酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接血凝试验检测猪瘟免疫抗体的比对报告

<正>基层兽医部门实验室普遍采用正向间接血凝试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪瘟免疫抗体,为了获得正向间接血凝试验和酶联免疫吸附试验两种检测方法之间存在的关系,笔者进行了本次猪瘟免疫抗体检测试验,并分别比较了2种方法的符合率和合格样品检出率。1疫苗及免疫程序1.1免疫疫苗试验所用疫苗为猪瘟活疫苗(脾淋源),为中牧实业股份有限公司成都药械厂生产。疫苗经检查无     

三种猪瘟抗体检测方法的比对试验

为找到猪瘟抗体检测的最佳方法,笔者分别选用正向间接血凝试验(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和猪瘟抗体免疫金标试纸条快速检测试验这3种不同方法对猪瘟抗体进行检测,从检测方法、检测成本和准确度3个方面进行结果比较和分析。结果表明,猪瘟正向间接血凝反应(IHA)试剂盒操作简便、准确实用、能最大程度地节约监测成本,是较为理想的猪瘟抗体检测方法。     

两种不同方法对猪瘟免疫效果评估对比试验

通过正向间接血凝试验和酶联免疫吸附试验（阻断ELISA）对3个规模化猪场提供的350份血清样品进行猪瘟免疫效果平行对比检测，结果：A猪场120份，正向间接血凝试验检测免疫合格为95份，免疫合格率为79.2%；阻断ELISA检测免疫合格为92份，免疫合格率76.7%。B猪场120份，正向间接血凝试验检测免疫合格为108份，免疫合格率为90.0%；阻断ELISA检测免疫合格为104份，免疫合格率为86.7%。C猪场110份，正向间接血凝试验检测免疫合格为58份，免疫合格率为52.7%；阻断ELISA检测免疫合格为55份，免疫合格率为50.0%。     

应用IHA与竞争ELISA方法检测猪瘟免疫抗体的比较与分析

通过对300份猪血清样品应用正向间接血凝试验(IHA)与酶联免疫吸附试验(竞争ELISA)方法进行猪瘟免疫抗体检测。采用IHA方法,以抗体效价≥2~5为合格标准时,其抗体合格率为95.3%;采用竞争ELISA方法,以阻断率≤50%为阳性标准时,其抗体阳性率为93.6%,两种检测方法总体一致符合率93.0%,经X~2检验,两者差异不显著,说明IHA方法和竞争ELISA方法皆可用于检测猪瘟免疫抗体水平。     

猪瘟病毒抗体检测方法的研究进展

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种猪的高度传染性和致死性病毒病,具有传染性强、流行广泛、发病率和死亡率高等特点,对养猪业危害极大.目前,疫苗免疫仍然是防控猪瘟的重要手段,而抗体检测是免疫效果的主要评价依据.现将猪瘟病毒抗体的主要检测方法:病毒中和试验、正向间接血凝试验、酶联免疫吸附试验、胶体金免疫层析法等进行综述,以期为猪瘟疫...     

甘肃通渭县三种重大猪病免疫效果评价与分析

为评估甘肃省通渭县猪的口蹄疫、猪瘟、繁殖与呼吸综合征三种重大猪病的免疫效果,在通渭县18个乡镇共采集猪血清样品540份,采用正向间接血凝试验(HIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行免疫抗体水平检测。结果表明三种猪病的免疫抗体阳性率均较高,各阶段猪群之间差异不显著,都在85%以上,免疫效果较好。     

两种不同方法对猪瘟免疫效果评估对比试验

通过正向间接血凝试验和酶联免疫吸附试验(阻断ELISA)对3个规模化猪场提供的66份血清样品进行猪瘟免疫效果平行对比检测。结果:66份血清样品用正向间接血凝试验检测免疫合格为65份,免疫合格率为98%;阻断ELISA法检测免疫合格为66份,免疫合格率为100%。     

三种检测禽副粘病毒2型(PMV-2)抗体方法的建立及其与HI方法的比较

建立了检测血清中禽副粘病毒2型（PMV-2）抗体的间接免疫荧光试验（IFA）、间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）以及斑点酶联免疫吸附试验（Dot—ELISA）方法，并将三种方法同血凝抑制试验（HI）进行了比较。结果表明，建立的IFA、间接ELISA和Dot—ELISA等三种抗体检测方法其敏感性、特异性均很好，与HI方法相比，敏感性也大大增强。     

免疫金标试纸检测与正向间接血凝试验对猪瘟免疫效果的评估对比

当前国内对猪瘟抗体水平检测方法有ELISA检测法、猪瘟正向间接血凝法以及免疫金标试纸检测法。前两种方法虽然都具有微量、特异、准确的优点,但需要比较完备的实验仪器和经验丰富的技术人员,且检测时间较长。而金标试纸条是新开发的一种全新猪瘟抗体检测方法,检测一个样品只需8～15min,操作简便、快速、直观、结果容易判定,但其应用检测结果的准确性尚待求证。鉴于这种情况,开展了免疫金标试纸检测与正向间接血凝试验两种检测方法的比较研究[1]。结果表明,免疫金标试纸检测与猪瘟正向间接血凝试验的结果基本符合,试验结果可靠。     

龙海市种猪场主要疫病检测与控制

1．1猪瘟采用猪瘟正向间接血凝试验(IHA)检测猪瘟免疫抗体水平，试剂由中国农科院兰州兽医所提供，抗体滴度在1：16以上为阳性。     

间接血凝试验在家畜口蹄疫免疫抗体检测中的应用

为了节省IHA（间接血凝试验）血凝抗原,扩大家畜O型口蹄疫免疫抗体检测数量,在不影响检测效果（合格率）的基础上,探索和改进原正向间接血凝试验检测方法。试验分别用口蹄疫O型-Asia 1型二价灭活苗和猪O型口蹄疫苗对天水地区几个养殖场的家畜进行了免疫注射,免疫后（牛免疫21 d、猪免疫28 d）随机抽样采血,常规分离血清,采用简化后的正向间接血凝试验进行牛和猪口蹄疫O型免疫抗体检测试验。结果表明：免疫合格率分别达到97.5%和92.5%;改进后的IHA既加快了操作速度、节省诊断抗原,又降低了检测成本。在家畜O型口蹄疫检测工作中具有推广应用价值。     

仔猪猪瘟母源抗体消长规律研究

为了探索仔猪猪瘟免疫抗体的消长规律,制定科学有效的免疫方案,本试验采用目前较为常用的酶联免疫吸附法(ELISA法)和正向间接血凝法(IHA法),对仔猪出生后猪瘟母源抗体的水平进行跟踪检测,系统研究了猪瘟母源抗体消长规律,明确了仔猪进行初免的最佳时间。结果表明,母源抗体对初生仔猪有良好的保护作用,且在4~10d时抗体水平较高,保护率达到95%。但猪瘟抗体水平和群体合格率随着仔猪日龄的增加而下降,0~25d下降速度较为缓慢,32d时抗体水平和群体合格率显著降低(P0.05)。虽然抗体水平超过临界保护值,但是群体合格率仅为40%,达不到农业部要求的合格率70%的标准,因此在25~32d进行首免较好。酶联免疫吸附法(ELISA法)和正向间接血凝法(IHA法)两种检测方法均具有很好的特异性,适用于日常的猪群免疫抗体水平的检测。     

应用正向间按血球凝集试验检测猪瘟免疫抗体

猪瘟免疫抗体的检测长期以来没有一种适合于基层应用的方法,琼脂扩散试验和免疫萤光试验虽能测得抗体,但是抗体效价的高低不能判定,酶联免疫试验能够判定抗体效价的高低,但由于操作程序的繁琐而不能在基层广泛应用。我们应用兰州兽医研究的猪瘟正向间接血凝诊断液,在郑州地区9个外贸猪场检测213份猪瘟免疫血清,现将结     

克拉玛依地区猪瘟免疫抗体检测及效果分析

为了分析克拉玛依地区猪瘟免疫效果,于2008年2月在43个猪场采血2942份,采用正向间接血凝试验对猪瘟免疫抗体进行检测。结果表明,猪瘟免疫抗体合格率平均为80.79%,大多数猪场猪瘟免疫效果较好,部分猪场猪瘟免疫抗体水平较低,并对免疫抗体水平较低的原因进行了分析。     

应用正向间接血凝（IHA）与阻断ELISA方法检测猪瘟抗体的比较试验

目前国内在对猪群进行猪瘟免疫效果评估时,多采用CSF正向IHA方法与CSFV抗体ELISA方法,但这两种方法在检测CSF抗体存在一定差异。本试验分别运用正向间接血凝（IHA）与阻断ELISA方法检测550份猪血清中猪瘟抗体水平。     

斑点酶联A蛋白免疫吸附试验(Dot-PPA-ELISA)检测猪衣原体抗体方法的建立

本研究建立了斑点酶联A蛋白免疫吸附试验（Dot-PPA-ELISA）,对猪衣原体IgG的最小检测量为1.21 ng。以间接血凝试验方法为对照,两种方法同时检测120头份猪血清样品,Dot-PPA-ELISA检出43头份（35.83%）,效价≥256;间接血凝试验检出26头份（21.67%）,效价≥64。诊断膜片与猪瘟、猪布氏杆菌病、猪口蹄疫和猪弓形体病标准阳性血清均不出现有意义的交叉反应。诊断膜片置室温、4℃和-20℃下至少保存3个月其抗原效价不变。试验表明本方法重复符合率为94.44%,且反应效果不受反应板质量和新旧的影响;试剂用量节省,各步骤均可做到严格定量,操作简便,3 h内可出结果,肉眼即可判断,不需要特殊检测仪器。由于辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白（PPA）是一种广谱诊断试剂,因此Dot-PPA-ELISA还可以用于其它哺乳动物衣原体抗体的检测。     

对猪瘟细胞苗和猪瘟组织苗免疫抗体水平的检测分析

应用猪瘟细胞苗和猪瘟组织苗免疫3个猪场不同的猪群，分别采集32、46头份用正向间接血凝试验来检测猪瘟免疫抗体的水平。     

用正向间接血凝试验检测猪瘟免疫抗体

对采自西宁地区两个绪场的76份血清用正向间接血凝试验进行了猪瘟免疫抗体的检测。结果检出阳性59份，抗体保护率为77．63％(59／76)。     

正向间接血凝试验(IHA)和液相阻断酶联免疫吸附试验(LPB-ELISA)检测O型口蹄疫免疫抗体的对比

本试验采用正向间接血凝试验(IHA)和液相阻断酶联免疫吸附试验(LPB-ELISA)两种方法对经过口蹄疫O型免疫的80份猪血清、60份牛血清、50份羊血清进行了O型口蹄疫免疫抗体检测的对比试验。IHA试验猪合格80份,合格率100%;牛合格60份,合格率100%;羊合格50份,合格率100%;总体合格率100%。LPB-ELISA试验猪合格75份,合格率93.75%。牛合格60份,合格率100%;羊合格47份,合格率94%;总体合格率95.79%。试验结果表明,IHA方法检测口蹄疫O型免疫抗体合格率比LPB-ELISA方法高,两者符合率95.79%,具体哪种方法更准确,还有待进一步研究。     

2种猪瘟抗体检测技术的比较

猪瘟单抗 ELISA和正向间接血凝试验方法均可用于猪瘟抗体的检测 ,为了比较其效果 ,笔者应用这 2种方法对目前规模化猪场猪瘟免疫状况进行了猪瘟免疫抗体水平的检测 ,报告如下。1　材料与方法1 .1　材料1 .1 .1　猪瘟正向间接血凝诊断试剂　购自中国农业科学院兰州兽医研究所。1 .1 .2　猪瘟单抗 ELISA诊断试剂　购自中国兽医药品监察所。1 .1 .3　受检血清　采自新疆南北疆 3个规模化养殖场的不同日龄的猪血清 ,其中仔猪 ( 1 5～ 45日龄 )480份 ,生产母猪 5 2 0份 ,肥猪 ( 70～ 1 60日龄 ) 40 0份 ,置 4℃冰箱保存备用。 3个场猪瘟免疫…