改进的盐溶蛋白电泳法鉴定玉米品种农大108种子纯度及品种真实性

本试验在<玉米种子纯度盐溶蛋白电泳鉴定方法>的基础上,通过对分离胶中丙烯酰胺和N,N-亚甲基双丙烯酰胺的浓度进行研究,建立了一种适合于鉴定玉米品种农大108种子纯度和品种真实性的方法.结果表明,该方法对农大108的种子纯度和品种真实性进行检测,具有电泳谱带清晰、分辨率高和重现性好等特点.     

酚染色法检验小麦品种纯度的可靠性分析

用1％邻苯二酚溶液处理20个小麦品种（系）进行纯度检验，并与田间纯度检验进行比较，发现过高地估计了品种纯度；而用0．125％邻苯二酚溶液处理这20个品种，又过低地估计了品种田间纯度。对另外4个品种用0．125％邻苯二酚处理，染成浅色和黑色种子进行穗发芽抗性鉴定，发现与PPO活性密切相关的穗发芽抗性存在较大的变异。对18个小麦杂交组合的F2种子用0．125％邻苯二酚处理，分别将浅色和黑色F2种子种植并测定株高，结果表明：PPO活性与株高并无相关性。实验证明酚染色法检验小麦品种纯度尚缺乏准确性，需进一步完善。     

蛋白质电泳纯度鉴定图谱的保存与使用技术

种子室内纯度鉴定是从种子中提取蛋白质，在聚丙烯酰胺凝胶的浓缩效应、分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下得到良好的分离，通过染色显示蛋白质谱带类型，不同的品种由于遗传组成不同，种子内所含的蛋白质种类有差异，这种差异可利用电泳图谱加以鉴别，从而对种子真实性和纯度进行鉴定。而聚丙烯酰胺凝胶暴露在空气中会很快失水萎缩，     

种子企业应用SSR分子标记鉴定棉花品种真实性和种子纯度

阐述了利用SSR分子标记鉴定品种真实性和种子纯度的基本原理,剖析了中棉种业科技股份有限公司利用SSR分子标记鉴定品种真实性和种子纯度的实践过程,指出了利用SSR分子标记鉴定品种真实性和种子纯度在企业中发挥的作用。     

杂交水稻品和真实性和纯度的SSR分子标记鉴定

本研究以459份杂交水稻为研究材料,分别用SSR分子标记、田间小区品种纯度正季鉴定法鉴定杂交水稻品种真实性和纯度,以田间小区品种纯度鉴定结果为对照,比较SSR分子标记鉴定方法的准确度.研究结果表明,SSR标记法与田间正季鉴定结果基本一致,两种鉴定方法的真实性鉴定结果完全一致,两种鉴定方法的纯度值最大相差8.8％,平均差距为0.7％.实验结果表明SSR分子标记法能准确、快速地鉴定杂交水稻品种真实性和纯度.     

玉米杂交种小区种植鉴定技术

玉米杂交种纯度小区种植鉴定是目前鉴定玉米杂交种纯度最准确、最可靠的办法。即利用大棚对市场销售的玉米杂交种进行当地异季种植，根据品种描述判定其品种真实性，及鉴定种子样品纯度是否符合国家规定标准或种子标签标注值的要求。     

棉花品种基因纯度和特异性的SSR标记分析

为从分子水平上鉴定棉花品种的纯度和真实性,采用扩增带型清晰,多态性较高的SSR引物对51个常规棉品种进行了基因纯度鉴定、遗传聚类分析和品种特异性鉴定。基因纯度鉴定结果显示,69%的品种基因纯度较好,基因纯度在90%以上;12%的品种基因纯度较差,基因纯度在80%以下。聚类分析结果表明,所有品种分为2个大类和4个亚类,这反映出品种间的遗传基础较窄。品种特异性鉴定中,以遗传距离阈值T=0.01为划分标准,83%的品种具有特异性。这说明利用SSR标记可以有效鉴定棉花品种的基因纯度和特异性。     

辣椒F1杂种遗传纯度的种子蛋白、同工酶与RAPD鉴定

采用SDS-PAGE电泳技术对辣椒F1杂种02—16及其亲本种子蛋白进行分析，杂种纯度为96．0％；苗期真叶POD同工酶电泳也可明显区分假杂种，纯度检测结果为96．7％。研究了Mg^2 、dNTPs浓度对扩增结果的影响，建立起适合辣椒的RAPD-PCR体系；从91个引物中筛选出父母本有差异的引物3个，利用引物N5对F1纯度进行初步鉴定，检测结果为95．5％。3种方法检测与田间小区鉴定结果96．2％基本一致，表明这3种方法可作为辣椒F1杂种02-16纯度快速鉴定的有效手段。RAPD分析还揭示了辣椒栽培种内遗传多样性较低。     

利用SSR方法鉴定大豆品种纯度

本研究以遗75—14，中黄14，中品662和中品661共4个品种为试验材料，利用不同连锁群上的SSR引物对其随机选择个体进行分析，以确定分析品种纯度所需的引物数，为大豆品种资源的保存及品种指纹图谱的建立提供理论依据。通过11对SSR引物对遗75—14，中黄14，中品662各10个单株的检测，发现中品662纯度最高，遗75～14次之，而中黄14的纯度最低。用SSR引物对中品661和中品662每10个单株混合样品分析并经单株检测验证，其纯度分别为99．0％和98．3％，研究结果表明，10个植株混合时，即使有一个单株为杂合位点也能被检测出来，并发现用3—5对位于不同连锁群的SSR引物可以对随机或混合样品进行快速、准确的纯度鉴定。     

利用SSR标记鉴定结球甘蓝杂交种真实性及纯度

本研究利用公开发表的50对甘蓝SSR引物对5份结球甘蓝杂交种构建指纹图谱,对新调入的4个批次结球甘蓝杂交种与对照品种是否属于同一品种(即真实性)进行鉴定,并依据指纹图谱筛选双条带引物,对其中某一批次的10份杂交种进行纯度鉴定。指纹图谱鉴定结果表明:新调入4个批次杂交种中有3个批次与对照属于同一品种,1个批次与对照属于不同品种,与田间形态鉴定结果完全吻合。利用筛选出的SSR标记对10份甘蓝杂交种进行纯度鉴定,其中8份鉴定结果与田间形态鉴定结果一致,两种鉴定方法显著相关。本研究为利用SSR标记进行甘蓝杂交种真实性及纯度鉴定的实践可行性提供理论依据和参考。     

顽拗植物龙眼果皮中总RNA的提取方法研究

[研究目的]为建立适于富含多糖和多酚等物质的龙眼果皮总RNA提取的方法;[方法]采用TRIZOL法、Tris-硼酸法和改良CTAB法提取龙眼果皮的总RNA,并通过凝胶电泳、紫外分光光度法检测提取的RNA样品的品质;[结果]改良CTAB法、Tris-硼酸法所提取的RNA经电泳检测,28SrRNA和18S rRNA条带清晰,RT-PCR得到的条带与目的片断大小一致,说明所提取的RNA纯度高、质量好;TRIZOL法所得到的RNA降解严重,没有得到完整的电泳条带;[结论]改良CTAB法和Tris-硼酸法适于富含多糖和多酚等物质的龙眼果皮总RNA的提取.     

小麦品种的蛋白电泳鉴定

由于小麦不同品种的种子含有不同的麦醇溶蛋白(gliadin),因此利用聚丙烯酰胺凝胶电泳可以分析比较不同品种的小麦。这种方法不受栽培条件的影响。本文分析了25个不同品种小麦的麦醇溶蛋白 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱,并对乙醇、脲提取的麦醇溶蛋白电泳图谱进行了比较,结果表明不同品种小麦麦醇溶蛋白电泳图谱差异明显,将疑胶     

一种适于PCR扩增的蓖麻基因组DNA提取方法

报道了一种从蓖麻叶片中提取DNA的改良SDS方法,该方法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测,获得的DNA条带较亮且无明显拖尾现象。利用ISSR引物对提取的蓖麻基因组DNA进行PCR检测,能够获得清晰稳定的条带。说明该方法提取的蓖麻基因组DNA能够满足PCR反应的需要。     

转基因玉米深加工产品中DNA提取方法的研究

对转基因玉米深加工产品中DNA的提取技术进行了研究。首先,通过经典CTAB法、CTAB初步改良法、CTAB有效改良法和煮沸法等4种方法提取了玉米片和爆米花中的DNA;其次,用琼脂糖电泳检测法将DNA进行了分离;再次,用紫外可见分光光度法检测出4种方法提取的DNA的纯度。结果表明,4种方法中的CTAB有效改良法提取DNA的完整性、纯度更好。     

栀子高质量总RNA的提取

利用改进的高盐高pH值法和EASYspin植物RNA快速提取试剂盒,从富含次生代谢产物的栀子叶片和果实中提取总RNA。用紫外分光光度法和1%非变性琼脂糖凝胶电泳检测总RNA质量,0.7%非变性琼脂糖凝胶电泳检测反转录产物质量,利用RT-PCR反应检测反转录产物用于基因扩增的有效性。结果表明,高盐高pH值法提取的栀子果实总RNA,试剂盒法提取的栀子叶片总RNA产量均较高,28S和18S条带清晰,28S条带亮度是18S条带的2倍,且A260/A280在1.9~2.0;以提取的RNA为模板反转录的cDNA长度范围较广(250~5000 bp);上述反转录获得的cDNA均能够成功用于60S核糖体蛋白L18A基因片段的扩增。综上所述,利用高盐高pH值法提取栀子果实总RNA、利用EASYspin植物RNA快速提取试剂盒提取栀子叶片总RNA,效果最好。本研究成功建立了从栀子果实和叶片中提取高质量总RNA的方法。     

PCR方法与其他快速检测乳中金黄色葡萄球菌方法的比较

对乳中金黄色葡萄球菌进行PCR与2种快速检测致病性金黄色葡萄球菌的培养基以及GB4789.10—94方法进行比较,结果表明,PCR方法的敏感性为100%,特异性为85%,符合率为90%;petrfilm RSA方法的敏感性为100%,特异性为95%,符合率为96.7%;Baird-Parker RPF方法的敏感性为100%,特异性为90%,符合率为93.3%。     

血红鸡爪槭叶片总RNA提取方法的比较研究

血红鸡爪槭叶片中富含多糖、多酚物质,严重影响了RNA提取纯度和质量。为了获得适宜血红鸡爪槭叶片总RNA提取的方法,采用柱式植物RNAout法、TRIZOL法和改良CTAB法3种提取方法对其叶片总RNA提取效果进行比较分析。结果显示,采用柱子法提取获得的总RNA产率最高,但是有DNA污染;TRIZOL法提取的总RNA OD260∕OD280为1.65,可能有多糖和酚类物质的污染,并且产率最低;改良CTAB法提取的总RNA纯度很高,OD260/OD280平均值在2.0左右,产率在上述两种方法之间,电泳图清晰,而且改良CTAB法提取的总RNA,经RT-PCR获得了清晰的特异性条带。表明改良CTAB法提取的总RNA纯度和产率高,完全可以满足进一步分子生物学研究的需要,是血红鸡爪槭叶片总RNA提取的适宜方法。     

不同年代棉花品种产量构成、纤维品质及其系谱分析

对５０年来我国自育的有代表性的棉花品种２０份进行了比较研究，结果表明，棉花单产呈递增趋势，９０年代棉花品种比５０年代品种皮棉增产１７．７３％，平均每年增产皮棉３．３８４ｋｇ·ｈｍ－２，产量增加主要是衣分和单株结铃数增加所致，衣分呈递增趋势，年均递增０．１００２个百分点；单株结铃数增加１．６个。新品种的子指变小，衣指变大；棉花衣分与皮棉产量呈显著正相关（ｒ＝０．７００３＊＊），衣分对棉花产量贡献最大（ Ｐ３ｙ＝０．５８１０），单株铃数次之（Ｐ１ｙ＝０．２８５８），铃重最低（Ｐ２ｙ＝０．１３２６）。棉花纤维品质逐步得到改良，绒长变长，纤维强度变大；棉花遗传基础狭窄。     

烟草感染青枯菌前后POD及同工酶的变化

【研究目的】对烟草感染青枯菌前后的根、茎、叶内过氧化物酶（POD）及同工酶进行比较研究,为抗病育种提供理论基础。【方法】采用比色法测POD酶活,用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）进行POD同工酶的比较。【结果】对烟草感染青枯菌前后,酶活性测定结果表明,烟草叶部POD活性显著高于根部和茎部。烟草接菌后,根、茎、叶内的POD活性均在第3天升至最高,而叶内比对照增高了29.67%。同工酶电泳分析表明,烟草接菌后的同工酶谱带,在条带的数目、种类和各条的相对活性上表现出差异。【结论】POD作为植物的保护酶类,随植物抵抗疾病的过程变化而变化,故与植物抗病性密切相关     

野生香蕉叶片总RNA提取方法研究

采用TRIZOL试剂盒法、RNAsio试剂法和改良CTAB法提取香蕉叶片总RNA,并通过凝胶电泳、紫外分光光度法检测提取的RNA样品的质量。研究结果表明：改良CTAB法提取的RNA具有28SrRNA和18SrRNA两条清晰的条带,OD260／OD280在1.80-1.95之间,OD260／OD230在1.75-2.10之间,具有较高的纯度;其它两种方法获得的RNA纯度不够,降解严重。将提取的RNA分别逆转录成cDNA,经RT-PCR扩增,只有改良CTAB法出现清晰的条带,进一步证明改良CTAB法提取的RNA具有很高的纯度,可以满足进一步分子生物学研究的要求。