羊传染性脓疱皮炎弱毒苗耐热保护剂的筛选优化

旨在筛选出羊传染性脓疱皮炎弱毒苗的最佳耐热保护剂。通过初步筛选,选出符合本试验设计要求的3组保护剂A3、A6、C4,以羊传染性脓疱皮炎弱毒为对象,以保存环境、保存期长短、病毒损失量为参数,采用单因子试验对3组耐热保护剂进行优化,优选出对羊传染性脓疱皮炎弱毒苗耐热保护效果最好、且经济实用的耐热保护剂A6组。试验结果显示,使用A6保护剂的羊传染性脓疱皮炎疫苗在37℃保存3周,病毒含量下降0.4个滴度,常规疫苗下降2.4个滴度;25℃保存60 d,病毒含量下降0.3个滴度,常规疫苗下降2.2个滴度;4℃保存9个月,病毒含量下降0.4个滴度,常规疫苗下降3.8个滴度,说明A6可作为羊传染性脓疱皮炎弱毒苗良好的耐热保护剂。     

鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗耐热保护剂筛选和优化

应用冻干制品加速热稳定试验,测试7组冻干保护剂配方对鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（LaSota株＋H120株）的耐热保护效果。试验筛选出用于鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗的耐热保护剂,使用该保护剂的疫苗表现为37℃保存10d,病毒含量下降0．4个滴度,常规疫苗下降2～2．4个滴度;25℃保存30d,病毒含量下降0．4～0．6个滴度,常规疫苗下降1．8～2．6个滴度。证明此保护剂具有良好的耐热效果。     

猪繁殖与呼吸综合征活疫苗耐热冻干保护剂的研究

为了解耐热冻干保护剂在猪繁殖与呼吸综合征活疫苗中的应用效果,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)分别与耐热冻干保护剂和常规冻干保护剂进行配比、冻干,制备疫苗,分别将疫苗置2~8℃保存,定期测定其效价,同时进行37℃、25℃耐老化试验。结果显示,疫苗在2~8℃条件下保存24个月,耐热苗效价下降不超过0.5个滴度,常规苗效价下降超过3.0个滴度;37℃保存10d,耐热苗效价下降不超过0.5个滴度,常规疫苗下降超过2个滴度;25℃常温保存2个月,耐热保护剂疫苗效价下降不超过0.35个滴度,而常规苗效价下降超过2个滴度。试验结果表明,耐热冻干保护剂对病毒的保护效果明显优于常规冻干保护剂,具有良好的热稳定性。     

羊传染性脓疱病毒耐热冻干保护剂筛选及冻干曲线优化

采用冻干试验筛选出保护剂基础配方,再通过Plackett-Burman设计法筛选主要保护剂基质,然后通过Box-Behnken响应面分析法对羊传染性脓疱病毒(ORFV)耐热保护剂配方进一步优化,用冻干试验进一步验证筛选出1种针对ORFV保护效果最好的耐热冻干保护剂作为疫苗用候选配方。同时,依据前期试验获得的活疫苗冻干曲线,通过进一步优化,获得疫苗最佳冻干曲线。利用该冻干工艺冻干的疫苗,保护剂的保护率可达95.3%,且疫苗各项指标均达到《中华人民共和国兽用生物制品规程》要求。经37℃保存7,15,30d病毒滴度分别下降0.46,0.70,1.00;2~8℃保存3,6,12,24个月病毒滴度分别下降0.10,0.10,0.40,0.60,证明此配方制备的疫苗具有良好的热稳定性。本试验解决了ORFV细胞弱毒疫苗仅能在低温条件下保存和运输的瓶颈技术问题,使疫苗的储存、运输更为方便。     

鸡传染性支气管炎活疫苗耐热保护剂的研究

应用冻干制品加速热稳定性试验,测试三组冻干保护剂配方对鸡传染性支气管炎(H120株)活疫苗的耐热保护效果。结果表明A配方的耐热保护剂效果最好,使用该保护剂的疫苗表现为37℃放置10d后,病毒含量下降在0.6~0.8个滴度。     

鸡痘耐热保护剂活疫苗的研究

选择不同基质组成保护剂与鸡痘抗原进行冻干试验，试制一种适宜鸡痘弱毒株的耐热冻干保护剂。应用耐热冻干保护剂和专用的冻干曲线，制成鸡痘耐热保护剂活疫苗，经37℃保存10d的耐老化试验，每羽份病毒含量下降0．2—0．4个滴度；疫苗在2—8℃保存24个月后，每羽份病毒含量下降0．2-0．4个滴度，且均≥10^3.0EID50／羽，具有良好的热稳定性。19万羽的田间试验证明，鸡痘耐热保护剂活疫苗安全、有效。     

鸡传染性支气管炎耐热活疫苗的研究

应用鸡传染性支气管炎病毒(H52株)与不同耐热保护剂配方和冻干曲线进行筛选.结果表明:采用冻干曲线2和耐热保护剂WXS冻干鸡传染性支气管炎病毒H52弱毒疫苗效果最佳.试制耐热活疫苗3批,其各项检验均符合要求.耐老化试验表明:经过37℃放置10d的每羽份病毒含量下降0.6～0.8个滴度,每羽份病毒含量达104.7～105.1EID50.保存期试验表明:2～8℃保存24个月疫苗每羽份病毒含量下降0.4～0.6个滴度,每羽份病毒达104.1～104.3EID50.疫苗2～8 ℃保存24个月后效检抗体水平达到1:16～1:32.免疫持续期试验表明:免疫21日龄SPF鸡,6个月后血清中和抗体效价达到1:32～1:64.田间试验表明临床观察无不良反应,安全有效.特异性试验表明耐热活疫苗抗原性不变.耐热保护剂生物学和理化特性表明保护剂安全、稳定,室温保存期达3个月.     

鸡新城疫耐热保护剂活疫苗(La Sota株)保存期试验

本实验将NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗分别放入37℃、常温、2~8℃进行NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗保存期试验。在37℃保存7d、10d、15d,将疫苗分别取出,进行病毒含量测定、性状检验。在常温保存10d、20d、30d,将疫苗分别取出,进行病毒含量测定、性状检验。在4℃保存9、12、15、18、24、27个月,按规定日期取出疫苗,进行疫苗的效力检验及外观性状检验。最后得出结论:耐热保护剂活疫苗可在2~8℃保存24个月。     

鸡新城疫活疫苗耐热保护剂研究

应用冻干制品加速热稳定性试验,测试三组冻干保护剂配方对鸡新城疫(LaSota株)活疫苗的耐热保护效果。结果表明3号配方的耐热保护效果理想,主要表现为剩余水份含量低,37℃保存不萎缩,各种温度下保存病毒损失量低。     

耐热保护剂鸡传染性支气管炎活疫苗试验

用3批耐热保护剂冻干的鸡传染性支气管炎活疫苗在2-8℃条件下放置2年，疫苗的病毒含量EID50由10^53、10^55、10^55分别下降为10^37、10^41、10^37。在20-25℃条件下储存6个月病毒含量EID50由10^53、10^55、10^55分别下降为10^39、10^35、10^41。由试验结果可知，试验中的3批耐热保护剂冻干的鸡传染性支气管炎活疫苗在2—8℃条件下保存有效期不少于2年，20-25℃条件下仍具有6个月的有效期。     

鸡新城疫耐热冻干保护剂活疫苗试验

用耐热冻干保护剂冻干的鸡新城疫（LaSota系）活疫苗，在37℃环境下放置14d，疫苗的病毒含量EID50由10^9.1下降为10^8.1，在4℃环境下放置1年半，疫苗的病毒含量基本不变。     

猪瘟无明胶无蛋白耐热活疫苗的研制及冻干工艺

为提高猪瘟(CSF)活疫苗的耐热性能,同时避免明胶和蛋白对猪只产生的免疫副反应,用葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、乳糖、氨基酸等成分设计无明胶无蛋白耐热保护剂,根据配方的共晶点、塌陷温度科学设计冻干程序,并比较了不同预冻方式对猪瘟活疫苗效价的影响。结果表明,猪瘟病毒采用无明胶无蛋白耐热保护剂配方A冻干后具有较好的耐热性能,37℃保存10,15d,病毒的耐热损失分别为0.6lg和0.9lg;对快冻、慢冻以及退火3种不同的冻干方式进行比较,发现对猪瘟病毒冻干损失由大到小依次为:退火慢冻快冻,而耐热损失则相反;与传统的含明胶含蛋白耐热疫苗相比,猪瘟无明胶无蛋白耐热疫苗耐热效果更好,可在2~8℃长期保存30个月,动物试验表明该疫苗对猪只安全、无副反应。     

鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(耐热保护剂)活疫苗的研究

通过对不同保护剂基质与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT)相溶性的研究及冻干曲线的优化,成功研制出一种适宜HVT的耐热冻干保护剂。用其与相匹配的48h自然回温冻干曲线冻干的HVT耐热活疫苗,其病毒冻干损失比SPGA常规疫苗减少约50%,在2~8℃条件下可保存24个月,37℃保存10d病毒存活率达50.5%,而SPGA规程苗仅为31.6%。经约50万羽份的田间试验,证明安全有效并显示出良好的耐热性能,达到国外同类产品水平。     

响应面法优化猪伪狂犬病病毒耐热保护剂的研究

为提高猪伪狂犬病活疫苗的保存温度,本实验应用响应面法(RSM)筛选并优化出猪伪狂犬病病毒(PRV)耐热保护剂最佳配方。结果表明:谷氨酸钠、L-精氨酸盐酸盐和D-山梨醇能够显著提高病毒对冻干环境的耐受能力,酶解酪蛋白、海藻糖、明胶、蔗糖和牛血清白蛋白显著性依次递减;以冻干后病毒保护率为响应值,响应面优化出最优配方为:谷氨酸钠2%、L-精氨酸盐酸盐2%、D-山梨醇2%、酶解酪蛋白7.6%、海藻糖1%、明胶4%、蔗糖15.2%、牛血清白蛋白2%。采用该配方进行验证试验,冻干保护率达到80.40%,经37℃保存7 d的耐老化试验及2℃~8℃保存24个月,3批疫苗病毒滴度分别下降0.55、0.62、0.47及0.47、0.51、0.41,证明该配方制备的疫苗具有良好的热稳定性。     

猪繁殖与呼吸综合征糖玻璃活疫苗制备及其耐热性能的初步研究

采用蔗糖、胰蛋白胨等成分配伍的耐热保护剂处方T28C-5,对猪繁殖与呼吸终审合征病毒(PRRSV)进行了真空梯度干燥,获得性状为干燥致密的白色泡沫状疫苗。采用扫描电镜对PRRS泡沫疫苗和传统的冻干商品疫苗进行了形貌分析,发现泡沫疫苗呈现糖玻璃样,而冻干疫苗呈现疏松孔道样。DSC测定结果表明,泡沫疫苗具有较高的Tg,为57.45℃。干燥的疫苗在37℃保存4个月,病毒效价损失≤1.0 Lg;25℃保存5个月,病毒滴度损失仍0.8 Lg;自然环境温度下保存190 d(历尽夏季、秋季、冬季),病毒滴度损失仍0.6 Lg。将37℃、25℃及4℃下保存3个月的泡沫干燥疫苗免疫20日龄仔猪,免后2周ELISA抗体水平合格且与商品苗趋势相当。试验结果表明泡沫干燥疫苗具有卓越的耐热性能。     

仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗的研究

为了解决仔猪副伤寒活疫苗在储存和运输中活菌数下降的问题,试验采用不同保护性基质组成冻干保护剂,与仔猪副伤寒沙门菌混合、冻干制成仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗,测定其冻干保护率和耐热保护率,以评价疫苗的质量。结果表明:T1和T2是优选的仔猪副伤寒耐热保护剂,采用T2保护剂中试生产的3批仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗经37℃保存10 d后,疫苗的耐热保护率在80%以上,且均大于3×109cfu/头份,具有良好的热稳定性,田间试验安全、有效。     

羊传染性脓疱皮炎耐热性活疫苗冻干曲线的筛选试验报告

为了进一步筛选羊传染性脓疱皮炎耐热性活疫苗,本次试验共设置了3条不同的冻干曲线,通过培养羊传染性脓疱皮炎弱毒为对象,通过对疫苗的冻型、色泽、质地、水分含量、真空度、冻干时间长短,冻干前后病毒损失量为主要试验内容,筛选羊传染性脓疱皮炎耐热性活疫苗的最佳冻干曲线。结果证明,选择不同的冻干曲线所制备的活疫苗均表现出很好的耐热保护性能,虽然在冻干前后损失适量,存在一定差异,但差异性不明显。最终结合冻型好、冻干时间短,冻干前后病毒损失量小,选择曲线1为本次试验的最佳冻干曲线。     

猪支原体肺炎活疫苗(168株)生产工艺关键技术研究

肺炎支原体的培养和保存条件非常苛刻,是疫苗规模化生产的工艺难题。本文针对猪支原体肺炎活疫苗(168株)生产工艺关键技术进行研究。通过培养试验筛选四种培养基配方表明该疫苗株在低血清改良培养基中生长良好;优化发酵培养工艺,使其在发酵罐培养60～70 h的峰值可达到1010CCU/mL;设计筛选该疫苗耐热保护剂和冻干工艺,37℃下保存10 d的耐老化试验结果显示,下降滴度小于100.5CCU/mL。本研究为提供高效、安全和稳定的猪肺炎支原体疫苗产品奠定基础。     

羊传染性脓疱皮炎耐热性活疫苗冻干曲线的筛选试验研究

采用冷冻干燥技术,设置了三条不同的冻干曲线,以培养的羊传染性脓疱皮炎(Orf)弱毒为对象,通过冻型、色泽、质地、水分含量、真空度、冻干时间长短、冻干前后病毒损失量为参数,筛选适合羊Orf耐热性活疫苗的最佳冻干曲线,生产出符合质量要求的冻干疫苗。试验结果显示:利用不同曲线冻干的羊Orf耐热性活疫苗,体积几乎没有发生变化,颜色一致,疏松多孔,呈海绵状,加水后溶解迅速而完全,且立即恢复原来的状态;在耐老化试验中疫苗均表现出了很好的耐热保护性能,虽然在冻干前后病毒损失量略有不同,但差异不明显。因此,通过冻型好、冻干前后病毒损失量较小、冻干时间短,最终确定冻干曲线1为羊Orf耐热性活疫苗的最佳冻干曲线。     

猪瘟淋脾毒(耐热保护剂)活疫苗的热稳定性研究

通过对3种不同配方的冻干保护剂和冻干曲线与猪瘟兔化弱毒相溶性的比较研究,成功研制了适用于猪瘟淋脾毒活疫苗的耐热保护剂.用这种保护剂生产的该疫苗经37 ℃保存10 d的耐老化试验及在2～8 ℃保存12个月后仍然符合产品质量标准的要求.经4 770余头份疫苗的田间试验,证明该产品安全、有效,且便于运输和使用,显示出良好的热稳定性能.