利用制霉菌素抗性筛选赤霉素高产菌株的研究

利用紫外、亚硝基胍以及复合诱变的方法,采用制霉菌素抗性筛选,选育赤霉素高产突变株.在磁力搅拌下,菌悬液先后经过浓度为3.0 mg/mL亚硝基胍30 min和紫外线(30 W,20 cm距离)45 s诱变,得到抗制霉菌素的赤霉菌突变株.进一步摇瓶复筛,获得赤霉素高产菌株,其中菌株ZNL-1产赤霉素效价达到2 170 μg/mL,较之诱变前发酵效价平均提高了16.7％.经10次斜面传代,菌株ZNL-1产素水平稳定,菌株遗传稳定性较好.表明,赤霉菌抗制霉菌素的抗性与赤霉素高产之间存在对应关系.     

高产D-核糖菌株选育

以枯草芽孢杆菌转酮醇酶变异株为出发菌株,运用物理和化学相结合的方法进行复合诱变,将出发菌株在紫外灯下照射后加入硫酸二乙酯置于摇床上诱变,再加入硫代硫酸钠终止反应。选出多个诱变后菌株,进行初筛和复筛,反复几次,以未经处理的菌株做对照,对突变株进行多次传代和D-核糖发酵试验,选育出D-核糖高产突变株。     

生防木霉菌株Tr10诱变改良

利用亚硝酸盐和紫外线复合诱变对生防木霉菌Tr10进行了改良。采用平板对峙法、摇瓶液体发酵法、发酵产物平板活性测定法研究了突变株的生长速度、拮抗作用、代谢产物的抑茵活性和突变株的遗传稳定性。研究结果表明.适宜诱变条件是0.01mol／L亚硝酸溶液诱变20min,然后在距20W紫外灯20cm处照射3min;遗传稳定突变株NUV147和NUV218生长速度分别是出发菌株的2倍和2.1倍,产孢量显著增加,突变株对病原菌的拮抗作用增强,拮抗机制没有变化。     

木耳漆酶高产菌株筛选及其发酵条件的研究

通过运用不同检测方法对木耳属中的三个种的 2 7个菌株的产过氧化物酶、漆酶能力的检测 ,筛选得到一漆酶高产菌株毛木耳 (Auriculariapolytricha)AP4。并且对AP4的产漆酶的发酵条件进行了初步研究。摇瓶实验产漆酶的最佳培养基的成分为 :碳源羧甲基纤维素(CMC) 5g/L ,氮源NH4NO3 L -天冬酰胺 (L -As paragine) 2 4mmol/L ,培养基的初始pH4 0 ,培养温度2 5℃。     

60Co-γ射线与ARTP复合诱变选育蛹虫草高产菌株

以实验室保存的蛹虫草菌株("BY2")为出发菌株,采用^60Co-γ射线与ARTP复合诱变方法对其进行处理,经过初筛、复筛及稳定性试验,研究了诱变菌株的菌落特征及子实体产量,以期获得蛹虫草高产菌种。结果表明:经复合诱变处理,筛选出3株高产突变株,其子实体产量与出发菌株相比提高率分别为32.27%、36.00%和33.87%。通过突变菌株的遗传稳定性及工厂化生产测试,BY2-1122菌株是传代稳定性较好的菌株,其子实体产量明显高于现行生产菌株,增幅达17.3%。研究表明,利用^60Co-γ射线与ARTP复合诱变选育蛹虫草,可以获得高产子实体菌株。     

低能N~+离子注入诱变选育云芝高产抗病菌株的研究

应用低能N+离子注入筛选所得高产抗病融合云芝菌株原生质体进行诱变,以获得一株产量更高,抗病性更强,适用于栽培的诱变菌株。试验确定了低能N+离子注入的适宜参数:注入剂量为9×1014ions/cm2,注入能量20 KeV,靶室真空度10-3Pa,以5 s脉冲式注入,间隔时间为15 s。离子注入后,筛选酯酶同工酶酶谱存在显著差异和拮抗实验呈阳性的突变菌株,分别以液体发酵生物量及固体栽培子实体转化率、对病菌平均抗性水平为初筛和复筛标准,经遗传稳定性实验验证,筛选到了一株云芝高产抗病菌株,其子实体产量较对照菌株提高了10.3%,抗病水平提高了5%。结果表明:低能N+离子束注入是一种较为理想的云芝诱变育种手段。     

紫外线诱变青霉P-M1选育柚苷酶高产菌株研究

采用紫外线对野生型柚苷酶产生菌青霉P-M1进行诱变处理以提高柚苷酶的产量,经过初步筛选最佳诱变条件为:孢子悬液(107个/mL)稀释度为10-5,15 W紫外灯,垂直照射距离为30 cm,处理时间为5 min.通过透明圈初筛和摇瓶复筛选育出一株柚苷酶高产菌株青霉PU-15,酶活达到334.3 U/mL,比出发菌株提高了137.4%,将其连续传代10次测定遗传稳定性,结果显示稳定性良好,是一株比较理想的柚苷酶高产菌株.     

原生质体紫外诱变选育莲花菌深层发酵多糖高产菌株

以莲花菌多糖产生菌GF12为出发菌株,采用紫外诱变原生质的方法,获得1株莲花菌多糖高产菌株,其摇瓶发酵产糖最高达1.0 mg/ml左右,比出发菌株提高了56.25%。通过摇瓶发酵试验,研究了该菌株的传代产多糖能力稳定性。研究结果表明,经过多次传代,GFS2402产多糖能力没有改变,遗传性状稳定,有望应用于工业生产中。     

紫外线诱变对姬松茸菌丝体生长及生理生化特性的影响

用不同剂量的紫外线诱变姬松茸菌丝体,从诱变菌株中挑取生长较好的菌丝体进行传代培养,测定第五代诱变菌株和对照株菌丝体的蛋白质含量及POD、SOD酶的活性。结果表明:紫外线对姬松茸菌丝体的生长有一定的促进作用;综合蛋白质含量及POD、SOD酶活性可以看出:照射时间为4min的诱变菌株均表现出最大值,且很明显,为试验中最优的突变菌株。     

一株高产漆酶野生金针菇菌株的鉴定及酶学性质研究

从野生食用菌中筛选出一株漆酶高产菌株F0027,依据形态学、生理生化特征以及r DNA ITS序列分析得出该菌株属于黄色金针菇。对子实体培养料中的酶学性质初步研究表明,其产漆酶的最适温度和最适p H分别是35℃和4.8。抗坏血酸可以完全抑制该漆酶的活性;Fe~(2+)、草酸和EDTA对漆酶活性有强烈的抑制作用,不同浓度的K+、Ca~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Mg~(2+)对漆酶活性几乎无影响,Cr~(2+)、Al3+对漆酶活性有不同程度的抑制作用;Cu~(2+)对漆酶活性的促进作用不明显。该漆酶对溴百里香酚蓝、依来铬黑和孔雀石绿3种实验室染料有不同程度的脱色作用,其中对依来铬黑染料的脱色率可达到30%以上。     

一株高漆酶活性树舌灵芝降解木质素条件的优化

以1株具有选择性降解木质素能力的树舌灵芝(Ganoderma applanatum)为基础菌株,通过液体发酵培养,对该菌株的木质素降解酶系进行初步分析,进而以木质素磺酸钙为底物,利用正交试验优化该菌株对木质素的降解条件.结果 表明,树舌灵芝可同时合成漆酶、锰过氧化酶和木质素过氧化物酶,其中漆酶活性显著高于锰过氧化酶和木质素过氧化物酶;经优化后,确定较适合树舌灵芝降解木质素的条件为:以3.0 g·L-1豆粕为氮源,底物浓度2.5 g·L-1,初始pH 6.0,发酵温度28℃,在此条件下木质素降解率达到44.72%.     

黑木耳胞外酶活变化与栽培性状比较的研究

研究了黑木耳10个菌株胞外酶活性及与栽培性状和产量的关系,结果表明,胞外漆酶、多酚氧化酶活性的变化趋势大致相似,酶活与栽培产量呈正相关,相关系数为0.823(7号菌株除外),酶活性相对较高的菌株(3、4、8号),栽培中产量相对较高。纤维素酶活性高峰时间出现较漆酶、多酚氧化酶早,且酶活性高峰出现早的菌株菌丝长速较快。蛋白酶活与栽培产量呈一定负相关性,相关系数为-0.700(6号菌株除外),蛋白酶活最低的3号菌株,栽培产量最高;而活性较高的5、9号菌株栽培产量较低。     

白腐真菌F9产漆酶发酵条件的优化

采用液体摇瓶培养方法,探讨了碳源、氮源、pH值、培养温度等各种因素对白腐真菌分泌漆酶能力的影响,采用正交试验对主要的影响因素进行了优化。优化的培养条件为:马铃薯200 g/L,葡萄糖20 g/L,酵母膏5 g/L,MgSO41.5 g/L,VB10.1 g/L,ZnSO40.05 g/L,MnSO40.05g/L,KH2PO43.0 g/L,pH 6,120 r/min,28℃发酵到10 d左右粗酶液酶活达到109.1μ/mL。     

多粘类芽胞杆菌ZF197对白菜茎基腐病防治效果

从露地大白菜根际土壤中分离获得一株对白菜茎基腐病病原菌白菜立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）有显著抑制效果的生防细菌ZF197，通过形态特征、生理生化特征和多基因系统进化树分析对其进行鉴定；通过大白菜离体叶片和温室盆栽试验研究其对白菜茎基腐病防治效果，并鉴定其在白菜根部的定殖能力；通过酶学试验和抑菌谱试验研究其生物学特性；采用三明治法测定其发酵液的最适培养基和发酵时间。结果表明，菌株ZF197为多粘类芽胞杆菌（Paenibacillus polymyxa），对大白菜离体叶片立枯丝核菌的防效可达82.35%，盆栽防效可达78.57%；该菌株可在白菜根部稳定定殖，处理20 d后定殖量趋于稳定，保持在2.37 × 105 cfu ? g-1左右；菌株ZF197具有广谱拮抗作用，能够有效抑制8种病原真菌和6种病原细菌的生长，其代谢过程中有蛋白酶和纤维素酶的产生。菌株ZF197 96 h发酵液对立枯丝核菌的抑制率最高，可达58.58%；以棉籽饼粉作为碳源的发酵液对立枯丝核菌的抑制率最高。     

真姬菇融合菌株生物学特性及生产性能的研究

运用原生质体融合与漆酶转化体系筛选到一株真姬菇融合菌株(金山1号),研究了不同培养基配方、温度、pH及含水量对该菌株菌丝生长的影响,并对该菌株的漆酶活性、生产特性进行了初步分析。结果表明,金山1号在PDA胡萝卜培养基上菌丝生长最快、活力较强,菌丝最适生长温度为25℃,最适pH为6.5,最适含水量60%～65%,漆酶活力为3.95 U·mL-1,生产周期可缩短3 d～5 d,生物学效率72.86%,与真姬菇相比提高了17.15%,表现出该融合菌株具有良好的生产应用价值。     

响应面优化虎杖固态发酵工艺条件的研究

应用产β-葡萄糖苷酶的黑曲霉固态发酵酶解虎杖中的虎杖苷,以提高虎杖中白藜芦醇的含量。采用均匀实验设计和响应面分析方法对影响虎杖中白藜芦醇含量的固态堆积发酵工艺条件(温度、湿度、菌龄和接种量)进行优化。结果表明:最佳的固态发酵工艺条件为:温度42℃,湿度1.85∶1、菌龄42h、接种量1.8%,在此条件下,发酵48h后,白藜芦醇含量提高为1.52%,是未进行固态发酵虎杖中白藜芦醇含量的4.47倍。优化固态发酵工艺条件能较大程度的提高从虎杖中获取白藜芦醇的得率。     

桑黄漆酶的发酵条件研究初报

采用液体深层培养方法通过不同碳源、氮源、pH值、温度等因素对桑黄产酶量的影响,研究桑黄合成漆酶的最适发酵条件。采用L9(34)正交设计法对桑黄合成漆酶发酵培养基进行了优化,初步筛选出了桑黄合成漆酶发酵培养基。结果表明,培养基为玉米粉1%、麦麸1%、葡萄糖2%、蛋白胨0.5%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、添加Cu2+浓度60μmol.L-1,维生素B1 1 mg.100-1.mL-1,漆酶产量最高,为7 666 U.L-1。     

灵芝胞内多糖高产菌株G7深层发酵工艺的研究

通过摇瓶培养实验从 2 2个广泛栽培的灵芝菌株中筛选出了胞内多糖产量最高的菌株 ,并以胞内多糖产量为指标通过单因子及正交实验优化了该菌株深层发酵所需的营养因子及非营养因子条件 ,包括碳源、氮源、初始pH、接种量、装液量、培养时间等。研究发现G7的最佳培养条件及目标产物不同 ,所需的培养时间也不同。G7在对数期内大量形成胞内多糖 ,在 6 0h胞内多糖产量最高达 5 33mg/mL培养液     

几种食用菌产木质素降解酶类研究

采用PDA—Bavendamm平板和PDA—RB亮蓝平板对13个食用菌菌株进行显色试验，得到广草和羊肚菌可以同时产生漆酶和过氧化物酶的菌株.对其进行液态产酶试验，结果表明它们产木质素降解酶类活性较高.     

沼液追肥对小白菜生物学性状和产量的影响

通过沼液与水不同比例配比追肥,研究沼液不同施用浓度对小白菜生物学性状和产量的影响.结果表明:在苗期后第35天,施用沼液低量处理的小白菜的叶片宽、叶片长和叶柄长比其他各处理高,分别为50.37、58.17、26.34 mm;沼液中量处理的小白菜的叶片数为9.6片,高于其他各处理.施用沼液显著提高了小白菜的产量,其中沼液高量处理产量最高,达730.921 kg/667m2,增产97.74%.