膜荚黄芪愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

为了建立膜荚黄芪组培快繁技术体系,本研究以膜荚黄芪无菌试管苗的下胚轴为外植体,探讨不同激素种类及其浓度配比对愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率、再生苗生根率的影响,筛选适宜的培养基配方。结果表明:膜荚黄芪愈伤组织最佳诱导培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L,愈伤组织诱导率达86.4%,丛生芽分化的最佳培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,丛生芽分化率最高达91.6%,再生苗最佳生根培养基1/2MS+IBA 0.5 mg/L+IAA 1.0 mg/L,生根率最高达62.6%。本研究建立了膜荚黄芪组培快繁技术体系,为其种质资源保存及开发利用提供了有力的技术支撑。     

玉蝉花愈伤组织的诱导及植株再生研究

以玉蝉花的茎尖和嫩叶为外植体进行愈伤组织诱导和再分化研究,成功建立了通过茎尖愈伤诱导途径的植株再生体系。研究得出:玉蝉花茎尖诱导愈伤的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,最高诱导率为51.51%;不定芽诱导的培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+KT 1.0mg/L,分化率达到72.31%,平均分化不定芽数为5.81;不定芽生根最佳培养基为MS+NAA 1.5mg/L,生根率为100%。     

川续断愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

为解决川续断种苗快速繁殖的问题,需建立高效的组培苗再生体系。本研究利用植物组培技术,筛选川续断组培的最佳外植体,运用响应面优化法对川续断愈伤组织及丛生芽的诱导体系进行优化。结果显示,适合川续断组培的最佳外植体为幼苗叶片,最佳愈伤组织诱导培养基:MS+6-BA0.93mg/L+NAA0.64 mg/L+KT 0.55 mg/L,诱导率98.62%,不同激素对愈伤组织诱导率大小的影响顺序:NAA6-BAKT,不同激素组合对愈伤组织诱导率大小的影响顺序为:NAA+KTNAA+6-BA6-BA+KT;丛生芽诱导的最佳培养基:MS+6-BA 0.76 mg/L+GA_3 3.51 mg/L+IAA 0.93 mg/L,诱导率88.49%,不同激素对丛生芽诱导率大小的影响顺序为:GA_36-BAIAA,不同激素组合对丛生芽诱导率大小的影响顺序为:GA_3+6-BAGA_3+IAA6-BA+IAA;生根壮苗的最佳培养基:1/4MS+6-BA 0.1 mg/L+GA_3 0.5 mg/L+0.5%活性炭,生根率81.92%。本研究建立的川续断组培苗高效再生体系,可为下一步研发川续断快繁优质种苗提供关键技术资料。     

降香黄檀愈伤组织培养与植株再生研究

为了实现降香黄檀工厂化快速繁殖和扩大栽培,并为降香黄檀抗寒基因导入打下一定的基础,以降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖为外植体,MS为基本培养基,对各器官愈伤组织诱导与分化的最适培养基成分进行了研究。结果表明,可从降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖成功地进行愈伤组织培养和植株再生。茎段、叶片、根尖诱导愈伤组织的最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L、1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L和1/4MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;茎段、叶片、根尖的愈伤组织诱导丛生芽最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L、1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L和1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L;茎段、叶片、根尖来源的单芽,其最佳生根培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L和MS+NAA 2.0 mg/L。比较茎段、叶片与根尖的愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率和单芽生根率,得出以无菌实生苗根尖作为外植体是降香黄檀愈伤组织培养和植株再生的最佳选择。     

欧报春上下胚轴再生体系的建立

以欧报春(Primula vularis)种子上下胚轴为外植体,通过外植体的消毒、丛生芽诱导和增殖、生根、炼苗和移栽等技术的研究,筛选出各阶段的最佳培养基配方,从而建立欧报春的再生体系。结果表明:欧报春种子上胚轴能诱导出不定芽,但下胚轴不能。欧报春上胚轴不定芽诱导最佳培养基为MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 0.6 mg/L,诱导率达21.67%;丛生芽增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.6 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率达62.96%;生根最佳培养基为MS培养基,诱导率达95.59%;最佳移栽基质为草炭:珍珠岩=3:1(体积比)的混合基质,移栽成活率可达96.67%。     

野生软枣猕猴桃组织培养及褐变处理

以野生软枣猕猴桃嫩芽、幼嫩叶片以及茎段作为外植体,研究野生软枣猕猴桃组织培养整个过程,以建立快速高效的野生软枣猕猴桃再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片、茎段愈伤组织的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;诱导出愈伤组织在MS+0.6 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA培养基上能很好地分化不定芽苗;诱导幼芽产生丛生芽的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;较适宜的生根培养基为1/2MS。愈伤组织继代中发现细胞生长素NAA可以防止愈伤褐化。在愈伤组织分化中,发现将分化出的芽苗再次愈伤化,可以提高分化率。     

小盐芥下胚轴再生体系的建立

以小盐芥下胚轴为外植体,研究了不同激素与不同浓度组合对愈伤诱导和不定芽分化的影响。结果表明,MS 6-BA 2,4-D组合能诱导出愈伤,诱导率为100%。MS 6-BA NAA组合既能诱导出愈伤又能分化不定芽,愈伤诱导率为100%,激素不同浓度不定芽分化率不同,最佳分化培养基为MS 2.5mg/L 6-BA 0.1mg/L NAA,不定芽分化率为43%。生根培养基为1/2MS,生根率为74%。     

总状绿绒蒿组织培养再生体系的建立

本研究以总状绿绒蒿(Meconopsis racemosa)的种子、无菌苗的根及生长点为材料,以2,4-D、NAA、6-BA设置不同的激素配比,以建立其组织培养快繁体系。结果显示,用0.1%升汞溶液为消毒剂,5.5 min为最佳的消毒时间,此时的种子发芽率为56.7%;愈伤组织诱导培养：以种子为外植体诱导愈伤,MS+0.6 mg/L 2,4-D为最佳的培养基。以无菌苗的根为外植体诱导愈伤,进行暗培养,MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA为最佳的诱导培养基。以无菌苗的生长点为外植体诱导愈伤,并进行光培养,MS+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA为最佳的诱导培养基;愈伤增殖培养：由种子诱导愈伤的最佳增殖培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D。MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA是无菌苗的根诱导愈伤的最佳增殖培养基。MS和MS+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA为生长点诱导愈伤的最佳增殖培养基;生根培养：由种子、生长点诱导并增殖愈伤的最佳生根培养基为MS。本研究为总状绿绒蒿的快速繁殖和分子育种提供了基...     

附子茎段组培快繁体系的建立

为探讨附子丛生芽的诱导、增殖及不定根诱导条件。本研究以附子带腋芽茎段为外植体,以MS和1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA、TDZ、IBA等植物生长调节剂,观察附子丛生芽的诱导、增殖、生根情况。结果发现,附子茎段经75%乙醇处理30 s后,0.1%Hg Cl2灭菌10 min,污染率为27.78%,存活率可达84.61%。附子第三个腋芽,诱导率为53.34%,死亡外植体少。丛生芽在MS+6-BA 2 mg/L+NAA0.3 mg/L条件时诱导率为86.67%,芽长1.947 cm,植株茎干粗壮。增殖培养时添加TDZ 2 mg/L+NAA0.3 mg/L,增殖系数达到4.029,苗粗壮,叶片浓绿。生根培养基条件为1/MS+IBA 0.5 mg/L时,15 d的生根率可达100%,平均根长0.906 cm,平均根数10.5条,叶色翠绿,生长旺盛。研究表明,最佳的取材部位为第三个腋芽,丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L,丛生芽增殖培养基中添加TDZ 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L的增殖效果最好,适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L。本研究为附子快繁体系的建立和工厂化育苗提供了理论依据。     

三角梅无菌播种快速繁殖技术

以种子作为外植体,通过比较植物生长调节剂种类和浓度配比,建立三角梅的组培快繁技术。结果表明:种子在MS+蔗糖3%培养基中萌发;培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖3%有利于丛生芽的生长发育,30 d的增殖系数达到5.22;培养基MS+NAA 1.5 mg/L+蔗糖3%适宜诱导生根,生根率为95.56%,平均每株生根6.39条。     

多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)高效再生体系的建立

为建立多花黄精高效再生体系,试验以多花黄精种子无菌萌发后形成的幼芽为材料,采用正交试验设计,筛选其愈伤组织和不定芽诱导的较优配方,并进一步开展了不定芽增殖、生根和移栽驯化试验。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L有利于诱导无菌幼芽形成愈伤组织,诱导率达83.5%;不定芽诱导较好的培养基配方为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L和MS+6-BA3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,诱导率均为100%;不定芽增殖较好的培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,增殖系数达4.7;适宜的生根培养基配方为1/2MS+NAA 0.1 mg/L;组培苗移栽到蛭石∶泥炭土∶珍珠岩=1∶2∶1的混合基质中,成活率达100%。试验构建了以多花黄精种子为外植体的离体高效再生体系,为多花黄精种苗快速繁殖提供技术途径。     

马蹄金(Dichondra repens Forst.)组织培养和快速繁殖

为了探究马蹄金组织培养及快繁技术,本研究以马蹄金为材料,使用75%的酒精和10%NaClO对不同外植体(胚根,下胚轴,子叶)进行消毒处理,在不同激素浓度配比的MS培养基中进行丛生芽诱导、愈伤组织诱导及分化,成功建立了马蹄金的组培快繁体系。结果表明:利用马蹄金下胚轴为外植体直接诱导不定芽效果较好,其最适程序为:流水冲洗30 min+75%酒精30 s+10%NaClO 9 min,污染率为5%,成活率为75%;下胚轴不定芽诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导率为93.55%,出芽指数为8.86;胚根愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%,下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,诱导率为95.24%,子叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,芽诱导率为20%,平均芽数为12.83;组培苗诱导生根的最适培养基为不加激素的1/2MS培养基;生根苗以瓶盖全开的炼苗方式移栽到以河沙为基质的育苗盒中成活率为100%,且添加蒸馏水与自来水对植株生长并无明显影响。本研究成功建立了马蹄金组织培养与快繁体系,为马蹄金种质资源改良及优质种苗生产提供了技术参考。     

薄荷离体培养及植株再生的研究

以薄荷茎段为外植体,研究了不同植物激素对薄荷愈伤组织的诱导及其增殖、不定芽分化和诱导生根的影响。结果表明,愈伤诱导最适培养基为MS 6-BA1.5mg/L 2,4-D0.5mg/L NAA0.5mg/L,其愈伤组织生长良好;最佳愈伤增殖培养基为MS NAA1.0mg/L或MS IAA2.0mg/L,其褐化率均较低;最佳诱导分化培养基为MS 6-BA2.0mg/L NAA0.1mg/L,分化率达77%;生根培养基为1/2MS NAA2.0mg/L,且根较为粗壮。     

粉葛丛生芽诱导与增殖条件

为短期内获得大量优质的粉葛丛生芽,从而筛选粉葛丛生芽诱导的适宜条件。本研究以粉葛(Pueraria montana var. thomsonii)幼嫩带节茎段为外植体,探索外植体消毒条件,腋芽萌发培养基、丛生芽诱导培养基丛生芽增殖培养基。结果表明:(1)外植体最佳消毒条件为75%酒精浸泡30 s后,0.1%氯化汞溶液(加2滴吐温80℃)处理10 min,污染率为10.00%,腋芽萌发率为93.33%。(2)最佳腋芽生长培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭0.2 g/L,腋芽萌发率达93.33%。(3) MS+TDZ1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+酸水解酪蛋白200 mg/L为最佳丛生芽诱导培养基,丛生芽诱导率达90.00%。(4) MS+IBA 0.2 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L为最佳丛生芽增殖培养基,增殖系数为1.77。本研究结果可为基于丛生芽诱导的粉葛离体快繁体系建立提供依据。     

唐古红景天愈伤组织诱导及植株再生

为解决唐古红景天种质资源短缺问题,本研究建立了唐古红景天愈伤组织诱导及再生体系。以唐古红景天幼嫩的叶片、茎段和根为外植体,筛选出最优的外植体灭菌处理方法;探索愈伤组织诱导和增殖,不定芽诱导和扩增的最佳激素配比;观测不定芽的生根情况以及再生苗生长状态。结果表明：唐古红景天诱导愈伤组织的最佳外植体为叶片,愈伤组织诱导的培养基为MS₀+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率为85.37%;最佳愈伤组织增殖的培养基为MS₀+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,增殖率为62.5%;最佳不定芽诱导、扩增的培养基为MS₀+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为66.67%;不定芽在1/2MS生根诱导培养基中的生根率为42.5%,再生苗移栽于混合基质(泥炭∶珍珠岩∶蛭石=2∶1∶1)成活率为24.9%。该研究为唐古红景天种质资源的保存及人工栽培提供了有效的技术参数。     

红芽芋的丛生芽诱导和再生体系建立

本研究以红芽芋球茎的顶芽或侧芽为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素,进行组织培养试验,采用正交设计对影响红芽芋组织培养的丛生芽诱导进行优化,并建立红芽芋离体再生体系。研究结果表明:初代培养过程中MS+6-BA 1.5~2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L为丛生芽诱导最佳培养基;MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L为理想的继代增殖培养基;1/2MS+IBA 0.1~0.3 mg/L是最佳的生根培养基适于诱导生根获得再生植株。     

辽东楤木愈伤组织诱导及增殖技术研究

以辽东楤木茎尖、幼叶、嫩茎、休眠芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同种类和浓度的植物生长调节物质诱导丛生芽及再生植株,筛选出适合于辽东楤木组织培养的系列培养基配方.结果表明,愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L(或IAA0.2mg/L),幼叶为愈伤组织诱导的理想外植体,30d继代一次分化效率较高,达到73%;不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA1.0～1.5mg/L十IAA0.1～0.15mg/L+NAA0.1～0.15mg/L;不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L;按1∶1混配的蛭石与草炭为试管苗移栽最适基质.     

鞑靼忍冬再生体系的建立

以鞑靼忍冬的成熟种胚作为外植体,建立再生植株体系,结果表明:成熟种胚采用2%的NaClO溶液处理时,最佳消毒处理时间为6 min,存活率为75%。诱导愈伤组织以及诱导不定芽的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,愈伤组织诱导率为74.85%;不定芽诱导率为69.35%。增殖的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,增殖率为76.58%。诱导生根最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA,生根率为76.45%,平均根长为4.25 cm。通过组织培养再生植株,对其快速繁殖、种质资源保存和改良及规模化生产利用以及工厂化育苗技术研究提供理论基础。     

白魔芋快繁体系研究

以优良白魔芋新品种——大青秆不同组织为外植体,进行愈伤组织的诱导和植株再生,试验结果表明：以叶柄为外植体,污染率低,愈伤诱导率达85.71%,继代培养中以MS+BA2mg/L+NAA0.01mg/L作为芽分化增殖的最佳培养基,将芽转接到MS+NAA0.5mg/L生根培养基上诱导生根,生根率达100%。     

红茄子叶和下胚轴离体再生体系研究

本研究以红茄的子叶和下胚轴为外植体,研究其子叶和下胚轴在不同激素的浓度和组合下分化率及再生频率的变化。在诱导愈伤组织时,低浓度的NAA和高浓度的6-BA会导致下胚轴的诱导能力略低于子叶;IAA和ZT的浓度升高时,红茄下胚轴的分化率随之增加,红茄子叶的分化率随之降低。在IAA浓度为0.3 mg/L时,不定芽分化率达到最高;诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA;不定芽诱导最佳培养基为MS+0.3 mg/L IAA+2.0 mg/L 6-BA;不定芽生根最佳培养基为1/2MS。本研究建立的红茄再生体系,为红茄遗传转化研究奠定了基础。