不同植物生长调节物质处理对吴茱萸组织培养的影响

以吴茱萸Euodia rutaecarpa雌株再生苗叶片为材料,研究了不同植物生长调节物质处理对其组织培养过程的影响。结果表明：添加1.0 mg·L^－16-苄氨基腺嘌呤（6-BA） 和1.0 mg·L^－1 6-BA ＋ 0.1 mg·L^－1 α-萘乙酸（NAA）等2种处理均可诱导叶片叶柄端形成愈合组织,随后分化出不定芽。而其余处理只能诱导愈合组织而未见不定芽的分化,其中以添加2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）诱导的愈合组织最佳。单独添加NAA不能诱导不定芽分化,但与6-BA同时添加时可增强6-BA的诱导效果;随着6-BA质量浓度的提高,不定芽分化率表现出先升高后下降的趋势;类似的现象也发生在不定芽的增殖和壮苗过程中,适当质量浓度的6-BA有助于增殖和壮苗,但质量浓度过高容易导致玻璃化。随着NAA质量浓度的升高,吴茱萸再生植株生根速度加快,根变粗,侧根增多,生根率和移栽成活率均提高,但NAA质量浓度过高不利于侧根生长和移栽。获得的吴茱萸再生植株移栽到大田1.5 a后即可成熟开花。图1表4参10     

雷公藤优良无性系组织培养技术的研究

以雷公藤绿色嫩叶诱导产生的愈伤组织为外植体,通过正交试验设计,研究了不同培养基对雷公藤优良无性系不定芽诱导、不定芽增殖和生根的影响。结果表明:不同浓度的激素组合对雷公藤愈伤组织不定芽诱导培养的影响显著,最优诱导培养基为MS+IAA 0.2 m.gL-1+KT 0.5 m.gL-1+6-BA 1.5 m.gL-1;不同浓度的激素组合对雷公藤不定芽增殖培养的影响极显著,最佳增殖培养基为MS+NAA 0.1 m.gL-1+KT 0.1 m.gL-1+6-BA 1.0 m.gL-1;不同培养基对雷公藤生根培养的影响不显著,生根培养适合的培养基为1/2MS+NAA 2.0 m.gL-1+KT 0.1 m.gL-1。     

美国红枫组织培养与快繁技术的研究

以美国红枫嫩茎为外植体,研究不同培养基对美国红枫组织培养的影响。结果表明,不同浓度的激素组合对红枫组织培养有不同的影响,最佳诱导培养基为1/2MS+IAA0.3mg/L+6-BA0.6mg/L;最佳增殖培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L;生根培养最适培养基为MS+NAA0.5mg/L。NAA、IAA及6-BA等激素组合对红枫不定芽诱导、增殖和丛生芽生根培养有较大的影响。     

北美柔枝松组织培养研究

以柔枝松的幼嫩顶芽为外植体,对不定芽的诱导、增殖和生根条件进行筛选。结果发现:在附加0.5mg/LBA和0.1mg/LNAA的SH培养基中,不定芽的诱导率为86.67%;诱导4周后,将外植体继代于SH基本培养基中,使不定芽伸长生长;然后,将伸长的不定芽转至含有2.0mg/LBA的SH培养基中进行增殖培养,4周后,增殖系数为3.75;继而在SH基本培养基或含有0.05%活性炭的SH培养基中进行壮苗培养;当不定芽长至1～1.5cm时,转入无植物生长调节剂的1/2GD培养基中进行生根诱导,培养6周后,在不定芽基部形成1～3条不定根;炼苗后,植株在土壤中(V(草炭土)∶V(蛭石)=1∶1)移栽成活率为64.86%。     

条叶榕扦插繁殖试验研究

在浙江省丽水市开展了条叶榕二年生和多年生枝条扦插繁殖试验,结果表明条叶榕在春季扦插二年生和多年生枝条成苗率达82%以上,为条叶榕的产业化开发提拱了技术支撑。     

木兰科7种植物的组织培养技术研究

金叶含笑、长蕊含笑、阔瓣含笑、峨眉含笑、乐东拟单性木兰的茎尖、茎段腋芽在诱导分化培养基MS 6BA(0.5~2)mg/L NAA(0.1~0.2)mg/L中培养能直接从幼芽基部分化出不定芽。不定芽继代培养增殖新生芽平均数分别为3.0,3.5,2.8,3.8,2.5棵;杂种鹅掌楸和鹅掌楸的幼芽在诱导分化培养基中培养,脱分化后产生不定芽,不定芽继代培养增殖新生芽平均数5棵,但幼芽体较小,茎杆短,茎尖生长慢。诱导分化外植体的最适温度在20~23℃,过高过低都不利于产生不定芽。当幼苗生长至1.0~2.5 cm高时即可作生根诱导。     

植物生长调节物质对一品红腋芽分化增殖的影响

[目的]寻求植物生长调节物质对腋芽分化增殖的最佳配比。[方法]将旗帜和福星2个一品红品种的腋芽茎段接种于附加不同浓度和配比激素的培养基上,研究不同植物生长调节物质及配比对腋芽分化增殖的影响。[结果]培养基单独添加0.5～1.0mg/L6-BA时,一品红有较高的芽增殖率,且分化出的不定芽可正常生长发育成小苗。培养基单独添加0.1～0.5mg/LNAA对腋芽增殖率及苗高的影响差异并不明显,增殖率较低,但可促进不定芽发育健壮。旗帜以1.0mg/L6-BA与0.2mg/LNAA配比效果较好,有较高的芽增殖率,且芽生长健壮,培养40d后,苗高可达4cm。福星以0.5mg/L6-BA与0.1mg/LIBA配比效果最好,芽增殖率达4.8倍,且芽生长健壮,叶色绿。[结论]6-BA对一品红腋芽的分化和增殖起决定作用,可以诱导腋芽分化并增殖,与IBA、NAA配比效果更佳。NAA对不定芽的生长有明显的促进作用。     

植物生长调节物质对栓皮栎茎芽增殖和生长的影响

研究了植物生长调节物质6-BA、NAA、GA3在离体培养条件下,对栓皮栎茎芽增殖和生长的影响。结果表明,低浓度的6-BA(0.2～0.6mg·L-1)能促进栓皮栎茎芽增殖,6-BA浓度为1.0mg·L-1时,茎段基部形成大的愈伤组织块,对芽增殖有所抑制。单独使用不同浓度的6-BA对茎芽伸长无显著影响。适当浓度的NAA(0.01mg·L-1,0.1mg·L-1)与6-BA配合使用,能明显促进茎芽的伸长生长。当NAA浓度为0.5mg·L-1时,抑制茎芽增殖和生长。在培养基中添加2.0～5.0mg·L-1的GA3,对茎芽的伸长有明显的促进作用,但连续使用时,植株生长细弱,不利于进一步继代培养和生根培养。     

不同激素配比对草石蚕不定芽诱导及生根的影响

为获得草石蚕高效再生繁殖技术体系,采用组织培养技术,研究了不同激素配比对草石蚕外植体不定芽的诱导及生长素对其生根效果的影响。结果表明:不定芽的诱导以添加6-BA 7.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的MS培养基效果较好,不定芽诱导率最高,茎尖达39.2%,茎段达33.3%,每个外植体可产生5~6个芽,芽长平均为0.93 cm;生根效果以MS+NAA 0.6 mg/L较好,平均生根数达15条,长度约10 cm,根系粗壮且密集。     

四翅滨藜组培快繁技术

四翅滨藜Atriplex canescens在中国西北具有很大的应用前景,利用组培进行扩繁是解决用于生产的优质苗木的有效方法。以四翅滨藜半木质化及全木质化枝条为材料,研究了不同的取材时间、消毒方法、基本培养基、植物生长调节物质质量浓度对组培的影响。结果表明,取材时间以4月为宜;消毒方法先用体积分数70%乙醇表面消毒20 s,无菌水冲洗2次,再用1.0 gL- 1氯化汞(HgCl2)浸泡消毒6 min为宜;初代培养宜选用高盐培养基MS(Murashige and Skoog)+ 0.5 mgL- 16-苄基腺嘌呤(6-BA);继代培养基以MS+ 1.0 mgL- 1 6-BA+ 0.1 mgL- 1萘乙酸(NAA)更有利于茎芽增殖和生长;在1/2MS+ 0.1 mgL- 1 NAA的培养基上进行生根培养,生根率较高,根系发育较好。图4表4参10     

金雀花组织培养与快繁

以金雀花Caragana sinica茎段为材料,通过不同植物生长调节物质种类和质量浓度进行单因素设计,建立金雀花的组织培养再生体系,为金雀花的组织快繁提供技术指导。结果表明:用1.0 gL－1的氯化汞（HgCl2）浸泡灭菌10 min为宜;初代培养宜选用培养基MS（Murashige and Skoog）+2.0 mgL－1 6-苄基腺嘌呤（6-BA）+0.2 mgL-1萘乙酸（NAA）;最佳增殖培养基为MS中添加0.5 mgL-1苯基噻二唑基脲（TDZ）,诱导形成5～6个丛生芽,将嫩茎接种在添加0.5 mgL-1NAA的MS培养基中,生根率为86.7%。图1表3参11     

樟树茎段组培快繁

以当年生樟树Cinnamomum camphora带芽茎段为外植体,研究6-苄基腺膘呤（6-BA）和萘乙酸（NAA）在初代培养和继代培养过程中对樟树茎段腋芽及丛生芽诱导增殖的影响。结果表明:最适腋芽诱导培养基为MS（Murashige and Skoog）＋1.00 mgL－1 6-BA＋（0.01～0.10 mgL－1） NAA。继代培养时采用正交试验设计进行培养基筛选,经极差分析和方差分析得知丛生芽发生率较高的培养基为MS＋1.00 mgL－1 6-BA ＋ 0.10 mgL－1 NAA,而丛生芽增殖最佳培养基为MS＋（0.50～1.00） mgL－1 6-BA。将无菌苗转入最适生根培养基1/2MS＋1.50 mgL－1 NAA,生根率可达90%;生根的无菌苗移栽至m（蛭石）∶m（泥炭）为1 ∶ 1的混合基质中,经过15~20 d练苗,95%以上无菌苗均能成活。这一结果为樟树优良品种的工业化育苗奠定了技术基础。图2表5参13     

基于28S, COI和Cytb基因序列的薜荔和爱玉子传粉小蜂分子遗传关系研究

薜荔和爱玉子均属于桑科榕属植物,二者为同一物种的原变种与变种的关系,早期研究认为这两种榕树与同一种传粉榕小蜂(Wiebesia pumilae (Hill))建立了稳定的互利共生关系,但近期在形态学、生态学、传粉生物学等方面对二者的研究结果表明,薜荔传粉小蜂和爱玉子传粉小蜂之间可能发生了遗传分化。实验用核糖体28SrDNAD1-D3区、线粒体Cytb及COI基因部分序列,对采自福建3个不同样地的薜荔传粉小蜂和3个不同品系的栽培爱玉子的传粉小蜂进行分析,结果表明:(1)薜荔传粉小蜂和爱玉子传粉小蜂的核糖体28S序列的碱基组成中A,T,G,C 4种含量较平均,C+G的平均含量(56%)稍高于A+T的含量(44%)。线粒体Cytb序列中A+T的含量(76.1%)明显高于C+G的含量(23.9%),COI序列中A+T的含量(71.9%)也明显高于G+C的含量(28.1%),这是膜翅目昆虫线粒体基因的普遍特征。在薜荔和爱玉子传粉小蜂的线粒体Cytb及COI基因中,密码子第三位点A+T的含量最高。(2)比较薜荔和爱玉子传粉小蜂的3种分子标记的变异范围显示,28S进化速度较Cytb及COI序列慢,比较保守,更适合科、亚科等较高分类单元的研究。薜荔传粉小蜂与爱玉子传粉小蜂之间的亲缘关系较近,采用Cytb与COI序列进行分析更为精确。(3)用Cytb及COI序列对薜荔传粉小蜂与爱玉子传粉小蜂之间的遗传距离进行分析显示,薜荔传粉榕小蜂个体间Cytb序列平均遗传距离为0.0054,爱玉子传粉小蜂个体间的Cytb遗传距离为0.0164;薜荔传粉小蜂与爱玉子传粉小蜂群体之间的Cytb序列平均遗传距离为0.1385;COI序列的薜荔传粉榕小蜂个体间遗传距离为0.0048,爱玉子传粉小蜂各样本间平均遗传距离为0.0102;薜荔传粉小蜂与爱玉子传粉小蜂群体间COI序列平均遗传距离为0.1896,两群体间的遗传距离(差异大于10%以上)明显大于群体内各样本之间的遗传距离,表明薜荔传粉小蜂与爱玉子传粉小蜂之间已经发生了很大的遗传分化,其变异水平达到了种间分化水平,即薜荔传粉小蜂与爱玉子传粉小蜂为两个不同的种。     

药用植物紫锥菊的组织培养与快速繁殖

以紫锥菊种子萌发的子叶为外植体，进行组织培养试验。确定了紫锥菊快繁体系的最适培养条件：（1）种子发芽培养基：MS＋IAA0．1mg／L＋6-BA 1．0mg／L；（2）愈伤诱导培养基：MS＋6-BA 1．0mg／L；（3）不定芽分化培养基：MS＋NAA 0．2mg／L＋6-BA 2．0mg／L；（4）生根培养基：1／2MS＋NAA 0．2mg／L。     

黑树莓的组织培养与快速繁殖

为了提供市场所需的大量苗木,适应树莓规模化生产的需要,以黑树莓的带芽茎段为外植体进行组织培养试验.经试验对比筛选出黑树莓的最佳分化培养基为MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.2mg/L+Sugar 20g/L+Agar 6 g/L,生根培养基为1/2 MS+IBA 0.2mg/L+Sugar 20?g/L+Agar 6g/L,生根率达100%.在两步移栽法中,移栽存活率分别为98%和100%.     

红腺忍冬组织培养快繁技术

【目的】研究广西山银花当家品种红腺忍冬的组织培养,为红腺忍冬种苗工厂化生产提供技术支持。【方法】以红腺忍冬腋芽为外植体,用0．1％升汞溶液灭菌处理;以MS为基本培养基,探讨不同浓度6-BA、NAA和MET组合对芽诱导、增殖培养和根诱导的影响。【结果】较适宜外植体灭菌的处理为0．1％升汞溶液（加吐温-80）处理7min,外植体污染率为16．O％。春季取材的灭菌效果及腋芽萌发效果最好,冬季最差。较适宜的芽初代诱导培养基为MS＋6一BA2．0mg／L,继代培养较适宜的培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L,生根培养较适宜的培养基为MS＋NAA0．1mg／IJ＋MET3．0mg／L。【结论】通过红腺忍冬腋芽培养,得到可用于生产的组培苗,该技术可应用于红腺忍冬种苗工厂化生产。     

常春藤离体快繁技术

以常春藤Hedera nepalensis var .sinensis 茎段为外植体, 研究了培养基、植物生长调节物质和移栽基质对常春藤离体快繁的影响。结果表明:起始和增殖培养中高盐质量浓度的MS 培养基好于低盐培养基WPM 和B5 。增殖培养时, 在培养基中同时添加2.0 mgL-1 6-BA和1.0 mgL-1GA3 为佳, 增殖系数可达到4 。以1/2 MS 为基本培养基, 虽然不添加任何生长调节物质亦能获得高生根率, 但附加0.10 mgL-1NAA 能更好地促进根系发育。移栽基质选用腐质土, 成活率可达80 %以上。用自来水代替蒸馏水, 白砂糖代替蔗糖, 对常春藤试管苗的增殖和生长无显著影响, 可降低培养成本。表6 参9     

长角豆组织培养繁育技术研究

【目的】探讨长角豆"卡苏达"(Ceratonia siliqua L.‘Casuda’)的组织培养快速繁育技术,为其在我国的成功引种及种质资源保存奠定基础。【方法】以引自西班牙的长角豆"卡苏达"种子为外植体,培养无菌苗后,取其茎段作为组培材料,在筛选出初代基本培养基的基础上,又进行了继代增殖培养基和生根诱导培养基的筛选,最后对长角豆组培生根苗进行了炼苗和移植。【结果】长角豆种子无菌苗在DKW+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+25g/L蔗糖的增殖培养基上生长最好;最适继代增殖培养基为DKW+0.8mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+60mg/L L-赖氨酸+25g/L蔗糖;最佳生根培养基为1/2DKW+0.4mg/L IBA+20g/L蔗糖,生根率为93.33%,生根苗移栽后的平均成活率达到92.36%。【结论】成功建立了长角豆的组织培养再生体系,为长角豆"卡苏达"的快速繁育提供了技术支持。     

天台鹅耳枥的组织培养与快速繁殖

为了首次建立天台鹅耳枥的组织培养与植株再生体系,以其茎段、未萌发的新芽及萌发后的嫩芽、叶片等为外植体进行离体培养试验。结果表明,以新生的嫩芽为外植体,成功诱导不定芽的分化与增殖,最佳培养基配方为1/2 MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PVP 0.2%。壮苗培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1;最佳生根培养基配方为1/4 MS+IBA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1。