应用猪胎肠单层细胞培养猪流行性腹泻病毒的研究

本研究运用猪胎肠组织原代单层细胞培养物进行了猪流行性腹泻病毒吉毒株的培养与传代试验,并对其细胞传代毒作了电镜检查、复归猪体试验、荧光抗体交互染色和交互中和试验等项鉴定。结果表明,应用猪胎肠组织原代单层细胞培养物来分离和传代猪流行性腹泻病毒是可行的;其细胞病变效应(CPE)明显,感染细胞表现为肿胀变圆和脱落;病毒产量高,TCID_(50)/0.05达10~(5.5～6.0)。血清学试验结果表明,吉毒株与华毒株和川毒株抗原性一致,而与猪传染性胃肠炎病毒Miller株没有共同抗原,从而证实所培养的吉毒株是猪流行性腹泻病毒。     

猪传染性胃肠炎病毒吉毒株的免疫电镜观察

国内自1973年开始,对猪传染性胃肠炎病毒的分离培养、荧光抗体诊断、中和试验和人工感染猪肠管标本的电镜观察等作了多方面的研究,并初步认为是冠状病毒(Coronavirus)(3)(5)(6)。但有些单位根据血清学试验的结果认为国内毒株与美国     

猪传染性胃肠炎国内外毒株的比较试验

本试验报告证明我国分离的猪传染性胃肠炎(TGE)华毒株已适应于胎猪肾细胞及甲状腺细胞,分别传至70代及74代。华毒株荧光抗体,Miller/10毒株荧光抗体及日本TGE荧光抗体与国内华毒株、辽毒株、齐毒株及国外Miller/10毒株,CKP毒株,SH毒株及日本TGE活苗均可交叉染色。用华毒株和Miller/10毒株的胎猪肾细胞传代毒作指示毒,和日本TGE阳性血清、H毒细胞传代毒感染28天后的血清做交叉中和试验,出现了交叉反应,血清的中和抗体价分别为1∶32以上和1∶64,华毒株与Miller/10毒株在猪体可交互免疫。用电镜负染法观察,见H毒细胞传代毒带纤突的典型TGE病毒粒子。因而表明我国华毒株、辽毒株、齐毒株是TGE病毒,与国外的TGE病毒在血清型上是一致的,并非新的冠状病毒。     

仔猪病毒性腹泻的诊断

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(RV)三种病毒是目前引起仔猪腹泻的主要的肠道病原。这三种病原有类似的传染途径和临床症状,同时也可能混合感染,临床上较难区别,所以对此三种病毒性腹泻病的诊断更多地还依赖于实验室。本文即综述了此腹泻病常用的实验室诊断方法。1PED1.1病原分离与鉴定人工感染仔猪是最常用的方法。一般选用2～3日龄不喂初乳的仔猪,将患病猪小肠组织及肠内容物做成悬液,加入青链霉素,室温放置1h,接种仔猪,如试验仔猪发病,取其小肠组织作直接荧光染色检查或免疫组化试验。采用直接电镜…     

猪轮状病毒江西株AY01的分离鉴定

【目的】确定江西省某猪场哺乳仔猪发生腹泻的病因。【方法】对送检的仔猪小肠样品进行猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)的RT-PCR检测,将阳性样品接种MA104细胞传代进行PoRV的分离;对分离毒株进行电镜观察、间接免疫荧光试验、PoRV VP4和VP7基因序列测序和动物回归等试验。【结果】猪小肠病料样品经终浓度15 μg/mL的胰酶处理37 ℃孵育2 h,接种MA104细胞,能在细胞上增殖传代,第6代开始表现稳定的细胞病变;电镜观察可见病毒粒子直径大小为61~70 nm,平均大小为65 nm,呈带有短纤突且外缘光滑的形似车轮状的粒子,具有轮状病毒粒子典型的形态特征;间接免疫荧光试验和RT-PCR检测均为PoRV阳性,确定该分离株为PoRV。分离株VP4和VP7基因序列分析显示,VP4基因型与P[23]基因型相似性最高,VP7基因型与G5基因型相似性最高,根据A群轮状病毒最新分类方法,分离株属于G5P[23]型。动物回归试验结果显示,经口感染该分离株的1日龄初生仔猪于感染后24 h左右陆续出现水样腹泻、呕吐等临床症状,并能在粪便中检测到PoRV。【结论】通过MA104细胞连续传代,从江西某猪场的腹泻仔猪小肠样品成功分离到1株PoRV,该分离株属于G5P[23]型PoRV,为哺乳仔猪发生腹泻的病原。     

猪传染性胃肠炎的鉴别诊断与防治

1病原特点 猪传染性胃肠炎是由冠状病毒科的猪传染性胃肠炎病毒所引起猪的急性、高度接触性肠道传染病,临床以呕吐、严重腹泻和脱水为主要特征。本病只感染猪,不同品种、性别、年龄的猪均能感染,以仔猪最为严重,10日龄以内仔猪死亡率高达100%。     

猪呼吸冠状病毒接种新生仔猪对传染性胃肠炎的免疫保护

猪呼吸冠状病毒接种新生仔猪对传染性胃肠炎的免疫保护ＲｏｎａｌｄＤ．ＷｅｓｌｅｙａｎｄＲｏｇｅｒＤ．Ｗｃｏｄｓ著黄忠摘译（广东省农业科学院兽医研究所广州５１０６４０）猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）是一种猪的冠状病毒，它可感染和破坏小肠上皮细胞．导致腹泻...     

猪传染性胃肠炎病毒LJ-12株的分离与鉴定

对黑龙江省某猪场腹泻仔猪的粪便进行病毒分离,获得1株疑似猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),命名为LJ-12株。在原代猪肾细胞上盲传8代后细胞出现病变,用TGEV S基因的1段特异性引物进行RT-PCR方法检测,扩增出与预期结果相一致的约480 bp的目的基因片段;核酸序列测定结果表明该段基因与TGEV TH-98株的核苷酸同源性为98.5%,氨基酸同源性为98.8%;并通过间接免疫荧光试验,超薄切片电镜观察等方法确定该分离毒株为猪传染性胃肠炎病毒。     

猪传染性肠炎的诊断和防治

猪传染性胃肠炎是猪接触传染性疾病，本病的病源体是冠状病毒属中的猪传染性病毒。不同年龄，不同品种的猪均可感染发病。十五日龄以内的仔猪发病率死亡率最高。三十五日龄以后的仔猪在无并发症的情况下死亡率很低。     

猪流行性腹泻病毒适应Vero细胞培养及以传代细胞毒制备氢氧化铝灭…

采用在病毒培养液中加５－１０μｇ／ｍｌ胰酶的培养方法，将猪流行性腹泻毒ＣＶ７７７适应于Ｖｅｒｏ细胞，并传４５代，细胞病毒规律，经免疫荧光检查阳性，电镜观察可见典型冠状病毒粒子，猪传染性胃肠炎免疫荧光检查阴性，猪流行性腹泻血清可抑制细胞病变。ＰＥＤＶ ＣＶ７７７毒株１１，２５，２８，４０及４４例传代毒的毒价分别为１０＾３．５，１０＾５．５，１０＾７．０和１０＾７．０ＴＣ１Ｄ５０／０．３ｍｌ。以１１，     

猪传染性胃肠炎pl株的分离与鉴定

为了调查所致仔猪发病死亡的原因,在开展了流行病学调查、临床症状观察基础上,进行了实验室PK15细胞适应性、细胞毒回归本动物试验、试剂盒检测和间接免疫荧光试验,结果均证明由猪传染性胃肠炎病毒引起,将所分离和鉴定出一株的猪传染性胃肠炎毒株,暂命名为TGEV-pl.     

仔猪实验感染新的猪肠冠状病毒CV777

从不同年龄仔猪的流行性腹泻暴发点分离到的类冠状病毒病原体CV777经口接种剖腹产不喂初乳的仔猪和常规饲养的仔猪。用电镜检查发现,被接种猪的肠内容物和粪便中的病毒粒子具有典型的冠状病毒形态。本研究还进一步证实这一类冠状病毒病原体不同于已知的那两种猪冠状病毒——传染性胃肠炎病毒和血凝脑炎病毒。被这一新的病源体实验感染的仔猪出现呕吐、腹泻、脱水。这一类冠状病毒病原体不同于传染性胃肠炎病毒,它不但可在小肠绒毛上皮细胞内复制,尚可在大肠绒毛上皮细胞内复制。     

常见猪病诊断与控制

第八讲 猪传染性胃肠炎的诊断与控制 猪传染性胃肠炎是猪的高度接触传染性肠道病毒性疾病，本病的病原体是冠状病毒属中的猪传染性胃肠炎病毒。不同年龄和品种的猪均易感染，但尤以10日龄内的仔猪死亡率最高，35日龄以上的仔猪在无继发感染的情况下死亡率明显下降，只有10％左右。其临床主要特征是严重水样腹泻、极度脱水和剧烈呕吐。本病严重影响猪只的生长和发育，给养猪业造成较大的经济损失。     

一株猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及其ORF3和S基因序列分析

为了探明辽宁省沈阳市某猪场仔猪发生腹泻的病原及其遗传进化特征,试验首先对该猪场发生腹泻的仔猪腹腔进行剖检,记录小肠组织的病理变化;收集病理变化较明显的组织进行切片和H.E.染色,观察并记录结果;取病料后提取病毒核酸,用猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Porcine transmissible gastroenteritis virus, TGEV)、猪丁型冠状病毒(Porcine delta coronavirus, PDCoV)、猪轮状病毒(Porcine rotavirus, PRoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)检测引物进行RT-PCR检测;然后进行病毒的分离、致细胞病变效应(CPE)观察、传代、间接免疫荧光试验与效价的测定;最后对病毒的关键基因进行PCR扩增及遗传进化分析。结果表明：腹泻仔猪小肠肠壁变薄、胀满、充满水样内容物,肠系膜呈树枝状充血,肠系膜淋巴结水肿;十二指肠肠绒毛破碎、细胞坏死,...     

规模化猪场暴发PED后的快速稳定策略

正0前言1971年英国首次报道猪流行性腹泻(PED),在架子猪和育肥猪群中暴发了急性腹泻,仔猪不发病,其临床症状类似猪传染性胃肠炎(TGE),被暂时命名为流行性病毒腹泻(Epidemic?viral?diarrhea,EVD)~([1])。直到1977年,在比利时第一次分离到一株冠状病毒被认为是病原,命名为猪流行性腹泻病毒(PEDV)-CV777毒株~([2-3])。PEDV在临床上与猪传染性胃肠炎     

猪传染性胃肠炎的诊治

猪传染性胃肠炎(TGE)是由冠状病毒科的猪传染性胃肠炎病毒所致的猪的一种急性、高度接触性肠道传染病，临床以呕吐、严重腹泻和失水为主要特征。本病只感染猪只，不同品种、性别、年龄的猪均能感染，以仔猪最为严重。10日龄以内仔猪死亡率高达100％；断奶以后各阶段猪感染后常呈良性经过。并产生主动免疫力。本病的发生虽无明显季节性，但冬春     

猪丁型冠状病毒的分离鉴定

2016年从某商品化猪场采集到6份疑为病毒性腹泻的腹泻仔猪小肠样本,利用RT-PCR对样品进行检测,检出1份猪丁型冠状病毒(PorcineDeltaconoravirus,PDCoV)阳性样品,使用ST细胞进行病毒分离和传代。通过细胞病变(CPE)、RT-PCR及S基因序列测定分析对分离的病毒进行鉴定,试验结果表明,已成功分离到一株能在ST细胞上稳定增殖并能产生典型CPE的猪丁型冠状病毒,命名为SCMS株。该毒株S基因长度为3480个核苷酸,与GenBank中登录23个参考毒株之间的同源性为95.9%～98.5%,其中与2018年山东分离株SD-11-2018同源性最高,为98.5%。该毒株的成功分离为进一步开展PDCoV的生物学特性研究和疫苗研制奠定了基础。     

猪传染性胃肠炎的诊治方案

正猪传染性胃肠炎(TGE)是由冠状病毒引起仔猪的一种高度传染病。该病毒经消化道途径感染猪群,以3周龄以下仔猪呕吐、严重腹泻、脱水和高死亡率(常达100%)为特点。本文从病原、流行、临床症状、诊断、类病鉴别、治疗和防控等方面对该病进行了阐释。由于本病致死率极高,因此重在预防。1病原和流行该病毒在结构上与猪呼吸道冠状病毒(PRCV)相似,不同的是后者主要感染呼吸系统。传染性胃肠炎病毒经由口腔     

一例猪流行性腹泻病毒变异株引起仔猪腹泻的诊断

2020年11月初,福建南平某猪场仔猪发病,临床症状以腹泻、呕吐等为主。为确定病因,采集发病仔猪小肠组织,提取核酸分别检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒和猪德塔冠状病毒等,结果仅检出猪流行性腹泻病毒,且通过对该毒株的S1基因进行扩增、测序与分析,发现该毒株与国内流行变异株对于序列同源性超过97.4%,但与疫苗株同源性相对较低,仅为92.2%,因此可判定该猪场流行的PEDV毒株为变异株。     

引发猪呕吐的病毒性、细菌性和中毒性疾病的临床鉴别

1病毒性疾病 猪血凝性脑脊髓炎由猪血凝性脑脊髓炎病毒引起,主要感染3周龄以下的仔猪。病猪主要表现厌食,剧烈呕吐或干呕,精神沉郁,肌肉震颤,脱水,呼吸困难,发绀、虚弱、昏迷而死亡。耐过猪成为永久性侏儒。通过病毒分离、血凝及血凝抑制试验进行确诊。猪传染性胃肠炎由传染性胃肠炎病毒引起的急性胃肠道传染病。各种年龄的猪均易感,10日龄以内的仔猪最敏感,如与猪呼吸道冠状病毒混合感染,则病情恶化。