吕梁黑山羊特色产业发展思考

吕梁黑山羊是山西省优良的地方山羊品种,具有适应性强、耐粗饲、易抓膘、抗病抗逆、肉质好等特点,主要分布在晋西吕梁山脉一带。保护并开发利用好这一优质特色种质资源,将资源优势转化为品牌优势和效益优势,对促进吕梁市特色畜牧经济发展和农民脱贫致富具有现实意义。阐述了吕梁黑山羊产业发展现状,分析了其产业发展潜力,并对其保护及特色产业发展提出建议。     

血清体积分数对培养黑山羊成纤维细胞的影响

为了建立并完善吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞培养体系,为进一步的克隆试验提供最佳生长状态的供体细胞,在常规培养液的基础上添加不同浓度的新生牛血清(0,5%,10%,20%,40%),每天在倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态,并用台盼蓝染色法统计细胞数目,连续观察7 d,绘制生长曲线,比较不同血清体积分数的培养液对吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞体外培养的影响。结果表明,吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞虽然在不同血清体积分数的5组中均有生长增殖,但生长状态不同,差距较大;其中,10%的血清培养液试验组培养的细胞生长状况最好,细胞形态完整清晰,增殖快,数量多,更适合此细胞的生长。不同体积分数血清的培养液对成纤维细胞的生长具有一定影响,10%血清体积分数的培养液最适合吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞的培养。结果可为进一步研究克隆、基因转染、构建基因文库等提供生物学材料。     

吕梁黑山羊种质特性研究与地方标准制定

为挖掘地方特色种质资源,指导特色畜牧业的快速发展,以吕梁黑山羊主产区的临县、柳林等选育点吕梁黑山羊为研究对象,采取形态学和行为学观察、生产性能测定等方法,对吕梁黑山羊种群体型外貌、体质量、体尺、产肉性能、绒毛性能、繁殖性能等种质特性进行了研究,并在此基础上制定出《吕梁黑山羊》地方标准。该标准的制定对吕梁黑山羊遗传资源的评价、保护、选育、开发、规范化生产都具有重要意义。     

吕梁黑山羊品种资源亟待保护和利用

<正>1品种形成与数量分布吕梁黑山羊主要产于山西省西部黄土高原的吕梁山区一带,该品种的形成在本地的一些县志有少量相关记载,但无据可查。据了解其饲养史可     

黄曲霉毒素对黑山羊血常规指标的影响

结合1起黑山羊霉菌毒素中毒病例,对30只病羊进行生理生化指标的检测。结果表明,黑山羊食用霉变花生藤后白细胞数目、谷丙转氨酶、谷草转氨酶显著上升(P<0.05);红细胞体积分布宽度、平均红细胞血红蛋白浓度、碱性磷酸酶显著下降(P<0.05),其他指标无显著差异(P>0.05)。     

黑山羊的养殖关键技术

随着我国经济水平和生活水平的提高,养殖业也在快速发展。其中,黑山羊是我国羊养殖中一种比较普遍的养殖种类,很多黑山羊养殖群体都有了收入的增长。但在黑山羊养殖中还有很多需要解决的问题。通过研究其特点习性,用科学有效的方法改进黑山羊的养殖关键技术,从而得到更高的经济效益,使黑山羊养殖户对黑山羊养殖提高信心,积极开拓市场,在市场的指导下改善养殖结构,发展黑山羊的科学养殖方法。     

荔波黑山羊的养殖心得体会

近年来,人们的生活质量不断的提高,人们越来越重视饮食中的健康问题,人们追求健康、绿色、无公害无污染的食品。本文中主要介绍了荔枝黑山羊的养殖技术。     

吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞的分离及体外培养

为了更好地开展对吕梁黑山羊这一特色地方品种资源的保护研究,采用组织块贴壁法,成功分离、培养并获得具备典型形态特征的吕梁黑山羊耳缘皮肤成纤维细胞。经过反复冻融试验检测细胞能够稳定传代和保存,同时对其进行了电转染条件的初步摸索。结果表明,在电压240 V,脉冲时长20 ms的条件下,转染效率较高。该细胞的分离培养为开展种质资源保存及相关繁殖生物技术研究提供了较好的平台,同时也为后续开展转基因克隆和基因编辑研究奠定了良好的基础。     

最后的黑山羊

深山里、沟壑间、旷野上、我是一只黑山羊. 我翘首蓝天、我亲吻大地,我寂寂孤行… 我亲历了暴雪肆虐的严冬,我行走在风刀霜剑的早春,前面依然是荆棘丛生,怪石嶙峋.     

浅谈黑山羊的养殖技术

在黑山羊的养殖过程中所碰到的关键性技术要点;根据自己的经验和体会;作个交流和探讨。     

太行黑山羊成纤维细胞系建立与生物学特性研究

以太行黑山羊耳缘组织为材料,采用组织块直接培养法和细胞冷冻技术构建了成纤维细胞系,并进行了细胞活力测定生长动力学观察、微生物污染间检测、染色体标本制备、同功酶分析及生物学研究。结果表明：细胞群体倍增时间（PDT）约为24h;细胞染色体中二倍体（2n=60）占主体,镜检细胞的百分比为98．2％;乳酸脱氢酶（LDH）、苹果酸（MDH）脱氢酶同工酶分析,没有其他物种污染;细菌、真菌、病毒、支原体检测阴性。该细胞库的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准。此项研究不仅在细胞水平上保存了这一重要畜禽品种的种质资源,而且亦为其基因组和后基因组及体细胞克隆等研究提供宝贵实验材料。同时,此技术平台的建立必将为其他畜禽遗传资源细胞水平的保存提供技术与理论支撑和保障。     

利用SRY基因鉴定山羊胎儿成纤维细胞的性别

根据GenBank中已发表的山羊SRY基因和β-乳球蛋白基因序列设计2对PCR引物,对来自3个1月龄山羊胎儿成纤维细胞的基因组DNA进行PCR扩增,分别以公羊、母羊的基因组DNA为阳性和阴性对照,同时对PCR产物进行序列测定和同源性分析。结果表明,阳性对照和GFF1细胞系有2条扩增带,阴性对照、GFF2和GFF3细胞系只有1条扩增带;序列测定结果表明,PCR扩增产物为SRY基因,利用该方法准确鉴定出1个雄性细胞系和2个雌性细胞系。     

山羊转人乳铁蛋白基因成纤维细胞和乳腺上皮细胞单克隆的制备及扩大培养

[目的]为探索单个转基因阳性细胞快速扩大培养成为细胞克隆的技术体系。[方法]对转染人乳铁蛋白(Human lactoferrin,hLF)基因乳腺特异性表达载体pBLM-C1的单个山羊胎儿成纤维细胞(Fetal Fibroblasts,FF)和乳腺上皮细胞(Mammary Gland Epithelial,MGE)细胞进行克隆。在96孔板中,首先用3种浓度(V/V:0、50%和100%)的适应性条件培养基对单个转染细胞进行细胞单克隆的制备,进而把转染细胞单克隆与非转染细胞共培养进行扩大培养,neo基因被用于筛选基因,以PCR方法鉴定转染细胞基因组DNA。并对单克隆细胞进行染色体核型分析。[结果]与非适应性条件培养基相比,100%适应性条件培养基能够显著提高细胞单克隆存活率;与对照相比,转染细胞单克隆与非转染细胞共培养,显著提高了转染细胞单克隆扩大培养后的比率(FF:53.33%vs.10.00%;MGE:33.33%vs.6.670%),且明显缩短了扩大培养汇合时间(20～30 d);PCR鉴定结果表明,上述方法获得的克隆细胞整合有hLF目的基因;核型分析表明,大部分细胞克隆染色体正常。[结论]该研究可为分离转基因细胞、理想载体的插入及诊断提供一种可靠的方法,并能节省转基因动物生产的及费用时间。     

动物细胞培养物中支原体污染的检测

[目的]建立检测细胞培养物中支原体快速有效的方法。[方法]从6种常见污染细胞的支原体16sRNA中选择2段高度保守的核酸序列作为引物,用PCR和DNA荧光染色法来检测实验室中25种动物细胞株。[结果]用DNA荧光染色法检测实验室中25种动物细胞株阳性率为24％,可疑阳性为16％;而用PCR法检测阳性率为36％。[结论]PCR法较DNA荧光染色法灵敏度更高、特异性更强,将2种方法结合应用效果更好。     

胡椒组织培养中污染问题的研究

研究了胡椒组织培养中外植体的污染问题。采用常规消毒、枝条喷施杀菌剂 常规消毒、培养基中加入不同杀菌剂和抗生素组合 常规消毒、杀菌剂和抗生素混和液振荡处理 常规消毒、枝条喷施杀菌剂 培养基中加入杀菌剂和抗生素 振荡处理 常规消毒对污染进行控制，对外植体消毒中的污染问题未有明显改善，表明这种污染主要是内源性污染。     

过表达MyoD1基因山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其成肌诱导分化

【目的】通过建立过表达MyoD1基因山羊胎儿成纤维细胞系研究MyoD1基因的异位表达研究其在成肌分化中的生物作用。【方法】采用RT-PCR从激活的骨骼肌卫星细胞中克隆MyoD1基因,并将其cDNA终止密码子TGA定向突变为GGA,定向克隆至带有增强型水母绿色荧光蛋白（ehanced green fluorescent protein,eGFP）报告基因的真核表达载体pEGFP-N1中,构建融合蛋白表达载体pEGFP-MyoD1,经过酶切、测序鉴定后,采用LipofectiminTM LTX转染山羊胎儿成纤维细胞（goat embryonic fibroblast,GEF）以建立MyoD1异位表达细胞株并采用成肌诱导分化培养液进行成肌诱导分化,探究MyoD1在成肌过程中的生物学功能。【结果】成功克隆山羊MyoD1基因,并在MyoD1 的开放阅读框（ORF）两端引入XhoⅠ/EcoRⅠ酶切位点,将其终止密码子TGA定点突变为GGA,定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体,获得融合蛋白表达载体pEGFP-MyoD1;经G418（400 μg•mL-1）筛选2周后,获得MyoD1异位表达的GEF细胞株;间接免疫荧光（indirect immunofluorescence assay,IFA）检测结果显示该细胞株能够表达Myf-5等成肌相关免疫学标志;采用成肌分化培养基分化培养处理2—3 d可见少量肌管产生,并表达MyoG、Desmin和MyHC等早期成肌分化标志,处理5 d可见大量肌管形成。【结论】成功克隆出山羊MyoD1基因,构建了pEGFP-MyoD1真核表达载体并建立过表达MyoD1 GEF细胞系,过表达MyoD1 GEF系能够在成肌诱导培养液诱导形成肌管。     

波尔山羊与贵州黑山羊杂交的改良效果

为了探明波尔山羊与贵州黑山羊杂交对其后代生长性能的影响,以及在人工草地和荒山放牧饲养方式下的生长变化,以波尔山羊为父本(♂)与贵州黑山羊为母本(♀)进行杂交(贵州纯种黑山羊为对照),对其初生重、3月龄、6月龄和12月龄羊的体重、体尺等生长性能进行测定和比较。结果表明:1)杂交F1代羔羊的体重较贵州纯种黑山羊后代的平均体重增加53.89%,3月龄、6月龄和12月龄的体重、体高、体长和胸围均得到明显提高,综合性能得到很好改善。2)通过比较人工草地放牧与荒山放牧饲养方式下的改良效果发现,在人工草地上的杂交优势更为明显。说明,杂交优势是否得到充分发挥与饲养方式密切相关,在饲草较为丰富、活动相对受限的人工草地放牧饲养方式下,波尔山羊与贵州黑山羊的杂交优势更明显。     

新疆番茄生长及其果实加工过程中霉菌污染的监测

[目的]确定新疆番茄果实生长及其加工过程中的霉菌组成,了解不同加工番茄产地所分离霉菌的差异与分布特征以及是否有产毒霉菌污染.[方法]对番茄生长与加工过程中不同环节进行样品采集与霉菌分离,并根据菌落形态特征、显微特征、生理生化和ITS序列分析等方法对分离获得的霉菌进行鉴定.[结果]共分离鉴定45株霉菌,曲霉为优势菌17株,其次为青霉9株,镰孢菌6株,赤霉菌4株,木霉2株,其它类型霉菌7株.[结论]番茄生长土壤与番茄果实中均分离鉴定出产毒真菌黄曲霉菌和木贼镰孢霉,从番茄叶片中分离到产毒真菌尖孢镰孢菌.     

植物组织培养中污染的控制

控制污染是植物组培苗工厂化生产中重要的技术环节。笔者从外植体消毒、操作污染和环境污染、继代培养中污染的防治、减少培养基中的有机成分等方面，讨论了减少污染的措施和方法。     

浏阳黑山羊品种改良配套技术研究Ⅰ.杂交浏阳黑山羊血液生理生化指标的测定

采用努比山羊（♂）与浏阳黑山羊（♀）进行杂交，获得杂交浏阳黑山羊，为探讨杂交后代的机能代谢状况，测定了杂交一代和亲本浏阳黑山羊的19项血液生理生化指标，结果表明，两组间RBC，Hb,GOT,GPT,AKP,TL,Tch,Glu,TP,A,G,Na^ ,Ca^2 ,Pi和Cl^-等15项指标值基本相近：WBC，AMY，K^ 和Mg^2 等4项指标，两组间虽有显著或极显著差异，但其变化幅度均在正常值范围内。