辣椒真叶离体培养及高效再生体系的建立

以4个辣椒品种为材料,探讨了不同基本培养基、不同激素组合、不同浓度的AgNO3及苗龄对真叶再生的影响,筛选出高效芽分化培养基为MB+6-BA 5 mg/L+IAA 0.2 mg/L+AgNO34 mg/L+蔗糖30 g/L+8 g/L琼脂,最适合接种的苗龄为10 d左右;高效芽伸长培养基为MB+6-BA 3 mg/L+IAA 1 mg/L+GA32 mg/L+AgNO3 4 mg/L+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂;有利于生根的培养基为1/2MS+IAA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂.     

''''宫藤''''富士苹果叶片离体再生体系的建立

以'宫藤'富士苹果组培苗为试材,对叶片离体再生体系进行了研究.不同激素种类、浓度配比及叶片放置方式的试验结果表明:以MS为基本培养基添加5.0 mg/L 6-BA、1.0mg/LNAA叶片远轴面接触培养基(叶片反放)可得到最高的再生效率,为73.3%,6-BA对叶片再生效果要好于TD2,且提高NAA浓度并不能提高TDZ对再生频率和再生叶片平均再生芽数的影响.再生植株在生根诱导培养基(1/2 MS 1.0 mg/L IBA)、生根培养基(1/2 MS)上进行培养后移入营养土成活率可达100%.     

番茄材料‘851’高效离体再生体系的建立

以自育番茄‘851’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浸泡时间和光暗培养处理对番茄种子萌发和幼苗生长状态的影响;以MS+2.0 mg·L^-1 6-BA为基础培养基研究不同IAA浓度、苗龄和外植体对愈伤和不定芽形成的影响;用不同处理的生根培养基研究不定芽对生根的影响,以期建立番茄材料‘851’高效离体再生体系。结果表明:番茄种子浸泡3 h,先暗培养3 d后光培养能够获得最佳生长状态的无菌苗且其发芽势、发芽率和发芽指数均为最高,分别为89%、93%和5.20。子叶节、下胚轴和子叶为外植体在IAA浓度为0.2、0.3、0.5 mg·L^-1时最有利于愈伤组织和不定芽的形成,同时在10、14、8 d的苗龄下,不定芽诱导率分别为160%、91%和79%。最佳处理生根培养基为MS+0.5 mg·L^-1 IAA,生根率为89%。     

新红星苹果密植优质高产配套技术研究

矮化密植栽培是苹果生产发展的方向.提高质量是高效农业的有效措施.新红星属短枝型浓红品种,结果早、丰产.用M26作中间砧嫁接新红星,使树体更加矮小.我们利用新红星和矮化中间砧新红星,实行高密栽培,栽后精细管理,高肥水供应,在促树快长的同时,采用早果、优质配套技术措施,实现了三年生树基本成形,树势强健,并有一定经济产量,四年丰产,五年亩产超万斤,达到了优质高产的预定目标.现将主要技术措施总结如下.     

苹果离体叶片高效再生不定芽技术研究

苹果不同品种叶片再生不定芽能力不同,嘎拉再生能力最强,其次是乔纳金,富士最难再生。用继代培养３ 年以上、当代培养３０ ～５０ ｄ 的试管苗,取顶部第２ ～４ 叶位幼嫩叶片,远轴面向下接触培养基,再生效率高。诱导叶片再生不定芽适宜培养基为ＭＳ＋ ＴＤＺ１．０ ｍｇ·ｌ－ １（ 富士、乔纳金）或ＢＡ５ ．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ ＮＡＡ０ ．１ ～０．２ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ 蔗糖３５ ．０ ｇ·ｌ－ １ ＋ 琼脂６ ．２ ｇ·ｌ－ １（ 嘎拉） 。     

薄皮甜瓜高效再生体系的建立

对"G24"和"甘甜一号"薄皮甜瓜材料5～7d苗龄的子叶、下胚轴、根尖、真叶以及不同6-BA浓度下不定芽诱导情况进行了研究,建立了高效稳定的再生体系并对生根以及移栽等条件进行了初步研究。结果表明:2份薄皮甜瓜材料在不定芽的诱导方面差异不大,"G24"不定芽的发生频率达到97.2%,"甘甜一号"为91.6%;最适宜作为甜瓜组织培养的外植体材料为子叶近胚轴端,其不定芽诱导率可达95%以上;不定芽诱导中最适6-BA浓度为1.0mg/L。     

新红星苹果成龄园丰产优质高效栽培试验

１９８７—１９９２年对９—１４年生的新红星苹果成龄国进行试验。连续６年年平均６６６．７ｍ~２产量为４６９６．２ｋｇ，产量稳定，Ｉ值（大小年强度）仅为３．２％，果实品质较优，年均６６６．７ｍ~２纯收入为７５１３．９元，产投比为５．５５：１。总结了该园的结构及主要栽培技术。     

红将军苹果离体叶片高频再生体系研究

以中熟红富士品种红将军组培苗的叶片为试材,研究了离体叶片诱导再生不定芽过程中不同激素种类与组合、暗处理时间、取叶部位等因素对再生率的影响。结果表明,试管苗继代培养3～4代,当代培养25～30d,取顶部嫩叶3～4枚,剪除叶片边缘,将剪切的叶片中部以近轴面接触在最佳诱导分化培养基上:MS+TDZ1.0mg/L+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L,培养基pH值5.8,黑暗培养10d后,转入光照培养条件下,再生频率达100%,再生芽数平均4.6个。叶片再生不定芽分化后15～20d转接到苹果继代培养基MS+BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L上,当不定芽长度约2cm时再转接到1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+Ac0.5g/L+蔗糖2%的生根培养基上,光培养15d后,生根率可达86.0%。     

苹果新品种—玉华早富的选育

玉华早富为目前最早熟的富士系品种。果实圆形或近圆形,果皮底色黄绿,果面着Ⅱ系鲜红色,平均单果重231g,果径均匀整齐;果肉黄白色,细脆多汁,酸甜适口,品质优良,可溶性固形物含量14.79%,总糖含量12.9%,可滴定酸含量0.36%,维生素C含量6.5mg/100g,果实硬度13.7kg/cm2。9月上中旬成熟,常温下可贮藏至春节。树体生长旺盛健壮,大小年结果不明显,丰产稳产。     

苹果早熟新品种——富红早嘎的选育

富红早嘎属嘎拉芽变,比嘎拉早熟20d左右,果实商品性好。该品种果个大,平均单果质量为195.4g,果形端正;易着色,艳红美观;果肉细、汁多,风味甜酸适口。可溶性固形物含量12.5%,可溶性总糖11.7%,可滴定酸0.28%,硬度9.5kg/cm2。果实采收后在常温可贮30d左右;易成花,结果早,果台枝连续结果能力强,丰产。     

苹果新品种——华玉的选育

华玉是郑州果树研究所以藤牧一号为母本,嘎拉为父本杂交育出的早熟苹果新品种。果实近圆形、果个较大,平均单果质量196g。果实底色绿黄,果面着鲜红色条纹,果面平滑,有光泽;果肉黄白色,可溶性固形物15%,风味浓郁,酸甜适口,品质上等。果实在室温下可贮藏10～15d。在郑州地区果实7月中旬上色、7月下旬成熟,成熟期比其母本藤牧一号晚2～3周、比嘎拉早2周左右。     

苹果抗寒早熟鲜食与加工兼用新品种——七月鲜的选育

七月鲜(K9)是以佚名大苹果为母本、铃铛果为父本杂交选育而成的。果实卵圆形,平均单果质量50.7g。果实颜色鲜艳,果面光滑,富光泽,外观美。可溶性固形物含量13.94%,可溶性糖10.94%,可滴定酸1.22%,维生素C0.1875g/kg,硬度10.99kg/cm2。果肉黄白色,肉质中粗、脆,汁液多,风味酸甜,有香气,品质中上。目前在黑龙江、吉林、内蒙古、辽宁等地栽培约有2.4万hm2,年产量20多万t,产值3.29亿元。     

樱桃砧木CAB-6p离体叶片再生体系的优化

以欧洲甜樱桃优良矮化砧木CAB-6p试管苗幼嫩叶片为试材,从基本培养基、激素配比、叶片生理状态和培养基中琼脂用量等方面对影响离体叶片再生的关键因素进行了研究。结果表明,CAB-6p试管苗幼嫩叶片以WPM为基本培养基再生效果最好,明显优于QL和DKW培养基,1/2MS培养基再生效果最差;最佳激素配比是BA2mg/L+IAA2mg/L,用IBA或NAA替代IAA出现愈伤组织生长量大但再生率低;CAB-6p试管苗顶部新发出合拢的幼嫩叶片再生能力最高,半展开的幼嫩叶片和完全展开的幼嫩叶片未能再生植株;用4.5g/L琼脂配制偏软的再生培养基明显有利于提高离体叶片的再生效率。通过以上几个方面的优化,建立CAB-6p试管苗幼嫩叶片高效离体再生技术体系,再生率可稳定地保持在90%左右,平均每叶再生4～5芽。     

不同激素和黑暗处理对泰山红石榴离体叶片再生的影响

以泰山红石榴为试材,研究了不同激素配比、黑暗处理时间等关键因素对泰山红石榴离体叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明,细胞分裂素是离体叶片再生不定芽所必需的。生长素2,4-D与IBA组合诱导出的愈伤组织生长量大,但不定芽再生率低。黑暗处理时间以2周为宜。适宜的再生培养基为MS+KT1.0mg·L-1+BA2.0mg·L-1+GA30.5mg·L-1,不定芽再生率达57.0%,每片叶再生芽数为3.0个。     

苹果SSR反应体系的建立

为摸索适宜苹果的SSR反应体系,以金冠苹果为试验材料,研究了苹果SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响。对SSR反应体系中的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板浓度以及退火温度进行了探索,确立了适合苹果的SSR反应体系为:在20μL反应体系中,Mg2+、引物和dNTP的最适浓度分别为2.5mmol/L、0.8μmol/L、0.10mmol/L;反应体系中TaqDNA聚合酶宜加入1U,模板DNA应加入15-30ng;引物的最佳退火温度为48.5-52.0℃。并利用该反应体系对10个苹果代表品种进行SSR反应,用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,不同品种间DNA谱带多态性丰富,证实该体系稳定可靠。     

苹果SRAP-PCR反应体系的建立

以苹果(Malus domestica Borkh.)品种Telamon及Telamon×Fuji的F1代为试材,采用改良的CTAB法提取苹果叶片的DNA,利用正交设计L16(45)和直观分析以及方差分析相结合,探讨了Mg2+、dNTPs、Primer、Taq聚合酶、模板DNA用量对苹果SRAP-PCR反应的影响。建立了总体积为10μL的苹果SRAP-PCR反应体系,Mg2+浓度为2.0mmol.L-1,dNTPs浓度为0.8 mmol.L-1,Primer浓度为0.2μmol.L-1,Taq DNA聚合酶含量为0.6 U,DNA含量为60 ng,并含1μL 10×buffer(Mg2+free)。应用该反应体系,用不同的引物组合对48份苹果样品DNA进行SRAP-PCR扩增,结果显示反应体系具有较高的稳定性。     

菊花新品系叶片外植体不定芽再生体系的研究

以'东林4号'、'东林6号'、'东林9号'3个优良菊花品系叶片外植体为试材,探讨了基因型、叶龄、潮霉素浓度等因素对菊花叶片不定芽再生的影响.结果表明:基因型是影响不定芽再生的重要因素,不同品系叶片不定芽再生的激素配比存在明显差异;同一品系,上层幼嫩叶片分化率明显高于中下部.'东林9号'品系叶片不定芽分化率高达90%,'东林9号'叶片及不定芽在30 mg/L的潮霉素中表现为全部死亡.东林4号最适分化培养基为:MS+3 mg/L BA+0.1 mg/L 2,4-D;东林6号最适分化培养基为:MS+2 mg/L BA+1mg/L NAA;东林9号最适分化培养基为:MS+0.5mg/L BA+1.5 mg/L NAA.