亚麻多倍体诱导技术研究 Ⅰ.秋水仙碱诱导形态变异率的影响因子研究

为建立亚麻多倍体化学诱导技术体系,通过清水浸泡时间与秋水仙碱溶液浓度、处理温度、处理时间的比较试验,研究了外界因子对亚麻多倍体诱导形态变异率的影响。结果表明:亚麻多倍体诱导,以清水浸种16小时,转入0.16%的秋水仙碱溶液,在20℃条件下浸泡12小时为最佳,其成活率为36.07%,诱导率达到24.67%,则诱导成活率为8.9%。     

亚麻多倍体诱导技术研究——I．秋水仙碱诱导形态变异率的影响因子研究

为建立亚麻多倍体化学诱导技术体系，通过清水浸泡时间与秋水仙碱溶液浓度、处理温度、处理时间的比较试验，研究了外界因子对亚麻多倍体诱导形态变异率的影响。结果表明：亚麻多倍体诱导，以清水浸种16小时，转入0．16％的秋水仙碱溶液，在20℃条件下浸泡12小时为最佳，其成活率为36．07％，诱导率达到24．67％，则诱导成活率为8．9％。     

刚果12号桉离体组织的多倍体诱导

以刚果12号桉（Eucalyptus 12ABL）下胚轴诱导出的愈伤组织及丛生芽为材料,采用浸渍法、点滴法、混培法等3种秋水仙碱处理法对其进行多倍体诱导.结果表明：在诱导愈伤组织时,浸渍法以处理时间为10 h与药液处理浓度为7 500mg/L、处理时间为22 h与药液处理浓度为2 500 mg/L的2个组合变异率最高,达到40%,点滴法以药液处理浓度为2 500mg/L变异率最高,达到42.9%;在诱导不定芽时,混培法以药液浓度为40 mg/L处理10 d的变异率最高,达到22.5%,点滴法以药液浓度为2 500mg/L的处理变异率最高,达到26.7%.多倍体植株形态特征表现为叶片肥厚宽大,叶色浓绿,茎较粗壮、气孔较大且数目较少,其染色体数目变为2n=4X=44.     

苎麻多倍体诱导技术研究

以秋水仙素为诱变剂,此较了不同浓度和时间对苎麻不同器官或部位进行处理的诱导效果。种子处理,由于胚根生长受到严重抑制,生活力差,成活率低,有效诱导率仅0.65％。首次成功地进行了苎麻实生幼苗茎尖处理,平均诱导率达9.04％,为国内已报道最高诱导率的5倍。处理的直接效应多数形成嵌合体,采用嫩梢扦插等繁殖方法即可分离完全多倍体。根据苎麻多倍体主要特征特性,采取大田目测或结合成熟花粉粒镜检进行初选,最后以染色体计数为准的鉴定程序,既省时又可靠。     

提高橡胶树多倍体诱导率的方法研究

在暴露条件和暗处理条件下用秋水仙素溶液处理RRIM600,PR107,GT1,海垦1,海垦2,天任31-45,红星1和93-114等15个无性系的萌动芽,已全部诱导产生形态稳定的多倍体。经细胞学鉴定,这些多倍体无性系的体细胞染色体数大多为72条。在暗处理条件下用秋水仙素溶液处理嫩芽,诱导率可高达60％,个别无性系高达100％。研究了多倍和二倍组织占不同比例的嵌合枝条在生长过程中的消长特点,发现并非在任何情况下,嵌合体的生长都是向着有利于二倍组织的方向发展的。应用本文所提出的暗处理诱导法,只需处理个别植株韵少量萌动芽,即可获得人工诱导的多倍体,这种多倍体在不同程度上夹杂着少数的二倍性细胞,因而只能称为外部形态稳定的多倍体,即“外稳型多倍体”。只有经过进一步分离纯化,并在有性繁殖中不再出现二倍体时,才能称为遗传型稳定的多倍体。     

苎麻多倍体诱导中的嵌合现象及累积诱导效应

苎麻子叶苗茎尖秋水仙素处理的直接效应是产生倍性嵌合生长锥,继而由其分别发育成地上茎和地下茎。处理当季只有少部分植株表现出多倍体特征,但嵌合体地下茎在多季宿根年代中可间歇或连续地发出不同倍性分株,据两年观察鉴定,其累积平均多倍体诱导率已高达49.4％。不同秋水仙素浓度和不同处理时间的多倍体累积诱导率差异显著。用综合诱导率进行评价更能反映各处理的实际效果,以低浓度较长时间处理(0.1％,3天)的综合诱导效果最佳(59.7％)。关于苎麻多倍体诱导中嵌合体形成及其特点以前未见报道。     

双胚亚麻(Linum usitatissmun L.)利用的研究

本试验对亚麻双胚实生苗进行了详细的观察,同时进行了亚麻染色体加倍技术的深化研究,确定了现蕾期用0.05%秋水仙碱24小时处理单倍体亚麻苗的最佳时期,并获得了多份加倍材料.本文阐述了双胚亚麻无融合生殖的意义和在育种中的利用价值.     

提高玉米花培绿苗诱导频率及染色体加倍效率的研究

采用微胚早期转移技术，将接种后2周的花药连同微胚一起转移到分化培养基，可提高分化成苗率10～12倍，且减轻了胚状体转移的麻烦。利用50kg/L的秋水仙碱溶液处理1～2mm的胚状体6～72小时，可在一定范围内提高可育株率，其中处理24小时效果最好，在不降低分化成苗率的前提下，可育株率由对照的32.3%提高到71.4%。将微胚早期转移与染色体早期加倍相结合，在微胚转移前一天向原培养基中滴加1ml 50mg/L的秋水仙碱溶液，在保持同样出胚率和分化率的基础上，可育株率由39.4%提高到58.3%，自交结实株率由17.9%提高到37.4%。     

甜叶菊多倍体离体诱导技术体系的建立

以甜叶菊茎段为外植体,用不同浓度的秋水仙素在试管苗茎段再生植株过程中进行不同时间处理,探讨适合于甜叶菊离体多倍体诱导的最佳秋水仙素处理时间和浓度,初步建立甜叶菊离体诱导多倍体的技术体系。结果表明,秋水仙素对甜叶菊植株形成影响较大,秋水仙素处理的最佳剂量为0.1%处理3 d,再生植株总数高且多倍体比率达42.3%;同时,再生苗生根也受到了一定影响;多倍体苗叶片厚实、颜色较深、植株矮化,气孔增大,单位面积气孔数较少;多倍体细胞核体积增大,染色体数加倍。     

春小麦花药单倍体植株染色体加倍技术初探

为了提高春小麦花药单倍体植株的加倍效率,对参试的春小麦材料的花药愈伤组织和再生植株根系分别进行了以下处理:(1)在脱分化培养基中分别加入五种浓度的秋水仙碱:0.02‰、0.05‰、0.1‰、0.3‰、0.5‰;(2)用0.2%和0.05%的秋水仙碱浸泡再生植株根系各5h和15h。结果表明,在脱分化阶段经秋水仙碱处理后愈伤组织生长缓慢,植株再生能力较差,甚至部分褐化死亡;再生植株的浸根处理无论是用高浓度还是低浓度的秋水仙碱,长时间浸泡根系后均会导致大部分再生植株夭亡。用0.2%的秋水仙碱溶液浸泡再生植株根系5h后,将其移栽温室,平均结实株率为45.9%,比对照结实株率(13.2%)提高了32.7个百分点。说明高浓度秋水仙碱短时间浸泡再生植株根系加倍效果较好。     

金钱树四倍体的诱导与鉴定

以金钱树块茎为材料,采用秋水仙素溶液处理不定芽生长点,研究秋水仙素浓度和处理时间的诱变效果。结果表明：0.1%的秋水仙素溶液浸泡处理块茎的不定芽48 h效果最好,其诱导率为30%。通过流式细胞仪对金钱树植株DNA相对含量的测定,鉴别出四倍体和嵌合体。四倍体植株与二倍体植株在叶厚、保卫细胞大小、气孔密度等方面存在明显差异,其中气孔的形态及密度可作为鉴别四倍体、嵌合体和二倍体的重要性状。     

苎麻多倍体诱导的研究

我们从1982年开始,以不同浓度的秋水仙素溶液处理苎麻种子、地下茎和试管苗,1983年4月诱导苎麻多倍体成功,以后又获得了43株多倍体单株,并用组织培养等快速无性繁殖方法迅速扩大群体,进行纤维产量、品质比较试验。     

秋水仙碱诱变棉花多倍体

秋水仙碱诱变棉花多倍体是棉花远缘杂交和倍数性育种工作中常用的技术之一。几年来,我们摸索了用秋水仙碱处理使棉花染色体加倍所需的浓度、时间和使用方法,获得了一些棉花品种和杂种染色体加倍植株,现将试验结果整理如下。一、材料及方法材料:中棉的不同品种,中棉×非洲棉杂种一代,中棉与野生棉(瑟伯氏棉和非洲异常棉)的杂种一代和四倍体中棉×陆地棉杂种回交一代。方法:先后采用过以下四种方法。1、水溶液浸种:用不同浓度的秋水仙碱水溶液(0.05%,0.1%、0.3%、0.5%、0.6%和1%等),分别浸泡干种子12小时、     

两份诱导系对不同种质类群材料的单倍体试验研究

利用两份玉米单倍体诱导系CY2009和NHY2009,对10个不同类群种质材料在不同环境条件下进行单倍体诱导和人工加倍试验,分析单倍体诱导率的差异性及理想的加倍方法。结果表明,CY2009对不同类群材料的平均诱导率（3.87%）低于NHY2009的平均诱导率（4.08%）。10份不同来源玉米种质与诱导系NHY2009杂交,单倍体诱导率差异极显著,表现为黄改系材料的单倍体诱导率普遍较高,其次为REID系材料,78599类热带材料的诱导率偏低。10份玉米种质在不同环境条件下与诱导系NHY2009杂交诱导率差异极显著,海南冬繁>张家口春播。秋水仙素处理能显著提高单倍体植株的散粉率、结实率,0.06%秋水仙素浸泡幼芽（切口8 h）对单倍体在成活率、散粉率和结实率方面效果最理想。     

剑麻四倍体诱导与倍性鉴定

以剑麻H.11648愈伤组织为材料,分别采用0、2、4、6、8 g/L浓度的秋水仙碱对愈伤组织进行不同时间(1、2、3、4、5、6 d)的诱导处理,观察处理后的再生植株气孔大小、保卫细胞叶绿体数目、叶长、叶宽、叶形指数、叶片厚度以及苗头大小等,采用流式细胞仪倍性鉴定方法对处理后的再生植株体细胞DNA含量进行了检测。结果表明:用4 g/L浓度的秋水仙碱处理2 d诱变率最高,诱变率为(57.69±6.66)%,不定芽分化率为(63.33±2.89)%,分化系数为(3.55±1.24),加倍后的再生植株叶片下表皮气孔变大,单位叶面积的气孔数减少,叶片变宽变厚,叶形指数变小,植株变粗,突变体再生植株体细胞DNA含量是二倍体的2倍。     

低浓度秋水仙素离体诱导甜叶菊多倍体技术体系的建立

以甜叶菊茎段为外植体,采用不同低浓度秋水仙素在甜叶菊试管苗茎段再生苗初期进行长时间持续处理,以探讨低浓度秋水仙素诱导甜叶菊多倍体的优势及适合长时间诱导甜叶菊的秋水仙素浓度,简化甜叶菊离体诱导多倍体技术环节。结果表明:0.025%的秋水仙素浓度适合于甜叶菊多倍体离体诱导的持续诱变,直至试管苗再生而无需清洗外植体和更换培养基,简化了诱导技术环节,提高了甜叶菊多倍体离体诱导效率;多倍体植株田间农艺性状表现为叶片大而厚实、开花延迟、花蕾较大等特征。旨在建立低浓度秋水仙素离体诱导甜叶菊多倍体技术体系。     

叠氮化钠对花生丛生芽诱导的影响

花生幼芽叶节,用不同浓度的NaN3及不同的处理时间进行诱变处理.结果表明,外植体的成活率,丛生芽的诱导率均随NaN3浓度的提高及处理时间的增加而降低.NaN3用于诱发花生丛生芽变异的适宜浓度为200mg/L,处理时间为2h.     

应用甲基睾丸酮诱导马拉瓜丽体鱼雄性化的研究

研究了口服甲基睾丸酮(MT)诱导马拉瓜丽体鱼(Cichlasoma managuense)雄性化效应与鱼苗规格、剂量和处理时间的关系，并讨论了MT对马拉瓜丽体鱼的生长率和成活率的影响。结果表明，MT诱导1.2 cm以下鱼苗可获得较高的雄性率；鱼苗的雄性率随着MT含量增加和处理时间延长而提高，投喂剂量为40 mg/kg的饲料30 d、50 mg/kg的饲料20 d以上，或者60 mg/kg的饲料10 d以上，鱼苗的雄性率均可达到90%以上；MT能提高马拉瓜丽体鱼的生长率，而与成活率没有直接依赖关系。     

紫色马铃薯离体培养芽诱导因子研究

[目的]应用组织培养技术对紫色马铃薯进行离体培养芽诱导研究,以建立紫色马铃薯离体培养技术体系。[方法]以紫色马铃薯芽为外植体,进行不同的灭菌处理、基本培养基、蔗糖浓度和培养温度的比较试验,筛选紫色马铃薯芽诱导的适宜因子。[结果]试验结果表明:适宜的芽外植体灭菌处理为75%酒精10 s+0.1%升汞10 min,芽诱导成活率为45.56%;适宜的基本培养基是MS培养基,芽诱导成活率为48.89%;适宜的蔗糖浓度是30g/L,芽诱导成活率为58.89%;适宜的培养温度是25℃,芽诱导成活率为54.44%。[结论]研究结果为紫色马铃薯快速繁殖提供了技术参考。     

对改进我国甜菜四倍体选育技术的商榷

甜菜四倍体的选育是多倍体甜菜育种不可缺少的重要环节。所采用的选育方法是否得当,将直接影响材料的选育进度与质量。一般来讲,获得甜菜四倍体的方法主要是利用秋水仙碱溶液处理二倍体材料。大量研究表明,被处理的二倍体亲本的特性如何,在相当大的程度上支配着四倍体品系的产质量性状。因此,选择特性优良的二倍体材料作为处理亲本是极为重要的。一般最普遍而又简便易行的方法是使用秋水仙碱溶液浸泡甜菜种子。而选育四倍体最关键的技术则为处理种子在播种出苗后的叶绿体检定与染色体检定等一系列措施。只有这些技术措施妥当合理,才能够顺利地获得稳定的四倍体材料。