抗盐碱罗布麻DNA导入棉花的研究

利用微注射技术，把抗盐碱罗布麻ＤＮＡ导入鲁棉６号。对其后代经人工配制的盐碱土筛选育成了两个耐盐碱品系９１－１１和９１－１５，在含盐量为０．５１％的滨海盐碱地种植，其皮棉产量分别比受体亲本鲁棉６号增产１９１．７％和２３７．８％。对９１－１１和鲁棉６号在盐胁迫条件下测定其细胞质膜透性和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性，结果表明，９１－１１在盐胁迫条件下能够维持较高的ＳＯＤ活性和较稳定的膜透性，而鲁棉６号呈现相反的变化，而且差异显著。据此说明，应用这一技术能够筛选出含有抗性基因的改良品种。     

我国抗虫棉花品种（系）的鉴定,选育,利用及其研究进展

棉铃虫的暴发危害已严重制约了我国棉花生产的稳定发展，生产上急需在综合防治中利用棉花自身的部分抗虫性抵御害虫的侵害，提高植棉的综合效益。本文从棉花种质（材料）的外部形态抗虫性，生理生化抗虫性，外源性抗虫基因导入等３个方面详细论述了我国棉花品种（系）的抗虫性鉴定，选育及其研究进展和生产应用现状。还针对抗虫棉研究与利用中存在若干问题探讨了未来发展的方向。     

棉花品种的抗虫性和抗虫鉴定技术研究

棉花品种抗虫鉴定是棉花品种区域试验中的重要组成部分。棉花品种区域试验中的抗虫鉴定主要对象是红铃虫和棉铃虫。抗虫鉴定方法为网室接虫鉴定,红铃虫的接虫密度是平均每10m2网室接5对成虫;棉铃虫的接虫密度为每10m2网室接虫2对;所接虫源雌雄各占50%。抗红铃虫鉴定指标为种子虫害率;抗棉铃虫鉴定指标为棉株生长点和蕾、花、棉铃受害率。根据棉花受害率将品种的抗虫性分为免疫(I),高抗(HR),抗虫(R),中抗(MR),感虫(S)和高感(HS)共6级。     

棉花抗虫性状与抗虫效果分析

本文探讨了具有单一或复合抗虫性状的陆地棉(Gossypium hirsutum.),对黄淮海棉区严重危害棉花的棉蚜(Aphis gossypii)和棉铃虫(Heliothis armegera)的抗性效果,并对不同抗性品系在虫害胁迫下的抗虫性进行了初步研究。结果表明,多茸毛性状抗棉蚜性最好,光叶抗性较差,生化抗性对棉铃虫抗性最好。由于蜜腺性状的复杂性,无蜜腺对棉蚜有一定抗性,但在田间棉铃虫自然发生条件下抗性不明显。所有具抗虫性状的品系均不同程度地优于常规品种。培育兼抗上述两虫的棉花新品种,以多茸毛和生化抗性结合较理想。幼叶和幼蕾棉酚含量高对减轻棉铃虫危害有一定效果。利用裂区设计和平均生产力(MP)、产量损失(L)和耐害率(PP)对评价不同棉花种质的抗棉铃虫性具有一定价值。     

转Bt+GNA双价基因抗虫棉花中抗虫基因及其抗虫性的遗传稳定性

采用PCR和PCR-Southern跟踪检测,Bt和GNA两个抗虫基因在转Bt+GNA双价基因抗虫棉花TL1的3个连续世代均稳定存在,完全连锁遗传;室内棉铃虫生物测定表明,该转基因植株的3个世代都高抗棉铃虫,各世代之间抗性水平一致,没有显著性差异;温室蚜虫抗性试验显示3个世代均对蚜虫具有较好的抑制作用,且抑制效果相当。因而,两个抗     

早熟棉花优异种质选育

棉花 (包括野生棉 )中含有许多可利用的优异性状 ,其中大部分未被应用 ,而在早熟棉育种中则更少。主要是缺乏具有优异性状的早熟种质。选育具有不同优异性状的早熟棉种质材料具有重要意义。1　材料与方法材料为石家庄市农科院棉花育种室的中熟材料和从中国农科院棉花所、中国科学院遗传所、河北省邯郸市农科所等单位引进的中熟及早熟材料。根据目标性状遗传规律 ,选择含有目标性状的材料与常规品种杂交 ,并适度回交、自交 ,促进目标性状纯和稳定 ,结合南繁加代加快育种进程。逐年进行抗病性鉴定和纤维品质测试。2　结果与分析选育了具有抗病…     

转育Bt抗虫基因棉与常规棉种子的活力比较

转育Ｂｔ抗虫基因棉与常规棉种子的活力比较李爱莲,曾献英,陈玉萍,吕双俊（河南省农科院经作所郑州４５０００２）我国目前育成的转育Ｂｔ抗虫基因棉,常表现为出苗差、苗期长势弱、棉铃小等。本文通过对抗虫棉种子的籽指、仁指、脂肪与蛋白质含量,适温与低下种子的吸...     

优质抗虫棉花新品系

河北省植物保护研究所育成的优质抗虫棉花新品系——W82-1,据北京市纺织纤维检验所检验,     

棉花种间杂交抗棉铃虫资源选育

棉属野生种共有４６ 个,这为棉花遗传育种提供了丰富的资源宝库。有些野生种具有天然的抗虫性。利用棉花远缘杂交的方法,把野生种的抗虫性转移到栽培种上,充分利用棉属内存的天然资源,是当前提高棉花抗虫性行之有效的方法。从１９７３ 年开始,我组通过棉花远缘杂交研究创造了一套克服棉花远缘杂交不亲和性技术,即采用种间杂交铃喷施植物生长素,杂种胚离体培养并在试管内利用秋水仙碱溶液进行染色体加倍的方法,有效地解决了种间杂交铃、杂种胚的发育和Ｆ１ 结实率的难题,并先后获得１４ 个野生种与栽培种的杂种高代材料,从中已筛选出一批抗棉铃虫的种质资源,并选出了９２－ ４８－ ２、９２－ ２６－ ２、６－ １ 和科１８１×完紫等高产、优质,抗棉铃虫的优良品系。     

黄瓜授粉后外源基因直接导入技术研究

以黄瓜（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ．）栽培品种津研四号为受体,以质粒ｐＢＩ１２１为供体进行授粉后外源ＤＮＡ直接导入技术的研究,建立起高效的黄瓜子房注射转化系统,获得了不同的转基因植株。试验表明,子房注射法的坐果率和结种率最低,但其转化率最高;黄瓜授粉后１２ｈ注入外源基因的转化率最高;外源ＤＮＡ溶液的浓度、ｐＨ值及ＤＮＡ溶液注射体积是影响黄瓜坐果结实及基因转化率的重要因素。ＧＵＳ组织化学染色结果以及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ印迹杂交表明,标记基因ＮＰＴⅡ和ＧＵＳ基因均转化到黄瓜植株中。     

抗虫棉高产栽培技术要点

1 选用适宜品种 抗虫棉在豫北地区推广应用的品种分中熟和早熟两大类。中熟品种(系)主要有特优抗虫棉，高效抗虫棉98-1、中29、中38、DP99B、20B、33B及抗虫棉原良种抗虫棉新品系99-3等，这些品种(系)适用于舂播的舂地，瓜棉套种、麦套春棉。早熟品种如中30等，主要适用于夏播。 2 推广高效间作套种模式 目前，在豫北地区水肥地以麦棉套种四、二式为主：即1.6m一带，种4行小麦，行距0.2m，占地0.6m，预留空档1m，翌年舂套种2行棉花，棉花行距……     

外源DNA导入小麦后的变异系生物学特性及胚乳蛋白的研究

应用受粉后的花粉管能通道Ｃ４作物高梁ＤＮＡ和抗逆性强的长穗偃麦草ＤＮＡ导入小麦，结果在不同组合中出现了不同类型的广泛变异，在三个组合中已选育出几个稳定遗传的优良变异系，其生物学性状大多是介于原受体和供体之间。主要特性是叶功能期延长，籽粒千粒重和单株粒重增加，增产显著，抗锈病能力增强等，其胚乳蛋白电泳图谱发季了明显变化，在变异系中产生了新的蛋白质组分，而且Ａ区和Ｂ区增加的是蛋白质群，相反原受体６８－     

长江流域高产转基因抗虫杂交棉新品种中棉所63

中棉所63系中国农业科学院棉花研究所（河南省棉花科学研究所）培育的丰产优质抗病转基因抗虫杂交棉新品种，2007年通过国家品种审定，审定编号：国审棉2007017，适宜河南南阳，湖北全省，湖南北部，四川盆地，江苏、安徽淮河以南（盐城除外），浙江沿海长江流域棉区作春棉种植。     

转基因棉花抗虫基因的分子辅助选择

为提高棉花新品种选育过程中外源抗虫基因选择的准确性,以常规非转基因抗虫棉花品种、单价转基因抗虫棉品种、双价转基因抗虫棉品种为试验材料,选择能扩增Bt基因通用引物和棉花内源基因SAD1的引物,建立了抗虫基因的PCR检测方法。利用该方法对常规非转基因抗虫棉品系和转基因棉花品系进行了检测。结果表明,该方法可明确区分常规非转基因抗虫棉品系和转基因棉花品系;对高代育种品系进行检测表明40%转基因品系中存在单株不能扩增出预期的特异片段,而在非转基因系冈197中存在8.0%的单株扩增出预期的特异片段。该方法可应用于棉花新品种选育过程中对外源抗虫基因的检测,提高了选择的准确性和目的性。     

转基因抗虫棉外源DNA插入整合结构分析和转化事件特异性检测方法的建立

通过3’端2次高效热不对称交互PCR(hiTAIL-PCR)和5’端4次hiTAIL-PCR及1次长链PCR获得了转基因抗虫棉材料06N-119的外源DNA插入片段的全序列。外源DNA插入片段全长11578bp,由NptⅡ基因和Bt基因两个表达盒串联构成。插入位点处缺失75个碱基,未发生基因重组现象。根据3’端旁侧序列设计引物,特异性和灵敏度检测结果表明,建立的3’端定性PCR检测方法特异性强,灵敏度高,最低检测限为每100ng模板量的0.05%,相当于11个靶标序列拷贝。本研究结果对转基因抗虫棉外源基因检测和生物安全评价具有重要意义。     

棉花抗虫核不育系-中抗A组合优势及昆虫传粉研究

用中棉所12与美国双隐性核雄性不育系(ms5ms6)回交, 培育了主要以中棉所12为遗传背景的双隐性核不育系, 然后通过杂交转育将抗棉铃虫Bt基因转入到该不育系中, 选育出抗虫双隐性核雄性不育系-中抗A((农科鉴字125号); 此不育系综合性状好, 高抗棉铃虫, 所配杂交组合优势明显, 增产替力大; 同时研究了中抗A蜜蜂辅助传粉的制种效     

棉花线粒体和线粒体DNA的分离与纯化

本文详细报道了一个针对棉花特点的线粒体以及线粒体ＤＮＡ的抽提方法，即先用蔗糖Ｓｔｅｐ递度和ＤＮａｓｅＩ体外消化分离纯化线粒体，然后氯仿抽提纯化ＤＮＡ。实验过程中采用ＰＶＰ排除棉酚和丹宁的干扰，用ＤＩＥＣＡ抑制酚氧化酶活性，并对许多实验细节作了较大改进。得到的ＤＮＡ可满足酶切、ＰＣＲ等分子生物学分析。     

沙引发对棉花老化种子活力及幼苗生理变化的影响

以转基因抗虫棉花品种中棉所41和浙905为材料,以其遗传背景品种中棉所23为对照,研究了沙引发处理对经人工老化的棉花种子的活力、田间出苗率以及幼苗生长特性的影响.结果表明,沙引发处理对提高人工老化的棉花种子的活力和幼苗生长具有显著的效果.幼苗子叶和根的超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量测定结果表明,沙引发处理使中棉所41和浙905幼苗子叶和根部维持了较高的SOD和POD活性,而中棉所23幼苗根部SOD和POD活性较老化未引发对照有明显提高.沙引发处理显著减少了3个参试品种幼苗子叶MDA的积累,说明沙引发有助于老化棉花种子的发芽和幼苗的生长发育,提高棉花的抗逆能力.沙引发效果受基因型影响,表现为转基因抗虫棉花品种浙905和中棉所41＞抗老化能力较强的对照中棉所23.