离子色谱法检测胶红酵母R.mucilaginosa CICC 33013胞外多糖的单糖组成

以胶红酵母R.mucilaginosa CICC 33013菌株代谢的胞外多糖REPS为研究对象,经DEAE-52纤维素层析和Sephadex G-100凝胶柱层析分离纯化得到单一组分多糖REPS2-A,采用离子色谱法测定多糖组分REPS2-A中单糖组成。结果表明,多糖组分REPS2-A由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖4种单糖组成,摩尔比为0.2∶63.1∶18.3∶18.3。其中半乳糖的含量占到50%以上,阿拉伯糖含量最低。     

棉花黄萎病拮抗蛋白的分离与纯化

从棉花叶组织中分离到的类芽孢杆菌(Paenibacillus)LC105菌株对棉花黄萎病病原菌大丽轮枝菌具有明显的拮抗作用.该菌株发酵液分别用过滤、高压灭菌及有机溶剂处理,初步证明对大丽轮枝菌产生拮抗作用的物质为蛋白质.LC105菌株发酵液经硫酸铵沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析及Sephacryl S-100凝胶层析分离纯化,得到了分子量为27 kDa的抗菌蛋白.     

甘蓝型油菜苯丙氨酸解氨酶的分离纯化与性质研究

分离和部分纯化了甘蓝型油菜荚果中的苯丙氨酸解氨酶,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得亚基分子量约为46KD,推测其全酶分子量为184KD。酶反应的最适pH值为8.4;最适温度是60℃,70℃处理10min残存活性仍保持在50%,具有较好的耐热性;底物L-Phe最适反应浓度是0.02mol/L;有两个Km值,即Km1为1.01×10-3mol/L,Km2为0.778×10-3mol/L。     

重金属镉、镍、汞对大麦过氧化物酶同工酶的影响

使用聚两燃酰胺凝脱垂直平板电泳法,研究了不同浓度（１０^-4-10^-8mol/L)的Ｃd^2,Ni^2 和Ｈg^2 对大麦根源细胞过氧化物酶同工酶的影响。结果表明,１０^-4mol/LCd^2 和Hg^2 处理２４h均比对照增加１条酶带（Ｒr=0.36),但前者缺失了１条Ｒf值为0．80的酶带８。处理４８h后,１０^-6mol/的Ｈg^2 处理组又增加１条Ｒf值为０．３６的新酶带。其余浓度的Ｃd^2 ,Hg^2 和３种浓度的Ｎi^2 均可使同工酶 强弱的发生改变。Ｃd^2 和Ｈg^2 对过氧化酶的影响明显大于Ｎi^2 。３种重金属对大麦过氧化物酶同工酶的影响与浓度和处理时间有关。     

纤维素降解菌LY16的筛选鉴定和产酶条件研究

从腐烂朽木及附近的土壤采样,分离到25株具有纤维素分解能力的菌株,其中LY16菌株的纤维素酶活最高.采用形态学观察及分子生物学方法初步鉴定其为里氏木霉(Trichoderma reesei).通过碳氮源优化等试验进行产酶条件研究,得出该菌株最佳的产酶条件,培养基配方为(g/L):微晶纤维素10,麸皮40,蛋白胨4,尿素12,KH_2PO_42,MgSO_4·7H_2O 1,CaCl_2·2H_2O 1,FeSO_4 0.01,MnSO_4 0.004 5,CoCl_2 0.003 6,ZnSO_4 0.0035,培养温度30℃、装液量50mL,转速200 r/min,培养时间为72 h.优化后在该条件下,CMC酶活为202.6 U/mL,FPA酶活最大53.2 U/mL.     

一株产胶原酶海洋微生物发酵条件的研究

于海洋污泥中筛选得到的Aeromonas sp.F3所产的胞外酶对胶原蛋白有水解作用,采用单因素试验法对Aeromonas sp.F3的发酵条件及培养基组分进行全面优化,提高该胶原酶生产菌的产酶效率。经优化试验结果表明,该菌株最佳发酵条件为：培养时间24 h,温度40℃,初始pH为8,装瓶量80~100 mL/250 mL;培养基组分为：葡萄糖3 g/L,酵母浸粉9 g/L,NaCl 5 g/L,MnSO4 10 mg/L。经优化试验明显提升了该菌株的产酶能力。     

高活性纤维素酶的分离纯化

为了纯化纤维素酶粗酶液,通过采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析、DEAF FF弱阴离子交换柱层析的方法,研究纤维素酶粗酶液分离纯化的方法。结果表明：采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析、DEAF FF弱阴离子交换柱层析的方法对内切葡聚糖苷酶组分的分离纯化有效。通过试验研究得到一种内切葡聚糖苷酶组分,其比活力提高了5.89倍,回收率为22%。     

小麦蛋白酶解物的分离及其体外抗菌作用的研究

采用碱性蛋白酶水解小麦面筋蛋白制备抗菌肽,再依次采用超滤处理、Sephadex G-25凝胶层析和反相高效液相色谱,从小麦面筋蛋白酶解产物中分离抗菌肽,并研究其体外抑菌作用。结果表明,经过超滤处理后,相对分子量在5 kDa以下的酶解物抑菌活性较好,随后其经过SephadexG-25凝胶层析得到4种组分,抑菌试验表明,其中相对分子量为2 036 Da的峰Ⅱ组分的抑菌效果最好,对大肠杆菌的抑菌率为20.6%,对金黄色葡萄球菌的抑菌率为20.1%。峰Ⅱ组分经过反相高效液相色谱鉴定,得到4个多肽组分。     

钙肥对金秋梨果实生理特性的影响

与健康果相比，金秋梨病果全钙、水提取态和1mol/L NaCl提取态钙含量减少，病果的N／Ca比、果胶甲脂酶（PEA）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性及丙二醛（MDA）含量较高。幼果期喷钙能显著增加平均单果重，降低发病率，改善果实品质，并可增加果实全钙，水提取态和1mol/L NaCl提取态钙组分，能降低果实N／Ca比、PEA、SOD、POD活性及MDA含量。     

枣树RAPD分析体系优化研究

利用随机引物扩增多态性(RAPD)分子标记技术研究不同枣树品系之间遗传多态性,建立起一个基于PCR技术的分子遗传标记RAPD分析的优化体系.设置不同的浓度梯度,从dNTPs、随机引物、Taq酶、Mg2 、缓冲液Buffe,的浓度及模板DNA的质量和用量方面考察,建立了枣树RAPD技术最优体系.结果表明:20μL反应体系组分含量为10×Taq酶Buffer 2μL,Mg2 浓度2.0 mmol/L,dNTPs浓度200μmol/L,引物浓度0.2 μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度0.06 U/μL,DNA模板浓度1.5 ng/μL.最佳扩增程序为94℃预变性4 min,94℃变性30 s,36℃退火40 s,72℃延伸1min,50个循环,最后72℃延伸8 min.