小麦5—氨基酮戊酸脱水酶的纯化及部分性质研究

以３０％～６０％硫酸铵饱和度分级沉淀、ＤＥＡＥ ＳepharoseＣＬ－６Ｂ、ＳephadexＧ－２００、Ｐhenyl ＳepharoseＣＬ－４Ｂ和羟基磷灰石层析纯化了小麦５－氨基酮戊酸脱水酶（ＡＬＡＤ）,其在pＨ８．５时比活为３１Ｕ．mg＾－１蛋白;酶纯化了９１倍,得率５％,酶亚基分子质量约５２ku,全酶分子质量约３３０ku,表明酶由６个亚基组成;酶的等电点为４．８,在４００nm有吸收峰,最适反应温度４５℃,Ｍg＾３＋激活酶,Ｚn＾     

含组氨酸标签的枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶的高效表达

以枯草杆菌基因组为模板,通过PCR扩增枯草杆菌编码5-氨基酮戊酸脱水酶基因hemB.将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切的纯化产物插入同样处理的pET-28a中构建成表达载体.表达蛋白的N端含有6个组氨酸标签.构建的表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,重组蛋白获得高效表达.SDS-PAGE检测到41 kD的特异带,表达菌株的上清检测到ALAD的比活为337 mU·mg-1,表明组氨酸标签不显著影响酶活.     

5-氨基酮戊酸光动力学疗法与高频电灼治疗跖疣的疗效比较

目的观察5-氨基酮戊酸光动力学疗法(5-ALA-PDT)与高频电灼治疗跖疣的疗效差异。方法60例确诊为跖疣的患者,随机分为2组,5-ALA-PDT组32例采用5-ALA-PDT治疗,高频电灼组28例采用高频电灼治疗。观察两组疗效和副作用。随访3个月,观察两组的复发情况。结果5-ALA-PDT组痊愈12例,显效13例,有效5例,无效2例;高频电灼组痊愈5例,显效11例,有效8例,无效4例,两组疗效比较差异有统计学意义(Hc=4.0805,P<0.05);5-ALA-PDT组副作用的发生率为53.1%,明显低于高频电灼组的87.5%(P<0.05);随访3个月,5-ALA-PDT组的复发率为6.3%(2/32例),明显低于高频电灼组的28.6%(8/28例)(P<0.05)。结论5-ALA-PDT治疗跖疣的疗效明显优于高频电灼法,是一种疗效好、无明显痛苦、无瘢痕形成、复发率低的治疗跖疣的新疗法。     

重组酿酒酵母5-氨基酮戊酸合酶在大肠杆菌的表达

以酿酒酵母基因组为模板,采用PCR扩增出编码成熟5-氨基酮戊酸合酶(第一个氨基酸残基为Asn63)的基因hem1,将其克隆到pMAL-2x中构建重组表达载体,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),在0.5 mmol·L-1的IPTG诱导下,SDS-PAGE显示分子量约为49 kD的特异条带.重组菌在紫外灯下显示红色荧光,表明酶在大肠杆菌体内活性表达.体外反应表明,在浓度超过0.1 mmol·L-1的IPTG诱导下,酶活力下降,培养基的初始pH值约为6.5,5-氨基酮戊酸产量达最大,且主要分泌到胞外.     

生物基高分子材料尼龙5单体5-氨基戊酸生物合成研究进展

5-氨基戊酸(5AVA)是生物基聚酰胺材料尼龙5和尼龙6,5的单体.尼龙5和尼龙6,5是重要的工程塑料,广泛应用于机械、化工、仪表、汽车等工业.目前工业上合成5AVA主要使用化学合成,但是化学合成法无法满足市场对生物基聚氨酯材料日益增长的需求,且化学合成法污染大,对环境不友好.因此,生物法合成5AVA引起了广泛关注.本...     

5-(4-氨基苯基/苄基)-2,4-咪唑啉二酮磺酰胺的合成及生物活性

以5-(4-氨基苯基/苄基)-2,4-咪唑啉二酮为原料,三乙胺为缚酸剂,与取代苯磺酰氯反应,合成了10个新的5-(4-氨基苯基/苄基)-2,4-咪唑啉二酮苯磺酰胺类化合物,其化学结构经1H-NMR、HR-ESIMS确证。初步生测结果表明,50μg/m L浓度的部分目标化合物对供试植物病原菌和稗草显现出一定的抑制活性,其中2种化合物对油菜菌核病菌抑制率达到76.1%。     

小麦胆色素原脱氨酶的联合酶活法测定

本实验以小麦匀浆液中δ－的氨基酮戊酸脱水酶（ＡＬＡＤ（催化δ－氨基酮戊酸（ＡＬＡ）生成胆色素原（ＰＢＧ）,并以ＰＢＧ作为底物测定胆色素原脱氨酶（ＰＢＧＤ）的酶活,的结果表明：将ＡＬＡ缓冲液与粗ＡＬＡＤ酶液１：２混合,２５℃,黑暗反应４ｈ,可获得最大量的ＰＢＧ,加入部分纯化的ＰＢＧＤ,３７℃反应１ｈ后,测得底物ＰＢＧ减少,产物原尿卟啉原Ｉ增加,该联合酶活测定法以ＰＢＧ减少来直接确定加热处理后的凝胶过     

5-氨基乙酰丙酸对蔬菜生理作用的研究进展

5-氨基乙酰丙酸(ALA)作为一种新型植物生长调节剂,同五大类植物激素一样,能对植物生长发育起重要调节作用。近10多年来,关于ALA的研究取得了很大的进展。与五大类植物激素相比,ALA具有一些新的功能及其生理作用,综述了其在蔬菜作物上的应用。     

新型绿色农药5-氨基乙酰丙酸的应用及合成方法

5-氨基乙酰丙酸是一种新型农药,由于其在环境中易降解,无残留,对人蓄无毒性,所以是一种无公害的绿色农药而倍受关注,在农业领域应用非常广泛,主要应用于植物生长调节剂、绿色除草剂、杀虫剂等方面,还可以应用到医学、有机合成等方面.该文还对其国内、外的生物方法、化学方法合成研究现状做了分析总结,为δ-ALA在农业、医学等各个领域的应用推广提供了理论依据,为以后δ-ALA的合成方法研究提供了研究方向.     

不同小麦品种(系)叶枯病田间发病情况及抗性评价

在自然发病条件下,系统调查了河南省主栽小麦叶枯病在2005年-2007年的田间发病情况,并采用自然病圃法鉴定了49个小麦品种对叶枯病的抗性.结果表明:供试小麦品种(系)叶枯病都有不同程度的发生,多数供试品种田间发病相对较轻,但在不同年份间,发病程度存在差异,2006年度所有供试品种均发病轻,而2005年和2007年则发病较重.抗性评价结果表明,49个小麦品种(系)中,没有对叶枯病的免疫品种;表现抗病的品种有40个,占供试品种的81.63%,其中高度抗病品种11个,中度抗病品种29个;表现感病的品种有9个,占供试品种的18.37%,其中,中度感病品种6个,高度感病品种3个.综合3年试验数据表明,河南主栽或新选育小麦品种(系)中,多数品种对叶枯病表现抗病,但也有少数品种表现高度感病.     

感染叶锈菌的小麦细胞间隙液对小麦悬浮细胞程序性死亡的诱导

以小麦悬浮细胞为材料,分别用感染叶锈菌小种165的小麦细胞间隙液(IWF165)和未接菌的小麦细胞间隙液(IWFck)对其进行处理,处理后不同时间点取样进行形态学观察和DNA电泳。结果表明,用IWF165处理后的悬浮细胞可观察到明显的染色质凝聚化、边缘化和细胞核解体等现象;同时DNA电泳结果显示IWF165处理后的细胞基因组DNA发生降解并形成明显的DNA梯状条带。而用IWFck处理的悬浮细胞,其细胞核结构完整,染色质分布均匀;DNA电泳没有出现DNA梯状条带。在感染叶锈菌的小麦细胞间隙液中存在着激发子,它能够诱导小麦悬浮细胞发生程序性死亡。     

氮肥运筹对黄河沙滩地优质麦叶片硝酸还原酶活性的影响

以郑麦9023和豫麦34两个强筋优质小麦品种为材料,采用盆栽试验,探索黄河沙滩地土质条件下氮肥运筹对优质小麦叶片硝酸还原酶(NR)活性的影响。结果表明:这两个不同基因型优质小麦叶片NR活性变化趋势基本一致,即从苗期到开花期都呈逐渐上升趋势,在开花期达到最大,之后又逐渐下降;不同施氮处理间的NR活性在小麦生育前期差异不大,而在生育后期以N3处理的叶片NRA最高,而且籽粒中蛋白质含量也最高,这表明黄河沙滩地土质条件下栽培优质小麦应适当延迟追氮时期、追氮量一致情况下分多次施氮可在不同程度上增强优质小麦中后期叶片NRA,提高氮素同化效率,延长籽粒灌浆时间,从而达到高产、优质目的。     

小麦木聚糖酶抑制蛋白的分离纯化及其性质研究

【目的】从成熟的小麦籽粒中纯化小麦木聚糖酶抑制蛋白,并研究其对木聚糖酶的抑制作用,从而探明小麦中木聚糖酶抑制蛋白对外加木聚糖酶的影响。【方法】采用硫酸铵盐析、Macro-prep CM阳离子交换层析、Macro-prep DEAE阴离子交换层析以及Macro-prep 25S阳离子交换层析等方法,从小偃22小麦中分离纯化木聚糖酶抑制蛋白,通过SDS-PAGE电泳检测木聚糖酶抑制蛋白的纯度和分子质量,并进一步研究了不同温度和反应时间对木聚糖酶抑制蛋白抑制活力的影响。【结果】小麦木聚糖酶抑制蛋白分子质量约为29ku,N端氨基酸序列为SVSSVVS,经NCBI BLAST比对,该抑制蛋白N端序列与其他木聚糖酶抑制蛋白无同源性,但与大麦几丁质酶的N端序列高度同源,却无几丁质酶活性;该蛋白对来自黑曲霉的GH11家族木聚糖酶有强烈的抑制活性,但对GH10家族的木聚糖酶不敏感;该蛋白与木聚糖酶结合的最适温度为30℃,最佳时间为30min;该抑制蛋白的半失活温度为74℃,具有较好的热稳定性。【结论】所获得的小麦木聚糖酶抑制蛋白可能是一种新型的XIP型木聚糖酶抑制蛋白。     

基于双波段光谱仪CGMD-302的小麦叶面积指数和叶干重监测

为探究双波段光谱仪CGMD-302在监测小麦长势上的可靠性与精准性,同时使用高光谱仪UniSpec SC与双波段光谱仪CGMD-302测试各生育时期小麦冠层信息,并定量分析了植被指数NDVI、RVI、DVI与叶面积指数和叶片干重之间的线性关系。结果表明,基于相同波段反射率计算出的高光谱仪植被指数和双波段光谱仪植被指数均能较好监测小麦群体长势。在CGMD-302监测的叶面积指数模型中,拟合方程的决定系数(R~2)均高于0.89,用以检验模型的均方根误差(RMSE)和相对误差(RE)分别小于0.792和0.225;叶片干重模型中,决定系数(R2)均高于0.85,用以检验模型的均方根误差(RMSE)和相对误差(RE)分别小于440kg/hm~2和0.239。通过分析发现,施氮270kg/hm~2既能保证产量又能兼顾品质,可作为适宜施氮量。适宜施氮量下,拔节期和孕穗期小麦适宜叶面积指数分别为:3.65±0.09和5.95±0.32;适宜叶干重分别为:(1 554±168)和(2 231±130)kg/hm~2。结合CGMD-302监测模型可推算出拔节期和孕穗期适宜冠层群体的植被指数区间并应用于冠层群体诊断。     

γ-氨基丁酸对小麦耐盐性的影响

[目的]探究盐胁迫条件下γ-氨基丁酸(GABA)对小麦中光合活性和抗氧化活性的影响,进而揭示GABA提高小麦耐盐性的作用机理.[方法]测定不同浓度梯度GABA处理盐胁迫下小麦萌发幼苗的各生理参数,包括气体交换、光合作用量子产量、光合色素、抗氧化酶活性、丙二醛含量和相对电解质渗漏等,并分析比较不同处理对小麦苗光合活性和抗氧化活性的影响.[结果]外源GABA处理能提高小麦幼苗的光合活性和抗氧化活性,经0.75 mmol/L GABA处理后,小麦幼苗的光合活性和抗氧化活性显著提高(P<0.05),同时小麦生物膜的损伤得到修复.[结论]GABA是通过增强小麦的光合活性和抗氧化活性来提高小麦对盐胁迫的耐受性.     

高分子量麦谷蛋白亚基基因Dx5的PCR检测

为 Dx5基因设计了 1对特异引物 ,选用 HMW- GS在 Glu Dx1位点已知的 2 2个材料对其进行了验证。结果表明 ,该引物的准确率达到 10 0 %,完全可以作为 Dx5基因的检测引物。利用这 1对引物 ,通过 PCR技术对 4 0种材料的 Dx5基因进行了检测 ,发现仅有 986 0 5 ,陕 2 5 3,郑州 891,97- 2 14 3,绵阳 96 171- 10 ,绵阳 19,中 1813- 1和绵阳 11等 8个品种 (系 )携带 Dx5基因 ,占待测材料总数的 2 0 .0 %,远远低于北美小麦品种中 Dx5基因的携带率。研究中还发现 ,对检测优质面包烘烤品质基因而言 ,PCR方法是最简便、快速、准确的方法之一。     

Comparative studies on some yield contributing traits of wheat sown in binary mixtures

Cultivar mixtures have been suggested as ways to increase crop productivity. This field study was conducted to investigate the competition among five cultivated varieties of wheat (Triticum aestivum L.) for the traits like plant height, flag leaf area, fertile tillers per plant, spike length, spikelets per spike, spike density, grain weight per spike, and seed index in relation to competition with yield per plant. It was observed that cultivar mixtures ought to be more productive than corresponding pure stands. Four binary combinations of Seher2006-Kohistan97, Farid2006-SH2002, SH2002-Shahkar95, and SH2002-Kohistan97 were superior in performance, showing land equivalent ratio (LER) values greater than one for plant height, fertile tillers per plant, spike density, grain weight per spike, and grain yield per plant. It was observed that the performance of binary mixtures was mainly due to the increased average performance in spike density, grain weight per spike, and grain yield per plant. The competitive ability of wheat varieties in mixtures was independent of each other for the respective traits, which lead to cumulative effects for the increased performance within the associates in mixtures.     

黄淮麦区部分小麦种质资源中矮秆基因的分布

选用254份黄淮麦区小麦品种(系),利用BFMR1,DFMR2和微卫星xgwm261标记检测了矮秆基因Rht-B1b,Rht-D1b和Rht8的分布.结果表明,在254份材料中,含有Rht-B1b,Rht-D1b和Rht8基因的材料分别有84,171和178份,平均株高分别为80.7,78.5和80.7 cm.只含有Rht-B1b,Rht-D1b和Rht8基因的材料分别有15,36和31份,平均株高分别为83.8,80.1和86.2 cm.只含Rht-B1b和Rht-D1b基因有16份,平均株高为73.7cm,Rht-B1b和Rht-D1b基因具有累加效应,两个基因同时存在时株高降低幅度会更大.只含Rht-B1b和Rht8基因的有94份,只含Rht-D1b和Rht8基因的有28份,同时含有Rht-B1b,Rht-D1b和Rht8基因的有25份,同时不含这3个矮秆基因的有9份,说明黄淮麦区小麦品种(系)中绝大部分品种均含有不同种类的矮秆基因.微卫星WMS 261及基于PCR的2个STS标记可以分别用于对品种(系)中Rht8,Rht-B1b和Rht-D1b基因型的鉴定以及育种世代该基因型的筛选.