CASA-型系统在种公猪精液质量检测中的应用效果研究

正种猪常温精液质量直接影响母猪的受胎率和产仔数。在种猪精液质量评定中,精子活率、直线前进运动精子数和畸形率是其关键指标,评定方法尤为重要。在传统方法中,使用分光光度计或精子密度测定仪测定精子密度的速度较快,但计数不准确;《国家种猪常温精液质量标准》检测法是采用显微镜观察法测定精子活力,血球计数板计数法测定直线前进运动精子数,吉姆萨染色法测定畸形率,此种方     

八眉猪精液品质分析研究

本试验选择生长发育良好,年龄在1.5～2.5岁的八眉猪公猪11头,按常规方法采集精液,对其精液品质进行评定分析。结果表明,11头试验猪精液颜色为乳白色或浅灰色,略带腥味,公猪平均射精量为(117.34±43.27) ml,平均精子活率为65.02%±4.26%,平均精子密度为(1.52±0.7)×10⁸个/毫升;解冻后精子活率均≥35%,精子畸形率≤20%;对精液品质特性进行相关性分析发现,精液量、精子活率、精子密度间相关性不显著(P>0.05)。经评定,其中一头公猪精子活率不达标,其余10头公猪精液符合国标要求,可以进行冻精制作及作为资源保存。     

牛冷冻精液的制作程序

1采精与精液品质检查按照牛冷冻精液国家标准的要求选择公牛,并检疫无病。采得的精液,精子活率不低于0.6,精子密度不低于8亿/毫升,精子畸形率不超过15%。2精液的稀释用牛冷冻精液稀释液,以原精液的活率和密度确定稀释的比例。按国家标准,以解冻后每个输精剂     

母牛人工授精冻配技术

人工授精提高了优良种公牛的配种效能和种用价值,扩大了配种母畜的头数。冷冻精液的推广应用使一头优秀公牛每年可配种母牛达数万头以上。1选购品质优良的颗粒冻精精子活率是指在精液中呈直线前进运动的精子数占总精子数的百分率。精子活率是评价精液品质的一个重要指标,与精子受精力密切相关。评定精于活率等级,通常采用十级评定法,即按视野中呈直线前进运动的精子数占总精子数的估计百分比评定,100%直线前进运动者评为1.0,90%者评为0．9，80％者评为0．8，依此类推。这种评定方法完全是凭检查者的主观经验评定，可以在显微镜上装置闭路电视或显微镜投影法反映在荧屏上。检查时，取一滴精液于载玻片上制成压片标本，放在400倍显微镜下观察，浓度大的精液先用生理盐水或等渗稀释液稀释后检查。     

介绍一种较理想的牛精子死活染色法

检查精子活力是评定精液品质重要指标之一,它是保证受胎效果的主要依据,因此每次采得的精液和输精前以及其他处理的前后都应做精子活力的测定。精子活力的检查办法,通常采用: (1)精子的活率(平板压片和悬滴法); (2)精子的死活染色法。平板压片法,是用10级制来评定,在37～38℃的环境中,显微镜下观察一个视野中的前进精子数。此法的优点是简单、方便、迅速,但也存在着不足,因肉眼观     

牛精液的质量与母牛受精率关系

牛冷冻精液的主要质量特性包括解冻后活力、每剂量中直线前进运动的精子数、精子顶体完整率、精子畸形率、解冻后的存活时间、精液中的污染及细菌数。这些质量特性对于母牛受精率有着直接的作用和影响。     

不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃液态保存效果的影响

鱼精蛋白具有一定的抗菌效果和保护精子的作用,为探讨不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃保存效果的影响,本实验在Modena稀释液中分别添加0、5、10、20μg/m L的鱼精蛋白,在常温保存过程中,检测精子活率、路径速度、直线速度、畸形率等质量参数。结果表明:精液在17℃保存过程中,在Modena稀释液中添加10μg/m L的鱼精蛋白,精子活率、路径速度、直线速度显著高于其他组(P0.05),畸形率显著低于其他组(P0.05)。综上可知,17℃保存的过程中,在Modena稀释液中添加10μg/m L的鱼精蛋白能够提高精液的保存效果,延长猪精液的保存时间。     

牛冷冻精液保存时间对精液品质及其受精能力的影响

为探究不同冷冻精液保存时间对荷斯坦奶牛精液品质及其受精能力的影响,选取北京奶牛中心冻存1年(A冻精)、冻存3年(B冻精)及冻存13年(C冻精)的3批精液进行研究。利用精子分析仪分析精子运动能力,台盼蓝染色鉴定精子活率,检测精子顶体完整率、线粒体功能以及DNA完整性,利用体外受精技术检测卵裂率和囊胚率,Realtime PCR检测弱精子症相关蛋白基因表达水平。结果显示:3批精液的精子活力和直线性随冷冻时间延长逐渐下降,精子活率也显著下降;3批冷冻精液的卵裂率和囊胚率随冷冻时间延长显著下降;精子线粒体功能分析结果表明,A精液线粒体膜通道孔相对荧光单位(RFU)值和线粒体活性光密度(OD)值最高(P0.05),C精液最低(P0.05);精子DNA完整性检测结果显示,随冷冻时间延长,精子拖尾率显著增加;弱精子症相关蛋白的基因表达趋势并未显现出与体外受精结果相一致的趋势。研究证明,随着冷冻保存时间的延长,精子活力、精子线粒体功能以及精子DNA完整性逐渐下降,最终导致精子受精能力下降。     

羧甲基纤维素钠对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。     

维生素E对猪精液常温负压保存效果的影响

为了探究不同浓度维生素E在负压(-0.04 MPa)条件下对猪精液常温(17℃)保存效果的影响，试验将猪精液分为A～D组，分别在含0,0.1,0.5,1 mg/mL维生素E的Modena基础稀释液中保存，用全自动精子质量分析仪检测猪精子质量指标及畸形率，用相应试剂盒检测总抗氧化能力(T-AOC)及H₂O₂含量，用酸度计检测猪精液pH值。结果表明：在精液保存至第7,11天时，C组精子活率显著高于其他各组(P<0.05),且在保存至第1～5天时精子活率高于60%;在精液保存期间，C组精子活力高于其他组，且在第9天显著高于其他组；在精液保存期间，C组精子平均直线速度、平均曲线速度、平均路径速度及鞭打频率均高于其他组，畸形率低于其他组；在精液保存至第9天时，C组精子T-AOC显著高于其他组(P<0.05);在精液保存至第9,11天时，C组H₂O₂含量显著低于其他组(P<0.05);在精液保存期间，C组pH值的下降趋势相较其他组最缓慢，pH值最高，使猪精子处于较为适宜的弱酸环境中。说明将0....     

牛冷冻精液稀释液中草药配方的初步研究

通过比较以淫羊藿为主要成分的单方及复方中草药提取液对牛冷冻精液解冻后精子活率、畸形率、顶体完整率及低温保存时间的影响，以期开发牛冷冻精液中式稀释液。将三种不同配方的淫羊藿提取液分别以6．25％、12．5％、25．0％、50．0％的体积分数添加于稀释液中，制作牛颗粒冻精，利用干解冻法（40～42℃）解冻后分别检查精子活率、畸形率和顶体完整率，评定其品质。结果表明：配方三取得了较佳的冷冻效果。其提取液添加12．5％时精子冻后活率平均达到0．56，极显著高于其他各组（P〈0．01）：精子顶体完整率最高达到76．80％。畸形率仅14．61％，低温保存时间长迭138h。配方三最有利于生产牛冷冻精液。     

新西兰兔精液冷冻保护剂的筛选

本试验的目的是分析在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中分别添加不同浓度的海藻糖、透明质酸、维生素E(Ve)、超氧化物歧化酶(SOD)对兔精液冷冻保存效果的影响,以冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率等作为质量评定指标,筛选出效果较好的新西兰兔精液的冷冻保护剂种类及浓度。结果表明,精液冷冻保存稀释液中添加3种浓度的海藻糖均未提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加0.5%和1%的透明质酸提高了兔精液冷冻后的精子活率(P0.05),但各组间质膜完整率和顶体完整率无显著差异;添加2 g/L Ve提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加4 000 IU的SOD提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05)。结果证实,在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中添加适宜浓度的Ve和SOD可提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。     

水蛭素对猪精液低温保存的影响

为了改善猪精液低温保存方法,通过在改进的猪精液低温稀释液中添加不同浓度(0,0.50,1.00,1.50,2.00 mg/mL)的水蛭素,研究在4℃低温保存条件下其对猪精液品质的影响。试验采用PI荧光染色检测精子活率,利用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活力,Diff-Quik染色检测精子畸形率,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整率及采用低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整率。猪精液保存7 d,每天检测上述指标,试验重复5次。结果表明:稀释液中添加一定浓度的水蛭素在一定时间内有利于维持精子的活率、活力,降低精子的畸形率,提高精子的顶体完整率和质膜完整率,并且水蛭素浓度越高,保存效果越好。因此,在本试验条件下,2.00 mg/mL是水蛭素在猪精液低温保存时的最佳添加浓度。     

猪精液冷冻过程中的脂质过氧化损伤

实验采集长白猪精液,分析猪精液中抗氧化酶活性及冷冻-解冻过程中精子抗氧化酶活性、精子质量与丙二醛(MDA)含量变化的相关性分析,研究猪精液冷冻过程中的脂质过氧化损伤。结果表明:新鲜猪精子和精浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性较高、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性较低,没有检测到过氧化氢酶(CAT);解冻后精子中SOD、GPX活性降低,SOD活性与鲜精相比差异极显著(P<0.01),精子中MDA含量极显著高于鲜精和平衡后精子(P<0.01)。精子中MDA含量与SOD、GPX活性、质膜完整率和顶体完整率呈负相关,但差异不显著(P>0.05),与活力和活率呈极显著负相关(P<0.01)。结果表明,在猪精液冷冻过程中SOD、GPX活性变化从一定程度上影响了猪精子脂质过氧化损伤,又引起精子活力和活率发生变化,继而影响精子的质膜和顶体完整性。     

猪常温精液品质检验

猪常温精液检测包括剂量、外观、精子活力、每剂量中直线前进运动精子数、精子畸形率和有效期等。一般应在检验前做好准备工作,主要包括实验室的环境温度(宜控制在20~25℃);所需器材均应加热到(37±1)℃;检查并确认所需试剂耗材、仪器设备是否齐全且运行正常;检查所需记录表格、笔以及采精记录等信息资料是否完整。     

海藻糖和维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响

试验比较了在冷冻稀释液中添加不同浓度海藻糖(0.025,0.05,0.1 mol/L)以及添加10 mg/L维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响.结果:(1)添加0.025 mol/L海藻糖组的精子冻后活率与复苏率分别跟对照组相比无显著差异(P>0.05),但添加浓度为0.05,0.1 mol/L的海藻糖组的精子活率和复苏率显著低于对照组(P<0.05).(2)在猪精液冷冻保存稀释液中,添加维生素C组的精子冻后活率和复苏率极显著高于对照组(P<0.01).表明在猪精液冷冻液中,添加0.025,0.05,0.1 mol/L 3种不同浓度的海藻糖对猪精液没有起到保护作用,其中后两者对之有降低的作用;而添加10 mg/L维生素C可取得较好的冷冻保存效果.     

巴马香猪精液冷冻保存研究

利用甘油和二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂,以精子存活率为评价指标,研究了冷冻保护剂对香猪精液冷冻保存效果的影响。试验分工、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个试验组和1个对照组。以解冻后的精子活力、活率为判断标准,比较了4种冷冻保护液对香猪精液冷冻保存的影响。结果表明,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组精子活率显著高于Ⅲ组（含5％甘油）（P〈0．05）;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间差异不显著（P〉0．05）;Ⅰ组精子活率最高,达到53．10％。     

不同品种纯种肉用绵羊精液检测试验报告

<正>精子活率的检测是精液品质检测的一项重要内容,活率的高低直接反映了精子质量和精子的生存能力,精子活率的降低将明显影响精子的受精能力。伊红-苯胺黑染色法和中性红染色法计算精子活率,其区别在于伊红Y为酸性染料,带有阴离子,可与带有阳离子的物质结合。死精子的细胞膜受到损伤,能渗透到精子内部与阳离子结合而呈红色;活精子细胞膜完整,伊红Y不能渗入细胞内而不着色。而中性红为水溶性染料,能通过活精子的     

水苏糖对猪精液冷冻保存效果的影响

为了提高猪精液冷冻保存效果．试验采用在传统的ZO稀释液基础上分别添加1％、2％、4％、8％的水苏糖的方法．研究不同浓度水苏糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明,水苏糖相对于ZO稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果,其最佳添加浓度为4％,冷冻一解冻后猪精子活力、活率、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高,水苏糖可以明显抑制精子获能,获能处理前精子获能率仅为32．4％,而获能处理后降为28．6％。有利于抑制精子获能,精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为3％,说明水苏糖与甘油共同作用能在冷冻一解冻过程更加有效地保护精子。     

一种精液净化保护剂对公猪精子活率的影响及对精液中5种病毒的杀灭作用研究

本实验检测了一种精液净化保护剂对公猪精子活率的影响,以及对存在于公猪精液中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CFSV)、细小病毒(PPV)和圆环病毒2型(PCV-2)5种猪病病毒的杀灭作用。用不同浓度的精液净化保护剂处理公猪精子,检测精子活率及存活时间。结果表明:当精液净化保护剂的浓度低于1.00%时,精子活率和精液存活时间都优于空白组;用不同浓度的精液净化保护剂处理5种猪病病毒,在非精液环境中,当净化保护剂的浓度分别不低于0.156%(PCV-2)、0.156%(PPV)、0.125%(PRV)、0.125%(PRRSV)、0.156%(CSFV)时,5种相应的病毒都能全部杀灭;在精液环境中,能完全杀灭这5种病毒的净化保护剂浓度分别不低于0.063%(PCV-2)、0.125%(PPV)、0.125%(PRV)、0.125%(PRRSV)、0.250%(CSFV)。实验结果表明,在浓度低于安全使用浓度范围内应用该精液净化保护剂,既能提高公猪精子活率、延长存活时间,又能完全杀灭公猪精液中的5种常见猪病病毒。