从盐田局送检的百合种球中检出百合斑驳病毒

2004年4月27日，深圳检疫局盐田分局从荷兰进口的百合种球中抽取样品送动植中心进行病毒检测。经隔离种植后，发现有一株百合叶片上出现斑驳、条纹、扭曲等症状，疑是百合斑驳病毒侵染。随后，采用百合无症病毒RT-PCR检测方法，特异性扩增得到一条大约500bp左右的特异性条带，这与期望结果一致。为了保证检测结果准确无误，又将RT-PCR扩增产物进行测序，测序结果与GenBank上已登录的百合斑驳病毒多聚蛋白基因保守区序列一致，也与预先设计的基因片断完全一致。从而表明，从荷兰进口的百合种球中确实携带有百合斑驳病毒（Uly mottle virus）。     

百合脱毒组培技术研究

百合为百合科百合属(Lilium)多年生球根植物,是国际上主要鲜切花之一。百合在生产中一般采用无性繁殖,而百合病毒可通过种球传播。因此,病毒一旦感染百合,即在种球内不断积累,最终导致种质严重退化,给百合种植业造成巨大的经济损失。迄今已发现引起百合种球退化的病毒及其类似病原多达12种,其中危害最严重的有百合潜隐病毒(Lily symptomless virus,LSV),郁金香碎色病毒(Tulip breaking virus,TBV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)。随着组织培养技术的日臻成熟,通过组培脱毒为解决百合种球病毒性退化问题提供有效途径。国内外对百合组培脱毒进行的系列研究表明,获得脱毒苗的方     

侵染唐菖蒲和百合三种病毒的多重实时荧光RTPCR检测方法

南芥菜花叶病毒Arabis mosaic virus(ArMV)、百合无症病毒Lily symptomless virus(LSV)和菜豆黄花叶病毒Bean yellow mosaic virus(BYMV)是侵染百合和唐菖蒲的主要病原物,受这三种病毒侵染的唐菖蒲和百合植株长势减弱、切花质量降低、种球产量下降.     

辽宁局全国首次在进境荷兰百合中检出亚洲车前草花叶病毒

<正>2015年10月,辽宁出入境检验检疫局大窑湾口岸将荷兰进境的百合种球送至国家级重点实验室北方隔离苗圃进行检疫,在隔离种植期间发现一染病植株,经实验室检测确定其为亚洲车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus,Pl AMV),这是我国口岸首次检出该种高风险性植物病毒。亚洲车前草花叶病毒是马铃薯X病毒属(Potexvirus)成员。1976年在前苏联车前草中首次报道,     

基因芯片在百合无症病毒检测中的应用

设计百合无症病毒、植物18SrRNA基因的特异扩增引物和各种对照的探针，将探针固定在醛基化玻璃片基上，完成植物基因芯片制备。提取百合种球总RNA，经RT-PCR扩增相应区段并用Cy3dCTP进行标记，用标记的PCR产物与芯片杂交，扫描仪对杂交结果进行扫描，GenePixProd．0软件对杂交图像进行分析。结果从荷兰进口的百合种球中检测出百合无症病毒，证明了该实验研制的植物病毒基因芯片的准确性和灵敏性。     

侵染青蒿的烟草曲茎病毒的分子鉴定及基因组结构特征分析

菜豆金色花叶病毒属病毒是一类在全球热带及亚热带地区造成严重经济损失的植物病毒,田间杂草是这类病毒重要的中间寄主。 本研究从云南省玉溪市采集了表现黄脉的青蒿植株,通过PCR扩增、克隆及测序从样品中获得两条菜豆金色花叶病毒属病毒DNA-A全基因组序列,分别为YN6393-23和YN6393-27,其全长均为2 739 bp,相似性为100%。序列分析发现,YN6393-23和YN6393-27的核苷酸序列与烟草曲茎病毒Tobacco curly shoot virus(TbCSV）的分离物YN4584的核苷酸序列相似性最高,为99.45%。根据国际病毒分类委员会对菜豆金色花叶病毒属病毒种的分类标准,全基因组序列相似性大于91%则为同种病毒,表明此病毒分离物为烟草曲茎病毒的一个分离物。这是菜豆金色花叶病毒属病毒侵染青蒿植株的首次报道。     

复合侵染水茄的两种菜豆金色花叶病毒属病毒基因组结构特征分析

为明确水茄Solanum torvum植株叶片邹缩、褪绿是否由菜豆金色花叶病毒属病毒侵染引起,从云南省西双版纳傣族自治州田间采集具有疑似感染症状的水茄植株叶片样品,应用菜豆金色花叶病毒属病毒简并引物和特异性引物进行PCR扩增、克隆和测序,通过生物信息软件分析比较其核苷酸序列特征,并对其进行系统发育分析。结果显示,从采集的疑似病叶中共克隆获得了5条菜豆金色花叶病毒属病毒DNA-A全序列和3条DNA-B全序列,经全序列分析发现,侵染水茄的2种菜豆金色花叶病毒属病毒分离物分别属于中国南瓜曲叶病毒(squash leaf curl China virus,SLCCNV)和野茼蒿黄脉病毒(Crassocephalum yellow vein virus,CraYVV)。SLCCNV水茄分离物的基因组具有典型的菜豆金色花叶病毒属病毒双组分结构特征,与来自泰国的SLCCNV分离物(AB330078)亲缘关系最近,相似性最高达到99.0%;CraYVV水茄分离物的基因组具有典型的菜豆金色花叶病毒属病毒单组分结构特征,与来自云南省景洪市的CraYVV分离物(EF165536)亲缘关系最近,相似性最高达到97.6%。表明水茄是这2种菜豆金色花叶病毒属病毒的新寄主,并首次发现双组分和单组分菜豆金色花叶病毒属病毒可复合侵染水茄。     

大连海关全国首次从荷兰进境的百合种球中截获郁金香X病毒

正2020年7月,大窑湾海关入境的一批荷兰百合种球(西伯利亚),经大连海关技术中心检疫鉴定,携带郁金香X病毒(tulip virus X, TVX)。这是我国口岸首次在荷兰进境的百合种球中截获该病毒。郁金香X病毒是马铃薯X病毒属(Potexvirus)成员,最早在苏格兰的郁金香中分离出来,可通过鲜切花采收机械接触及种球携带远距离传播,在郁金香植株上引发叶片褪绿和坏死斑点、花被片中形成颜色     

进境菜豆种子中南方菜豆花叶病毒的检疫鉴定

南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic virus,SBMV)是我国禁止进境的检疫性有害生物。应用RT-PCR和实时荧光RT-PCR方法,从西班牙进境的菜豆种子中检疫鉴定出该病毒,这是我国首次在西班牙进境菜豆种子中截获该病毒。     

唐菖蒲病毒种类鉴定分布危害和检验技术研究

从1986～1989年,我们在北京、上海、南京、杭州、广州、深圳、厦门、福州、昆明、成都、武汉、沈阳、长春和哈尔滨大、中城市的园林科研所和公园共23个单位,对唐菖蒲病毒进行调查和采集病样358份。口岸动植物检疫局截获送检的唐菖蒲种球获得的病株210株。通过鉴别寄主反应,电镜观察粒体形态,琼脂双扩散试验和蛋白亚基分子量测定等,共鉴定出4种病毒,即烟草环斑病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和蚕豆萎蔫病毒。从荷兰引进的唐菖蒲球茎获得的病株均分离到这4种病毒,其中烟草环斑病毒是对外检疫对象。在我国的唐菖蒲尚未发现,应特别注意。该病毒侵染大豆引起顶枯,并经大豆种传,可构成潜在威胁。后3种病毒是在国内唐菖蒲鉴定获得的。菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒是危害唐菖蒲的主要病毒。分布广、危害严重,其平均检出率分别为48.3%和20.1%。蚕豆萎蔫病毒只有局部地区零星发生,对危害重,零星发生分布未广的病毒,禁止从病区调运种球,以免病毒扩散传播。在对外检疫上防止新的病毒随种球传入我国。     

北京局从荷兰进境花卉中检出南芥菜花叶病毒

2007年4月，北京检验检疫局植物检验检疫中心对一批来自荷兰花卉种苗进行检验，利用DAS-ELIS和RT-PCR检测方法，并由中国检验检疫科学研究院动植物检疫所复核，结果从样品老鹳草（Geranium hybrid）和一串红（Salvia nemerosa）种苗中检出我国进境植物检疫性有害生物一南芥菜花叶病毒（Arabismosaic virus，ArMV）。这也是我国口岸首次从这两种寄主中检出该病毒。     

百合病毒病及其检验

百合病毒病及其检验沈淑琳（农业部植物检疫实验所１０００２９）自Ｓｔｅｗａｒｔ（１８９６）描述百合的坏死条纹以来，相继报道了病毒病原１４种，类菌原体１种。其中发生普遍，为害严重的主要病毒有４种，即百合无症病毒、黄瓜花叶病毒、郁金香碎锦病毒和百合丛簇病毒...     

侵染唐菖蒲和百合3种病毒的多重RT-PCR检测方法

本文针对侵染百合和唐菖蒲的南芥菜花叶病毒、百合无症病毒和菜豆黄花叶病毒,建立了同时检测3种病毒的多重RT-PCR检测方法.该方法根据上述3种病毒保守的衣壳蛋白基因序列,设计特异性引物,优化了反应条件.通过对9种不同寄主和6种病毒的检测,验证该检测方法具有很高的特异性、稳定性,其灵敏度为植物总RNA稀释101～102倍.特别是,该方法缩短了检测周期,适合于植物病毒快速检测工作的需要.     

侵染厦门百合的百合无症病毒的鉴定及其分子检测

百合无症病毒(Lily symptomless carlavirus, LSV)属于香石竹潜隐病毒组(Carlavirus),是单链正义RNA病毒。基因组全长为8 394 bp,共有6 个开放阅读框(Open reading fragment,ORF),分别编码RNA依赖的RNA复制酶,三基因连锁结构, 外壳蛋白和16 kD核酸结合蛋白。主要侵染百合属、郁金香属植物,通常在百合上不产生明显症状,与黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)复合侵染时,导致叶片出现坏死斑。LSV 是危害百合的重要病毒,在世界各地都有分布。近年来国内陆续有该病毒病的报道,其发病率一般在40％-50％,二代种球的带毒率在90％以上, 严重制约了我国百合鲜切花的产量和质量,目前LSV已成为各口岸进出口百合种球的主要检疫对象。     

大麦条纹花叶病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

大麦条纹花叶病毒Barley stripe mosaic virus（BSMV）是我国进境植物检疫性有害生物。为提高大麦条纹花叶病毒检测的灵敏度和特异性,缩短检测周期,根据该病毒不同分离株外壳蛋白（coat protein, CP）基因的保守序列设计特异性的引物和探针,建立了BSMV的实时荧光RT-PCR检测方法。结果表明,本检测方法特异性强,对南方菜豆花叶病毒Southern bean mosaic virus（SBMV）、小麦线条花叶病毒Wheat streak mosaic virus（WSMV）、玉米褪绿斑驳病毒Maize chlorotic mottle virus（MCMV）、烟草环斑病毒Tobacco ringspot virus（TRSV）、菜豆荚斑驳病毒Bean pod mottle virus（BPMV）和番茄环斑病毒Tomato ringspot virus（ToRSV）6种病毒均无交叉扩增;且检测方法灵敏度高,对RNA模板的最低检测限达到5×10-4 ng/μL,与双抗体夹心酶联免疫吸附法（DAS-ELISA）和普通RT-PCR相比,本方法的灵敏度分别提高了10倍和100倍。此外,我们利用该方法对12批进口大麦进行检测,发现6批大麦中检出大麦条纹花叶病毒,占比约50%。总之,本研究建立的荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强等优点,适合于BSMV的快速检测。     

一种侵染鳢肠的双生病毒基因组特征

菜豆金色花叶病毒属病毒是热带及亚热带地区经济作物的重要病原病毒,该类病毒在田间的杂草寄主范围较为广泛。本研究从云南红河流域采集到叶脉黄化的鳢肠植株,经克隆获得了菜豆金色花叶病毒属病毒分离物YN3306,该分离物核苷酸序列全长2749 nt,具有典型的双生病毒基因组结构特征。进一步分析发现,分离物属于金腰剑曲叶病毒(Synedrella leaf curl virus,SyLCV),RDP软件分析表明,该分离物是由烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,Tb CSV)、云南烟草曲叶病毒(Tobacco leaf curl Yunnan virus,TbLCYnV)和金腰剑曲叶病毒重组产生的病毒。本研究首次报道了GenBank中在印度注册的SyLCV可以侵染鳢肠植株。     

福建口岸首次截获玉米褪绿斑驳病毒和玉米矮花叶病毒

2011年4月,福建出入境检验检疫局技术中心植物检疫实验室采用DAS-ELISA、RT-PCR及序列测定验证的方法,从一批阿根廷进境玉米种子上同时检出玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)和玉米矮花叶病毒(Maize dwarfmosaic virus,MDMV)。这是福建口岸首次检出上述2种病毒。     

张家港局从进境美国大豆中截获菜豆荚斑驳病毒和大豆花叶病毒

2006年1—4月份经江苏局植检实验室检测确认张家港送检的美国大豆样品中3批含有检疫性有害生物——菜豆荚斑驳病毒（Bean pod mottle virus），1批含有大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus）。值得一提的是这2种有害生物皆为美国大豆中截获，也是张家港局首次在大豆中截获的病毒。     

侵染苣荬菜的中国胜红蓟黄脉病毒及伴随的卫星基因组结构特征

杂草是菜豆金色花叶病毒属病毒的重要中间寄主,常富集多种该属病毒及其卫星病毒。2014年,在云南红河常见杂草苣荬菜Sonchus arvensis上出现了疑似菜豆金色花叶病毒属病毒病症状。利用克隆、测序和生物信息学分析技术对其所含病毒进行分离鉴定,结果从1株病样中共获得了两条菜豆金色花叶病毒属病毒全序列、两条β卫星全序列和一条α卫星全序列。序列分析显示,两条菜豆金色花叶病毒属病毒全序列与中国胜红蓟黄脉病毒相似性最高,分别为99%和96%,确定为中国胜红蓟黄脉病毒的分离物。两条β卫星全序列与赛葵黄脉β卫星相似性最高,为97%,确定为赛葵黄脉β卫星的一个分离物。α卫星全序列与中国番茄黄化曲叶α卫星相似性最高,为86.3%,是中国番茄黄化曲叶α卫星的一个分离物。这是菜豆金色花叶病毒属病毒病害复合体在中国侵染苣荬菜的首次报道。     

兰花上凤仙花坏死斑病毒和建兰花叶病毒双重RT-PCR检测方法的建立

根据凤仙花坏死斑病毒(Impatiens necrotic spot vjrus,INSV)和建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)的保守序列设计特异性引物,建立了双重RT-PCR同时检测两种病毒的方法.用该方法对兰花基地的可疑发病兰株进行检测,结果从田间采取的12株可疑兰花中有6株检出INSV,1株检出CyMV,2株同时检出两种病毒.