中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

精浆对猪精子冷冻效果影响的研究

为优化猪精子冷冻技术,提高解冻后精子的活力和受精能力,本试验分别以含精浆浓度为10%、20%和30%的冷冻保护剂处理精子,以冷冻前、解冻后精子活力和质膜完整性,解冻后精子进行体外受精(IVF)的卵裂率和囊胚率等作为检测指标,同时以含有卵黄的Tris-柠檬酸－葡萄糖(Tris-citric acid-glucose,TCG)冷冻基础液作为对照研究精浆对猪冷冻精子的保护作用。结果显示,在含有10%精浆浓度的稀释液中,冷冻前质膜完整性,解冻后精子活率、质膜完整性、IVF囊胚率相对于对照组均显著提高(P<0.05);当含有10%精浆的冷冻精液解冻后用于人工授精时,与配母猪妊娠率、窝产仔数、窝产活仔数等仍显著低于鲜精授精组(P<0.05)。上述结果表明,含10%精浆的冷冻保护剂能提高精子的冷冻后活力和IVF胚胎发育率,但用于人工授精配种与鲜精相比还有一定差距。     

不同保护剂对藏羊冷冻精液品质影响的研究

本实验研究了不同保护剂对藏羊细管冷冻精液的品质影响。结果表明:含T ris的柠檬酸盐缓冲液可以提高冷冻-解冻后的精子活率(0.41±3.23)和精子顶体完整率(74.45±1.45),以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率(0.41±2.87)和顶体完整率(81.23±1.45)。稀释液中添加维生素B12对提高冷冻后精子活率(0.44±3.26)与保护顶体完整率(83.33±1.93)具有良好的作用。     

不同冷冻保护液和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响

在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳.     

不同冷冻保护剂在鸡精液冷冻中的作用效果分析

本实验采用一定浓度的甘油、乙二醇、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、二甲基乙酰胺（ＤＭＡ）作为冷冻保护剂，用含冷冻保护剂的稀释液将精液稀释后常温保存，观察精子活率，比较精子生存指数，并进行输精实验，发现在常温下对精子毒害作用最大的是甘油，其次是ＤＭＳＯ，而ＤＭＡ及乙二醇对精子的毒害作用最小。以一定浓度的４种冷冻保护剂将精液冷冻后观察解冻活率，发现以ＤＭＡ作为冷冻保护剂，解冻后精子活率最高。在输精实验中，以ＤＭＡ作为冷冻保护剂采用深阴道输精，取得了５０％的受精率。浅输精取得了４０％的受精率。     

提高奶牛细管冻精使用效果的研究

为了提高奶牛细管冻精的使用效果,试验从筛选最佳解冻方法和解冻后有效保存环境二方面进行研究,分别比较低温、室温、体温及高温环境下的精子活率。结果显示:采用75℃解冻3 s精子活率最高,效果最好,适合解冻后立即输精;40℃解冻20 s效果较好,保存时间较长,适合解冻保存后输精;低温5℃和室温15℃解冻精子活率低于0.35,90℃高温条件下精子活率不稳定,不适合生产使用。此外,对奶牛细管冻精40℃下解冻20 s后在0~4℃,14~16℃,25~27℃下分别保存2,4,6,8,10小时时的活率进行测定,结果显示,0~4℃和14~16℃保存10 h精子活率与初解冻精子活率差异不显著(P0.05);25~27℃随保存时间延长,精子活率呈下降趋势,保存6 h精子活率与初解冻相比差异显著(P0.05),保存8,10 h精子活率与初解冻相比差异极显著(P0.01)。因此,在生产实践中对奶牛细管冻精解冻时,需根据具体情况选用适合的解冻方法。     

温度对犬精液冷冻保存的研究

本实验在以往研究的基础上进一步研究了冷冻起始温度(始冻温度)、解冻温度对精子活率的影响.实验结果表明:始冻温度为-70℃时冻后精液质量最好,冻后镜子活率达0.6284±0.0408,优于-65℃和-75℃时的冻后精子活率;解冻温度为70℃时对解冻后精液质量最好,达0.6810±0.0324,明显优于60℃和65℃的精子活率.     

猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

不同冷保保护剂在鸡精液冷冻中的作用效果分析

本实验采用一定浓度的甘油，乙二醇，二甲基亚砜（ＤＭＳＯ），二甲基乙酰胺（ＤＭＡ）作为冷冻保护剂，用含冷冻保护剂的称释法液精稀释后常温保存，观察精子活率，比较精子生存指数，并进行输精实验，发现在常温下对精子毒害作用最大的是甘油，其次是ＤＭＳＯ，而ＤＭＡ及乙二醇对精子的毒害作用最小，以一定浓度的４种冷冻保护剂将精液冷冻后观察冻活率，发现以ＤＭＡ作为冷冻保护剂，解冻后精子活率最高。在输精实验中，以ＤＭＡ     

猪精液冷冻技术研究

手握法采集约克种公猪(12月龄)精液,于37℃离心后弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,采用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。通过对不同稀释液及冷冻保护剂进行筛选研究,结果表明,Ⅶ号稀释液优于其他6种稀释液(P<0 05);甘油为较佳的冷冻保护剂(P<0 01),其适宜浓度为2%;干解冻效果优于湿解冻,其适宜温度为40～45℃,解冻后精子活率达0 46～0 52;稀释液中添加安钠咖可有效延长精子的冻后存活时间(P<0 01)。     

解冻稀释液及孵育温度对冷冻-解冻后犬精液品质的影响

实验旨在比较解冻后解冻稀释液(Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液)的添加比例(1:0、1:1、1:2)对精液品质的影响,并比较了4种孵育温度(37、34、25、4℃)对精子寿命及精子活力的影响,探索合适的冷冻-解冻后犬精液的孵育条件。结果显示:解冻稀释液的添加与否及添加比例对解冻后孵育30 min的精子活力、活率、质膜完整率及顶体完整率均无显著影响;解冻后,在不同温度下孵育30 min,4组精子活率和质膜完整率无显著差异,而4℃孵育温度下精子活力和顶体完整率高于37℃(P0.05);解冻后孵育2 h,4℃孵育温度下的精液品质(精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率)最佳(P0.05),34℃和25℃组之间差异不显著,而37℃组的精液品质最差。结果表明,解冻稀释液对解冻后精液的孵育效果无影响,而解冻后精液的孵育温度以4℃最佳。     

内蒙古白绒山羊附睾精子冷冻效果的研究

本试验把不同温度下的样品分成3个处理组,通过检测精子与繁殖力有关的重要指标研究3个处理组的冷冻效果,结果显示, 在3个不同的环境下收集附睾,室温下(19 ℃)收集附睾精子(处理1组)的冷冻效果最好,解冻后活率为(55.0±3.4)%;4 ℃下收集的精子(处理2组)冷冻解冻后的活率为(35.0±2.5)%;37 ℃下收集的精子(处理3组)的冷冻效果较差,解冻后活率为(23.0±2.5)%。通过对处理组中冷冻和解冻后两个阶段的精子指标的测定,研究了精子活率与其他指标的关系,得出白绒山羊附睾精子能够成功的保存。     

波尔山羊冷冻精液稀释液及稀释倍数研究

通过研究波尔山羊冷冻精液稀释液和稀释倍数,以筛选最佳稀释液配方、确定适宜的稀释倍数、提高波尔山羊精液冷冻效果。结果表明,4号稀释液解冻后精子活率高于1号、2号、3号稀释液解冻后精子的活率,差异极显著( P<0 .0 1 ) ;4号稀释液解冻后精子存活时间为61 .2 6h,长于1号、2号稀释液精子存活时间( P<0 .0 1 ) ,短于3号稀释液精子存活时间,但差异不显著( P>0 .0 5 ) ,说明4号稀释液冷冻效果最好。精液稀释3倍、4倍、5倍解冻后精子活率分别为0 .5 0 2、0 .5 0 1、0 .495 ( P>0 .0 5 ) ,均高于稀释6倍、7倍、8倍的精子活率( P<0 .0 1 ) ,表明波尔山羊冷冻精液稀释倍数以3～5倍为宜。     

羊冷冻精液的制作技术研究

通过对羊精液冷冻稀释液组成成分的研究,筛选合适的稀释液配方,研究精子平衡时间、解冻温度、稀释倍数和稀释方法等对精子活力的影响。结果如下:①解冻后的精子活率以加入Tris的一组稀释液活率最高,与其他组相比差异极显著(P<0.01)。②精液的平衡时间以平衡4～5h解冻后活率最高。③在45℃～60℃的水温条件下,取得了精子复苏率74.5%的解冻效果。④选用5种稀释比例(精液:稀释液),分别为1∶4、1∶5、1∶6、1∶6、1∶8,结果1∶8的稀释比例精液解冻后活率最高,达到了70%以上。     

巴马香猪精液冷冻保存研究

利用甘油和二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂,以精子存活率为评价指标,研究了冷冻保护剂对香猪精液冷冻保存效果的影响。试验分工、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个试验组和1个对照组。以解冻后的精子活力、活率为判断标准,比较了4种冷冻保护液对香猪精液冷冻保存的影响。结果表明,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组精子活率显著高于Ⅲ组（含5％甘油）（P〈0．05）;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间差异不显著（P〉0．05）;Ⅰ组精子活率最高,达到53．10％。     

稀释液中添加维生素E对绵羊冷冻精液品质的影响

采用两步稀释法 ,在绵羊冷冻精液中添加维生素E ,精液稀释平衡后精子活率 ,试验组 (0 .6 35 )高于对照组(0 .5 75 ) ,但无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;而解冻后 ,试验组活率 (0 .4 35 )极显著高于对照组 (0 .36 5 ) (P <0 .0 1) ;精子顶体总异常率 ,试验组 (33.72 % )极显著低于对照组 (4 4 .35 % ) (P <0 .0 1) ,其中试验组顶体膨胀率和脱落率与对照组分别为 1.2 8% ,2 3.0 8%与 2 .6 8% ,2 8.96 %。添加维生素E可以降低冷冻对精子顶体的损害程度 ,提高精液品质。试验也证明在解冻后保存 1h内 ,精子活率呈现缓慢下降的趋势 ,但 1h后活率急剧下降 ,因而 ,绵羊冻精颗粒解冻后应在 1h内输精完毕     

不同稀释液配方对奶牛冷冻精液的影响

采用假阴道法采集成年种公牛精液,经精液品质检查后,合格精液用四种不同冷冻稀释液进行稀释、冷冻、以筛选出适宜的冷冻稀释液和最佳冷冻保护剂.结果表明:Ⅱ号稀释液优于其它3种稀释液(P＜0.05);甘油为最佳冷冻保护剂.优于乙二醇和DMSO冷冻效果(P＜0.05),其最佳浓度为7%,精子冷冻后活率平均可达0.45±0.575,畸形率15.44%,项体完整率57.82%;奶牛细管冻精的解冻效果以75℃水浴,2 S到6 S的解冻时间最佳.     

不同解冻方案对牛冷冻精液质量的影响

解冻是冷冻精子复苏的关键步骤,解冻方案的选择则是冷冻精子复苏的关键点。为筛选出适合目前我国规模化牧场冷冻精液的解冻方案,本研究分别采用6种解冻方案对冷冻精液进行解冻并观察其解冻活率。结果表明,随着解冻温度的升高和解冻时间的缩短,精子活率呈上升趋势,并且当解冻温度达到40℃,解冻时间为20s时,冷冻精子解冻后的活率达到最高。关于6种解冻方案对精液存活时间的影响研究结果表明,当采用38~39℃解冻30s方案时,精子存活6h的活率最好。     

解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。     

不同精液解冻液和解冻速率对猪颗粒冻精品质的影响

为提高猪冻精解冻后的质量,本试验选择5种解冻液配方,对猪颗粒冻精进行解冻,结果表明,Ⅴ号解冻液为最佳解冻液,解冻后精子活率为(34±2.4)%,极显著高于Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ组(P0.01);存活时间为(506.6±40.4)h,极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P0.01),显著高于Ⅳ组(P0.05)。选择9种不同的水温,采用V号解冻液对冻精颗粒进行解冻,记录解冻时间,并计算解冻速率,研究结果表明,以27.5℃/s的速率进行解冻,解冻后精子的活率、弯尾率及顶体完整率均达最优水平。