番鸭“白点病”的病原分离与防制

1998年10月起，广东省四会、佛山、花都、清远、茂名、湛江等地的番鸭先后发生一种以肝、脾、小肠等部位出现灰白色坏死点为主要特征的疾病。经流行病学调查、临床症状观察、病理剖检、实验室检验及病原分离，初步认定为番鸭的一种新的病毒性疾病，暂定名为番鸭“白点病”。1流行情况　　1998年10月，四会某养殖户饲养的1500只番鸭，在7日龄时发生一种急性、烈性的传染病。发病率从刚开始的10％，至第二天即迅速发展到80％，第三天达100％，死亡率高达90％。以后该病在佛山、花都、清远、茂名、湛江等地陆续大量发生。发病日龄在3～65日龄之…     

番鸭"花肝病"的病原研究

从广西患“花肝病”的雏番鸭肝，脾分离到三株病毒，定名为NM1，NM2，NM3。该三株病毒能在番鸭胚和番鸭胚成纤维细胞上增殖。并产生细胞病变，人工感染1日龄番鸭死亡率达100%，但对鸡，康贝尔鸭和鹅不致病。该病毒对氯仿不敏感，耐热，耐酸，不被DNA抑制物所抑制。经超薄切片，磷钨酸负染，电镜观察到大量球形，实心（少量空心）病毒粒子，其大小为66-70nm，该病毒无囊膜。这是一株无囊膜的RNA病毒，其具体的生物学分类位置有待进一步研究。     

番鸭花肝病病原的研究

从广西患花肝病的雏番鸭肝、脾分离到3株病毒．定名为NM1、NM2、NM3。这3株病毒能在番鸭胚和番鸭胚成纤维细胞上增殖，并产生细胞病变。人工感染1日龄番鸭致死率达100％，但对鸡、康贝尔鸭和鹅不致病。分离毒对氯仿不敏感，耐热、耐酸，不被DNA抑制物所抑制。分离毒的细胞培养物经超薄切片，磷钨酸负染，在电镜下观察到大量球形、实心(少量空心)的病毒粒子，其直径66～70nm，无囊膜，属无囊膜的RNA病毒。     

一种新的鹅病毒病的病原分离与初步鉴定

对湖北省某县发生的一种以成年鹅皮下血包囊及内脏广泛性肿块为特征的传染性疾病的病原进行了初步分离、鉴定。用成年病死鹅和病鹅肝组织悬液接种12日龄鹅胚，48～72h鹅胚死亡，再用第一代鹅胚尿囊液连传6代，鹅胚均死亡(GVF1～6)。用GVF2接种鸡胚，48～96h死亡，连传4代，鸡胚均死亡(EVF1～4)；用GVR回归成年母鹅，出现与自然感染病例类似的病变；对EVF4进行毒力测定，其ELD50为10^-5.3；鸡胚平均死亡时间为96h；将EVF4鸡胚尿囊液进行纯化和浓缩，电镜观察，可见大小120～220nm有囊膜的近似球形的病毒颗粒；该病毒能凝集鹅、豚鼠、牛、羊、人等多种红细胞，能被相应的血清和鸡新城疫血清所抑制，经核酸型测定，为RNA。初步确定本病毒是未曾报道过的一新型鹅副黏病毒。     

十种消毒剂对番鸭“白点病”病毒的体外杀灭效果试验

为了提高防制番鸭“白点病”的效果,本试验筛选了目前较为常用的10种消毒剂分别对番鸭“白点病”病毒进行不同时间的体外杀灭效果试验。试验结果表明,各种消毒剂在与“白点病”病毒体外作用15min、30min的情况下,百毒杀、复合酚(消毒灵)、过氧乙酸、二氯异氰尿酸钠、氢氧化钠、甲醛、苯酚、络合碘、戊二醛、乙醇等消毒剂对该病毒均有不同程度的杀灭作用,但百毒杀、过氧乙酸、苯酚、络合碘、戊二醛、乙醇等消毒剂只能致弱或灭活少数病毒,因此杀灭效果并不是很理想。而在0.5﹪甲醛、1∶200复合酚(消毒灵)作用15min,1﹪NaOH、1∶200020%二氯异氰尿酸钠作用30min的情况下,对该病毒的杀灭效果较佳,杀灭率均为100%。     

鸡生殖障碍综合症（暂定）病原的初步研究

１９９９年１０月,从临床表现产蛋率达不到应有峰值的鸡体内分离到一株病毒,病毒粒子基本呈圆形或六角形,无囊膜,直径约３０ｎｍ～６０ｎｍ,病毒经蔗糖密度梯度离心后可得到４条病毒带,纯化后的病毒经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后至少显示出１５种多肽,分子量从５．４～１０７ＫＤ不等,动物回归试验表明性成熟前感染该病毒后果比性成熟后感染更为严重。不凝集鸡红细胞。     

番鸭的一种新病毒性疾病--花肝病

番鸭花肝病是自1997年以来在雏番鸭中发生的以肝、脾上散布许多灰白色坏死小点的一种新的急性病毒性传染病，由于这些小点似花点状。故称之为“花肝病”，也有的称“白点病”。近年来该病在我国多个省份的番鸭养殖地区常有暴发，给广大养殖户造成了很大的经济损失。现将有关该病的认识情况综述如下。     

陕西省部分猪场5种疫病抗体及病原的检测

为调查2019年陕西省规模化猪场中口蹄疫(FMD)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪瘟(CSF)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病(PR)的免疫状况及病原感染情况,采用间接ELISA对送检的20233份血清样品进行抗体检测,采用PCR/RT-PCR方法对送检的1633份病料样品进行病原检测.结果表明,检测口蹄疫...     

鸡生殖障碍综合症（暂定）病原的初步研究

1999年10月,从临床表现产蛋率达不到应有峰值的鸡体内分离到一株病毒,病毒粒子基本呈圆形或六角形,无囊膜,直径约30nm-60nm,病毒经蔗糖密度梯度离心后可得到4条病毒带,纯化后的病毒经SDS－PAGE后至少显示出15种多肽,分子量从5.4KD-107KD不等,动物回归试验表明性成熟前感染该病毒后果比性成熟后感染更为严重。不凝集鸡红细胞。     

鸭病毒性脑炎（暂定）病原分离与鉴定的初步研究

从以腹泻和腿麻痹为主要症状的康贝尔鸭肝、脾中分离到1株病毒。该病毒能适应于鸡胚、鸭胚，胚接种后不死亡，但有出血点。小鸭人工感染病毒后出现与自然病例相似的症状，并能回收到病毒。电镜观察病毒主要呈球形，有囊膜，大小约为30nm；病毒有3种结构蛋白，VP1（17KD）、VP2（41KD）和VP3（50KD），其中VP3为主要结构蛋白，病毒核酸为单链RNA。     

番鸭"花肝病"病原的研究

文章对番鸭"花肝病"病原进行了研究,证实病原为番鸭呼肠孤病毒。该病毒大小为50nm-70nm左右,圆形,无囊膜;雏番鸭人工感染该病毒后可出现和自然病例相同的临床症状和病理变化,并能回收到病毒,鸡、麻鸭人工感染不发病;该病毒不凝集鸡、鸭的红细胞,能够在鸡胚、番鸭胚成纤维细胞上增殖并出现明显的细胞病变;核酸类型为RNA,琼扩试验表明与禽呼肠孤病毒有血清学交叉反应。     

番鸭花肝病流行病学诊断与防制

番鸭花肝病是一种新病 ,对番鸭养殖业造成了较大的经济损失 ,成为影响我国番鸭养殖业的一种重要疾病。近几年来学者们进行了大量的研究工作 ,在流行病学、病原鉴定和防治方面取得了一些突破。对进一步的研究和临床工作都具有参考价值     

福建省番鸭细小病毒病流行病学及病原研究

从福建省番鸭主要饲养区共收集临床疑似番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)病病料65份,进行病原学检测、病原分离、动物回归试验、免疫攻毒试验、基因片段序列分析,旨在研究福建省番鸭细小病毒病流行情况及病毒遗传变异状况。结果显示:仅有10份为MDPV感染,占比为15.2%;其余均为其他病原或两种病原混合感染。MDPV一年四季均能发生,但主要以冬春季节多发(占80%)。从分离的10株MDPV来看,分离株均能致死番鸭胚,番鸭感染MDPV分离株后发病率为80%~100%,死亡率为40%~60%,与1985年分离的MDPV-P株特性相似。1日龄番鸭免疫番鸭细小病毒病活疫苗后,7日龄进行分离株的攻毒,未见发病和死亡现象。基因进化树显示10株分离株与MDPV-P株属于同一分支。基于2018年流行的MDPV毒株与1985年MDPV-P株致病性、抗原性和基因序列特性相似,无明显变化,可使用番鸭细小病毒病活疫苗进行免疫可有效防控该病。     

番鸭感染“白点病”病毒后血浆总胆红素和某些酶的动态变化

以番鸭“白点病”病毒株人工感染雏番鸭 ,于感染后 1 2 ,2 4 ,48,1 2 0 ,1 68,2 4 0和 360h分别检测对照组和感染组番鸭的血浆总胆红素(TBil)含量和碱性磷酸酶 (AKP) ,丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和天冬氨酸氨基转移酶 (AST)的活性 ,同时观察番鸭的临床症状和病理变化。结果 :感染组番鸭的Tbil含量在感染后 1 2和 2 4 0h显著低于对照组 (P<0 0 5) ;AKP活性在攻毒后 1 2h开始显著上升 ,并持续至试验结束 ;ALT活性在攻毒后 2 4 ,1 2 0和 1 68h显著上升 ;AST活性在 1 2 ,48,1 2 0和 2 4 0h显著升高。番鸭感染“白点病”后血浆中酶活性上升 ,提示肝脏、心脏等器官受损明显。感染后期血浆ALT和AST活性趋于正常 ,表明受损器官在后期逐渐恢复。这与临床症状和病理变化相对应。     

番鸭细小病毒与鸭圆环病毒二重PCR方法的建立

根据基因库中鸭圆环病毒和番鸭细小病毒的基因序列,分别设计了两对特异性引物,通过对二重PCR扩增条件的优化,研究建立了可同时鉴别检测鸭圆环病毒和番鸭细小病毒的二重PCR方法。用该方法对同一样品中鸭圆环病毒和番鸭细小病毒的模板进行PCR扩增,结果均得到了与实验设计相符的351bp（鸭圆环病毒）和474bp（番鸭细小病毒）的扩增条带,而对鸭Ⅰ型肝炎病毒、鹅细小病毒、鸭副黏病毒、鸭瘟病毒和禽流感病毒等病原体的检测全为阴性。敏感性测定结果表明：该二重PCR技术最低能检出100fg的鸭圆环病毒和番鸭细小病毒DNA模板。研究建立的鸭圆环病毒和番鸭细小病毒的二重PCR方法,具有快速、敏感、特异、定量和重复性好等优点,可用于临床上鸭圆环病毒和番鸭细小病毒感染的检测。     

番鸭"花肝病"的研究现状

番鸭“花肝病”是番鸭的一种新的急性烈性传染病 ,主要引起 1～ 3周龄雏番鸭发病 ,发病率为 2 0 %～ 10 0 % ,死亡率为 10 %～ 95 %以上。病鸭的主要症状为严重下痢 ,迅速脱水、衰竭死亡 ;特征病理变化为肝、脾、胰、肾及肠等内脏器官形成大小不等、斑点状、白色至灰白色的坏死性病灶。研究者目前均认为该病的病原为病毒 ,但在病原的理化特性与生物学特性、实验宿主系统及各地疫区免疫防制效果等方面均存在较大差异。对该病原的类属地位未能作出确切的结论     

番鸭细小病毒强毒株(MDPV-Q)VP_2基因的序列分析

应用PCR技术扩增了MDPV_Q株的VP2 蛋白基因片段。将扩增后的VP2 基因重组到pMD18_T质粒载体上 ,并对插入片段进行序列测定。将测序结果及由该结果推导的氨基酸序列分别与MDPV、GPV进行了同源性比较及分析。结果表明 ,我国分离的MDPV_Q株其VP2 基因序列与国外分离株具有很高的同源性。而与GPV的同源性较低。     

鸭新城疫病毒与番鸭细小病毒二重PCR方法的建立

根据GenBank中新城疫病毒(NDV)L基因和番鸭细小病毒(MDPV)Vp3基因的保守序列,采用Primer Premier 5.0软件设计并合成了2对引物。通过优化反应条件及特异性、敏感性评价,建立了能同时检测鸭源NDV和MDPV的二重PCR方法。该方法对鸭源NDV和MDPV的检测敏感性分别为30和16 fg。同时使用该方法对鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒、鸭圆环病毒、H9亚型禽流感病毒、鸭黄病毒、沙门氏菌、大肠杆菌和禽多杀性巴氏杆菌进行检测,结果显示全为阴性。本研究建立的鸭源NDV和MDPV的二重PCR检测方法,具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于鸭源NDV和MDPV感染的快速鉴别检测。     

番鸭呼肠病毒的分离与RT-PCR鉴定

从发病番鸭中分离到1株病毒,用该病毒接种番鸭胚,至第2代可引起鸭胚死亡,胚体出血,部分鸭胚肝脾有少量白点。分离毒经用RT-PCR方法进行检测,可与番鸭呼肠病毒标准株扩增出大小一致的特异条带,证实该分离毒为番鸭呼肠病毒。     

番鸭呼肠孤病毒B3分离株的致病性研究

用番鸭呼肠孤病毒B3分离株接种番鸭胚，半番鸭胚和鸡胚，导致接种胚死亡，并产生基本一致的病理变化，死亡胚周身出血，肝，脾有灰白色坏死点，感染番鸭肝细胞出现颗粒变性，随后崩解，该 病毒具有经胚蛋，滴鼻，饮水，肌肉和爪垫注射与同居感染的能力，潜伏期3－11天，不同途径接种1日龄敏感番鸭死亡率达100％，接种1日龄番鸭，半番鸭和雏鸡爪垫可引起注射部位炎性反应，爪垫和肌肉注射1日龄半番鸭和雏鸡不引起死亡。感染番鸭主要可见肝，脾，心肌，肾，法氏囊，腺胃，肠粘膜下层等组织局灶性坏死，其中以肝，脾尤为显著，肝组织和脾白髓结构遭到严重破坏；肝，脑血管周围和肾间质，肺间质，心肌间有淋巴样细胞或／和吞噬细胞聚集，法氏囊淋巴细胞变性和坏死，电镜观察感染胚肝细胞和脾淋巴细胞胞浆内有大量病毒样颗粒及近核包涵 体，感染细胞多核化，空泡化及颗粒化，可见含有病毒样颗粒的凋亡细胞，吞噬细胞胞浆内和凋亡小体内有病毒样颗粒。