芸薹类蔬菜基因组DNA遗传多样性的RAPD分析

采用随机引物扩增多态性DNA（RAPD）技术,对芸薹类（2n=20）蔬菜作物的33个品种进行了遗传多样性检测。从70个引物中筛选出37个引物,共扩增出353带。其中,多态带有260条,扩增片段长度大多数集中在0.9～1.6　kb之间。不同引物的检测效率相差很大。运用5个引物扩增的10条RAPD特征带,可以作为一组DNA指纹,区分所有供试7个大白菜品种。     

芸薹属作物花粉发育相关基因MS1的生物信息学分析

[目的]利用生物信息学分析芸薹属作物MS1基因的结构功能,为作物杂种优势利用提供理论参考.[方法]以拟南芥花粉发育关键基因AtMS1为参考序列,通过BLAST比对获得同源基因序列,运用生物信息学方法对其编码氨基酸序列进行预测分析.[结果]从甘蓝型油菜、白菜、甘蓝等芸薹属作物基因组中获得4条同源序列,与AtMS1基因的相似性在88.0%以上,均含有3个外显子,其CDS序列长度均为2004 bp,编码667个氨基酸.4个芸薹属作物MS1蛋白均含有1个植物同源结构域(Plant homeodomain,PHD),属于亲水性不稳定蛋白,定位于细胞核,磷酸化以丝氨酸(Ser)为主,以苏氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)为辅;二级结构均由α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲组成,其中α-螺旋所占比例最高,在40.00%以上,β-转角所占比例最低,仅为10.00%左右;其三级结构大致相同,均为球状的功能结构域.4个芸薹属作物MS1蛋白和AtMS1蛋白序列的相似性为95.69%.4个芸薹属作物MS1蛋白的PHD结构域序列高度保守,仅有3个位点氨基酸残基存在差异.19个不同植物的MS1同源蛋白聚为两大类,其中琴叶拟南芥、亚麻荠、萝卜的MS1蛋白与4个芸薹属作物MS1蛋白及拟南芥AtMS1蛋白聚为一类,均属于十字花科植物,即MS1蛋白的聚类结果与植物系统分类结果相吻合.[结论]芸薹属作物MS1基因属于PHD-finger基因家族,其序列高度保守,参与调控花粉发育成熟过程.     

黄瓜性别控制基因CsACS1G的分子标记及其快速检测

根据黄瓜性别控制基因CsACS1G、CsACS1及BCAT基因DNA差异序列,设计CsACS1G基因特异标记引物G1/G2,采用碱处理法,快速提取黄瓜品种WI1983G、95、98-17、S-2-98及95×WI1983G的F1、F2群体植株DNA,并以此为模板进行PCR扩增.为了验证特异引物对检测CsACS1G基因的准确性,在黄瓜开花期间进行田间调查,结果表明,以快速提取的黄瓜DNA为PCR模板,特异引物G1/G2能稳定、准确扩增出CsACS1G基因特异片段,电泳检测结果与田间调查结果一致.     

甘蓝型油菜试管苗人工低温春化方法研究

为争取5月份形成的半冬性油菜小孢子植株于当年种于田间，并开花结籽，即一年种两代，缩短双单倍体育种和遗传研究年限，我们用光照培养箱对半冬性甘蓝型油菜试管苗进行了人工低温春化研究。华双3号、P34—3品系、中油821和DH系-32种子再生的4～6叶龄试管苗于6～8℃的光照培养箱春化32-42d，分别于3月31日(1999年)和5月6日(1997年)种在田间。所有处理的植株结角株率达100％，每角结籽9．3-21．4粒，种子的发芽率在54％以上。2001年，小孢子离体培养再生的试管苗于5-6℃光照培养箱春化14-25d，分别于6月7日和6月19日栽到田间。春化14d开花株率为8．33％，春化22d和25d达90％以上，但均未结角。结果表明，半冬性油菜试管苗于6-8℃光照培养箱处理32d所有植株可通过春化。在武汉，春化的小植株于5月上中旬以前移栽到田间可收到种子，6月以后仅能开花，不能结角。     

花椰菜与青花菜DNA标记研究进展

近年来花椰菜与青花菜在中国的种植面积越来越大,其分子生物学和遗传育种研究也越来越受到关注和重视。国内外利用各种分子标记技术对其基因组进行了深入的研究,取得了长足的进展。文章从构建遗传图谱、基因定位、种质资源遗传多样性评价、DNA指纹图谱以及标记辅助选择等方面综述了DNA标记在花椰菜和青花菜中的研究进展,并对其前景进行了展望。     

转基因芸苔属作物营养生长速率等级评判模型的构建

基于模糊集重心理论及熵值法构建了转基因芸苔属作物营养生长速率等级评判模型,该模型包含确立评价指标正态隶属函数、利用模糊集重心理论计算指标重心向量集、利用熵值法计算评价指标权重向量和营养生长速率等级划分4个基本步骤.以一常规杂交组合试验的营养生长指标测量值为例对该评判模型进行了演示,论证了该模型具有可操作性.     

甘蓝型油菜"79.7"细胞核雄性不育基因RAPD分子标记初步研究

对油菜DNA的RAPD扩增中Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶和模板DNA用量、不同PCR扩增仪以及用不同方法制备的DNA对扩增结果的影响进行了探讨.在确立了本研究的RAPD反应体系后,对油菜"79.7"细胞核雄性不育及其保持系的育性相关基因进行了分子标记.从使用的254个随机引物中,发现随机引物2-70-11和60-37可分别检测到一个与可育基因连锁的RAPD分子标记2-70-11700和60-371150.     

芸薹属作物分子标记研究

通过对已有资料的分析 ,从芸薹属作物分子连锁图的现状 ,芸薹属作物比较作图研究以及重要农艺性状的分子标记等方面 ,概述了芸薹属作物分子标记的研究进展 ,并对今后的研究方向提出了建议     

蔬菜抗病分子标记研究进展

蔬菜是我国重要的经济作物,而病害是制约蔬菜生产可持续发展的重要的因子。综述各种分子标记技术在茄科、十字花科和葫芦科等重要蔬菜作物抗病育种中的应用及其发展,并提出在未来的抗病育种中分子标记技术的重要性。     

DNA分子标记在小麦抗条锈病基因研究中的应用概述

DNA分子标记直接反映生物在DNA水平上的遗传多态性,是抗病基因研究中最准确、有效的方法。文中概述了DNA分子标记技术的主要原理、方法、特点以及在小麦抗条锈病基因研究中的应用,对小麦抗条锈病基因研究中存在的问题进行了分析探讨,并对抗条锈病基因研究进行展望。     

绿体春化型大蒜叶片在春化过程中的生理生化变化

以大蒜(Allium sativum)为试验材料,对低温春化作用过程中叶片组织内的可溶性蛋白质、可溶性糖、SOD活性、内源激素ABA、GA和IAA水平及特异性蛋白质进行了测定与分析.结果表明:春化作用过程中,可溶性蛋白质、可溶性糖含量及IAA水平无显著变化,SOD活性、ABA和GA水平均逐渐增加,IAA/ABA、IAA/GA和GA/ABA逐渐降低的趋势;春化作用完成后,可溶性蛋白质含量,SOD活性,ABA和GA水平均显著下降,而可溶性糖含量、IAA水平及IAA/ABA、IAA/GA和GA/ABA显著增加;另外,低温春化作用后室温生长一定时期可诱导特异性蛋白质(44.3~29.0kU)的合成与积累.结果显示,绿体春化型大蒜只有在春化作用完成后,经历适宜的生长条件下一定时期,才会呈现明显的生理生化反应并开始迅速的生长发育.     

Inheritance and molecular markers for the seed coat color in Brassica juncea

To elucidate the inheritance of seed coat color in Brassica juncea, Sichuan Yellow inbred (PY) was crossed with the Ziyejie inbred, and their F₁, F₂ and BC₁ and BC₂ progenies, derived from backcrossing to PY, were phenotyped for seed coat color. Results showed that the yellow seed coat was controlled by two independent recessive loci. Seven brown-seeded near-isogenic lines were developed by successive backcrosses to PY and by selfing. One of the BC₆F₂ populations segregated for a single locus controlling seed coat color was used for mapping. Using the 88 primer pairs from sequence-related amplified polymorphism and the 500 random primers, two markers were found to be linked to the gene for brown seed coat, which were designated as SCM57 and SCM1078. The crossover between these markers and the brown seed coat loci was 2.35% and 7.06%, respectively. A sequence characterized amplified region (SCAR) marker according to Negi et al. (2000), designated as SZ1-331, was found to be linked to the gene for brown seed coat, with a crossover estimate of 2.35%. The markers were located on the same side of the brown seed coat loci and 2.41, 7.51 and 2.41 cM away from the brown seed coat locus. The seven brown-seeded near-isogenic lines were classified into two groups by three DNA markers. They were located at the same linkage group of the marker RA2-A11 previously published by Padmaja et al. (2005).     

芥菜型油菜黄化突变体L638-y的遗传及黄化基因gr1的分子标记

【目的】研究芥菜型油菜黄化突变体L638-y黄化性状的遗传规律,并初步定位黄化基因gr1。【方法】以芥菜型油菜黄化突变体L638-y分别与正常绿色的渭源大黄芥、2598进行杂交,根据杂交F1、F2和BC1材料单株的叶色调查结果进行遗传分析;以从L638-y与2598杂交后代选育得到的近等基因系(Near-isogenic line,NIL)为材料,选用SRAP、SSR、RAPD和AFLP分子标记,采用BSA(Bulk segregant analysis)法,初步定位黄化基因gr1。【结果】芥菜型油菜黄化突变体L638-y的黄化性状受2对隐性核基因控制,将其分别命名为gr1、gr2。将黄化基因gr1初步定位在2个AFLP分子标记EA4TG4和EA7MC1之间,其与2个标记间的遗传距离分别为33.6与21.5cM。【结论】芥菜型油菜黄化突变体L638-y的黄化性状受2对隐性核基因控制,且黄化基因gr1初步定位在EA4TG4和EA7MC1之间。     

Identification of soft rot resistance loci in Brassica rapa with SNP markers

Soft rot caused by Pectobacterium carotovorum(Pc) is a devastating disease of Brassica rapa, causing substantial reductions in crop yield and quality. Identifying genes related to soft rot resistance is the key to solving this problem.To characterize soft rot resistance, we screened a soft rot-susceptible Chinese cabbage(A03), a resistant pakchoi(‘Huaguan’), and a resistant mutant(sr). An F2 population was generated by crossing susceptible Chinese cabbage A03and resistant pakchoi ‘Huaguan’ to id...     

DNA分子标记在月季中的应用

遗传标记的发展促进了植物遗传育种的研究,DNA分子标记是继形态标记、细胞学标记、生化标记之后发展起来的一种新的更为理想的遗传标记,它在月季遗传育种研究方面发挥了重要作用。DNA分子标记包括限制性片断长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片断长度多态性(AFLP)、简单重复序列(SSR)、单核苷酸多态性(SNP)等。对DNA分子标记的分类、原理、特点及其在月季亲缘关系分析、基因定位、品种鉴定和遗传图谱的构建等方面的研究进行概述。     

外源DNA直接导入技术在麦类作物育种上的应用(综述)

外源DNA导入是改良作物的有效途径之一。文章概述了该技术在麦类作物上的应用研究进展。对外源DNA的导入途径、导入效果、导入验证和产生变异的机理等方面作了分析。     

DNA分子标记技术在甘薯遗传育种研究中的应用

近年来,以PCR技术为基础的RAPD、AFLP、ISSR、S-SAP和SRAP等DNA分子标记技术已经逐步应用于甘薯的遗传育种研究中。本文对DNA分子标记的应用原理做一简单分析,并主要介绍了DNA分子标记技术在甘薯的起源、进化、分类、遗传多样性分析、品种鉴定、连锁图谱构建和分子标记辅助育种方面的应用情况。     

单、双子叶作物间EST-SSRs引物和标记的通用性研究

【目的】探讨单、双子叶作物间EST-SSR引物和标记的通用性。【方法】选取30对小麦、8对油菜和14对白菜的EST-SSR引物,分别以10个小麦、10个油菜、5个大豆品种和5个玉米自交系的基因组DNA为模板,进行PCR扩增及扩增产物的多态性分析。【结果】(1)30对小麦EST-SSR引物中,有29,28和26对引物分别在玉米、油菜和大豆中有扩增产物,可扩增率分别为96.7%,93.3%和86.7%;其中分别有12对和9对引物在单子叶作物小麦和玉米及双子叶作物大豆和油菜中的扩增产物显示多态性,有4对引物在4种作物中的扩增产物均显示多态性。(2)22对白菜/油菜EST-SSR引物中,有18,21和22对引物分别在大豆、小麦和玉米中有扩增产物,可扩增率分别为81.8%,95.4%和100%;其中分别有10对和7对引物在单子叶作物小麦和玉米及双子叶作物大豆和油菜中的扩增产物显示多态性,有7对引物在4种作物中的扩增产物均显示多态性。【结论】在单、双子叶作物间开发可通用EST-SSR引物和建立可转化EST-SSR标记是可行的;在单、双子叶作物中均有多态性的EST-SSR标记所对应的基因,涉及贮藏蛋白、核酸的转录及复制、功能基因的表达调控、代谢催化等基础功能。     

青花菜绿体春化过程中同工酶变化研究

试验以青花菜早熟品种"清风103"为试材,对青花菜绿体春化过程中植株中春化相关的酶进行研究。结果表明,青花菜植株在低温春化处理过程中,NR、EST和α-淀粉酶及ASP的活性都呈增加趋势。对EST、α-淀粉酶和POD同工酶分析发现,经过低温春化处理后既有新谱带的产生,也有谱带的消失,产生或消失的谱带可能与青花菜春化有关。     

大豆耐盐基因标记的开发

利用目前大豆中已经克隆的耐盐相关基因及EST序列，设计43对引物，分别对大豆耐盐品种文丰7号和盐敏感品种union的基因组DNA，RNA进行检测，开发了6个可用于大豆种质耐盐性鉴定的标记。