山羊早期胎儿组织TET1与Wnt通路基因的表达变化及其相关性

【目的】通过检测TET1和Wnt信号通路相关基因以及DKK家族基因在山羊胎儿发育早期的表达变化,分析TET1与Wnt通路基因的相关性,为TET1调控山羊胎儿发育研究提供理论依据。【方法】选取12只健康大足黑山羊母羊,自然发情后与同一只种公羊自然交配。采用剖腹产手术的方法,分别获得妊娠20、25、30、60和90d的胎儿,对胎儿的生长指标(体重、体长)进行统计,并采集了60和90d胎儿的组织器官样品(心、肝、肺、肾、脑、皮肤),通过Real-time PCR(RT-PCR)检测各样品中TET1基因,DKK家族基因(DKK1、DKK2、DKK3)和Wnt家族基因(Wnt2、Wnt2b、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt7b、Wnt16)的相对表达量。利用SPSS软件分析山羊胎儿发育早期不同阶段TET1与WNT信号通路相关基因相关性以及基因表达显著性(P0.05)。【结果】山羊妊娠早期胎儿生长在60d后有显著变化。荧光定量检测结果表明,TET1基因表达随妊娠天数的增加呈上升趋势。Wnt家族基因在山羊胎儿发育中都检测到表达(Wnt2,-2b,-4,-5a,-5b,-7b,-16)。其中,Wnt2和Wnt7b表达量随胎儿发育逐渐增高;Wnt2b、Wnt5a、Wnt5b、Wnt7b在妊娠30 d时有显著高表达(P0.05);Wnt4在胎儿发育20 d时表达显著(P0.05);Wnt16基因在妊娠25 d有显著高表达(P0.05)。DKK家族基因表达检测结果显示,DKK1在胎儿发育早期阶段都有表达,DKK2/3在妊娠初期表达量较低,后期表达增高。通过组织中基因表达检测显示,TET1在90d胎儿肝、肺、肾和脑中的表达水平相比于60d胎儿组织升高,肝中表达量显著(P0.05)。Wnt家族基因Wnt2在组织器官中有相对活跃的表达,妊娠90d胎儿肺中表达量极显著(P0.01);Wnt16基因在胎儿皮肤组织中表达显著(P0.05),且维持在一个较高的水平;Wnt5a和Wnt7b在肾中表达显著(P0.05),其他Wnt基因在组织中都有表达。相关性分析显示,胎儿生长指标(体重、体长)变化与TET1的表达呈极显著正相关(P0.01);TET1在胎儿发育早期的表达与Wnt2、Wnt7b、Wnt16呈现正相关,与Wnt2b、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b呈负相关,其中与Wnt5b呈显著负相关(P0.05),与Wnt7b呈极显著正相关(P0.01)。Wnt通路基因之间也有相互关系,Wnt2与Wnt4呈极显著负相关(P0.01)。Wnt2与Wnt7b,Wnt2b与Wnt5a、Wnt5b,Wnt5a与Wnt5b呈极显著正相关(P0.01)。Wnt4与Wnt5a呈显著正相关(P0.05)。【结论】获得了TET1与Wnt基因在山羊胎儿发育早期的表达模式,并进行了相关性分析,填补了这些基因在山羊方面的研究空白;TET1与Wnt基因对山羊胎儿早期的发育和组织的形成是一个动态的调控变化过程;TET1基因表达与部分Wnt基因呈现显著正相关,部分呈现显著负相关;Wnt通路基因之间表达量呈现一定的相关性。这些数据为TET1与Wnt分子调控山羊早期胎儿发育的机制深入研究提供了参考。     

山羊胚胎脊髓灰质的发育

对山羊胚胎脊髓灰质形成和发育的形态学变化进行了系统研究。结果表明 :山羊脊髓神经管闭合以后 ,其组织发生持续近 2 0 d才形成完整的 3层同心圆结构 ;山羊脊髓神经管的组织发生和脊髓灰质的形成在时间上有很大程度的重叠性 ;脊髓灰质各结构形成和发育的规律也不完全一致 ,有些结构发生早 ,而神经元分化较晚 ,如侧角、胶状质 ;有些结构发生虽然晚 ,但其中的神经元胞体分化和发育则较早 ,如 Clarke氏背核 ;有些结构发生早 ,神经元发育也早 ,如腹角运动神经元。     

关中奶山羊胎儿皮肤发育的组织形态观察

【目的】观察关中奶山羊胎儿皮肤及其衍生物在不同生长阶段的组织发育及生长变化。【方法】运用HE和Masson染色法以及透射电镜,对不同发育时期的山羊胎儿皮肤组织切片进行染色和观察。【结果】表皮于8~9周龄开始发育;10周龄表皮由3层细胞构成,真皮层出现胶原纤维,表明真皮层开始出现;在11周龄可见有原始毛囊出现,有少量张力原纤维存在,并发现朗格罕斯细胞;12~13周龄表皮细胞出现角化层、透明层及颗粒层的分化,可见汗腺;14~15周龄毛球上皮细胞索开始分化为外根鞘、内根鞘的原基和毛发的前体,在毛囊一旁出现皮脂腺,张力原纤维增多、变粗,并发现典型的桥粒结构;16~17周龄表皮层变薄,毛开始形成,并随着发育逐渐长出体表;18周龄皮肤结构渐趋成熟。【结论】山羊胎儿表皮的发生先于真皮发生,皮肤在胎儿期处于剧烈的分化阶段,皮肤衍生物的形成对皮肤的发生有重要作用。     

山羊胎儿成纤维细胞转染人t-PA指形区缺失基因及其核移植研究

采用阳离子脂质体法将人t-PA指形区缺失基因乳腺特异性表达载体(pEBT)导入山羊胎儿成纤维细胞,以山羊胎儿成纤维细胞和转染的山羊胎儿成纤维细胞作供体,构建核移植胚,对其体外发育情况进行了研究,比较了2种供体细胞(山羊胎儿成纤维细胞和转人t-PA指形区缺失基因的山羊胎儿成纤维细胞)及转人t-PA指形区缺失基因的山羊胎儿成纤维细胞饥饿处理与否对核移植胚胎体外发育的影响。结果表明,早期核移植胚有荧光蛋白(GFP)的表达;以山羊胎儿成纤维细胞作供体细胞时,核移植胚的桑葚胚率(50.3%)及囊胚率(16.0%)均高于以转人t-PA指形区缺失基因胎儿成纤维细胞为供体时的桑葚胚率(48.4%)和囊胚率(10.9%),但差异不显著(P>0.05);转人t-PA指形区缺失基因的山羊胎儿成纤维细胞经饥饿处理后,其核移植胚胎的卵裂率(73.6%)与不饥饿时的卵裂率(73.9%)差异不显著;饥饿处理后核移植胚胎的桑葚胚率(48.5%)和囊胚率(11.2%)均高于不饥饿处理的桑葚胚率(39.2%)和囊胚率(9.2%),但差异不显著(P>0.05)。本研究成功地构建了转人t-PA指形区缺失基因的体细胞核移植胚胎,体外囊胚率为11.2%。     

如何提高肉羊生长速度

一般饲养的肉山羊,12月龄体重不超过15千克,生长速度非常缓慢。要提高羊的生长速度,可采取以下技术措施： 1.搞好羊的杂交应引进体型大、产肉性能强的优良羊种与本地山羊杂交，大量繁殖杂种山羊，供农户饲养。杂种羊具有生长快，抗病力强，为羊的增重打下基础。     

绒山羊多头蚴病的诊治报告

多头蚴常寄生于牛羊脑和脊髓,引起疾病.脑多头蚴病又称脑共尾蚴或脑包虫病,主要寄生于绵羊、山羊、黄羊、牦牛、偶见于骆驼、猪、马以及其他野生反刍动物的脑和脊髓中,尤以两岁以下的绵羊易感,极少见于人.是危害羔羊和犊牛的一种重要的人畜共患寄生虫病.本病呈世界性分布,我国各省、市、区均有报道,但多呈地方性流行,并可引起动物死亡.     

《西北农业学报》2004年总目次

第 1期小尾寒羊群体遗传检测的研究杜　垒 ,常　洪 ,鲁生霞 ,孙　伟 ,角田健司 ( 1 )……………………………出生前山羊脑和脊髓的生长发育规律徐永平 ,卿素珠 ,张　涌 ,赵慧英 ,蒲　鹏 ,郑月茂 ( 5)……………不同种类菌糠组成全价日粮对生长育肥猪的饲喂效果吕亚军 ,张永弟 ,     

山羊下颌部寄生多头蚴病

多头蚴常寄生于牛羊脑和脊髓，引起疾病。脑多头蚴又称脑共尾蚴或脑包虫，主要寄生于绵羊、山羊、黄牛、牦牛，尤以两岁以下的绵羊易感。偶见于骆驼、猪、马以及其他野生反刍动物的脑和脊髓中，极少见于人。是危害羔羊和犊牛的一种重要的     

戴云山羊早期生长曲线的拟合与分析

为了探究戴云山羊早期生长发育规律,测定了戴云山羊从初生到6月龄的各项体重、体尺指标,分别采用Von Bertalanffy、Gompertz和Logistic 3种非线性生长模型拟合其生长曲线.结果表明:公、母戴云山羊在1月龄前生长较快,2～5月龄生长速度变缓,5～6月龄生长速度呈现增快趋势.通过比较拟合度(R2)发现...     

线粒体损伤对山羊-绵羊异种核移植胚早期发育的影响

【目的】研究线粒体损伤对核移植胚早期发育的影响。【方法】用经光敏化染料罗丹明-123损伤的山羊胎儿成纤维细胞和绵羊卵母细胞,构建山羊-绵羊异种体细胞核移植胚,于38.5℃、相对湿度100%、体积分数5%CO2条件下培养,统计其2-细胞期、8-细胞期和囊胚期的发育率。【结果】山羊核供体线粒体损伤并不影响囊胚期前核移植胚的发育率(P0.05);绵羊卵母细胞线粒体损伤,使核移植胚2-细胞期的发育率下降(P0.05),但不影响8-细胞期和囊胚期的发育率(P0.05);核供体和卵母细胞线粒体都损伤的核移植胚发育率的变化规律与卵胞质受体线粒体损伤的核移植胚一致。【结论】在异种核移植胚的早期发育中,核供体线粒体损伤不影响核移植胚的发育,但卵母细胞受体线粒体损伤明显影响核移植胚的发育率。     

支配山羊胸腺的神经纤维起源

用ＨＲＰ法研究证明,支配山羊胸腺的初级传入神经来源于双侧Ｃ１～Ｔ５ 脊神经节,以同侧为主;其标记神经元的分布呈双峰型;在双侧结状节也出现少量标记细胞,山羊胸腺的感觉经两侧神经传入,以交感途径占优势;交感节后纤维来自双侧颈前节、颈中节、星状节及Ｔ２～Ｔ５ 椎旁节,其中颈中节和星状节的标记细胞最多;在双侧Ｃ１～２节脊髓腹角和延髓疑核出现标记细胞较多,延髓迷走神经背核、面后核和脊上核出现较少的标记细胞。     

Origin of 5-hydroxyindoleacetic acid in the spinl fluid

5-Hydroxyindoleacetic acid applied intracisternally in cats does not appear in spinal fluid. Changes of 5-hydroxyindoleacetic acid concentration in the spinal cord are clearly reflected in the perfusate of the spinal subarachnoid space. Thus, 5-hydroxyindoleacetic acid in the spinal fluid originates from the spinal cord and reflects metabolic changes of 5-hydroxytryptamine in the spinal tissue, but not those in the brain.     

出生前山羊小脑皮质神经元超微结构的观察

应用超薄切片技术研究了第6周到出生前山羊小脑皮质神经元超微结构发育的变化。结果表明:(1)出生前山羊小脑皮质内颗粒层细胞在第10周龄以前一直处于未分化状态,第10周龄以后开始分化,但直到出生前山羊小脑皮质内颗粒层细胞内细胞器的种类和数量都增加缓慢。(2)小脑浦肯野氏细胞在第7周龄以前处于未分化状态;在第7周龄开始分化,第7～14周龄处于不成熟期;第15～18周龄浦肯野氏细胞处于发育成熟期,细胞内各种细胞器均出现并充满整个胞体,细胞核膜趋于成熟,核内常染色质发达,中央核仁发育成熟;浦肯野氏细胞自第19周龄开始进入成熟期,细胞内尼氏小体开始形成并发育,但其体积较小,界限不明显,这表明浦肯野氏细胞在出生前尚未完全成熟,出生后仍存在一个较长生后发育过程。     

Local anesthetic drugs: penetration from the spinal extradural space into the neuraxis

Local anesthetics, injected into the spinal extradural space, can be recovered from the spinal cord and brain. Transport from the extradural space into the neuraxis is independent of an active circulation. Distribution is greatest in the periphery of the cord and is most intense near the site of injection. The drugs probably diffuse into the subperineural spaces of the mixed nerves and then pass centripetally along the spinal roots into the cerebrospinal fluid and the cord.     

Cell recognition by neuronal growth cones in a simple vertebrate embryo

The mechanism that guides neuronal growth cones to their targets in vertebrate embryos has been difficult to study primarily because of the complexity and large number of neurons found in many vertebrate nervous systems. The spinal cord of a simple vertebrate, the fish embryo, is used to analyze pathfinding mechanisms. The early embryonic spinal cord consists of a relatively small number of identifiable neurons. From the beginning of axonal outgrowth the growth cones of these identified neurons extend along stereotyped and precise pathways in the spinal cord. Laser ablation experiments (i) support the hypothesis that early growth cones that pioneer specific spinal tracts appear to recognize cues on subsets of longitudinally arrayed neuroepithelial cells and (ii) demonstrate that later growth cones that selectively fasciculate in these spinal tracts appear to recognize cues on specific subsets of axons.     

Functional restoration of the traumatically injured spinal cord in cats by clonidine

The long-term, chronic, paralysis resulting from spinal cord injury in the cat has been reversed by the use of an alpha 2-adrenergic receptor agonist, clonidine. Administration of this drug resulted in "normalization" of sensory-motor and autonomic dysfunctions. Preliminary studies of the clonidine in humans with traumatically injured spinal cord indicate that autonomic dysreflexia can be controlled and spasticity minimized. The data suggest that biochemical and pharmacologic manipulation of receptors may ameliorate paralysis following traumatic injury to the spinal cord as well as to the brain and brainstem.     

关中奶山羊Prm1基因的克隆及真核表达

【目的】研究雄性奶山羊Prm1基因的表达规律并克隆该基因,为奶山羊精子发生过程的研究提供分子基础。【方法】利用PCR技术从关中奶山羊睾丸组织中扩增出Prm1基因的全CDS序列,对其进行同源性比较和进化比较。同时用PCR、western blotting及免疫组化技术检测Prm1在不同年龄雄性关中奶山羊睾丸中的表达。将克隆出的奶山羊Prm1基因与pIRES-GFP载体连接构建重组真核表达载体,转染GC1细胞和人的脐带基质细胞检测Prm1基因的超表达情况。【结果】Prm1基因在成年奶山羊睾丸组织中的表达量很高,且只定位于精子头部,在其它时期的睾丸组织中基本不表达。同时扩增得到了关中奶山羊Prm1 基因CDS序列,与其它物种比对,发现其与许多物种具有较高的同源性,与牛的同源性高达97.4%,最后在GC1细胞和人的脐带基质细胞中进行了超表达。【结论】得到了关中奶山羊Prm1基因的表达规律及完整的CDS序列。     

Nerve growth factor attenuates neurotoxic effects of taxol on spinal cord-ganglion explants from fetal mice

Most neurons in organotypic cultures of dorsal root ganglia from 13-day-old fetal mice require high concentrations of nerve growth factor for survival during the first week after explanation. These nerve growth factor-enhanced sensory neurons mature and innervate the dorsal regions of attached spinal cord tissue even after the removal of exogenous growth factor after 4 days. In cultures exposed for 4 days to nerve growth factor and taxol (a plant alkaloid that promotes the assembly of microtubules) and returned to medium without growth factor, greater than 95 percent of the ganglionic neurons degenerated and the spinal cord tissues were reduced almost to monolayers. In contrast, when the recovery medium was supplemented with nerve growth factor, the ganglionic neurons and dorsal (but not ventral) cord tissue survived remarkably well. Dorsal cord neurons do not normally require an input from dorsal root ganglia for long-term maintenance in vitro, but during and after taxol exposure they become dependent for survival and recovery on the presence of neurite projections from nerve growth-factor-enhanced dorsal root ganglia.     

水泡性口炎病毒人工感染小白鼠的免疫病理学研究

[目的]探讨水泡性口炎病毒在动物体内的致病机制。[方法]利用H.E、免疫组织化学染色法,研究了水泡性口炎病毒感染小白鼠的免疫病理过程。[结果]病变以肺脏变化最明显,脑次之,呈肺淤血、出血、水肿及支气管肺炎变化,大脑皮质有脓性坏死灶。免疫组化染色显示,肺、脑部和脊髓出现了阳性反应,脑的阳性率高。[结论]水泡性口炎病毒对小白鼠的致病性主要表现在肺脏和脑部。     

奶牛腰荐尾段脊髓灰质板层构筑的研究

本研究取８头初生黑白花奶牛的腰荐尾段脊髓，分节后横切成３ｍｍ厚的脊髓块。其中７例在切片剪用苯胺蓝或尼氏混合液的块染法作细胞染色；１例用Ｗｅｉｌ氏法作髓鞘染色。均作石蜡切片。结果表明：奶牛腰荐尾段脊髓灰质基本上象猫那样分为１０个板层，但在层的范围，形态，结构等方面也有自己的特点。本文还与其它一些动物和人的脊髓灰质板层构筑进行了比较。