检测结果表明,最低能检测到的接骨木镰刀菌基因组DNA浓度为70pg/μL。该引物也适用于发病马铃薯块茎中接骨木镰刀菌的快速检测。     

马铃薯镰刀菌干腐病研究进展及防控手段

马铃薯是世界第四大粮食作物。马铃薯干腐病是一种重要的马铃薯收获后真菌病害,在我国各马铃薯产区内广泛发生,导致马铃薯块茎的商品薯率大幅下降,对马铃薯的产量造成严重经济损失。本文针对马铃薯干腐病的症状、发生与危害、病原菌种类以及综合防控手段进行综述,以期为病害的研究及防治提供参考。     

甘肃省马铃薯镰刀菌干腐病优势病原的分离鉴定

 为明确甘肃马铃薯镰刀菌干腐病的优势病原,2006 年12 月~ 2007 年3 月由西至东从甘肃张掖、天祝、永登、临洮、渭源和西和等6 县市的马铃薯贮藏窖中采集表现有镰刀菌干腐病症状的马铃薯薯块,以组织分离法分离病原,单孢纯化镰刀菌(Fusarium spp. )菌株后,以形态学为基础,参照Nelson 镰刀菌分类系统进行鉴定。结果表明:6 个采样区共分离到293株镰刀菌菌株,其中以接骨木镰刀菌(F. sambucinum)和茄病镰刀菌(F. solani)出现频率高,是优势种。分析发现第一优势种随采样区而异,张掖、天祝和渭源采集的样品中茄病镰刀菌分离频率分别为42. 6% 、42. 1% 和32. 4% ,接骨木镰刀菌分离频率分别为14. 8% 、5. 3% 和26. 5% ,茄病镰刀菌为第一优势种;永登、临洮和西和采集的样品中接骨木镰刀菌分离频率分别为52郾1% 、50. 9% 和55. 2% ,茄病镰刀菌的分离频率分别为23. 3% 、32. 7% 和20. 7% ,接骨木镰刀菌为第一优势种。本文进一步对其在PDA、CLA 上的培养特征进行了观察和描述。按照柯赫氏法则用混合菌株接种法对大西洋(Atlantic)、夏波蒂(Shepody)以及一地方品种进行致病性测定,证实了优势菌种对块茎的致病性。利用EF鄄1琢基因引物(EF鄄1H 和EF鄄2T)对接骨木镰刀菌菌株GAUF鄄F12 进行基因组DNA 的PCR 扩增,将PCR 产物回收测序后在GenBank 上比对,菌株GAUF鄄F12 与GenBank 登记的接骨木镰刀菌5 个菌株的同源性均达99% ;用DNASTAR 分析软件将同源性较高的登记菌株的序列与GAUF鄄F12 菌株构建同源性树,结果表明:该菌株与以上5 个接骨木镰刀菌菌株均位于同源性树的同一分支,聚为一类,与形态学的鉴定结果一致。     

两株毛壳菌对马铃薯干腐病病原菌的抑制作用

为研究毛壳菌及其发酵液对马铃薯干腐病的抑制作用,选取两株毛壳菌与病原菌进行皿内对峙试验,测定毛壳菌对病原菌的抑制率,并调查菌株发酵液对病原菌孢子萌发的抑制效果及离体抑菌效果.结果 显示,在皿内对峙试验中,球毛壳菌(Chaetomium globosum)菌株22-10和粪生毛壳菌(C.funicola)菌株39-6-2...     

35个马铃薯品种对镰刀菌干腐病优势病原的抗病性评价

为合理利用抗源,用菌株混合接种法分别接种接骨木镰刀菌Fusarium sambucinum和茄病镰刀菌F.solani,以DPS2000数据处理系统对接种块茎第15天腐烂斑的半径进行系统聚类分析,从而探讨35个马铃薯品种对镰刀菌干腐病优势病原的抗病性。结果表明:以接种接骨木镰刀菌的块茎其腐烂半径原始数值不转换、接种茄病镰刀菌的块茎其腐烂半径原始数值进行标准化转换、聚类方法均采用欧式距离、最长距离法,其聚类效果与接种结果的吻合度最好。接种接骨木镰刀菌后,以欧式距离21作为最佳聚类距离分割点,将试验品种分为11个抗病品种、17个中抗品种和7个感病品种;接种茄病镰刀菌后,以欧式距离3.0作为最佳聚类距离分割点,将试验品种分为13个抗病品种、14个中抗品种和8个感病品种。     

黑龙江省马铃薯干腐病菌种类鉴定及致病性

本研究将采自黑龙江省不同地区的马铃薯干腐病病样进行分离和病原菌纯化,得到27个镰刀菌菌株,通过致病性鉴定,其中的18个菌株具有致病性。运用培养性状和形态特征综合分析的方法,对上述18个菌株进行鉴定,结果显示为6种镰刀菌,分别为拟枝孢镰孢(Fusarium sporotrioides)、茄镰孢(F.solani)、接骨木镰孢(F.sam-bucinum)、拟丝孢镰孢(F.trichothecioides)、燕麦镰孢(F.avenaceum)和茄病镰孢蓝色变种(F.solanivar.coerule-um)。同时对上述6种镰刀菌进行致病性测定,结果表明不同种类镰刀菌致病性不同,以接骨木镰孢、燕麦镰孢和拟丝孢镰孢致病力最强,拟枝孢镰孢致病力最弱。     

河北和内蒙古马铃薯干腐病菌种类鉴定

为明确河北和内蒙古马铃薯干腐病菌种类和优势种群,从两省采集300块具干腐病症状的样品,通过分离培养、形态鉴定、TEF-1α序列分析及致病性测定等,对马铃薯干腐病菌种类进行了系统研究.结果表明,两省马铃薯干腐病共存在4种病原菌,即接骨木镰刀菌Fusarium sambucinum、锐顶镰刀菌F.acuminatum、尖孢镰刀菌F.oxysporum和芬芳镰刀菌F.redolens,分别为149、80、3、3株.其中,河北省的优势种群为接骨木镰刀菌和锐顶镰刀菌,其发生频率分别为50％和48.68％;内蒙古的优势种群为接骨木镰刀菌,发生频率为87.95％.     

云南马铃薯粉痂病病原研究

马铃薯粉痂菌(Spongospora subterranea f.sp.subterranea)是引起马铃薯粉痂病的病原。本试验对云南省马铃薯产区的马铃薯粉痂菌进行了研究,通过光学和扫描电子显微镜对病原菌进行了描述。光学显微镜观察到了典型的海绵状蜂窝结构;扫描电子显微镜观察到的休眠孢子囊结构与国外观察的一致,证明了马铃薯粉痂菌在云南省马铃薯主产区的存在。     

快速检测马铃薯干腐病病原接骨木镰孢的环介导等温扩增技术

 本研究基于环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP),建立了一种快速、准确和灵敏的接骨木镰孢的检测技术。通过比对接骨木镰孢与其近源种之间的候选靶标序列,选取TEF1-α(translation elongation factor 1-α,翻译延伸因子)基因作为靶标,设计并筛选出一套对该病原菌具有种特异性的LAMP引物,建立了检测接骨木镰孢的 LAMP 体系。该体系在反应前加入染料羟基萘酚蓝(hydroxynaphthol blue,HNB),经62℃恒温反应70 min之后,可根据肉眼观察到的反应物的颜色判定结果。特异性分析结果表明,仅接骨木镰孢的DNA经检测后呈天蓝色的阳性反应,而其他供试菌株的DNA均呈紫色的阴性反应。该方法对DNA的最低检测限为100 pg·μL^-1。在采自内蒙古和黑龙江的28份马铃薯干腐病疑似病害样本中,检测到14份阳性样品。该方法的建立为接骨木镰孢的检测及其所致病害的诊断提供了快捷准确的技术。     

马铃薯块茎干腐病发生危害及防治

随着种植结构的调整，马铃薯已成为甘肃省定西市的支柱产业，2004年种植面积20万hm^2以上，占全市粮食播种面积的52％，总产量500万t，马铃薯贮藏期腐烂病日渐突出，造成损失严重，成为制约定西马铃薯产业发展的重要因素。为此，对定西市马铃薯贮藏病害的种类、危害情况进行了调查研究。     

小麦根腐镰刀菌鉴定及其生物学特性

１９９１－１９９４年对山东省１１县市的小麦根腐病标样进行病原分离培养及致病性测定，鉴定出６种镰刀菌，有黄色镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｃｕｌｍｏｒｕｍ（Ｓｍｉｔｈ Ｓａｃｃ）、禾谷镰刀苏（Ｆ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ Ｓｃｈｗ）、尖孢镰刀苏（Ｆ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ Ｓｃｈｌ）、串珠镰刀苏（Ｆ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ Ｓｈｅｌｄ）茄病镰刀苏（Ｆ ｓｏｌａｎｉ（Ｍａｒｔ） Ｓａｃｃ）及木贼镰刀菌（Ｆ ｅｑ     

玉米茎腐病侵染规律的研究

作者首次提出了玉米茎腐病侵染分成４个阶段的理论，即发病前期（Ｉ），根系显症期（Ⅱ），病害快速上升期（Ⅲ），植株地上部显症期（Ⅳ）。根据田间病株症状系统观察、病菌分离以及病组织显微观察，明确了茎腐病 是以生育前期侵 染为主，后期侵染为主，后期侵染为辅的病害。植株地上部受害症状受根系被害程度和环境因素制约。降雨和高温是影响病程发展速度的关键因子。两种茎腐病菌只有到植株散粉期才能进入茎基髓部。     

番薯(甘薯)黑斑病[Ophiostoma fimbriatum(Ell.&Huls.) Nannf.]的防治研究

 番薯(甘薯)黑斑病在國內现已蔓延十几个省份,造成的损失十分驚人,估計每年在貯藏期要毁掉薯塊二十億斤以上,春薯地区,育苗期普遍發生爛床,例如在河北省疫区調查結果,以前未發現黑斑病时候,每味能采8次苗以上,现在由于黑斑病为害的結果,只能采1-3次苗,苗床即已坏掉。     

浙江玉米苗期根腐病病原研究简报

 一九九○年春,浙江天台县大面积春玉米苗期出现一种毁灭性的根病,重病地块死苗率达80%,一般发病地块为40-60%,给玉米生产带来严重影响。     

马铃薯软腐病细菌的鉴定

 比较了4种方法(结晶紫果胶酸钠培养基直接分离、富集分离技术、雾室技术和厌气技术)检查薯块带菌率的结果,平均10个薯块的带菌薯块数分别为1、7.3、8.7、10。用厌气技术对来自全国23个省、市和地区的46份样本中的460块薯块进行带菌率检查的结果,各样本之间的带菌率高低是不同的,在0~100%之间,平均为39.3%,即共有181块薯块由于软腐欧氏杆菌的危害而发生腐烂。     

京郊保护地黄瓜枯萎病防治研究

京郊黄瓜枯萎病致病菌经鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schlecht.)。该病发病最适合温度25～28℃,低于20℃或高于35℃时,发病减轻。相对湿度在80％以上,发病严重。病害消长与黄瓜生育期亦有关系,结瓜期开始显症状,结瓜盛期受害最重。另外,在有根结线虫时,发病也加重。防治试验,是在夏天进行土壤消毒。措施有:(1)清洁田园;(2)每亩施石灰100公斤、碎稻草500公斤;(3)深翻土壤66厘米;(4)起高垅33厘米;(5)灌水,使沟里的水始终呈饱和状态;(6)铺盖地膜、密闭大棚20天。经测定20厘米以上土温平均40℃以上,防治黄瓜枯萎病效果达89.11—91.49％,每亩增产10％左右,还可兼治根结线虫(Meloidogyne sp.)     

西瓜抗枯萎病品种“卡红”的抗病遗传研究

 西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型Fusarium oxysporum f.sp.niveum侵染所致。该病是西瓜生产中的主要病害,世界各国均有发生。     

舟山地区水仙基腐病研究

浙江省舟山地区近年来发现有水仙基腐病发生为害。据收获时调查,发病率为26—82％。该病主要为害水仙鳞茎基盘及根部,引起褐色软腐,进而使植株枯萎致死。病原菌经鉴定为水仙尖镰孢Fusarium oxysprum f.sp.narcissi Shy.and Hans.舟山地区4月下旬以前旬平均气温低于19℃,田间发病率仅0.6％左右,5月份至收获期,随温度升高病情发展很快。防治试验表明,播种前用福尔马林120倍液浸种3.5小时,防效75.8％。     

浙江省荸荠上镰刀菌种类及其致病性

作者从浙江省11个县市采集病、健株及球茎标样共669个,经分离、纯化、鉴定,获以下7个镰刀菌种;尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、锐顶镰刀菌(F.acuminatum)、半裸镰刀菌(F.semitectum)、层出镰刀菌(F.proliferatum)、茄病镰刀菌(F.solani)、禾谷镰刀菌(F.graminearum)和木贼镰刀菌(F.equiseti)。田间观察和接种试验证明:F.oxysporum是引起荸荠茎秆枯萎的主要病原,这是一种新的危险性病害。病株矮小、黄化、基腐、后期倒伏。1986～1990年少数县市发病率达40％～50％。人工接种证明:F.acuminatum也属强致病性的种类。而F.proliferatum和F.solani则是引起贮藏期球茎腐烂的主要病原。其余种类仅具微弱或无致病性。     

花椒干腐病研究

花椒干腐病是近年来在花椒产区出现的一种新病害。了解该病害的为害性及其发生规律,并寻求有效的防治措施,是目前花椒生产中急待解决的问题。为此,作者几年来先后在陕西渭北地区和甘肃陇南地区对该病开展了大范围的调查及病原菌的鉴定,并进行了药剂防治试验。结果简报如下。