赤霉素A3对铜绿微囊藻的生长和微囊藻素合成的影响

由于微囊藻素对环境安全和公共健康的危害,影响铜绿微囊藻生长和微囊藻素产生的环境因素已受到全世界的关注。然而,人为有机污染对铜绿微囊藻的影响研究较少。赤霉素A_3(GA_3)是一种广泛用于农业和园艺的植物激素,可作为人为污染物污染水体。由于其发生频率较高,本研究分析了不同GA_3浓度(0.1, 1, 10, 20 mg/L)对铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa) PCC7806生长和微囊藻素生成的影响。结果表明,在GA_3处理后,干重和细胞数逐渐增加。GA_3增加了铜绿微囊藻PCC7806细胞中叶绿素a、藻蓝蛋白和细胞可溶性蛋白的数量,但减少了水溶性碳水化合物的积累。另外,观察到GA_3影响铜绿微囊藻的氮吸收,但对磷的吸收没有影响。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定的微囊藻素量在GA_3处理组中增加,但刺激效应在不同培养阶段不同。因此,GA_3通过刺激其吸收氮和利用碳水化合物的能力来促进铜绿微囊藻的生长,增加细胞叶绿素a和藻蓝蛋白含量,并最终诱导蛋白质和微囊藻素的积累。     

珍汕97A“基本苗”,“十元素硼肥”制种试验研究

本文研究了珍汕97A在不同“基本苗”、不同时期喷施十元素硼肥”下的产量反映．结果表明：在667m2基本苗14．17万～22．68万苗范围内,产量随着基本苗的增加而增加,各时期喷施“十元土硼肥”的产量显著和极显著优越对昭。16种处理中,以667m2“基本苗”2268万和始穗期喷施“十元素硼肥”产量最佳。     

不同光环境对黄栌光合生理特性及营养生长和叶色的影响

研究了不同光环境（相对光强分别为全光的100%、70%、40%、25%）对黄栌光合生理特性及营养生长和叶色的影响。结果表明：随着光照强度的降低,黄栌叶片的净光合速率、蒸腾速率和气孔导度均依次降低;黄栌的主枝长度和叶片数量减小;叶片面积呈现先增大后减小,70%全光下叶面积最大。在生长期,全光及高光处理下的黄栌叶片中的叶绿素含量低于中、低光照的处理,且具有显著性差异（P<0.05）,较高全光下叶色为黄绿色且叶片较薄,而较低光照下叶片深绿而厚。在变色期,全光及高光处理下的黄栌叶片中的叶绿素含量逐渐降低、花青素含量逐渐增加,叶片呈现变红过程,但全光下黄栌叶片出现一定的日灼现象,而中、低光照处理时黄栌叶片基本没有花青素的积累,叶片直接由绿色变为黄色。因此,我们认为黄栌属于喜阳不耐阴植物,但考虑到全光下叶片易出现日灼现象,稍遮阴（大于70%全光）是黄栌的最适光环境。     

绵羊抑制素shRNA慢病毒干扰载体的构建与鉴定

构建并鉴定了针对绵羊抑制素α亚基(INHA)基因的shRNA(Small hairpin RNA,shRNA)慢病毒干扰载体,为进一步制备优质、高产转基因绵羊奠定基础.设计并合成4条针对绵羊INHA基因的shRNA表达序列(shRNA1、shRNA2、shRNA3、shRNA4)及2条阴性对照序列(NC1、NC2),将...     

玉米素合成通路相关基因的克隆及表达

高温已成为近年来世界范围内制约玉米生产的最重要的非生物胁迫因素之一,然而对玉米耐高温胁迫的分子机理的认识还十分有限。本试验选取中地88(耐高温胁迫)和先玉335(不耐高温胁迫)两个玉米品种为试验材料,在42℃高温和28℃常温两种条件下研究其花粉中玉米素合成通路相关基因的表达情况。结果表明,共有5个玉米素合成相关基因,即Zmco5、Zmit4、Zmco4b、Zmco12和Zmczg1,基因编码蛋白的氨基酸数目分别为582、364、534、528、465个。进一步对这5个基因表达蛋白作了生物信息学分析,包括常见理化性质、功能位点、磷酸化修饰、二级结构和三级结构等,结果表明,不同蛋白其生物学表型存在差异。基因表达结果显示,对于耐高温胁迫的中地88,这5个基因表达差异达到2倍以上,以常温条件为对照,Zmco5基因表达上调,其余为表达下调。但对先玉335的Zmco5和Zmczg1基因表达上调,其余3个基因表达下调。这5个基因均处于玉米素合成通路中,与细胞内玉米素的生物合成密切相关。     

赤霉素与油菜素内酯对芫荽种子高温萌发的影响

探讨了赤霉素（GA3）和油菜素内酯（BR）对芫荽种子萌发的影响。芫荽种子经不同浓度的GA3或BR预处理后，在高温下进行种子萌发，结果GA3（300mg/L) 、BR（0.005mg/L、0.010mg/L）可显著促进高温下芫荽种子的萌发，尤其是BR（0.010mg/L)效果最佳。     

水肥耦合及其对水稻生长与N素利用效率的影响研究进展

在农业水资源的日益紧缺下,为了减少水稻的灌溉用水和肥料高效利用以实现水稻稳产高产,综述了国内外水肥耦合的研究进展、水肥耦合的概念及其协同、拮抗、叠加三种效应,水肥耦合的机理、水肥耦合对水稻生长发育及产量品质的影响、水肥耦合对水稻中N素利用效率的影响;展望了中国目前在水肥耦合研究方面可以提升的空间,提出了水肥耦合模式是争取水稻高产优质的有效措施,以及如何根据实际需要,运用“以水促肥、以肥调水”,建立合理的水肥耦合模式,提高水肥利用效率,在节约灌溉用水和不增加施肥量的前提下达到既保证作物优质高产又减少环境污染的双重效果,为今后节水农业及水稻的田间栽培和管理提供理论与技术依据。     

侧耳素类抗生素对几种植物幼芽生长的影响

确定侧耳素类抗生素对植物的影响,用不同浓度的截短侧耳素、泰妙以及沃尼妙林溶液培养3个科的5种植物种子,观察幼芽生长情况。通过试验,分别得到截短侧耳素、泰妙菌素、沃尼妙林对红豆、黄豆、玉米起促进作用的浓度范围、最大促进浓度、抑制作用起始浓度,但活尼妙林在所研究浓度范围对玉米未表现出促进作用;还得出对于绿豆和白菜,3种侧耳素类抗生素在质量浓度0.002~0.800 mg/mL没有表现出促进作用,都抑制幼芽生长,且质量浓度越高,抑制作用越强。侧耳素类抗生素在高质量浓度下都对植物幼芽生长有抑制作用,但不同化合物对不同植物的作用效果不同,低质量浓度下可能有促进作用。     

优生素对北京肉鸭生产性能的影响

本试验探讨了优生素对北京肉鸭生产性能的影响.试验选用1日龄北京肉鸭.试验分2个阶段,第一阶段为1～21日龄,采取床上饲养,共2000只雏鸭,分4个处理组,每个处理组设5个重复组;试验第二阶段为22～38日龄,采取地面饲养,共800只肉鸭,同样分4个处理组,每个处理组设5个重复组.各处理组优生素分别按0、250、400、500g·t-1添加到基础日粮中.结果表明日粮中添加400g·t-1优生素组的采食量与对照组相比差异显著;日粮中添加250g·t-1优生素组的体重与对照组相比差异显著(P<0.05);日粮中添加250g·t-1和400g·t-1优生素组的料肉比与对照组相比差异显著(P<0.05);日粮中添加250g·t-1和400g·t-1优生素组的死淘率与对照组相比差异极显著(P<0.01),添加500g·t-1优生素组与对照组相比差异显著(P<0.05);日粮中添加250g·t-1和400g·t-1优生素组的经济效益与对照组相比,要优于对照组.本试验的结果表明日粮中添加优生素可提高北京肉鸭的生长性能,给养鸭业带来一定的经济效益.     

侧耳素类抗生素对几种植物幼芽生长的影响

确定侧耳素类抗生素对植物的影响,用不同浓度的截短侧耳素、泰妙以及沃尼妙林溶液培养3个科的5种植物种子,观察幼芽生长情况。通过试验,分别得到截短侧耳素、泰妙菌素、沃尼妙林对红豆、黄豆、玉米起促进作用的浓度范围、最大促进浓度、抑制作用起始浓度,但活尼妙林在所研究浓度范围对玉米未表现出促进作用;还得出对于绿豆和白菜,3种侧耳素类抗生素在质量浓度0.002~0.800 mg/mL没有表现出促进作用,都抑制幼芽生长,且质量浓度越高,抑制作用越强。侧耳素类抗生素在高质量浓度下都对植物幼芽生长有抑制作用,但不同化合物对不同植物的作用效果不同,低质量浓度下可能有促进作用。     

斑蝥素对草地贪夜蛾卵巢细胞凋亡基因PP2A表达的影响

用实时荧光定量PCR技术对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢组织细胞蛋白磷酸酶2A (protein phosphatase 2A,PP2A)基因表达进行分析以研究斑蝥素对其表达的影响。结果表明,PP2A相对表达量与斑蝥素浓度存在不显著的负相关性,斑蝥素各浓度下PP2A相对表达量差异都不显著(P＜0.05),处理24 h后对照的极显著高于用斑蝥素处理的(P＜0.01)。在相同斑蝥素浓度下,除25μg/mL外其他浓度处理24 h后PP2A相对定量显著高于6 h的(P＜0.05)。研究结果说明,斑蝥素处理对卵巢细胞内的PP2A基因相对表达量有一定的影响,且与斑蝥素的浓度和处理时间有一定关系。     

供核细胞及处理方式对绵羊核移植效率的影响

旨在研究羔羊、胎儿成纤维细胞、绵羊类胚胎干细胞及处理方式对核移植效率的影响。比较了羔羊皮肤成纤维细胞饥饿及消化后平衡时间对细胞可用率的影响;胎儿成纤维细胞饥饿及消化后平衡时间对细胞可用率的影响;羔羊成纤维细胞、胎儿成纤维细胞、类胚胎干细胞在可用率及对融合率的差异和类胚胎干细胞与转基因羔羊皮肤成纤维细胞对核移植效率的影响。结果表明,饥饿对胎儿成纤维细胞可用率影响不大(P>0.05),但平衡时间影响极大(P<0.01);饥饿及平衡时间对胎儿成纤维细胞影响都很显著(P<0.01);胎儿成纤维细胞的可用率极显著高于类胚胎干细胞和羔羊皮肤成纤维细胞(P<0.01),融合率显著高于羔羊(P<0.05),但与类胚胎干细胞间没有差异(P>0.05);胚胎移植后,类胚胎干细胞的怀孕率显著高于羔羊皮肤成纤维细胞(P<0.05)。饥饿和平衡时间对供核细胞的可用率有显著影响,类胚胎干细胞的核移植效果好于成纤维细胞。     

不同分离方法及培养方式对绵羊腔前卵泡发育能力的影响

研究的目的在于分析用不同的方法分离绵羊腔前卵泡以及用不同的培养方式对分离得到的腔前卵泡进行培养,对于绵羊腔前卵泡存活和发育能力的影响。实验分两部分进行：实验1为分离卵巢皮质,分别用显微分离法和胶原酶法分离腔前卵泡。实验2是在实验1的基础上,将较优方法获得的腔前卵泡分别进行单独培养和群体培养。结果显示,显微分离法与胶原酶法相比,在获得的腔前卵泡数量上差异不显著,但显微分离法获得的腔前卵泡基膜完整率显著高于胶原酶法（P<0.05）。获得的腔前卵泡使用单独和群体两种方式进行培养,其直径增加值在第三天和第六天差异不显著,但单独培养法在第三天和第六天的存活率显著高于群体培养法（P<0.05）,且有卵泡腔形成。研究显示使用显微分离法分离腔前卵泡与胶原酶法相比具有优势,相对简单,廉价并且对卵泡的损害很小。经显微分离法获得的腔前卵泡,使用单独培养法进行培养能够促进卵泡的生长发育。     

小鼠ES细胞在不同饲养层上培养nanog基因的表达水平与生长行为的研究

观察小鼠ES-D3细胞在MEF、新生牛睾丸支持细胞(nBTSCs)和新生兔睾丸支持细胞(nRTSCs)饲养层上生长4dnanog基因的表达水平和生长行为。RT-PCR分析显示,MEF饲养层上培养4d的ES-D3nanog基因含量高;nBTSC饲养层上培养nanog基因表达较低;而RTSC饲养层上培养nanog基因表达最低。结果显示:不同饲养层上的ES-D3细胞集落形态和培养4d分化程度有差异。在MEF饲养层上的ES-D3细胞培养4d,集落形态仍然很规则,细胞间紧密,集落表面少见大细胞,AKP染色强阳性。在nBTSC饲养层上的ES-D3细胞,集落界限清晰,AKP染色显示,集落大部分细胞呈阳性,少数的细胞集落为弱阳性,可见集落表面分散有较多的大细胞。在nRTSC饲养层上的饲养层上的ES-D3,集落隆起不明显,集落界限不清晰,大部分集落形态不太规则,AKP染色显示集落中部分细胞呈阳性,少数的细胞集落为全阴性,集落表面有较少的大细胞,集落周围有伸出的成纤维细胞。     

小鼠ES细胞在不同饲养层上培养nanog基因的 表达水平与生长行为

观察小鼠ES-D3细胞在MEF、新生牛睾丸支持细胞(nBTSCs)和新生兔睾丸支持细胞(nRTSCs)饲养层上生长4 d nanog基因的表达水平和生长行为。RT-PCR分析显示，MEF饲养层上培养4d的ES-D3 nanog基因含量高；nBTSC饲养层上培养nanog基因表达较低；而RTSC饲养层上培养nanog基因表达最低。结果显示：不同饲养层上的ES-D3细胞集落形态和培养4d分化程度有差异。在MEF饲养层上的ES-D3细胞培养4d，集落形态仍然很规则，细胞间紧密，集落表面少见大细胞，AKP染色强阳性。在nBTSC饲养层上的ES-D3细胞，集落界限清晰，AKP染色显示，集落大部分细胞呈阳性，少数的细胞集落为弱阳性，可见集落表面分散有较多的大细胞。在nRTSC饲养层上的饲养层上的ES-D3，集落隆起不明显，集落界限不清晰，大部分集落形态不太规则，AKP染色显示集落中部分细胞呈阳性，少数的细胞集落为全阴性，集落表面有较少的大细胞，集落周围有伸出的成纤维细胞。     

茉莉酸甲酯对中国红豆杉细胞基因表达的mRNA差异显示研究

茉莉酸甲酯是一种环戊烷衍生物型植物激素,在植物次生代谢物质生物合成中起着重要作用。我们以中国红豆杉悬浮培养细胞为材料,设两组平行实验,一组为阴性对照组,一组以茉莉酸甲酯进行诱导,所得细胞利用mRNA差异显示技术进行分析,研究了茉莉酸甲酯对红豆杉细胞mRNA表达的差异,最终共获得34个差异表达片段。经二次扩增和单引物阴性对照实验及序列测定,共获得9个阳性差异表达片段。与GenBank数据库比对,结果表明其中2个片段与已知基因有较高的同源性,与欧洲赤松（Pinus sylvestris）cDNA克隆的同源性为88％,与南方红豆杉（Taxus mairei）18SrRNA基因的同源性为93％,其余7个差异表达片段与GenBank中所有基因的同源性都非常低,可能代表了红豆杉细胞中的受茉莉酸甲酯诱导的未知基因序列。     

金黄色葡萄球菌对小尾寒羊乳腺组织TLR2表达的影响

Toll样受体能够识别细菌等病原微生物及介导炎症反应信号通路,在先天免疫和获得性免疫中发挥着重要作用。为了解Toll样受体2(TLR2)在小尾寒羊正常乳腺组织及由金黄色葡萄球菌引起的乳腺炎乳腺组织中的表达情况,探讨TLR2在金黄色葡萄球菌乳腺炎致病过程中的作用机制及乳腺上皮细胞在乳腺免疫防御中所起的作用,采用qRT-PCR技术和免疫组织化学染色(IHC)法检测了正常小尾寒羊及金黄色葡萄球菌乳腺炎病理模型小尾寒羊乳腺组织中TLR2基因mRNA及其蛋白的表达情况。结果显示,小尾寒羊正常乳腺组织、金黄色葡萄球菌感染乳腺组织均有TLR2 mRNA及其蛋白表达;但金黄色葡萄球菌感染后乳腺组织中TLR2基因及TLR2蛋白显著高于正常乳腺组织,且感染后48 h TLR2 mRNA和TLR2蛋白相对表达量最高(P0.05),96 h TLR2 mRNA和蛋白相对表达量较48 h显著降低(P0.05),正常对照组TLR2的相对表达量最低。通过免疫组织化学染色发现,正常乳腺组织中TLR2蛋白主要定位于乳腺腺泡上皮,而感染金黄色葡萄球菌后乳腺组织中TLR2蛋白主要表达在乳腺腺泡腔中脱落的乳腺上皮细胞和以淋巴细胞为主的炎性细胞上。结果表明,乳腺感染金黄色葡萄球菌后,乳腺上皮细胞是病原菌作用的靶标,通过上调表达TLR2识别病原菌,激发先天免疫。     

不同冻存液对奶牛乳腺上皮细胞冻存质量的影响

本试验旨在探究奶牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells,BMECs）最佳的冻存液以改善乳腺上皮细胞的冻存质量。BMECs传至第5代后分别加入以下10种不同配方的冻存液。A组：85%DMEM+10%胎牛血清+5%DMSO;B组：80%DMEM+10%胎牛血清+10%DMSO;C组：75%DMEM+10%胎牛血清+15%DMSO;D组：70%DMEM+10%胎牛血清+20%DMSO;E组：85%DMEM+5%胎牛血清+10%DMSO;F组：75%DMEM+15%胎牛血清+10%DMSO;G组：70%DMEM+20%胎牛血清+10%DMSO;H组：80%DMEM+10%胎牛血清+10%甘油;I组：70%DMEM+10%胎牛血清+20%甘油;J组：60%DMEM+10%胎牛血清+30%甘油,冻存前统一调整细胞密度到1×106 /mL冻存。分别对复苏后的细胞进行台盼蓝染色计算存活率和PI/Hoechst33258双染计算凋亡率。结果表明：BMECs经不同冻存剂冻存复苏后,细胞活力、形态学及凋亡率表现有所不同,其中B组和G组的活力和24 h贴壁率较其他组高,二者的凋亡率较低,二者之间差异无显著性(P>0.05);传代后B组细胞的生长状况最好。     

附红细胞体感染小鼠Thl7细胞的表达

为分析附红细胞体感染后Thl7细胞所发挥的免疫功能。采用RT-PCRTL荧光抗体双标的方法检测小鼠脾脏IL-17的表达变化。结果显示：小鼠感染附红细胞体后,IL-17表达水平显著增高,提示Thl7细胞在附红细胞体感染后发挥了重要的免疫作用,为该病的临床诊断、治疗及预防提供了理论依据。     

桔梗、白花蛇舌草不同组分对人肺癌细胞A549的抑制作用

为筛选桔梗和白花蛇舌草中的抗肿瘤活性成分,制备桔梗总黄酮、总皂苷提取物,白花蛇舌草总黄酮、总蒽醌提取物,采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法检测总黄酮含量,香草醛法检测总皂苷含量,紫外吸收法检测总蒽醌含量,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测四种提取物对人肺癌细胞A549的抑制作用。结果表明：桔梗和白花蛇舌草总黄酮含量分别为5.51% 和1.19%,桔梗总皂苷含量为1.71%,白花蛇舌草总蒽醌含量为7.81%。桔梗总皂苷浓度为0.04 mg/mL时,对人肺癌细胞A549抑制率达到87.59%,桔梗总黄酮浓度为0.5 mg/mL时,抑制率达到89.16%。白花蛇舌草总蒽醌浓度为1.2 mg/mL时,抑制率达到34.76%;白花蛇舌草总黄酮浓度为0.3 mg/mL时,抑制率达到24.33%。试验认为,桔梗总黄酮和总皂苷对肺癌细胞A549的抑制作用较强,可为抗肿瘤药物的研究提供参考。