中华鳖致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

对江西省进贤县某中华鳖养殖场送检的2只患病中华鳖进行细菌分离,且对分离的细菌进行培养特性观察、生化特性鉴定、毒力因子检测、毒力基因PCR检测、实验动物攻毒及体外药敏试验。结果表明,从2只中华鳖肝脏分离到3株菌,均为革兰阴性短杆菌,其中体型稍大中华鳖2株,体型稍小中华鳖1株;经过实验动物感染试验得出3株菌都为强毒力致病菌;通过生化鉴定、毒力因子及PCR检测确定为嗜水气单胞菌;体外药敏试验结果显示,3株菌对头孢曲松都高度敏感,对利福平、甲氧苄啶、氨苄青霉素都不敏感。     

致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

对锦州及周边地区3个水库30尾病鱼进行细菌分离培养、染色镜检、生化试验和PCR扩增气溶素基因aer鉴定,确定6株为嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的敏感性,各分离菌株均对环丙沙星、氯霉素、强力霉素、妥布霉素敏感;对氨苄青霉素、青霉素不敏感;部分菌株存在不同程度的耐药性。接种试验动物出现典型的嗜水气单胞菌的病理变化和死亡。     

水貂嗜水气单胞菌的分离鉴定与药敏试验

本试验从发病水貂分离到一株细菌,经生化试验、16sr RNA基因序列测定最终确定为嗜水气单胞菌,经动物试验确定有致病性,经药敏试验选择氧氟沙星作为理想的药物,最终取得良好的治疗效果。     

疑似草鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

试验对疑似嗜水气单胞菌草鱼的肝脏、脾脏、肾脏组织进行嗜水气单胞菌的分离鉴定。通过普通营养琼脂、胰蛋白大豆琼脂及生化试剂等的分离培养与生化鉴定后,获得3株细菌;16S rRNA通用引物检测3株细菌的基因序列比对确定菌株后,对确定的草鱼嗜水气单胞菌进行回归试验确认其致病性,然后采用临床上常用的阿奇霉素、阿米卡星、链霉素等10种抗生素进行药敏试验。结果表明,经过分离培养、生化鉴定及16S rRNA通用引物鉴定后确定3种菌株分别为嗜水气单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌和腐败斯瓦尼菌,确定的嗜水气单胞菌回归试验证明其具有致病性;药敏试验显示阿奇霉素对腐败斯瓦尼菌和嗜麦芽窄食单胞菌敏感,其抑菌直径分别为105、95 mm,阿米卡星对嗜麦芽窄食单胞菌、嗜水气单胞菌和腐败斯瓦尼菌这3种菌都较敏感,抑菌直径分别为105、95和93 mm。结果表明,疑似为嗜水气单胞菌病的草鱼有3种细菌感染,其中鉴定的嗜水气单胞菌是致病菌,常用抗生素阿米卡星对3种菌都有抑制作用,而仅对腐败斯瓦尼菌和嗜麦芽窄食单胞菌敏感的是阿奇霉素。     

金鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定和药敏实验

从江西某地发病死亡金鱼体内分离到6株呈D-溶血的革兰氏阴性杆菌,对其进行鉴定、生化试验、动物试验,鉴定为嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophi-la,Ah）。对该菌的致病性和敏感药物试验发现6株菌均具有较强的致病性,均能致死小鼠;该菌对氯霉素、链霉素、诺氟沙星等高度敏感,而对青霉素等药物不敏感。     

大鲵致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定与药敏试验

从患皮肤溃烂的大鲵体内分离到一株细菌,经人工回归感染试验证实该菌株具有较强致病力;通过生理生化鉴定和16S rRNA序列分析,分离菌株为嗜水气单胞菌。该分离菌株对头孢噻吩、庆大霉素、氟哌酸、头孢三嗪高度敏感,对强力霉素、头孢唑啉、卡那霉素中度敏感。     

甲鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及体外抑菌试验

本试验采用分离培养法观察菌落形态特征,微量生化法检测生化特性,PCR扩增法进行分子鉴定,纸片扩散法检测耐药性,牛津杯法检测体外抑菌作用,人工感染动物法检测致病性,以期找到防控甲鱼大量发病的有效办法,对具有典型病状的甲鱼进行细菌分离鉴定。试验结果表明:得到4株形态一致的G-短杆菌JAY-1、JAY-2、JAY-3、JAY-4;均分解葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等,不分解乳糖、鼠李糖、木糖等,硝酸盐、枸橼酸盐等为阳性,H2S、尿素等为阴性;均在约1 500 bp处出现目的条带,与气单胞菌同源性最高,与嗜水气单胞菌同一分支;对青霉素G、阿莫西林、林可霉素、头孢氨卞等完全耐药,对红霉素、四环素等耐药,对头孢曲松、环丙沙星、恩诺沙星敏感;8株乳酸杆菌对分离菌均有明显的抑菌圈;攻毒小白鼠24 h内均死亡,均分离到与自然发病株一致的菌株。说明分离菌均为嗜水气单胞菌,乳酸杆菌对分离菌具有显著的抑致作用,头孢曲松、环丙沙星、恩诺沙星等与乳酸杆菌配合用药,可作为临床防控嗜水气单胞菌的参考依据。     

美洲红点鲑嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

为预防和治疗在美洲红点鲑中暴发嗜水气单胞菌病提供实验依据。从患病美洲红点鲑的鳃及肠等病灶部位分离到一株细菌,经回归试验均出现与自然病例相似的症状,并分离到革兰染色和生理生化特性结果与原菌株相同的细菌。结果表明,该菌为短杆状,两端钝圆的革兰阴性菌,与D-葡糖酸、丙二酸和葡萄糖等反应呈阳性,而与黏菌素、七叶苷和L-阿拉伯糖等反应呈阴性,结合16S rRNA基因序列分析结果,该菌与嗜水气单胞菌的亲缘关系最近,鉴定为嗜水气单胞菌。对其进行药敏试验,结果对氨苄西林、环丙沙星和头孢唑啉等药物表现出耐药,对阿米卡星和亚胺培南等药物敏感。本试验首次从美洲红点鲑中分离出嗜水气单胞菌,并得到16种高度敏感的药物,同时阐明了嗜水气单胞菌在美洲红点鲑中的发病症状。     

锦鲤致病性嗜水气单胞菌分离和药敏试验

从北京某渔场发病锦鲤中分离出8株细菌。经形态学、生化特性鉴定有凝集试验，证明其中3株为嗜水气单胞菌。通过溶血试验、脱脂奶琼脂平板法、Dot-ELISA法及动物试验，显示这3株菌均能产生溶血毒素和胞外蛋白酶，并能致死小鼠。药敏试验表明它们对常用抗生素呈不同程度的耐药性。     

嗜水气单胞菌的分离培养和鉴定

本研究对嗜水气单胞菌进行了分离鉴定,经过临床诊断和病理剖检发现患病鲫鱼具有典型的嗜水气单胞菌感染症状。镜下检查看到可见G-短小杆菌,呈单双排列,两端钝圆。分离培养得到圆形、圆滑、湿润边缘整齐、微凸、半透明、灰白色至淡黄色中等大小的菌落,生化试验结果显示发酵葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、七叶苷和水杨苷。鉴定此细菌为嗜水气单胞菌。动物易感试验结果与结论相符。     

鲤源嗜水气单胞菌分离鉴定、耐药性及毒力基因检测

为查明贵州某鲤鱼养殖厂鲤鱼死亡的病因,本试验进行了细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生理生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、药敏试验、耐药基因检测、动物感染试验、毒力基因检测等。结果显示,从死亡鲤鱼病变组织中分离到的细菌呈圆形凸起、表面光滑的灰白色菌落,为革兰氏阴性短杆菌;生化鉴定结果显示,分离菌具有运动性,能发酵葡萄糖产酸产气,精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶、M-R和V-P试验阳性;应用细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增获得大小为1 421 bp的片段,测序发现,该分离菌与16株嗜水气单胞菌相应序列同源性达75.3%~100.0%;药敏试验结果显示,该分离菌对氟苯尼考、头孢曲松、妥布霉素、氧氟沙星、恩诺沙星5种药物呈现高度敏感,对复方新诺明、磺胺异噁唑、羧苄西林等药物呈现耐药,经耐药基因PCR检测显示,该分离菌携带Sul1、Sul2和Intl1 3种耐药基因,与药敏表型相符;人工感染试验显示,该分离菌有致病力,经毒力基因检测显示,该分离菌携带aer、hly和act 3种毒力基因。上述试验结果表明,本研究分离得到了一株耐磺胺类药物的鲤源嗜水气单胞菌,为该鲤鱼养殖厂的鲤鱼疾病防治与合理用药提供了科学依据。     

鹅源沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验

为了对辽宁省某养鹅场10日龄患病鹅作出正确诊断和治疗,利用实验室诊断和药物敏感试验对病菌进行分离培养与鉴定。结果表明,该病病原为沙门氏菌,对培氟沙星、环丙沙星、痢特灵等药物高度敏感,对卡那霉素等药物中度敏感,对磺胺嘧啶钠等药物不敏感。选用敏感药物进行治疗,收到良好效果。     

梅花鹿败血性肺炎病原的分离及其药敏试验

四川省某野生动物园梅花鹿发生肺炎。无菌采取病死梅花鹿的肝、肺、血液等病料,进行病原菌分离试验、细菌学鉴定、致病力试验,确定该病原菌为肺炎克雷佰氏杆菌(K.pneumonia);药敏试验表明:该菌对丁胺卡那霉素、卡那霉素、氯霉素、强力霉素高度敏感。     

Isolation,Identification and Drug Sensitivity Test of a Strain of Aeromonas veronii from Chinemys reevesii

To determine the cause of death of Chinemys reevesii in a pet shop in Changli county, Hebei province, a dominant strain CLW-1 was isolated and purified from the diseased Chinemys reevesii. It was analyzed and identified through anatomical observation, bacterial isolation and culture, Gram staining and microscopic examination, biochemical identification and 16S rDNA gene sequencing, the drug resistance of the strain was detected through drug sensitivity test, and its pathogenicity was detected through zebrafish inoculation test and virulence gene experiment. The results showed that the bacteria formed moist, smooth surface, gray colony with β hemolysis on blood agar medium, and grew smooth and moist yellow colony on RS agar medium; Gram staining and microscopic examination showed negative coccidiosis; Homology analysis of 16S rDNA gene sequence showed that the isolated strain CLW-1 belongs to the same group with Aeromonas veronii, and the homology is above 99%; Inoculation test results of zebrafish showed that the strain had high pathogenicity, and its LD₅₀ was 1.26×10⁶ CFU; The virulence gene amplification results showed that the isolated strain CLW-1 had virulence genes of aerA, Exu, Lip and Ser; Drug sensitivity test results showed that the isolated strain CLW-1 was sensitive to piperacillin, cefazolin and enrofloxacin, etc; Susceptibility to furazolidone, oxacillin and erythromycin, etc; Resistance to midecamycin, clindamycin and vancomycin, etc. According to the test results, the isolated strain CLW-1 is confirmed to be Aeromonas veronii, which carries virulence genes and has high pathogenicity, it has great therapeutic effect by applying corresponding antibiotics, thus laying a foundation for the prevention and treatment of Aeromonas veronii.     

肉鸡沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

为了解吉林省某地鸡源性沙门氏菌的感染及耐药情况,对该地7个肉鸡场150份病鸡组织样品进行细菌分离,并进行了血凝试验、致病性试验和药敏试验。分离得到26株沙门氏菌,经血凝鉴定有19株呈阳性,其中5株呈强阳性并均能使雏鸡致死。药敏试验结果显示,该5株沙门氏菌对头孢噻肟较为敏感;对氨苄西林、替米考星、林可霉素、阿奇霉素和头孢拉定表现出极高的耐药性,耐药率高达100%;诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、强力霉素和氯霉素5种临床用药与痢菌净不具有协同或累加作用。试验结果表明,沙门氏菌是危害该地肉鸡养殖场的主要病原菌之一,且耐药性十分严重。     

1株草龟维氏气单胞菌的分离鉴定及药敏谱分析

旨在确定河北昌黎县某花鸟鱼店宠物草龟发病死亡的病因,笔者从发病草龟体内分离纯化出1株优势菌CLW-1,通过解剖观察、细菌分离培养、革兰染色镜检、生化鉴定和16S rDNA基因测序对其分析鉴定,并通过药物敏感性测试检测菌株的耐药性,通过斑马鱼接种试验和毒力基因检测其致病性。结果显示,该菌在血琼脂平板形成湿润、表面光滑、呈β溶血的灰白色菌落,在RS琼脂培养基上长出光滑湿润的黄色菌落;革兰染色镜检为阴性短小球杆菌;16S rDNA基因序列同源性分析表明,分离菌株CLW-1与维氏气单胞菌为同一族,相似性均达99%以上;斑马鱼接种试验结果显示,该菌具有较高的致病力,其LD₅₀为1.26×10⁶CFU;毒力基因扩增结果表明,分离菌株CLW-1具有aerA、Exu、Lip和Ser毒力基因;药敏试验结果显示,分离菌株CLW-1对哌拉西林、头孢唑林和恩诺沙星等敏感;对呋喃唑酮、苯唑西林和红霉素等中敏;对麦迪霉素、克林霉素和万古霉素等耐药。通过试验结果确定此分离菌株CLW-1为维氏气单胞菌,携带毒力基因,具有较高致病力,应用对应的抗生素治疗效果较好,为维氏气单胞菌病的防治奠定基础。     

副猪嗜血杆菌江西株的分离鉴定及药敏试验

从江西省彭泽县某猪场出现咳嗽、呼吸困难、胸膜有化脓性纤维蛋白渗出物病变的病死猪中分离到4株革兰氏阴性细小杆菌,对其进行培养特性和生化特性鉴定;用副猪嗜血杆菌16S rRNA的特异性PCR引物,通过PCR技术可从分离菌中扩增出821 bp的特异基因片段,表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌。药敏试验结果表明,4株分离菌对头孢唑啉高度敏感,对头孢哌酮、氯霉素等敏感,而对复方新诺明、青霉素G等有抵抗力。小白鼠攻毒试验结果显示4株分离株均有致病性。