高频率生菜植株再生及转化体系的建立

通过对两种生菜及其不同外植体在培养基上不定芽发生能力的筛选，得到“大湖３６６”叶切片不定芽发生率高达８７％的培养体系，并且丛生状不定芽可陆续发生。将叶切片与农杆菌共培养，对经ｋｍ筛选后所得再生株进行Ｘ－Ｇｌｕ染色，兰色反应阳性率为５０％。     

小麦转基因再生植株培养体系的优化

以5个基因型不同的小麦幼胚，幼穗作为供试材料，探讨了品种基因型、ABA咱生根条件等对小麦离体培养的影响。结果表明，小麦品种豫麦18－64为遗传转化的良好受体材料；0．2mg/L NAA和0．8mg/L IAA可促进幼苗生根；在幼胚愈伤组织诱导前14d，用0．5mg/L ABA处理可有效抑制出芽率，并有利于促进胚愈伤组织形成和再生能力的保持.     

‘晶瑶’草莓高效再生及遗传转化体系的建立

以草莓‘晶瑶’为试材,研究不同激素种类和浓度配比对叶片诱导愈伤、愈伤分化出芽的影响,建立‘晶瑶’草莓叶片的高效离体再生体系。结果表明,‘晶瑶’叶片在MS+2,4-D 0.05 mg/L+TDZ 2.0 mg/L的诱导培养基上不定芽再生率达到79.18%。在‘晶瑶’草莓遗传转化试验中,叶盘对卡那霉素的敏感性最适筛选浓度为30 mg/L,羧苄青霉素的最适抑菌浓度为400~500 mg/L,150μmol/L乙酰丁香酮的加入可提高GUS的瞬时表达率;10 min是最适合农杆菌侵染‘晶瑶’叶片的时间;共培养48 h对叶片转化较适宜,得到抗卡那霉素并呈GUS阳性的抗性芽频率为2.38%,获得了转化阳性植株。     

草莓组培快繁及叶片诱导植株再生的研究

以4个草莓品种的匍匐茎尖为起始材料，试验以MS为基本培养基附加不同激素草莓茎尖诱导植株再生、增殖、生根的培养基，确立了草莓组培快繁技术方法；又以4个草莓品种的组培苗叶片为外植体，探讨了不同激素配比、基因型对诱导草莓不定芽再生的影响；通过进一步试验，以MS＋B5有机为基本培养基附加6－BA2．253mg/L、IAA1．752mg/L，探讨草莓不同基因型及不同外植体对诱导不定芽再生的影响，初步建立了一个有效的、较高频率的芽再生系统，也为基因的转化找到一个较好的受体材料。     

杜仲叶片为外植体的植株再生

杜仲不仅是传统中药植物，也是重要的胶源植物，具有很高的经济价值。本研究采用生长21天的杜仲无菌苗叶片为材料，基本培养基为MB(MS无机盐，B5有机物)。不定芽的分化：切取杜仲叶片(叶盘)为外植体，在附加6-BA(1．0mg／L)，IAA(0．5mg／L)，KT(2．0mg／L)，TDZ(0．2mg／L)的MB培养基上培养一个月，分化得到不定芽，分化率高达到56％。壮芽和芽的增殖：不定芽培养在MB 6-BA(1．0mg／L) NAA(0．05mg／L)的培养基上，可使不定芽迅速得到增殖。生根和移栽：将切取的单芽培养在1／2MS IBA(1．5mg／L) 蔗糖20g／L的(培养基上，一个月后，从芽的基部生长出根，获得杜仲再生植株。本研究通过叶盘法建立杜仲植株再生体系，为杜仲的遗传改良奠定了基础。     

热敏型生菜‘GRAND RAPIDS TBR’高效再生体系的建立

本试验以热敏型生菜‘GRAND RAPIDS TBR’为材料,分别探讨不同消毒试剂及时间对种子消毒的影响及不同生长调节剂对愈伤组织诱导、不定芽再生的影响,初步建立了高效的再生体系。结果表明：种子消毒的最适配比为75%的酒精45 s+3%的次氯酸钠12 min,种子成活率可达97.8%;愈伤组织诱导与不定芽分化的最适培养基为MS+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,愈伤组织诱导率100%,平均不定芽再生27.7个,且不定芽生长健壮;最适生根培养基为不添加NAA的纯MS培养基,生根率为97.8%;炼苗移栽后,植株成活率100%。本研究初步建立了‘GRAND RAPIDS TBR’的高效再生体系,为生菜基因功能研究和耐高温新品种培育提供基础。     

西洋杜鹃叶片离体培养及植株再生

以西洋杜鹃的嫩叶片为外植体,研究了其离体培养和植株再生的过程。结果表明：叶片愈伤组织诱导最佳培养基为Read＋ZT5．0mg／L,可用回归模型y=19．21＋7．32x1来估测西洋杜鹃叶片愈伤组织诱导情况。叶片愈伤组织增殖培养基同初代培养基,继代30d后体积可增为原来的3倍,重量增为原来的2．5～4．5倍。愈伤组织分化的最佳培养基配方为：Read＋ZT1．0mg／L＋NAA0．01mg／L,分化率为87．5％,分化出苗数在12—18株。生根培养基以Read＋IBA1．0mg／L＋NAA2．0mg／L＋ZT 0．2mg／L为好,生根率迭90％以上。炼苗基质选腐殖土：黄沙：珍珠岩：5：1：1为宜,存活率达88．33％。     

大花绣球‘无尽夏’组培苗叶片再生植株的研究

为建立大花绣球’无尽夏’规模化无性繁殖和高效遗传转化体系,以’无尽夏’组培苗叶片为外植体,研究叶位、暗培养时间及不同激素组合等因素对叶片诱导形成愈伤及分化不定芽的影响。结果表明,’无尽夏’组培苗植株中上部叶片的愈伤诱导效果好,适宜的外植体取样叶位为第3～6位叶片。初始暗培养有利于叶片形成愈伤,暗培养15～25天的效果最佳。诱导’无尽夏’组培苗叶片形成愈伤的适宜培养基为MS+CPPU 3.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,其愈伤诱导率达到98%以上;愈伤增殖与不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0～2.25 mg/L+IBA 0.1 mg/L。     

转基因杜仲再生体系的优化

为了提高杜仲不定芽的获得率及生根率,选用B5、MS和WPM 3种培养基,以杜仲下胚轴为外植体,利用农杆菌介导pGM 626-Act1-EuDIR3和pSH 737-35S-EuDIR1遗传转化杜仲,并将浸染后的各外植体分别接种于3种不同培养基上,观察记录各培养基上外植体的生长情况,通过GUS染色检测和PCR验证统计得到阳性芽数。结果表明:转化质粒在B5、MS和WPM培养基上的平均出芽率分别为(14.79±6.20)%、(7.68±2.37)%和(4.05±0.64)%,相较于MS和WPM培养基,B5培养基上的愈伤组织生长旺盛,色泽鲜艳呈绿色,质地紧密脆嫩,平均出芽率显著高于另外2种培养基,但是WPM培养基的生根率显著高于另外2种培养基,WPM和B5培养基的生根率分别为53.85%和3.57%,在MS培养基上的阳性芽并未生根。因此,在杜仲遗传转化过程中,B5培养基更适合诱导不定芽,WPM培养基利于不定芽生根。本研究优化了转基因杜仲再生体系,为杜仲基因功能研究提供技术支持。     

杜仲叶片为外植体的植株再生

杜仲不仅是传统中药植物,也是重要的胶源植物,具有很高的经济价值.本研究采用生长21天的杜仲无菌苗叶片为材料,基本培养基为MB(MS无机盐,B5有机物).不定芽的分化:切取杜仲叶片(叶盘)为外植体,在附加6-BA(1.0mg/L), IAA(0.5mg/L), KT(2.0mg/L), TDZ(0.2 mg/L)的MB培养基上培养一个月,分化得到不定芽,分化率高达到56%.壮芽和芽的增殖:不定芽培养在MB 6-BA (1.0mg/L) NAA (0.05mg/L)的培养基上,可使不定芽迅速得到增殖.生根和移栽:将切取的单芽培养在1/2MS IBA (1.5mg/L) 蔗糖20g/L的(培养基上,一个月后,从芽的基部生长出根,获得杜仲再生植株.本研究通过叶盘法建立杜仲植株再生体系,为杜仲的遗传改良奠定了基础.     

叶用莴苣组织培养再生体系的建立

为了满足市场需求,通过组织培养技术可以使叶用莴苣不受季节气候所牵制。随时可以工厂化大量生产,以达到百姓日食之需。本研究以PS11叶用莴苣为试材,从种子开始培育无菌苗,MS培养基为基础培养基,附加不同浓度的6-BA和NAA激素配比,再经愈伤组织诱导、芽分化、生根3个步骤的离体培养,建立叶用莴苣快速高效的再生体系。研究表明：该品种最佳诱导愈伤组织分化的培养基为MS+0.2mg/L6-BA+0.4mg/LNAA,出愈率达到100%,出芽率达到71.6%。     

结球莴苣品种比较试验研究

结球莴苣在高温环境下栽培,植株往往遭受伤害或生长不良,为给生产提供优质的结球莴苣品种,本文选取目前栽培中具有代表性的8个结球莴苣品种进行了春夏露地和秋冬日光温室栽培比较试验,并对其苗期性状、商品性状、营养成分、产量及抗性进行观察比较和分析。结果表明：栽培条件不同,结球莴苣的各项生理指标表现出不同程度的差异。幼苗期J42表现最好,J44次之。J42和J44两个品种的叶片性状指标最好,产量最大,且抗病,W64表现为感病,其余品种均为中等抗病品种,无严重感病现象。J42的综合营养品质最好,而8个品种口感和质地相似,都带有苦味,质地脆。总之,‘国王102’（J42）和‘早玉结球生菜’（J44）这两个品种产量高,性状好,品质优良,抗性强,应加以推广。     

鲜切莴苣保鲜技术研究

以新鲜莴苣为试材,使用不同的包装材料、抗褐变剂和抑茵剂,观测贮藏期间鲜切莴苣主要生理生化指标和品质的变化。结果表明：在鲜切莴苣贮藏过程中,用0．8％脱氢醋酸钠＋0．15％乙二胺四乙酸二钠＋0．20％D．异Vc钠＋0．25%柠檬酸处理鲜切莴苣,用聚丙烯膜包装可使鲜切莴苣的货架期达到12d。     

叶用莴苣无缝克隆构建LsE3基因过表达载体和新RNAi载体及遗传转化体系优化

研究旨在应用新技术和新载体构建过表达和沉默载体,优化遗传转化体系,验证生菜LsE3基因功能,探究高温抽薹机制.以pCAMBIA1304和pFGC5941载体为材料,通过无缝克隆构建叶用莴苣转基因载体,并通过筛选培养基配方优化遗传转化体系.试验成功地以pCAMBIA1304为基础,插入源自pFGC5941的dsRNA表达...     

氮磷钾施用水平与莴苣产量关系的拟合分析

摘要：本研究采用“3414” 试验设计方案,研究了13种（不含空白）不同氮、磷、钾搭配施肥方案下,各处理组合莴苣植株对氮、磷、钾的吸收量,获得莴苣每形成1000 Kg生物产量,需从土壤吸收N 1.21-2.26 Kg,平均 1.88Kg;P2O5 0.57-0.81Kg,平均0.64Kg;K2O 2.97-5.09Kg,平均 3.92Kg,氮、磷、钾的吸收比例为3：1：6;采用拟合法分析了单纯施用一种营养、两种营养元素配合下,施肥与产量的关系,提出了莴苣“控氮磷增钾” 的施肥原则。从提高肥料利用率,减少肥料流失的角度对于减轻农业面源污染具有非常重要的意义。     

程序降温过程中吲哚乙酸对生菜种子抗低温胁迫的影响

种子是植物越冬的重要生存策略,种子低温保存是种质资源保存的主要方式.选取含水生菜种子作为研究对象,利用程序降温仪制造不同的降温速率(3℃/h和60℃/h),研究吲哚乙酸(IAA)对种子抗寒性的影响.结果表明,相比于快速降温(60℃/h),慢速降温(3℃/h)有利于生菜种子内源IAA的积累.外源施加IAA可以降低程序降温(经慢速降温后更显著)过程中生菜种子的冷冻伤害,其中以200 μm的IAA对种子进行预处理效果最显著.无论降温速率如何,生菜种子遇到低温胁迫后SOD活性和脯氨酸含量会显著增加.外源施加IAA浓度越高,对SOD活性产生抑制作用,而IAA对脯氨酸含量有促进作用.降温速率以及外源IAA浓度也会对冷相关的ICE 1、HOS 1基因的相对表达量产生影响.     

大丽花叶片离体再生体系的建立

为了建立大丽花高效遗传转化体系及解决今后通过植物基因工程选育新种质的问题,以大丽花为试材,研究光照条件、叶片生理状态、激素浓度等因素对叶片再生的影响,建立以大丽花离体叶片为外植体的高频再生体系。研究结果表明：以顶部充分展开的25天叶龄的无菌苗叶片为外植体,在含KT 7 mg/L+NAA 0.05 mg/L的MS分化培养基上,暗培养15天后转到光下培养,20天后开始有不定芽直接从叶片上分化产生,出现的高峰期在接种后30~35天,芽分化率最高可达86%,平均叶片再生芽位点数为5.0。待不定芽长至2 cm以上时,将其剪下转到生根培养基1/2MS+ NAA 0.1 mg/L上培养后得到生根的完整植株。     

日光温室不同种植位置温光变化及对结球生菜产量的影响

研究旨在探索基于日光温室条件下科学高效的种植模式,为实现日光温室蔬菜科学化种植、统一化管理、标准化生产奠定理论基础。通过监测分析温室不同种植位置的气温、地温、湿度以及光照强度,研究不同种植位置的温湿度及光照变化规律。同时,选取8个结球生菜品种,分畦测定不同品种生菜的产量,研究日光温室不同种植位置对结球生菜产量的影响。结果表明,温室不同种植位置的温度、湿度、光照强度均存在较大差异,气温、地温由南向北逐渐升高,光照强度先升高后降低。由于温光条件的差异导致结球生菜南北两边的长势都不均匀,不同品种生菜产量由南向北呈现出较为一致的规律性,即北边产量高于南边,靠近棚边最南边的位置与其他区域生菜产量存在显著差异。试验研究温室不同种植位置的温光等环境条件变化规律,为温室蔬菜科学化种植提供了理论依据。     

4个优良石榴品种叶片高频再生体系的建立

为提高石榴叶片再生率,增加再生芽数量及缩短再生周期,以‘泰山红’‘、泰山三白甜’‘、皮亚曼’‘、牡丹’4个石榴品种盆栽苗和无菌苗叶片为试材,研究培养基类型、生长调节剂配比、叶片来源和培养步骤对不定芽再生的影响。结果表明：MS是叶片再生最适培养基类型;无菌苗叶片比盆栽苗叶片更易再生不定芽;BA3.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA0.3mg/L是叶片愈伤组织诱导、分化和不定芽形成过程中生长调节剂最佳配比;先在液体培养基上培养3~5天,再转至固体培养基比仅在固体培养基上效果更好,叶片再生率最高达98.47%,出芽数达7.51个。叶片不定芽的最佳单芽培养基和增殖培养基分别为B5+BA0.6mg/L+IBA0.5mg/L+椰汁100mL/L+PVP2.0g/L+GA31.0mg/L和B5+BA0.8mg/L+IBA0.5mg/L+椰汁100mL/L+PVP2.0g/L,增殖系数为5.56。适宜的生根培养基为B5+IBA1.0mg/L+椰汁100mL/L,生根率为89.63%。由此建立了石榴叶片高频再生体系。