生防链霉菌SAT1的分离、鉴定及其对辣椒疫霉的生物防治潜力

辣椒疫霉引起的植物病害使农业遭受了巨大的经济损失,环保、经济实用的混合微生物菌剂防治策略是当前的最新发展趋势.试验从6种药用植物分离得到15株植物内生菌,平板拮抗实验筛选得到拮抗链霉菌SAT1,经鉴定为Streptomyces anandii,其发酵液粗提物和挥发性物质对辣椒疫霉菌丝生长有明显抑制作用.接种链霉菌SAT1的孢子液可提高辣椒苗对辣椒疫霉的抗性并明显促进辣椒苗的生长.     

青海高原东部土壤辣椒疫霉生防菌的初步筛选

以辣椒疫霉为病原靶标菌，采用平皿体外筛选法分离到在皿内对辣椒疫霉有明显拮抗作用的放线菌17株，细菌及霉菌各3株；经辣椒盆栽接种复筛从中筛选出有明显抗病作用的放线菌7株，细菌和霉菌各1株；经鉴定，6株放线菌为链霉菌，霉菌为曲霉属疏展曲霉，1株放线菌和细菌未鉴定。     

链霉菌和壳寡糖对辣椒幼苗生长发育的影响

为了探究链霉菌30702和壳寡糖对辣椒种子萌发和幼苗生长的影响,采用浸种方法和穴盘育苗法,研究了链霉菌(3个浓度水平)、壳寡糖(2个浓度水平)对辣椒出苗质量及幼苗形态和生理的影响。结果表明,采用链霉菌和壳寡糖浸种后,辣椒的出苗率、株高、茎粗、根长、叶面积、壮苗指数、总干质量、可溶性糖、可溶性蛋白等含量显著提高,萎蔫指数显著降低,影响程度随链霉菌使用浓度的增加而增大,且链霉菌的作用大于壳寡糖;链霉菌1.2×10⁷ cfu·mL^-1和壳寡糖100 g·L^-1的复合处理的生长发育最佳,萎蔫指数最低,且此复合处理在主成分分析中的综合得分最高;交互作用分析结果表明,除总干质量和壮苗指数外,链霉菌和壳寡糖均有显著的交互作用。综合结果表明,链霉菌30702对辣椒的种子萌发有促进作用,有利于辣椒幼苗的生长,链霉菌与壳寡糖之间有交互效应。     

几种杀菌剂抑制辣椒疫霉孢子囊形成的室内测定结果

在室内测定了甲霜灵等１０种杀菌剂对辣椒疫霉（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｃａｐｓｉｃｉ）孢子囊形成的抑制作用,测定结果表明,甲霜灵,甲霜锰锌,磷酸乙酯,乙磷铝对辣椒疫霉孢子囊的形成具有很强的抑制作用,但该菌对这几种杀菌剂的适应浓度范围较宽,硫酸铜,霜疫必克,克抗灵,冠菌铜在较高浓度下对才能在辣椒疫霉孢子囊的形成有抑制效果,该菌以壕几种杀菌的适应浓度范围要对较窄。     

辣椒疫霉在土壤中的季节性变化和存活

对辣椒疫霉（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｃａｐｓｉｃｉＬｅｏｎｉａｎ）在上海市郊蔬菜土地壤中的季节性变化和垂直分布进行了研究,结果表明,辣椒疫霉在一年中季节性的种群数量变化与温度的关系最密切,土壤中多菌量出现的时间也是病原菌生长的最适温度（２５～２８℃）出现的时间,也正值该地的夏,秋季节,Ｐ．ｃａｐｓｉｃｉ在土壤中主要分布的地表１０ｃｍ的土层中,１０ｃｍ以下土层的菌量较少,当土壤中存有Ｐ．ｃａｐｓｉｃ     

广东柑橘疫霉研究

从广东省柑橘栽培老区的苗圃和果园采集的罹病柑橘组织样本中分离获得36个疫霉菌株,鉴定出6个种,其中柑橘褐腐疫霉Phytophthora citrophthora 11株,烟草疫霉P．nicotianae 9株,棕榈疫霉P．palmivora 7株,辣椒疫霉P．capsici和掘氏疫霉P．drechsleri各4株,柑橘生疫霉P．citricola 1株．     

广州地区茄疫病的发生及疫霉种鉴定

 1987～1999年,从广州地区茄的果实、茎、叶及根上分离得到疫霉菌,根据形态特征、培养性状及生理特性等方面研究结果,鉴定出4个种,其中以辣椒疫霉Phytophthora capsici Leon较为普遍,烟草疫霉P.nicotianae Van Breda de Haan次之, 掘氏疫霉P.drechsleri Tucker较少出现,致病疫霉P.infestans (Montagne) de Bary 仅见于春季;此外,种群分布与前作及不同季节有关。     

辣椒疫霉EST-SSRs标记的发掘

通过对GenBank上发布的55 848条辣椒疫霉EST的鉴定,在328条EST中发现331个SSR.在筛选的EST序列中SSR平均密度为每23.7 kb含有1个SSR.在鉴定的SSR中,三核苷酸重复基元的SSR类型最多,占鉴定总数的59.5%;其次为二核苷酸乖复基元的SSR类型,为39.3%;四核苷酸重复基元的SSR类型最少,为1.2%.设计40对SSR引物对5个辣椒疫霉菌株基因组DNA进行PCR扩增,有27对引物扩增出SSR特征条带,其中有18对引物在5个辣椒疫霉菌株间扩增出多态性条带25条.基于SSR标记进行聚类分析,可将5个检测大豆疫霉菌菌株划分为3类.该研究是辣椒疫霉的SSR标记开发的首次报道,为辣椒疫霉的遗传变异和分子作图等分析提供了一种有效的分子标记系统.     

壳寡糖诱导辣椒抗白粉病的初步研究

以壳寡糖为诱导剂,研究其诱导辣椒抗白粉病性的效果.结果显示,25～125 μg·mL-1壳寡糖对辣椒白粉病均有明显的防病效果,其中以50 μg·mL-1处理后1 d接种产生的诱导抗病性最显著,防病效果达80%以上;结果还表明,壳寡糖还能有效激活辣椒对白粉病产生系统抗病性.     

辣椒疫霉根腐病的发生与防治

本文阐述了辣椒疫霉根腐病的病原菌和侵染循环及发生条件,并从种植抗性品种、采用农业栽培措施、生物防治、化学防治等方面介绍其防治技术,以供辣椒种植户参考.     

辣椒疫霉可溶性蛋白和酯酶同工酶电泳分析

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(SDS-PAGE)和PAGE电泳技术分别对安徽不同地区的46个辣椒疫霉进行可溶性蛋白和酯酶同工酶分析,从蛋白质和酶学水平上分析辣椒疫霉的生理生化特征。可溶性蛋白电泳表明,每个辣椒疫霉分离出了25~37条谱带,平均31.5条。其中具有多态性的条带共有24条,多态性比率达64.9%,可溶性蛋白图谱与地理来源相关,但与致病力不相关。酯酶同工酶PAGE电泳显示辣椒疫霉菌株各有1~8条条带,Rf值为0.05~1.00,不同辣椒疫霉菌株间某些同工酶谱带数和同一迁移率谱带的颜色和宽度差异显著,其中弱致病力菌株的条带数为1~3条,说明菌株的致病力差异可在酯酶同工酶水平上得到反映。     

辣椒苗期不同生长阶段对疫霉根腐病的抗性研究

准确鉴定辣椒的抗性水平对种质资源的筛选和新品种选育具有重要意义。文章采用云南的辣椒疫霉优势生理小种菌株,通过游动孢子悬浮液灌根接种法,对不同辣椒品种在苗期不同生长阶段的抗病性进行了初步研究。结果表明,在20~25℃条件下,苗龄20 d(子叶期)、40 d(3~4叶期)、60 d(5~6叶期)以及90 d(现蕾初期)的辣椒抗性、中抗以及感病品种对辣椒疫霉的抗病性表现出明显的差异,即不同苗龄生长阶段的抗病性水平由强至弱为90 d60 d40 d20 d,表明抗病、中抗及感病辣椒品种的抗性水平与苗龄呈正相关。在辣椒苗龄60 d(5~6叶)时灌根接种能够充分地反映出不同品种的抗性水平。本研究明确了进行辣椒疫霉根腐病抗性评价的适宜生长期,可为辣椒种质资源、品种抗病性筛选和鉴定提供科学依据。     

辣椒疫霉对甲霜灵和霜脲氰抗药性遗传的研究

为了探寻综合治理辣椒疫霉抗药性的有效途径,采用Ｎ－甲基－Ｎ’－硝基－亚硝基胍诱变方法,从辣椒游动孢子群体中筛选出２９株抗甲霜灵、６株抗霜脲氰的突变菌株,并证明突变菌株的抗药性经无性和有性生殖均可稳定遗传。     

贵州辣椒疫霉种群的组成与分布

为了对贵州辣椒疫病的防治与抗病品种的选育提供理论依据,采用苗期人工接种技术,对不同年度分离自贵州省遵义、贵阳、六盘水、黔南、毕节和安顺等6个地区（州、市）12县（市、区）的49个辣椒疫霉单孢菌株进行了生理小种鉴定。鉴定出 race 0、race 1、race 2和 race 3共4个生理小种,race 0为新小种。贵州辣椒疫霉生理小种的组成、分布以及优势小种的种类因时间和空间不同而有所差异,2004－2007年4个小种组成相对均衡,2009年优势小种为 race 1、出现频率50．00％,2012年优势小种为 race 3、出现频率高达71．43％。不同地区间生理小种数以贵阳最多,有4个小种;其次是遵义和六盘水,均有3个小种;安顺、黔南和毕节只有2个生理小种。贵阳、安顺和黔南的优势小种为 race3,遵义是 race1,毕节和六盘水的小种分布较为平均。     

辣椒疫霉抗甲霜灵菌株的致病力研究

在实验室条件下诱导辣椒疫霉对甲霜灵产生抗性 ,然后测定所得抗性菌株和野生亲本型菌株对辣椒的致病力。结果表明 :辣椒疫霉易对甲霜灵产生抗药性 ,抗甲霜灵 (Mrt)突变株HF 1 T、LA 1 T和驯化 (Trt)抗性菌株HF 1 Y、LA 1 Y与其野生亲本相比 ,其对甲霜灵的抗性水平均在 5 0 0倍左右 ;在含甲霜灵的CA平板上 ,其抗药性较稳定 ;所得的抗性菌株无论抗性倍数多大 ,其对辣椒的致病力与其野生型亲本菌株没有明显差异     

疫霉侵染的辣椒cDNA文库的构建及非特异性脂转移蛋白cDNA的筛选

建立了辣椒疫霉侵染的辣椒幼苗cDNA文库,该原始文库含有1.5×106个独立克隆,插入片段约为0.5-2 kb.采用基于PCR技术的96孔文库筛选方法,从该cDNA文库中筛选出了1个应答辣椒疫霉侵染的候选基因的全长cDNA.经生物信息学分析,推测这个候选基因为非特异性脂转移蛋白(non-specific lipid-transfer protein,nsLTP)基因.     

辣椒疫霉生物学性状的遗传与变异研究

在实验室条件下研究了不同地理来源辣椒疫霉菌株的菌丝线性生长速率、菌落形态和异宗配合性状的遗传与变异。结果表明,生长速率和菌落形态在单游动孢子无性系均能稳定遗传,在自交S1代均发生变异,认为上述两性状可能是由细胞核杂合基因控制;交配型在辣椒疫霉的单游动孢子后代中能稳定遗传,但在自交S1代出现无规律分离,认为辣椒疫霉交配型可能是由细胞质基因控制。     

枯茗酸对辣椒疫霉病菌生长发育的影响

【目的】探讨孜然种子提取物枯茗酸对辣椒疫霉病菌生长发育的影响。【方法】采用菌丝生长速率法、悬滴法和室内盆栽法测定枯茗酸对辣椒疫霉病菌的毒力;采用扫描电镜和透射电镜观察枯茗酸对辣椒疫霉病菌超微结构的影响;采用Calcofluor white染色法、苯酚-硫酸法等研究枯茗酸对辣椒疫霉病菌细胞壁主要组分的形成及分布、β-1,3-葡聚糖含量和β-1,3-葡聚糖酶活性的影响。【结果】枯茗酸对辣椒疫霉病菌菌丝生长、游动孢子萌发有强烈的抑制作用,对辣椒疫霉病有良好的防效;扫描电镜观察发现枯茗酸处理使菌丝分枝增多、不规则膨大、生长点密集,孢子囊表面不规则凹陷,甚至塌陷,出现空腔;透射电镜观察发现经枯茗酸处理的菌丝细胞壁不规则加厚、颜色加深,线粒体肿胀,部分线粒体内嵴解体消失成为空腔,内质网、核糖体等小型细胞器解体;枯茗酸处理后,细胞壁主要组分的正常分布受到干扰,极性生长受到抑制,β-1,3-葡聚糖含量及β-1,3-葡聚糖酶活性显著下降。【结论】枯茗酸对辣椒疫霉病菌生长发育有明显的抑制作用。