新城疫病毒感染鸡肾脏组织蛋白质组学方法条件的优化

为研究新城疫病毒(NDV)与宿主组织细胞之间的相互作用关系,本研究以NDV疫苗(La Sota)接种的鸡肾脏组织为材料,对其差异蛋白的表达进行分析,通过条件的优化,建立了NDV感染鸡肾脏组织的双向凝胶电泳检测方法。采用ImageMaster2D Platinum version 6.0软件对电泳图谱分析后显示:24 cm IPG胶条(pH4～pH7)对应的凝胶中可检测到约1 400个蛋白点,蛋白点匹配率达90%,表明NDV感染鸡肾脏组织蛋白质组双向凝胶电泳模型稳定、分辨率高、重复性好,在对4个时间点对照和人工感染凝胶分析过程中发现差异蛋白点主要集中于接种后7 d,该样品的2-DE电泳图谱中共有29个差异表达明显的蛋白点,其中上调表达蛋白点有15个,下调表达蛋白点有14个,利用荧光定量PCR对其中4个差异蛋白在mRNA水平进行检测,结果与双向电泳结果一致,NDV接种鸡肾脏组织蛋白质组学方法的建立为NDV致病机理的研究提供有效的方法。     

麻鸭感染新城疫病毒HI抗体效价的比较研究

以ＮＤＶ强毒，弱毒分别感染麻鸭，３０天后检测其血清ＨＩ抗体水平，并与自然感染ＮＤＶ动物，对照组动物血清ＨＩ抗体水平作比较；强毒感染动物血清与其所产蛋卵黄上清ＨＩ抗体水平作比较，结果表明，麻鸭群为ＮＤＶ野毒感染；鸭群血清ＨＩ抗体水平检测，以５０％以上检样出现７（ｌｏｇ２）以上的ＨＩ效价，可作为鸭群为受ＮＤＶ野毒感染的标志；鸭卵黄不宜替代鸭血清作ＮＤＶＨＩ抗体检测。     

3株单抗对新城疫病毒HN抗原变异的分析

以新城疫病毒(NDV)LaSota株为免疫原研制了3株针对NDVHN蛋白的单抗,分别命名为1E5、C3-B7和E6-F11。3株单抗与NDV不同毒株在血凝抑制试验(HI)、ELISA和病毒中和试验中的反应性不同,而同一株单抗与同一个NDV毒株在HI、ELISA以及病毒中和试验中的反应性一致。其中,单抗1E5与NDV标准株(LaSota、F48E8)、8个NDV分离株反应阳性,而与9个NDV分离株反应阴性;单抗C3-B7、E6-F11与所有NDV毒株反应均为阳性。结果表明,3株单抗均是针对HN蛋白上的中和位点,国内部分NDV流行株的HN抗原至少有1个抗原位点发生了变异。     

蛋白质组学技术在病毒及其感染机制研究中的应用

在病毒学领域中,如双向差异凝胶电泳、偶联应用质谱和稳定同位素标记等的蛋白质组学技术正在被广泛应用,可从整体层面上分析组织或细胞内动态变化的蛋白质组成、表达水平与翻译后修饰,探索蛋白质的功能及蛋白质之间相互作用与联系,有助于病毒感染及病毒与宿主间的相互作用机制的研究,推动病毒相关疾病诊断和治疗的发展。作者简要论述了近年来蛋白质组学技术在病毒及其感染机制研究中的应用,并对其在病毒学研究中的应用前景作了展望。     

用核酸探针检测新城疫病毒的研究

用光敏生物素标记鸡新城疫ｃＤＮＡ制备核酸探针，经斑点杂交和碱性磷酸酶显色后，探针同该ｃＤＮＡ的ＰＣＲ产物，ＰＣＲ产物重组子和新城疫强，弱毒株呈现阳性反应，与ＩＢＶ，ＩＬＴ，ＭＧ和正常尿囊液等均呈阴性杂交反应，田间病料的杂交试验也表明该ｃＤＮＡ探针是且特异的检测方法。     

新城疫病毒的抗肿瘤机制

新城疫病毒(Newcastle Desease Virus,NDV)属副粘病毒,可以引起禽类的新城疫.该病主要表现为呼吸道炎症,也出现脑部和胃肠道炎症.新城疫也能感染人类,但是它仅仅引起人类中度的流感样症状、结膜炎或者喉炎[1].     

新城疫病毒毒力的进化规律

新城疫是家禽养殖重点防控的疫病之一,文章总结了新城疫病毒的毒力进化规律,指出将来会出现新的血清型,为新城疫的防控提供参考.     

免疫蛋鸡携带新城疫病毒的调查研究

实验对江苏省某地区 2 2个免疫鸡场进行了新城疫病毒抗体随机抽样监测 ;并从所抽样的鸡只中无菌采集气管及泄殖腔棉拭子样品 ,接种非免疫鸡胚进行病毒分离与鉴定。结果表明 ,在不同新城疫病毒抗体水平的鸡群 ,均可分离到新城疫病毒 ;这提示了新城疫病毒抗体水平只能用于衡量机体的体液免疫状况 ,而不能作为评价鸡群是否带毒的指标     

鸡新城疫诊断和监测方法的比较及应用

新城疫诊断和监测方法经典的有HA和HI试验、中和试验等。随着科技的发展，新的诊断和检测方法不断出现，如单抗夹心ELISA、RT—PCR方法等。为探索适应于我省市、县不同实验室诊断和监测需要，实现全省诊断和监测的标准化，本研究对诊断和监测新城疫的几种方法：病毒的分离和鉴定、HA和HI试验、单抗夹心ELISA等进行了平行试验比较，以确定在实际应用中可根据需要选择某种方法，使诊断和监测更加快速、准确、方便。     

不同株鸡新城疫病毒结构蛋白的比较研究

对鸡新城疫病毒(NDV)B1株、La Sota株、Mukteswar株和长春强毒野毒株(C87E7)感染的鸡胚尿囊液分别进行浓缩和提纯,并作SDS-PAGE和Western印迹,进行结构蛋白及其抗原性的分析。结果,4株NDV的电泳图谱显示11-12条结构蛋白带,分子量从43000到120000不等。其中各株均有3条主要蛋白带,8～9条次要蛋白带。不同株NDV的次要蛋白带有明显的区别。Schiff氏试剂染色证明,分子量为76000、52000和50000的蛋白为糖蛋白。结构蛋白的抗原性分析表明,4株NDV蛋白带中有2条具有共同抗原性,其他蛋白带的抗原性则有差异或明显不同。     

新城疫病毒检测方法研究进展

新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性、致死性传染病,被国际动物卫生组织(OIE)列为危害禽类的A类传染病之一.由于该病毒毒力存在差异,容易出现毒力返强或是导致发生非典型症状,快速、可靠、准确的诊断方法对于新城疫的监测和控制具有重要意义.本文从病毒的分离与鉴定、电镜技术、血清学方法以及分子生物学诊断技术4个方面介绍了新城疫病毒的检测技术,为今后兽医临床上检测新城疫病毒提供一定的参考.     

一起鸡新城疫的诊断及强弱毒株鉴别的研究

某鸡场鸡群中出现以神经症状、产蛋下降、畸形蛋增多和呼吸困难、腹泻等为主要特征的疾病,对发病鸡场进行实地走访并采集发病鸡病料。根据临床症状,病理剖检及实验室细菌学、血清学、病毒学检测,鉴定该鸡场发生新城疫疫情,并继发鸡群大肠杆菌感染;通过实时荧光RT-PCR检测,对该病毒进行强弱毒株的鉴别,显示该鸡场发生的新城疫是由新城疫中强毒株引起的。     

新城疫病毒糖蛋白致病作用的研究

本实验以分子生物学和现代免疫学方法,对新城疫病毒（ＮＤＶ）中国毒株Ｆ４８Ｅ９和ＬａＳｏｔａ等毒株的糖蛋白的致病作用进行了探讨。结果表明,ＮＤＶ Ｆ和ＨＮ蛋白为糖蛋白,强弱毒株之间Ｆ蛋白裂解位点的氨基酸序列有明显的不同,并决定了毒株的毒力,但ＮＤＶ的致病作用尚需ＨＮ、Ｆ蛋白的协同作用,单一的Ｆ或ＨＮ蛋白不能构成ＮＤＶ的致病作用。     

单抗ELISA试剂盒检测肉鸽新城疫病毒初步研究

应用新城疫病毒单克隆抗体建立的抗原捕捉ELISA试剂盒,对人工攻毒和自然发病的肉鸽进行检测,结果表明,从人工攻毒肉鸽各脏器组织均可检出新城疫病毒,从自然发病肉鸽泄殖腔内也可检出病毒。     

中药大黄体外抗新城疫病毒活性试验

为了筛选出有效的防治新城疫的中草药,采用鸡胚接种试验,对大黄煎煮液的体外抗新城疫病毒活性进行了测定,结果表明,中药大黄在体外对新城疫病毒具有较好的抑制作用。     

新城疫、禽流感病毒同胚接种的研究

根据新城疫病毒、禽流感病毒两种病毒均能在鸡胚中繁殖的特点,将两种病毒以最适稀释比例稀释后,分别接种于9—11日龄的鸡胚尿囊腔,同时进行两种病毒同胚培养,并利用血凝试验进行病毒效价的测定。结果表明,在同一鸡胚中两种病毒均能较好地增殖,病毒间干扰现象不明显。本试验在增强疫苗的免疫原性和进一步阐明病毒的增殖机理方面具有重要意义。     

纳米银对新城疫病毒的抑制作用

本文探讨了纳米银对NDV的抑制作用,旨为纳米银在黏膜局部对NDV感染进行治疗和预防提供实验依据.……     

新城疫病毒分子流行病学研究进展

新城疫在世界范围内已经引起了4次大流行,每次大流行都是由一种新基因型引起的。尽管新城疫病毒只有1个血清型,但其基因型众多。论文主要综述了新城疫病毒基因型的划分方法以及国内外不同时期新城疫的流行状况及其特点,分析了国内外流行毒株及流行趋势,目前在国内外三大家禽中主要流行基因Ⅶd亚型毒株,鸽群中主要流行基因Ⅵb亚型毒株,为我国新城疫的防控提供理论基础。此外,弱毒株在新城疫的传播中所起的作用也值得关注。