抑制素基因免疫大鼠的免疫应答与基因表达

为了研究抑制素基因免疫对大鼠免疫应答和发情的影响及免疫后抑制素的组织分布,将60只大鼠分为5组,每只分别肌肉注射10（T1）、50（T2）、100μg pCIS（T3）,50μg pcDNA3.1（V）和生理盐水（S）。ELISA检测抑制素抗体水平,阴道涂片法检测大鼠的发情状况,免疫组化分析抑制素的组织分布。结果显示,不同剂量抑制素基因2次免疫10 d后抗体P/N值均显著升高（P〈0.05）,3次免疫10 d后T2和T3组抗体P/N值进一步显著升高（P〈0.05）,T3组抗体水平有高于T1和T2组的趋势（P〉0.05）;抑制素基因免疫对大鼠的发情无显著影响;3次免疫2周后心脏、肝脏、接种肌肉部位均未检出抑制素;卵巢、肾脏和垂体部位均检出抑制素;而脾脏部位,抑制素质粒免疫组检出抑制素,对照组则未检出抑制素。这些结果表明,免疫剂量和次数的增加没有导致大鼠产生明显的抑制素免疫耐受,抑制素基因免疫大鼠是相对安全的,抑制素的组织分布结果亦为抑制素基因免疫的作用机理研究提供了理论依据。     

抑制素基因免疫的免疫反应性

通过应用抑制素真核表达质粒pcINH和抑制素融合表达质粒pCIS分别经肌肉注射免疫大鼠的2个系列试验，检测了免疫鼠抑制素抗体水平及抗体阳性鼠的比例。结果，抑制素质粒pcINH经脂质体介导免疫大鼠，50％（13／26）的个体产生了抑制素阳性抗体。40μg组产生的抗体水平最高；抑制素融合表达质粒pCIS免疫经盐酸普鲁卡因处理的大鼠，2次免疫获得了38.9％（23／54）的抗体阳性率。3次免疫获得55．6％（20／36）的抗体阳性率，100μg组产生的抗体水平最高；加强免疫可提高抗体的水平。但免疫剂量的增加并不一定能增加抗体阳性鼠的比例。     

卵泡抑制素主动和被动免疫及基因免疫研究进展

抑制素是由动物卵巢颗粒细胞或睾丸间质细胞分泌的糖蛋白激素 ,对垂体FSH的分泌具有抑制作用。用抑制素或其片断主动或被动免疫可以提高家畜的排卵率和产仔数 ;用抑制素基因免疫可望得到类似效果。本文通过分析抑制素的理化特性、生物学作用及作用机制、主动和被动免疫对家畜繁殖力的影响 ,阐述了抑制素基因免疫的原理与方法及应用前景     

抑制素免疫与超数排卵

寻找一种简单的繁殖技术以提高排卵率或用作超数排卵是长期以来的目标。虽然利用促性腺激素的超排技术已成为获得可移植胚胎的有效手段,但仍有许多问题尚未解决。最突出的问题是:外源促性腺激素处理后个体差异较大,甚至出现ＰＭＳＧ处理后大卵泡不排卵的报道[1]。近年来国内外学者发现抑制素对垂体ＦＳＨ具有负反馈调节作用,认为内源性抑制素的抑制可能缓解这些问题,因而在促进动物多产和超排的研究中开始关注抑制素及其免疫中和技术[2,3,4]。1　抑制素特性抑制素(Ｉｎｈｉｂｉｎ,ＩＮＨ)是一种由动物性腺分泌的糖蛋白激素,是由α、β两个亚…     

抑制素与乙肝表面抗原融合基因免疫对大鼠生殖能力的影响

90只大鼠随机分为5组(n=18),分别肌肉注射10、50、100μg抑制素与乙肝表面抗原融合基因表达质粒(pCIS)、50μg空载体(pcDNA3.1)和100μL生理盐水。20 d后加强免疫1次,对每组中的12只大鼠进行2次加强免疫。结果发现抑制素抗体P/N值随着免疫次数的增加而提高。100μg剂量组2次和3次免疫的成熟卵泡发育数分别比对照组多6.9和7.5个(P<0.05)。3次免疫后大鼠成熟卵泡发育数比2次免疫后显著提高(35.2±2.73 vs 31.0±0.92,P<0.05)。抑制素基因免疫组的胎盘数和窝产仔数高于对照组(P>0.05),抗体阳性鼠高于阴性鼠(P<0.05)。pCIS 3次免疫后抗体阳性鼠的抗体水平与成熟卵泡发育数的相关系数为0.45(P>0.05),与胎盘数的相关系数为0.77(P<0.05)。pCIS免疫大鼠动情期和产后血浆FSH水平高于对照组,抗体阳性鼠的血浆FSH水平高于阴性鼠,其中2次免疫后阳性组动情期FSH浓度极显著高于阴性组(P<0.01)。这些结果表明,抑制素基因免疫大鼠可促进大鼠的卵泡发育,提高血浆FSH水平,为抑制素基因免疫大动物提供了试验依据。     

卵泡抑制素主动和被动免疫及其基因免疫研究进展

抑制素是由动物卵巢颗粒细胞或睾丸间质细胞分泌的糖蛋白激素，对垂体ＦＳＨ的分泌具有抑制作用。用抑制素或其片断主动或被动免疫可以提高家畜的排卵率和产仔籽；用抑制素基因免疫可望得到类似效果。本文通过分析抑制系的理化特性。生物学作用及作用机制，主动和被动免疫对家畜繁殖力的影响，阐述了抑制素基因免疫的原理与方法及应用前景。     

提高繁殖力的新技术：抑制素基因免疫的研究进展

抑制(Inhibin,INH)是一种由性腺器官分泌的抑制垂体FSH分泌的糖蛋白激素.用抑制素免疫动物特别是单胎动物在生产上有很大的应用前景.本文从抑制素的免疫机制及其研究进展加以阐述,并在此基础上,提出了进一步研究的思路.     

抑制素基因免疫对小鼠生殖的影响

用编码抑制素α（1－32）的基因与pcDNA3.1真核表达质粒进行重组，构建抑制素基因疫苗NH。将30只2周龄ICR小鼠随机分为3组（每组10只），试验Ⅰ，Ⅱ组分别经脂质体介导肌肉注射iINH15μg()0μL,25μg(100μL)，对照组注射免疫空载体pcDNA3.115μg(100μL)。首次免疫后间隔3周加强免疫1次。小经pINH基因免疫后，用ELISA可从血浆中检测到抑制素抗体，表明pINH可在活体肌细胞内表达，表达产物具有制素抗原性，能激活免疫系统产生抑制素抗体。抑制素抗体P／N＞2视为阳性，阳性率为30％（6／20）。抑制素抗体阳性小鼠与阴性小鼠的产仔数，初生重和窝重等没有显著差异（P＞0．05）。抗体阳性组首次免疫后，雌鼠血浆FSH浓度略有升高，经过加强免疫后显著升高（P＜0．05）。由此可以看出，抑制素基因免疫可以诱导产生抗抑制素抗体，并促进促卵泡素的分泌。     

抑制素免疫对牛繁殖的影响

抑制素是一种主要由动物性腺9睾丸的支持细胞和卵巢的颗粒细胞）分泌的一种异二聚体糖蛋白激素，由两个二硫键连接两个不同的亚单位（α和β）构成。抑制素对垂体FSH分泌和／或合成具有选择性地抑制作用。抑制素免疫中和技术能特异性地刺激FSH分泌，进而促进配子生成，提高动物繁殖力。     

抑制素免疫对禽类繁殖的影响

抑制素（Inh ib in,IB)是一种由雌性动物的卵泡颗粒细胞和雄性动物的睾丸支持细胞分泌的糖蛋白激素。用抑制素免疫禽类在生产上有很大的应用前景。本文从它的免疫机理、免疫方法、对动物排卵及FSH水平影响、在养禽业中的应用前景和存在的问题加以阐述，并在此基础上，提出了进一步研究的任务。     

抑制素免疫对牛、羊繁殖力作用的研究进展

文章综述了天然提纯,化学合成及重组等不同种类抑制素抗原免疫对牛、羊繁殖力的影响.近年来抑制素疫苗作为多胎疫苗的角色已越来越为人们所重视,其免疫原性同抗原本身一些因素如纯度、免疫原性、异原性、免疫剂量有关.     

串联抑制素重组质粒的构建

根据GenBank中报道的猪抑制素基因序列设计两对引物,克隆含有抑制素抗原决定簇基因片段α(1～32)的plINH和p2INH,在这两个片段中都设有限制性内切酶Xba Ⅰ的酶切位点,通过Xba Ⅰ把p1INH与p2INH串联起来.串联抑制素基因片段与pcDNA3.1载体通过EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切位点连接后经过转化DH5α感受态细菌构建重组栽体.以重组载体作为模板,以含有EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切位点的引物进行PCR,产物经验证为含串联的抑制素基因.串联的抑制素基因产生的融合蛋白具有抑制素的免疫原性,且不会与体内其他蛋白发生免疫交叉反应.串联后的基因片段在单位体积内的抗原位点数增多,免疫效果也会加强.可以反馈性地抑制FSH的分泌,提高母畜的排卵数,提高产仔数.     

串联抑制素重组质粒的构建

根据GenBank中报道的猪抑制素基因序列设计两对引物，克隆含有抑制素抗原决定簇基因片段α（1～32）的p1INH和p2INH，在这两个片段中都设有限制性内切酶XbaⅠ的酶切位点，通过XbaⅠ把plINH与p2INH串联起来。串联抑制素基因片段与pcDNA3．1载体通过EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点连接后经过转化DH5a感受态细菌构建重组载体。以重组载体作为模板，以含有EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点的引物进行PCR，产物经验证为含串联的抑制素基因。串联的抑制素基因产生的融合蛋白具有抑制素的免疫原性，且不会与体内其他蛋白发生免疫交叉反应。串联后的基因片段在单位体积内的抗原位点数增多，免疫效果也会加强。可以反馈性地抑制FSH的分泌，提高母畜的排卵数，提高产仔数。     

抑制素(Inhibin)基因免疫在提高动物繁殖力中的应用

抑制素(Inhibin)是一种由性腺器官分泌的糖蛋白激素,能抑制垂体促卵泡素(FSH)的分泌及卵泡发育。本文主要阐述抑制素基因免疫对动物繁殖力的影响及影响免疫效果的因素。     

抑制素pCIS基因免疫对黄牛卵泡发育和生殖激素的影响

分别用O(C)、0.75(T1)、1.50(T2)、2.25(T3)和3.0(T4)nag·头'-1的抑制素pCIS基因疫苗免疫58头黄牛,以探讨抑制素pCIS基因免疫对卵泡发育和生殖激素的影响.结果表明,抑制素pCIS基因免疫组的大卵泡(d≥10 mm)数显著高于对照组(P<0.01),中卵泡(7 mm≤d<10 mm)数和小卵泡(4 mm≤d<7 mm)数与对照组均没有显著差异(P>0.05),T1组左右两侧成熟卵泡大小与对照组差异不显著(P>0.05),其它3组两侧成熟卵泡均显著大于对照组(P<0.05).抑制素pCIS基因免疫黄牛的促卵泡素(FSH)平均含量高于对照组,且在加强免疫阶段差异显著(P<0.05);加强免疫后雌二醇(E2)和孕酮(P4)含量均显著增加,且均与对照组差异显著(P<0.05).这些结果表明,抑制素pCIS基因免疫可促进FSH分泌,进而影响黄牛卵泡发育和成熟.     

抑制素免疫在动物繁殖中应用的研究进展

抑制素是性腺分泌的一种糖蛋白激素，它具有抑制垂体促卵泡素合成和分泌的作用。抑制素具有免疫反应性，抑制素免疫在提高动物繁殖性能方面有良好的应用前景。作者阐述了抑制素的结构和特性以及抑制素免疫的机理、类型、方法和影响因素及其在畜牧业中的应用。