口蹄疫病毒适应于细胞培养的研究

将不同型（Ｏ，ＡｓｉａＩ）系（兔系和鼠系）和不同代次的口蹄疫病毒适应于ＢＨＫ２１细胞培养物，免化Ｏ型毒传至第１５代即产生明显的细胞病变ＴＣＩＤ５０可达７．０－７．６；兔化ＡｓｉａＩ需传２０代以上才能产生ＣＰＥ，ＴＣＩＤ５０为６．０－６．５。     

兔轮状病毒致细胞病变株的分离鉴定

用ＭＡ－１０４细胞培养，结合电镜和ＲＮＡ电泳检查，自幼兔腹泻粪便中分离鉴定出一株致细胞病变的兔轮状病毒ＡＤ７．４株，该株传至第４代时，于３６小时开始出现细胞病变效应（ＣＰＥ）；传至第７代时，于２４小时ＣＰＥ达７５％，以上，且病毒滴度为１０＾５．０ＴＣＩＤ５０／０．１ｍｌ。     

对新城疫CS2株与4株疫苗毒株有关性能的比较

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）中等毒力毒株ＣＳ２株、ＮＤⅠ系、Ｒｏｋｉｎ、Ｋｏｍｅｒｏｖ和低毒力ＬａＳｏｔａ株病毒的脑内致病指数（ＩＣＰＩ）、鸡胚的半数感染量（ＥＩＤ５０）等指标进行了测定,结果是ＩＣＰＩ分别为１．２７～１．５２、１．６６～１．７０、１．４６、１．４３和０．２９～０．５;ＥＩＤ５０分别为１０＾７．５、１０＾７．５≥１０＾８．５、１０＾＾７．９和≥１０＾８．５／０．１ｍｌ。用１０倍剂量的ＣＳ２株病毒注射１月龄和１．５月龄ＳＰＥ雏鸡,均安全无不良反应,测定ＣＳ２株病毒保存期,结果在－２０℃保存６年的鸡胚２代（Ｅ２）、鸡胚６代（Ｅ６）、鸡胚１０代（Ｅ１０）毒的ＥＩＤ５０均≥１０＾７．５／０．１ｍｌ。ＮＤＣＳ２株病毒的各项指标均在中等毒力范围内,对鸡胚的半数感染量仍保持原毒（Ⅰ系）的特性,ＩＣＰＩ比原毒有所下     

猪流行性腹泻弱毒株的培育

用ＰＥＤＶＣＶ７７７株强毒适应Ｖｅｒｏ细胞系并传至１４７代。以ＰＥＤＶ沪株做效检用强毒，传代毒８３代之后适应仔猪肾原代细胞，自９０年代起进行了５次克隆纯化，克隆是２次群斑（由５～７个单斑组成）的基础上，再进行３次单斑挑选（均是１ｍｍ以内小空斑）以８３－７斑５株继续传代并做系列试验，传代毒的毒价为１０＾７．０～１０＾７．５ＴＣＩＤ５０／０．３ｍｌ。免疫接种途径为后海穴位，克隆后５代（总代次１０４代）     

番鸭细小病毒弱毒株的选育及其生物学特性

应用生物技术对番鸭细小病毒莆田株（ｍｕｓｃｏｖｙｄｕｃｋｌｉｎｇｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＭＰＶ－Ｐ）进行诱变，选育出符合制苗用的弱毒疫苗株（ＭＰＶ－Ｐ１）。该弱毒株失去了对１日龄雏番鸭的致病力，对番鸭胚的ＥＬＤ５０为ｌｇ４．５～ｌｇ５．０；对ＭＤＥＦ细胞ＴＣＩＤ５。为ｌｇ５．０～ｌｇ６．０；在雏番鸭体内连续传５代，未见毒力返强现象。１日龄番鸭免疫接种ＭＰＶ－Ｐ１后，第３天部分鸭血清中出现抗体，第７天全部出现抗体，第２１～３０天抗体效价值达高峰。肌肉注射比滴鼻免疫接种方法效果好。该弱毒株具有良好的免疫原性和遗传稳定性。     

猪流行性腹泻病毒适应Vero细胞培养及以传代细胞毒制备氢氧化铝灭活疫苗免疫效力试验

采用在病毒培养液中加５～１０μｇ／ｍｌ胰酶的培养方法，将猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）ＣＶ＿（７７７）适应于Ｖｅｒｏ细胞，并传４５代．细胞病变规律．经免疫荧光检查阳性，电镜观察可见典型冠状病毒粒子，猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）免疾荧光检查阴性，猪流行性腹泻（ＰＥＤ）血清可抑制细胞病变（ＣＰＥ）．ＰＥＤＶＣＶ＿（７７７）毒株１１、２５、２８、４０及４４代传代毒的毒价分别为１０￣（３．５）、１０￣（５．５）、１０￣（６．５）、１０￣（７．０）和１０￣（７．０）ＴＣＩＤ＿（５０）／０．３ｍｌ。以１１、２１及２２代的毒１０ｍｌ头口服接种未吃初乳仔猪，可使之典型发病，免疫荧光及电镜观察均呈阳性．分别以２５、２８及３１代毒０．５ｍｌ／头、１ｍｌ／头、２ｍｌ／头口服接种３日龄仔猪１８头．除０．５ｍｌ组有１头反应外，均未发病，攻毒试验的总保护率为８７．５％，对照组１００％发病．以２８代毒制备氢氧化铝灭活苗，后海穴位接种，主动免疫组８５．１９％保护，被动免疫组８５％保护，对照组１００％及９２．３％发病．     

用单克隆抗体鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株

应用ＰＲＲＳＶ单克隆抗体,采用直接与间接免疫荧光抗体试验对分离获得的ＰＲＲＳＶ６个毒株进行了鉴定,结果所有分离毒株均能被单克隆抗体（ＳＤＯＷ１７、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ）所识别,呈现特异荧光,６个分离毒株均能与仅识别美洲型ＰＲＲＳＶ的单克隆抗体Ｆ反应,结果表明６个分离毒株均属于美洲型ＰＲＲＳＶ。利用微量细胞培养对分离毒株ＴＣＩＤ５０测定结果表明,６个分离毒株的ＴＣＩＤ５０分别为１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．７５／０．１ｍｌ、１０－７．２５／０．１ｍｌ、１０－６．２５／０．１ｍｌ。病毒感染细胞的超薄切片电镜观察表明,在感染细胞浆内可见典型的ＰＲＲＳＶ病毒粒子,呈球形或椭圆形,直径约为６０ｎｍ左右,可见囊膜。     

双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病

作者进行了双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病的试验，试验鸡共５０００只，设９个治疗组，１个对照组，每组５００只ＡＡ肉鸡。试验组鸡群于１～７天，２２～２８天，分别选用敏感抗菌素氟哌酸（ＦＰＡ，５０ＰＰＭ），强力霉素（ＤＯＣ。７５ＰＰＭ，），氯霉素（ＣＭＴ，７５０ＰＰＭ）进行双疗程治疗，取得了满意的效果。ＤＯＣ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＤＯＣ、ＤＯＣ－ＦＰＡ、ＦＰＡ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＦＰＡ、ＤＯＣ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＦＰＡ、ＣＭＴ－ＣＭＴ各试验组的存活率分别为９２．８％、８７．６％、９７．２％、９６．４％、９５．８％、８９．６％、９４．６％、９６．２％、８８．４％。对照组的存活率７９．４％。     

引入青海的辽宁绒山羊心电图分析

对３４只引入青海的辽宁绒山羊肢　导联，双极胸导联　和Ａ－Ｂ导联共１０个导联的心电图进行了分析和研究，结果发现：①平均心电轴显著右偏，为＋１　３４．４°±７６．７°；②皆为窦性心律，但窦律不齐的出现概率达６４．７％；③Ｐ波和Ｔ波波向一致性　较好的有Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，ａＶＦ和Ａ－Ｂ导联（正向）以及ａＶＲ导联（负向）；④ＣⅡ，ＣⅢ和Ａ－Ｂ导联的ＱＲＳ　综合波波型较为恒定，分别呈ｑＲ型，ｑＲ型和Ｒ型以及ｒＳ型；⑤波及间期时限：Ｐ波，０．０４９ｓ（０．０４　～０．０８ｓ）；ＱＲＳ综合波，０．０５９ｓ（０．０４～０．０８ｓ）；Ｔ波，０．０７２ｓ（０．０４～０．１２ｓ）；Ｐ－Ｑ间期，０．１０　７ｓ（０．０８～０．１６ｓ）；Ｑ－Ｔ间期，０．３０６ｓ（０．２２～０．３８ｓ）；Ｒ－Ｒ间期，０．６７２ｓ（０．４２～１．１１ｓ）。     

口蹄疫病毒灭活的研究

将兔体传代的Ｏ型口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）适应ＢＨＫ（２１）细胞培养，该细胞毒的ＴＣＩＤ（５０）达７～７．６。在ｐＨ７．９的介质中，用胺类衍生物能使ＦＭＤＶ彻底灭活。给豚鼠接种灭活毒后１个月攻击强毒，能极有效地保护豚鼠抵抗强毒攻击，实验动物的保护达１００％．     

重组牛干扰素γ对病毒性MDBK细胞病变的抑制作用

本实验研究了重组牛干扰素对５种病毒诱导ＭａｒｄｉｎＤａｒｂｙ牛肾细胞产生细胞病变（ＣＰＥ）的抑制作用。通过比较重组牛干扰素ｒ处理和未处理情况下５种病毒的ｌｏｇＴＣＩＤ５０,发现水泡性口炎病毒（ＶＳＶ）,牛呼吸道合胞病毒（ＢＲＳ）和副流感病毒３型对于重组牛干扰素有显著的敏感性,与对照相比,其ＴＣＩＤ５０分别增加１０００倍,７９４倍和３９８倍。牛腺病毒７型（Ａｄ－７）和传染性牛鼻气管炎病毒（ＩＢＲ）对重组牛干扰素的敏感性很弱,ＴＣＩＤ５０分别增长１．２５倍和１．５８倍。实验结果表明重组牛干扰素在治疗对其敏感性强的病毒性传染病方面具有潜在的应用价值。     

猪流行性腹泻弱毒株的培育

用ＰＥＤＶＣＶ７７７株强毒适应Ｖｅｒｏ细胞系并传至１４７代。以ＰＥＤＶ沪株做效检用强毒。传代毒８３代之后适应了仔猪肾原代细胞。自９０代起进行了５次克隆纯化,克隆是在２次群斑（由５～７个单斑组成）的基础上,再进行３次单斑挑选（均是１ｍｍ以内小空斑）。以８３７斑５株继续传代并做系列试验。传代毒的毒价为１０７．０～１０７．５ＴＣＩＤ５０／０３ｍｌ。免疫接种途径为后海穴位。克隆后５代（总代次１０４代）～２５代的５批次主动免疫试验的总保护率为９５９２％（４７／４９）,对照组８８８％（１６／１８）发病。克隆后１７代～４０代的８批次被动免疫试验的总保护率为９６２％（７６／７９）,对照组１００％（１０／１０）发病。以克隆后２５代（总代次１２５代）进行稳定性试验,经６代次返祖传代毒力未返强,仍是稳定的,已符合弱毒株的标准。在与ＴＧＥ弱毒株组合制备的二联弱毒苗的初步田间试验中取得良好效果。     

鸡传染性法氏囊病Vero细胞弱毒疫苗免疫效果的研究

鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）Ｖｅｒｏ细胞弱毒疫苗（ＶＣＶ９０１）病毒滴度为１０￣（７．３）～１０￣（８．３）ＴＣＩＤ＿（５０）／０．０５ｍｌ．疫苗经皮下、肌内、点眼－滴鼻和口服途径免疫接种雏鸡，均表现出良好的免疫原性。皮下接种１４日龄雏鸡，免疫后８、１４和２１天攻毒，保护数分别为２／６、６／６５／６，如在３５日龄再加强免疫一次，于二免后７０天和１１５天攻毒．其保护数分别为６／６和５／６．疫苗的最小免疫剂量为１０￣５ＴＣＩＤ＿（５０）／只，用１０、５０和１００培免疫剂量免疫雏鸡，临床表现均安全，不影响雏鸡增重．经易感雏鸡连传５代，疫苗毒力不返强．温苗在－２０℃～－２５℃至少保存一年，在０℃可保存一周，疫苗对鸡无致瘤性．     

人红细胞生成素转基因小鼠乳腺生物反应器的建立

将 ２．４ ｋｂ 的人红细胞生成素（ｈ Ｅ Ｐ Ｏ）基因组基因（ｇ Ｄ Ｎ Ａ）ｍ ｉｎｉｇｅｎｅ 克隆于 ０．９７７ ｋｂ 大鼠乳清酸蛋白（ Ｗ Ａ Ｐ）５′调控序列下游和 ０．８５ ｋｂ Ｗ Ａ Ｐ３′侧翼序列上游,构建了 ｈ Ｅ Ｐ Ｏ 乳腺定位表达载体 ｐ Ｗ Ａ Ｐ Ｅ Ｐ Ｏ Ｗ Ａ Ｐ３′ Ｕ Ｔ Ｒ（ｐ Ｗ Ｅ３′）。载体经 Ｓａｃ Ｉ Ｉ酶切、回收并纯化后作为目的基因,通过显微注射方法导入小鼠受精卵的雄原核,共注射 ５００ 枚卵,移植 ３００ 枚卵至 ２９ 只假孕母鼠输卵管内,获得仔鼠 ５５ 只。采取鼠尾,提取基因组。经 Ｐ Ｃ Ｒ 检测,阳性鼠 ２２ 只; Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 检测,阳性鼠 １６ 只,其中 ９ 只母鼠,７ 只公鼠。将 １６ 只首建者小鼠分别与非转基因鼠交配,共获得 Ｆ１ 代仔鼠 １５７ 只。应用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法对 Ｆ１ 代小鼠进行检测,结果首建者１ 号母鼠所生的 ６ 只仔鼠中有 ３ 只为阳性。与此同时,于 ９ 只雌性首建者分娩后第 １０ 天采奶,应用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法对乳汁中的 Ｅ Ｐ Ｏ 进行检测,结果 ６ 只母鼠获得表达,表达量为 ０．１２～１．５９ μｇ／ Ｌ。     

绵羊妊娠期外周血T细胞及其亚群的观察

应用酸性ａ－萘酯酶（ＡＮＡＥ）组化反应标记绵羊妊娠期外周血Ｔ细胞，与间情期相比，Ｔ细胞总数和辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ）无明显变化（Ｐ＞０．０５），而抑制性Ｔ细胞（Ｔｓ）明显增加（Ｐ＜０．０５）。间情期和妊娠期Ｔｈ／Ｔｓ分别为４．６７和２．６。结果提示，妊娠期羊可能通过增加Ｔｓ细胞来压低母体免疫水平。     

鸡减蛋综合征病毒GC2毒株稳定性测定

将ＥＤＳ７６ＧＣ２毒株接种于１０～１１日龄鸭胚尿囊腔内,连续传至第３０代,分别测定不同代次胚液病毒ＨＡ、ＥＩＤ５０及其免疫原性。结果,该病毒不同代次胚液ＨＡ和ＥＩＤ５０分别在１∶２１５和１０５．０／０．１ｍＬ以上,免疫原性良好,对鸭胚致死性随传代次数增加而减弱,说明该病毒稳定性良好。于－２０℃和－５０℃可分别保存６和１２个月以上。     

应用间接免疫荧光法检测狂犬病病毒

取０．５ｍｌ兔ＢＨＫ－２１新鲜健康细胞液和０．１ｍｌ狂犬病病毒细胞液在含小飞片青瓶中混合，培养２４小时后制片，加抗狂犬病病毒兔抗体感作，用驴抗兔荧光抗体染色，通过荧光显微镜观察细胞浆内黄绿色结构判定病毒是否在细胞内增殖，从而建立了检测狂犬病病毒的间接免疫荧光法（ＲＦＡＴ）。用ＲＦＡＴ检测５批Ｆｌｕｎｇ－ＬＥＰ株培养液，５批ＥＲＡ株培养液和５批鹿毒８２０２株培养液，ＴＣＩＤ５０平均滴度分别为５．６８、６６０５、４．８６；对小鼠脑内接种，ＭＬＤ５０平均滴度分别为５．５、５．５６、４．２５。从试验结果看，ＲＦＡＴ是取代ＭＬＤ５０测定法的理想方法。     

类固醇激素对牛输卵管上皮细胞分泌的调节及其分泌物对小鼠胚胎发育的影响

模拟发情期（０～６ｄ）母牛外周血浆雌激素和孕酮变化水平，在添加相应水平１７β－雌二醇和孕酮的ＴＣＭ－１９９液中，培养间情期牛输卵管上皮细胞（ＢＯＥＣ）。５％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析ＢＯＥＣ分泌物，发现上皮细胞受类固醇激素作用分泌的２类蛋白质分子量与自然发情期（０～６ｄ）分泌的特异蛋白相似。证明类固醇激素可以调节和启动间情期ＢＯＥＣ的分泌活动。当雌二醇浓度高达１ｍｇ／Ｌ时，即使不加孕酮，ＢＯＥＣ仍能分泌这２类蛋白质。在培养小鼠原核胚的ＣＺＢ培养液内添加牛输卵管上皮细胞分泌蛋白（ＢＯＥＰ），与添加间情期牛输卵管冲洗蛋白（ＢＯＰ）和小牛输卵管冲洗蛋白（ＣＯＰ）相比，能显著提高通过２－细胞阶段胚胎的百分率和桑囊形成率，表明ＢＯＥＰ能较好地促进胚胎的分裂和发育。但ＢＯＥＰ组的桑囊形成率显著低于对照组，表明ＢＯＥＰ中可能缺少某些低于Ｍｒ１．０×１０４的蛋白因子的协调作用，以及含有Ｍｒ３．０×１０４～５．６×１０４的分泌蛋白的抑制作用而阻碍胚胎分裂与发育。     

不同月龄鸵鸟38项血液生化参数比较

比较了 １～３ 月龄（ ｎ ＝ １５）和 ４～６ 月龄（ ｎ ＝ １５）鸵鸟血液的 ３８ 项生化参数。结果，１～３ 月龄和 ４～６ 月龄鸵鸟之间血清 Ｃ Ｋ、 Ｔ Ｇ、 Ｂ Ｕ Ｎ、 Ｂ Ｕ Ｎ／ Ｃ Ｒ Ｅ、 Ｕ Ａ、 Ｍ ｇ、 Ｐ含量差异极显著（ Ｐ ＜ ００１）；血清 Ｔ Ｂ Ａ、 Ｌ Ｄ Ｌ Ｃ、 Ｃ Ｈ Ｏ、 Ｔ Ｔ Ｔ、 Ｎａ、 Ｋ 含量的组间差异显著（ Ｐ ＜ ００５）；其他指标 ２ 组间差异不显著。该结果提示，不同月龄鸵鸟的营养物质代谢过程存在一定差异。     

直接法和差量法评定鱼粉对鹅的营养价值

本文以鱼粉为研究对象,研究直接法和差量法对测定鹅真代谢能（ＴＭＥ）、常规养分代谢率的影响,以评定鹅饲粮中鱼粉的营养价值。试验采用单因素完全随机设计,分别选取 ２６０日龄健康五龙鹅和青农灰鹅各 ４２只（公）,各设 ７个组,每组 ２个重复,每个重复 ３只鹅,单笼饲养。对照组采用直接法,饲粮中不添加玉米淀粉;６个试验组采用差量法,分别在饲粮中添加２０％、３０％、５０％、６０％、７０％、８０％的玉米淀粉替代鱼粉。代谢试验采用全收粪法。结果表明：１）与对照组（直接法）相比,采用差量法测得的五龙鹅和青农灰鹅品种内 ６个试验组的 ＴＭＥ及粗蛋白质（ＣＰ）、青农灰鹅的粗脂肪（ＥＥ）、部分氨基酸（ＡＡ）、粗纤维（ＣＦ）、中性洗涤纤维（ＮＤＦ）、酸性洗涤纤维（ＡＤＦ）的代谢率显著提高（Ｐ＜０．０５）。２）差量法组间比较的结果表明,五龙鹅和青农灰鹅 ７０％玉米淀粉组的 ＴＭＥ及 ＣＰ、ＥＥ、部分 ＡＡ、ＣＦ、ＮＤＦ、ＡＤＦ、钙（Ｃａ）、磷（Ｐ）的代谢率均显著高于其他各组（Ｐ＜０．０５）;８０％玉米淀粉组营养代谢率呈下降趋势（Ｐ＞０．０５）。３）青农灰鹅对鱼粉的 ＴＭＥ及 ＣＰ、ＥＥ、部分 ＡＡ的代谢率显著（Ｐ＜０．０５）或极显著（Ｐ＜０．０１）高于五龙鹅;五龙鹅的 ＮＤＦ、ＡＤＦ、ＣＦ的代谢率显著高于青农灰鹅（Ｐ＜０．０５）。由此可见,采用差量法测定鹅鱼粉的营养成分代谢率效果优于直接法,并且以 ７０％玉米淀粉的添加比例数据稳定性最好,且鹅饲粮中的鱼粉养分代谢率品种间存在差异。