DFRKN-1碱性磷酸酶的纯化研究

以根结线虫天敌1号分离物为提取碱性磷酸酶的材料,菌体经液氮研磨破碎后,用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀分离,透析获得酶的粗提取液.再经过DEAE-52离子交换和SephadexG-150分子筛两步层析得到纯化倍数为27.17、比活力达10 514U/mg的碱性磷酸酶.     

鸡血浆碱性磷酸酶变化规律的研究

用磷酸苯二钠法测定新扬州鸡碱性磷酸酶水平,结果表明家系间、性别间和同功酶类型间有显著差异;随日龄增加逐渐下降,开产前回升;产蛋后4—5h升至最高,之后,逐渐下降,20h降至最低;采食后,血浆碱性磷酸酶水平很高,6—18h降至较低水平,旦相对稳定。聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果表明该酶同功酶可分为F型(含有AKP~(?)带)和S型(含有AKP~(?)带)。一般情况下,F型酶和S型酶各具2条带,其相对含量随日龄明显变化。     

罗非鱼碱性磷酸酶的化学修饰

采用PMSF、PCMB、NBS、TNBS、SUAN、DTT、IAc、BrAc等化学修饰剂在一定的条件下选择性修饰罗非鱼ALP,研究罗非鱼ALP分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系.结果表明:PMSF、NBS等两种化学修饰剂能显著抑制酶的活力,而PCMB、TNBS、SUAN、DTT、IAc、BrAc等对酶的活力影响不大.说明对丝氨酸残基、色氨酸残基的化学修饰后对酶的活力影响很大,而酶分子中的其他功能基团不在酶的活性中心,修饰后对酶的活力影响不大.     

中性粒细胞碱性磷酸酶染色在血液病诊断中的应用

目的 探讨中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色在血液系统疾病患者诊断与鉴别诊断中的应用意义.方法 对366例血液系统疾病患者的血涂片用改良戈氏钙-钴法进行染色并作积分判断,并以30例健康体检者作正常对照.结果 急性髓细胞白血病(AML)、慢性粒细胞白血病(CML)慢性期和加速期、巨幼细胞贫血患者的NAP阳性率和积分均明显低于正常对照组(P＜0.01);而急性淋巴细胞白血病(ALL)、骨髓增殖性疾病MPD、再生障碍性贫血(AA)、淋巴瘤白血病期、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、类白血病患者的NAP阳性率和积分则明显高于正常对照组(P＜0.01),且以类白血病者最高;CML急变期、嗜酸细胞增多症、骨髓增生异常综合症(MDS)者与正常对照组比较则差异无统计学意义(P＞0.05).结论 根据NAP活性的特性在很多血液疾病中都可以把其作为诊断及鉴别诊断的判断指标.     

鸡品种血浆碱性磷酸酶多态性研究

用改进的聚丙烯酰胺凝胶系统对 6个鸡品种的血浆碱性磷酸酶 ( AKP)进行了多态性检测 ,共检测到 13个区 (或位点 ) ,并对 7个区进行了表型、基因型和基因频率的统计和计算。在AKP位点检测到快、慢两条带 ,肉鸡 AA和伊莎褐均表现为快带     

碱性磷酸酶在动物骨骼代谢中的研究进展

碱性磷酸酶（ALP）活性是反映骨骼代谢的一项重要指标。文章就ALP的分子结构特点、生理功能以及影响因素等作一综述,以期为科学地监测和预防肉鸡骨骼代谢疾病提供理论依据。     

紫贻贝中碱性磷酸酶动力学特性研究

通过硫酸铵分级沉淀技术,从紫贻贝中分离提取出碱性磷酸酶。酶促动力学试验结果表明,碱性磷酸酶的最适作用p H值为9.0,最适作用温度为37℃;碱性磷酸酶在p H值5.5~7.5的偏酸性范围内不稳定,而在p H值8.5~9.5的偏碱性范围内较稳定;碱性磷酸酶的稳定性随温度的增加而减弱,在60℃加热60 min后其酶活仍保留47.5%,说明该酶对热具有一定的耐受力;37℃时碱性磷酸酶的动力学参数为:Km=0.09 mmol/L,rmax=0.22 mmol/(L·min)。     

猪小肠碱性磷酸酶提取与性质研究

碱性磷酸酶是酶标技术较理想的标记物。我们本着原料来源广泛,研究了猪小肠粘膜制备碱性磷酸酶方法。其活力在20000单位/mg,经聚丙烯酰胺凝胶园盘电脉,呈现一条粗蛋白带和两条细蛋白带。酶染色粗带呈现特异活性。将该酶标记在兔抗猪 IgG、羊抗人 IgG,羊抗兔 IgG 制成结合物。分别用 ELISA 间接法检测猪旋毛虫,人血吸虫,兔血吸虫等均获得满意结果。并与辣根过氧化物酶比较结果一致。碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase 称 AKP)广泛存在哺乳动物各脏器中。文献报     

黄鳝内脏碱性磷酸酶功能基团的初步研究

经Tris—HCl缓冲液（pH8．6）抽提,正丁醇脱脂,硫酸绥分级沉淀分离,DEAE—Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200柱层析,从黄鳝内脏中提取出电泳纯的碱性磷酸酶。用PCMB,NBS,PMSF,TNBS,SUAN,DTT及IAA在一定条件下选择性修饰该酶的各种氨基酸残基,并对酶活力的变化作出测定。结果表明,PMSF,NBS,TNBS,SUAN和DTT的修饰能显著抑制酶的活性,且酶活力降低程度与修饰别的浓度相关;IAA和PCMB的修饰不表现对酶的抑制作用。初步认为,Ser,Lys和Trp残基为黄鳝碱性磷酸酶的必需功能基团,部分二硫键对保护酶的催化能力是必需的。     

酵母菌碱性磷酸酶的分离及部分性质研究

提取酵母菌中的碱性磷酸酶,并对其性质做出分析.结果显示酶促反应最适pH值为10.3,初速度 V0=0.01367μmol/L·min,以对硝基苯磷酸二钠(pNPP)为底物测得Km=0.535mmol/L、Vm=0.01429μmol/L.较低浓度的Mg2 对酶有较强的促进作用,2mmol/L时达到641%,磷酸氢二钠对碱性磷酸酶有竞争性抑制作用.     

黄鳝内脏碱性磷酸酶功能基团的初步研究

经Tris-HCl缓冲液(pH 8.6)抽提,正丁醇脱脂,硫酸铵分级沉淀分离,DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200柱层析,从黄鳝内脏中提取出电泳纯的碱性磷酸酶.用PCMB,NBS,PMSF,TNBS,SUAN,DTT及IAA在一定条件下选择性修饰该酶的各种氨基酸残基,并对酶活力的变化作出测定.结果表明,PMSF,NBS,TNBS,SUAN和DTT的修饰能显著抑制酶的活性,且酶活力降低程度与修饰剂的浓度相关;IAA和PCMB的修饰不表现对酶的抑制作用.初步认为,Ser,Lys和Trp残基为黄鳝碱性磷酸酶的必需功能基团,部分二硫键对保护酶的催化能力是必需的.     

免疫组化法在脂肪移植体内微血管定量研究的应用

目的：探讨免疫组化法在脂肪移植体内微血管定量研究的应用价值。方法：利用内皮细胞特异性标记ＣＤ３４抗原,通过免疫组化法显示微血管,对不同时期脂肪移植体按周边区和中央区划分,进行微血管的定量研究。结果：免疫组化法染色后血管呈棕黄色,切片背景清晰。周边区血管密度在移植后１４ｄ达最高,２８ｄ组高于７ｄ组;中央区血管密度逐渐增高;各期血管密度均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。同一时期周边区血管密度高于中央区,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论：免疫组化法显示微血管清晰、可靠,便于统计分析,在定量研究脂肪移植过程中的血管生成方面具有实用价值     

免疫组化法在脂肪移植体内微血管定量研究的应用

目的：探讨免疫组化法在脂肪移植体内微血管定量研究的应用价值。方法：利用内皮细胞特异性标记ＣＤ３４抗原，通过免疫组化法显示微血管，对不同时期脂肪移植体按周边区和中央区划分，进行微血管的定量研究。结果：免疫组化法染色后血管呈棕黄色，切片背景清晰。周边区血管密度在移植后１４ｄ达最高，２８ｄ组高于７ｄ；中央区血管密度逐渐增高；各期血管密度均有显著性差异（Ｐ〈０．０１）。同一时期周边区血管密度高于中央区，差     

不同价态砷的土壤碱性磷酸酶效应研究

【目的】砷是土壤污染的主要元素之一,研究As5+、As3+单一和复合污染对土壤碱性磷酸酶活性的影响,揭示其对土壤碱性磷酸酶的作用机理,为砷污染监测提供理论依据。【方法】采集江西鹰潭红壤、陕西榆林风沙土、陕西杨凌土娄土各2个肥力水平的土样为供试土壤,采用室内模拟法,研究不同含量As5+、As3+以及二者复合污染下供试土壤碱性磷酸酶活性的变化。【结果】As5+和As5++As3+均能抑制土壤碱性磷酸酶活性,随As5+和As5++As3+含量的增加,相对碱性磷酸酶活性持续减小;采用模型E=A/(1+B×C)可较好表征相对碱性磷酸酶活性(E)与砷含量(C)间的关系(A、B为参数),揭示出土壤碱性磷酸酶活性可作为表征土壤As5+和As5++As3+污染程度的监测指标,且As5+和As5++As3+对碱性磷酸酶活性的作用机理为完全抑制作用(包括竞争性抑制和非竞争性抑制)。As3+对土壤相对碱性磷酸酶活性影响较小。As5+与As3+之间存在一定的交互作用,除了低肥力水平红壤及土娄土中As5+和As3+含量均小于50mg/kg时二者表现为协同作用外,在其他供试土壤中均为拮抗作用。不同供试土壤As5+的生态剂量ED10和ED50差异较大,砷对土壤造成轻度污染的含量为25mg/kg。【结论】土壤碱性磷酸酶可作为土壤As5+及As5+与As3+复合污染程度的监测指标。     

鸡血浆碱性磷酸酶与生产性能关系的研究

用磷酸苯二钠法测定新扬州鸡血浆碱性磷酸酶水平,发现早期酶水平与产蛋量、总蛋重等生产性能呈强的负相关,与各时期体重、开产蛋重和开产日龄等生产性能呈强的正相关.早期酶水平遗传力均在0.5—0.7之间.聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明该酶同功酶可分为F型(含有AKP~F带)和S型(含有AKP~S带).F型鸡具有体重大、开产晚、产蛋少和蛋重大的特点,而S型鸡的特点则相反。     

鲤鱼消化道粘液物质及碱性磷酸酶的组织化学研究

本文用组织化学方法对鲤鱼食道、肠粘液物质及碱性磷酸酶进行了研究。食道、肠杯状细胞均含中性粘液和延粘液，肠部分杯状细胞还含有硫酸粘液。含硫酸粘液的杯状细胞随前、中、后肠逐渐增多，其中硫酸粘液的含量在后肠杯状细胞中最高。前、中、后肠吸收细胞核上方胞质和纹状缘含有发达的碱性磷酸酶。肠上皮中有嗜酸性颗粒细胞，其颗粒含有中性粘液和碱性磷酸酶。     

脂多糖对三角帆蚌酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活力的影响

对三角帆蚌注射脂多糖后,分别于6、12、24、48、72和96 h测定其血清中酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)的活力。结果显示,2种酶活力均呈先升后降的趋势,其中ACP活力在所有时间段内(6~96 h),试验组均显著高于对照组;而AKP活力在12~72 h时,试验组的AKP活力均显著高于对照组,表明脂多糖(LPS)诱导刺激对三角帆蚌血清中的ACP和AKP活力有激活增强作用。     

鸭肝碱性磷酸酶的分离纯化及其部分性质研究

经过匀浆、正丁醇除脂、硫酸铵分级分离、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤等步骤,从鸭肝中分离纯化出电泳纯的碱性磷酸酶,该酶纯化倍数达58．3倍,比活为337．4U／mg．经SDSPAGE和凝胶过滤测得该酶的全分子量为121．0kD,亚基分子量为60．5kD．以磷酸苯二钠为底物,测得该酶的最适pH为9．0,最适温度为40℃．Na^＋、K^＋、Li^＋等一价离子对该酶活性基本无影响,Mg^2＋、Mn^2＋对该酶活性有激活作用,Cd^2＋对该酶活性有抑制作用．米氏常数Km为1．28mmol／L．