怀头鲶血液学常数值的测定

以 8 0尾怀头鲶为材料 ,测定了血液中红细胞数、血红蛋白值、比积、白细胞分类计数值及各类血细胞大小值。按统计学原理进行分析 ,并对总体正常值范围进行估计。此外 ,对怀头鲶的血液指标与其他鱼类的血液指标进行了比较     

杂交鲶(怀头鲶♀×鲶鱼♂)胚胎发育进程

以低温催产药物进行人工催产、授精 ,获得的杂交鲶受精卵平均卵径 1.6 4mm ,卵粒质量 3.5～ 3.6mg。利用 0 .3%胰蛋白酶对受精卵脱膜 ,解剖镜下连续观察 ,并将其分为胚盘期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期和出膜期七个阶段 ,对所需时间和发育各时期形态特征进行了详细描述。在 18.2～ 19.7℃水温条件下 ,孵化积温为 10 35℃·h ,经 5 1h2 6min孵化出苗。     

怀头鲶的人工养殖技术

怀头鲶也称黑龙江六须鲶、怀头和怀子。怀头鲶是黑龙江省地产鱼类,在黑龙江、松花江、乌苏里江、嫩江等水域,以及一些大型湖泊均有分布。怀头鲶是一种大型鱼类,最大个体可达100kg以上。怀头鲶肉味鲜美,无肌间刺,含肉率高,营养丰富,很受消费者欢迎。近年来,怀头鲶在;黑龙江省养殖取得了较好效果,已发展成为重要的名特优养殖品种。     

怀头鲶人工养殖技术

怀头鲶在我省也被称作黑龙江六须鲶，是东北地区近几年新兴起的一个优良养殖品种，它适应环境能力强，生长速度极快，当年繁殖的水花在精养条件下经3个多月的饲养即可长成1．5kg左右的商品鱼，养殖周期短，效益高。     

怀头鲶高产养殖技术

怀头鲶以惊人的生长速度而著称，投放当年规格为3—5厘米的鱼苗，经过110天左右的饲养，当年出池的商品鱼可重达1—3公斤。怀头鲶不仅生长速度快，产量高，而且抗病力强，很少患病，同时肉味嫩香，深受人们喜爱，是极易养殖成功和易销价高的水产品种之一。池塘养殖怀头鲶可主养、也可套养。两种养殖的高产技术如下：     

怀头鲶仔稚鱼自残行为影响因素的分析

对影响怀头鲶(Silurus soldatovi)自残行为的因素进行了研究.以怀头鲶仔稚鱼作为研究对象,分别考察饲养密度、饥饿、光照周期、容器颜色、个体大小5种因素对其自残行为的影响.结果发现,饲养密度、饥饿、光照周期、个体大小对怀头鲶仔稚鱼自残行为影响显著,其中饥饿对其自残行为影响最大,24 h后自残死亡率最高可达70.0％;容器颜色对其影响不显著,投饵可以缓解仔稚鱼的死亡,但不能从根本上解决怀头鲶仔稚鱼自残行为,建议生产上适时下塘、及时投饵,并积极探索新的养殖方法.     

道氏虹鳟同工酶的组织分布及表达

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,初步研究了道氏虹鳟(Oncorhynchus mykiss)的7种同工酶(GDH、SOD、LDH、α-AMY、POD、EST、MDH)在5种组织(眼、心脏、肾脏、肝脏、肌肉)中的分布及位点表达。结果表明,道氏虹鳟除α-AMY外的6种同工酶都具有明显的组织特异性。生化遗传研究发现7种同工酶共记录27个基因座位,多态座位百分数P=29.63%,平均有效等位基因数Ne=1.2963,说明道氏虹鳟的群体遗传多样性在鱼类中处于中等水平。     

人工养殖鲶的TRAP遗传分析

建立了鲶Silurus asotus的TRAP-PCR反应体系,采用24个TRAP引物组合对鲶人工选育群体进行引物适用性的研究,将获得的多态性位点用于研究鲶群体的遗传结构。结果表明:有9个引物组合可产生有效位点,其中多态引物占所筛选引物总数的37.5%,平均每条引物扩增出15个位点。共扩增出135个位点,多态位点数为75,多态位点比例为55.56%。说明TRAP标记技术适用于鲶的遗传多样性研究,可以作为构建鲶遗传连锁图谱的分子标记。     

人工养殖鲶的TRAP遗传分析

建立了鲶Silurus asotus的TRAP—PCR反应体系,采用24个TRAP引物组合对鲶人工选育群体进行引物适用性的研究,将获得的多态性位点用于研究鲶群体的遗传结构。结果表明：有9个引物组合可产生有效位点,其中多态引物占所筛选引物总数的37．5％,平均每条引物扩增出15个位点。共扩增出135个位点,多态位点数为75,多态位点比例为55．56％。说明TRAP标记技术适用于鲶的遗传多样性研究,可以作为构建鲶遗传连锁图谱的分子标记。     

罗氏沼虾同工酶表达组织差异性及遗传多样性分析

【目的】从生化遗传角度分析罗氏沼虾群体的同工酶基因座及其酶谱表型,明确不同群体的遗传多样性,为其种质资源鉴定及遗传育种研究等提供基础数据。【方法】采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）对罗氏沼虾肌肉、复眼、鳃、心脏和肝胰腺等5种组织中的苹果酸脱氢酶（MDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、山梨醇脱氢酶（SDH）、苹果酸酶（ME）、磷酸葡萄糖变位酶（PGM）、乙醇脱氢酶（ADH）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）、乳酸脱氢酶（LDH）、谷氨酸脱氢酶（GDH）、天冬氨酸脱氢酶（AAT）和酯酶（EST）等11种同工酶进行电泳分析,并选取肌肉同工酶对申漕群体、野生群体、抗病群体、生长群体和浙江群体（2017年引进种虾）等5个罗氏沼虾群体进行遗传学研究。【结果】同种同工酶在罗氏沼虾不同组织间所表现出的酶谱总数和酶带颜色（酶活性）存在明显差异,即罗氏沼虾同工酶具有明显的组织差异性;11种同工酶在罗氏沼虾5种组织中存在26个基因座。其中,EST在肌肉中未表达,但在肝胰腺中表达较多;ME在肌肉、复眼、鳃、心脏和肝胰腺等5种组织中均有表达;SOD-2只在肝胰腺中表达;PGM在肝胰腺和心脏中表达较多。罗氏沼虾肌肉中的7种同工酶存在11个基因座,有3个基因座（SDH-1、PGM-3和LDH-1）呈多态性,多态位点比例为27.27%。5个罗氏沼虾群体的平均预期杂合度在0.1006~0.1416,平均观测杂合度在0.1143~0.1762,Hardy-Weinberg遗传偏离指数（0.1362~0.2444）均为正值,即偏离Hardy-Weinberg平衡。【结论】罗氏沼虾同工酶具有明显的组织差异性,表现为不同组织间的酶谱总数和酶带颜色（酶活性）存在明显差异,因此同工酶可作为研究罗氏沼虾遗传多样性的一种生化遗传标志。5个罗氏沼虾群体均处于杂合子过剩状态,其遗传变异水平较高。     

索氏六须鲶受精细胞学研究

采用连续切片显微观察的方法对索氏六须鲶成熟卵的受精细胞进行了研究。结果显示，精子入卵刺激卵细胞形成胚盘，精子头部在胚盘中逐渐核化，形成雄性原核；卵母细胞放出第二极体，完成第二次成熟分裂，形成雌性原核，两性原核结合成合子核；合子核膜消失，产生第一次卵裂，受精全过程历时50min。     

怀头鲇的核型分析

根据对100个中期分裂相染色体的计数结果,确定怀头鲇Sihurus soldatovi的2倍染色体数为2n=58。由所测得的核型参数和Levan等提出的染色体划分标准得出：中部着丝点染色体（m）为12对;亚中部着丝点染色体（sm）为8对;端部着丝点染色体（t）为2对;亚端部着丝点染色体（st）为7对。染色体总臂数（NF）为98,怀头鲇的核型公式为2n=58=24m＋16sin＋14st＋4t。     

怀头鲇的含肉率和肌肉营养成分分析

报道了怀头鲇（Ｓｉｌｕｒｕｓ ｓｏｌｄａｔｏｖｉ）含肉率和营养成分的测定结果,并将此结果同南方大口鲇的含肉率、营养成分进行了比较。结果表明,怀头鲇的含肉率低于南方大口鲇和鲇,但怀头鲇肌肉氨基酸总量、４种鲜味氨基酸总量以及８种人体必需氨基酸总量均高于南方大口鲇和鲇。     

六须鲶暴发性败血症病原菌的分离与鉴定

从患暴发性败血症的六须鲶Silurus soldatovi身上分离到致病菌株（FY-024）,用常规细菌培养方法对其观察,并进行生理生化特性测试。结果表明,该致病菌均符合鲶爱德华氏菌Edwardsiella ictaluri特征。为了进一步确认该致病菌的分类地位,对其进行了16S rRNA基因序列分析、遗传距离距阵及系统发育树分析,共扩增出1 417 bp基因片段（GenBank登录号为GQ924477）。系统发育结果显示,菌株FY-024与鲶爱德华氏菌的16S rRNA基因同源性达99.6%～99.9%,聚为同一分支,进一步确认致病菌是鲶爱德华氏菌。药敏试验和毒力试验结果显示,菌株FY-024对环丙沙星、恩诺沙星药物高度敏感,按Reed和Muench氏法计算LD50=1.08×106 cfu/尾。     

鲶源维氏气单胞菌的分离鉴定及药敏特性

为探明发病怀头鲶Silurus soldatovi的病原及其生物学特征,从发病怀头鲶体内分离出1株革兰氏阴性细菌SG-1,通过细菌形态学观察、理化特性、16S r DNA测序和构建系统发育进化树分析对其进行了鉴定。结果表明:分离菌SG-1菌株葡萄糖产气、氧化酶、硝酸盐还原为阳性,鸟氨酸脱羧酶、硫化氢为阴性;进一步采用PCR方法扩增其16S r DNA序列,测序获得片段大小为1409 bp,与维氏气单胞菌Aeromonas veronii模式菌株ATCC35624序列相似性达99.86%;构建系统发育树分析显示,分离菌与维氏气单胞菌自然聚为一支,最终判定SG-1菌株为维氏气单胞菌;人工感染斑马鱼Danio rerio、鲶S.soldatovi,其死亡率均达100%,病鱼呈现体表出血、肛门红肿、腹水等症状;药敏试验结果显示,该菌对头孢克肟、头孢哌酮、头孢噻肟、诺氟沙星、左氟沙星、恩诺沙星、氟苯尼考等药物敏感,对阿莫西林、氨苄西林、磺胺异恶唑、甲氧嘧啶、复方新诺明等耐药。本研究结果为了解维氏气单胞菌感染鲶的致病机理及其该病的预防治疗提供了科学参考。     

温度、pH对怀头鲇幼鱼胃和肠道蛋白酶、淀粉酶活力的影响

研究了温度和pH对怀头鲇Silurus soldatovi幼鱼(体重为(80.2±3.5)g、体长为(19.4±1.7)cm)胃和肠道中蛋白酶、淀粉酶活性的影响.结果表明:1)pH对怀头鲇幼鱼蛋白酶的活性影响非常明显,胃蛋白酶最适pH为2.6,最大比活力为(67.65±8.99)U/mg,肠蛋白酶最适pH为9.8～10.3,最大比活力为(149.22±11.33)U/mg;胃、肠淀粉酶的最适pH分别为6.0、6.5～7.0,后者酶活力比前者高约3倍.2)温度对酶活性影响也非常明显,胃、肠蛋白酶的最适温度分别为35℃和40～45 ℃,最大比活力分别为(78.88±6.80)、(192.26±17.22)U/mg;胃、肠淀粉酶的最适温度分别为45℃和40～45 ℃,最大比活力分别为(11.77±1.98)、(16.52±1.62)U/mg.     

黑尾近红鲌3种同工酶的组织特异性研究

[目的]了解黑尾近红鲌的遗传特性。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳,对黑尾近红鲌肝、肾、心、脑、肌和眼6种组织中乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST)及苹果酸脱氢酶(MDH)进行电泳分析。[结果]LDH-B4在心脏和脑中优势表达,LDH-A4在肌肉中优势表达,而LDH-C只在肝脏中检测到;EST在肾、心、肝中活性较强,其中脑和肝组织有6条带,肾组织有5条带;m-MDH在心脏中表现为典型的二聚体2条酶带,s-MDH在所分析的6种组织都有分布。[结论]黑尾近红鲌6种组织中3种同工酶酶带的组成及活性均有所不同,表现出较明显的组织特异性。