花生小叶外植体植株再生及农杆菌介导的基因遗传转化

鄂花四号、中花四号和豫花一号萌动４ｄ的小叶作外植体，通过器官再生在ＭＳ培养基加３ｍｇ／ＬＢＡＰ和１ｍｇ／ＬＮＡＡ上诱导芽分化，转至ＭＳ加５ｍｇ／ＬＢＡＰ上诱导芽伸长，再生植株。芽诱导率为８６％～１００％，每个外植体平均再生５个植株。在培养基中加入１ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３和５００ｍｇ／Ｌ羧苄青霉素能有效抑制愈伤褐化和死亡，并能提高植株再生率。萌动４ｄ的小叶与农杆菌ＡＧＬ１分别共培养２ｄ，通过在再生培养基中加卡那霉素筛选，获得转基因再生植株，转基因植株生根后，移栽网室生长，并已开花结荚。外源基因的表达通过卡那霉素抗性和Ｇｕｓ活性组织化学检测得到证实。     

大豆不同外植体植株再生的研究

采用不同大豆品种的下胚轴、上胚轴、小真叶和幼胚作外植体进行植株再生的研究。结果表明汾豆３３号诱导植株再生率最高;诱导频率依次为下胚轴＞上胚轴＞小真叶＞幼胚;下胚轴在Ｂ５＋ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ培养基上可诱导出愈伤组织并直接分化成苗,植株再生频率为３４％,最高达５０％。获得大豆高频率再生植株,收到较饱满的种子。     

花生去子叶幼胚的丛生芽诱导和植株再生

授粉后２５－３０天的花生幼胚，去子叶后，在ＭＳ２（ＭＳ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ＋ＰＶＰＰ０．３％＋椰计５０ｍｌ／Ｌ＋蔗糖４％＋琼脂０．８％）培养基中，置３００ｌｕｘ弱光和２０℃±１℃条件下，培养２１－２８天，能有效地产生丛生芽；在ＭＳ２中诱导培养后的去子叶幼胚的生长点切去，在改良无激素培养基（ＭＳ１）中培养１４天，转入ＭＳ３（ＭＳ＋ＢＡ６．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．４ｍｌ／Ｌ＋Ｄ－生物素０．１ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ＋酵母浸出物２００ｍｇ／Ｌ＋椰计５０ｍ／Ｌ＋ＰＶＰＰ０．３％＋蔗糖２．５％＋琼脂０．８％）培养基，置２５℃±１℃，３５００ｌｕｘ光照条件下培养２１－２８天，８０％的外植体分化出丛生芽，继而长成无根带叶小苗．．平均每外植体产生８．１个丛生芽，最多可达４０个．诱根后小苗移植田间８０％植株成活并开花结实。品种（系）间差异不显著。     

甘蔗人工种子的最佳制作流程及其提高萌发率的研究初报

以闽选７０３为材料，在Ｎ６（或ＭＳ）＋２，２－４Ｄ２．２ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ（水解酷蛋白）１．５ｇ／Ｌ培养基上诱导产生胚状体。利用１／２ＭＳＯ的５．５％海藻酸钠包裹体细胞胚，播种在４种不同的固体培养基上，其中播种在培养基１／２ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡｌｍｇ／Ｌ＋ＡＣ（活性炭）０．５％的人工种子萌发率为３１．７％，比前人报道的２７．６％（２）提高４．１％。本文最后还探讨了活性碳对生根的作用。     

花生体细胞胚胎诱导和植株再生研究

以花生成熟种胚为外植体,在ＭＳ附加不同激素（２０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ或５ｍｇ／Ｌ Ｐｉｃｌｏｒａｍ）的培养基上黑暗培养,胚性愈伤组织发生率和产胚量无明显差异,在ＭＳ＋５ｍｇ／Ｌ Ｐｉｃｌｏｒａｍ培养基上,胚性愈伤组织发生率和产胚量和品种类型有关,珍珠豆型花生品种胚性愈伤组织发生率和产胚量高于普通型花生品种。体胚在ＭＳ＋１０ｍｇ／Ｌ ＢＡ培养基上苗再生达３６．３％－７７．８％,再生小苗在ＭＳ＋０．３ｍ     

马铃薯优化再生系统的建立

本试验研究了六种培养基系统对马铃薯东农３０３，Ｆａｖｏｒｉｔａ和极早三个品种来源的不同外植体的愈伤组织诱导和植株再生的影响，筛选出了适合植株再生的最佳外植体、最佳外植体大小及最佳培养基系统。适合植株再生的最佳外植体为叶片；最佳外植体大小为叶片０．５ｃｍ２、茎０．５ｃｍ、块茎０．２５ｃｍ２×０．３ｃｍ，适合于茎、块茎及叶的有效培养基系统分别为：①ＭＳ＋３ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ＋０．０１ｍｇ·Ｌ-１ＮＡＡ（ｐｈ５．６）４周ＭＳ＋０．３ｍｇ·Ｌ-１ＧＡ３（ｏＨ５．６）；②ＭＳ＋１．７５ｍｇ·Ｌ-１ＺＴ＋０．８７ｍｇ·Ｌ-１ＩＡＡ（ｐＨ５．８）；③ＭＳ＋２．２５ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ＋０．１８６ｍｇ·Ｌ-１ＮＡＡ（ｐＨ５．８）２周ＭＳ＋５ｍｇ·Ｌ-１ＧＡ３＋２．２５ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ（ｐｈ５．８）。     

亚麻体细胞无性系的建立及其植株再生

以亚麻无菌苗（７－１０天培养）切取的茎尖和下胚轴作为外植株，分别接种于Ｎ６、Ｂ５基础培养基，均附加ＩＡＡ４ｍｇ／Ｌ、ＫＴ２ｍｇ／Ｌ和ＬＨ２００ｍｇ／Ｌ，经过四个星期的离体培养，获得具备不定苗发生能力的愈伤组织，诱导率平均达９４．２％。然后把它们转移至继代培养基中进行再分化培养，培养得到绿苗及胚性愈伤组织，分化频率平均达６．３倍。切取下的绿苗植于改良后的Ｂ５培养基上进行生根培养，生根率达９０％以上。     

甜菜基因型的筛选及胚性细胞系建立的研究

通过以甜菜未成熟胚为外植体诱导愈伤组织，再将产生的愈伤组织转移至分化培养基（ＭＳＢ培养基附加１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、３％蔗糖、８％琼脂）进行分化力测试实脸，筛选出两个再生能力强的基因型─８９３０、ＧＤ＿２．通过挑选淡黄色或灰白色、呈颗粒状的愈伤组织继代培养，经调节培养基的ＩＡＡ和ＮＡＡ的浓度，得到再生能力强的胚性愈伤组织，建立了胚性细胞无性系。     

花生体胚诱导和植株再生研究

在含２０ｍ ｇ／Ｌ２，４－ Ｄ ＭＳ诱导培养基上，未成熟种胚和成熟种子种胚为外植体，光照培养下体胚诱导率分别为９２％ 和７８％ ，单个外植体平均产胚４８ 和４１ 个；而成熟种子胚小叶和未成熟种子子叶体胚诱导率均较低。以成熟种子种胚为外植体，２０ｍ ｇ／Ｌ２，４－ Ｄ和５ｍ ｇ／ＬＰｉｃｌｏｒａｍ 暗培养体胚诱导率分别为５５％ 和５８％ ，单个外植体平均产胚分别为４４和４２ 个。在含５ｍ ｇ／ＬＰｉｃｌｏｒａｍ 培养基上，１３个花生品种（系）体胚诱导率６％ ～８３３％ ，产胚量１２～４５个，差异显著，珍珠豆型花生品种体胚诱导率、产胚量普遍高于普通型花生品种。８ 个品种（系）体胚在含１０ｍ ｇ／ＬＢＡ 的ＭＳ培养基上枝条再生率３６３％ ～７７８％ 。再生枝条在含０３ｍ ｇ／ＬＮＡＡ ＭＳ培养基上生根后，植株移到温室已正常开花、结荚。     

海甘蓝茎尖培养再生植株的研究

海甘蓝种子在附加有０～１０ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基中，当６—ＢＡ为２～５ｍｇ／Ｌ时，幼苗生长健壮．采用ＭＳ＋２～４ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ培养基可从无菌苗茎尖诱导大量丛生芽，２～３周后，平均每个茎尖可诱导５．１～５．５个丛生芽，６—ＢＡ大于４ｍｇ／Ｌ，会导致丛芽黄化．继代培养时，４ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ配合使用效果较佳，繁殖系数高达１０．４．１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ丛芽的生根效果较好，保湿组培苗的成活率可达９５％，再生植株在自然条件下能正常开花结实．     

芝麻远缘杂种胚胎的营救和植株再生

以栽培种中芝５号、中芝８号、宜阳白和犀牛角为母本，以野生种为父本对其杂种胚的败育时间、营救技术及植株再生进行了研究。结果显示：授粉后９—１３天为杂种胚营救的较佳时期。ＭＳ矿质＋Ｎｉｔｃｈｅｒ有机营养＋ＢＡ０．２ｍｇ＋ＧＡ３０．１ｍｇ＋ＣＨ６００ｍｇ＋ＰＶＰ０．２％＋蔗糖５％能促进杂种胚的体外发育。幼胚在ＭＳ中萌发后采用ＭＳ＋ＰＰ３３３０．１ｍｇ＋ＢＡ０．２ｍｇ的培养基可壮苗促芽，在ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ培养基中可形成正常试管苗．再生植株在２５℃—３２℃温室中能正常开花结实．种子具生活力．     

巴西橡胶悬浮细胞培养胚胎发生与植株再生

研究结果表明,把２％的甘油加入到悬浮培养基中,能提高胚胎发生的频率;在悬浮培养基和固体诱导培养基中分别加入浓度为１．０ｍｇ／Ｌ和０．２ｍｇ／Ｌ的２,４-Ｄ能促进胚胎的发生;在固体培养基中添加ＡＢＡ有利于正常胚状体的形成;高浓度的谷氨酰胺对胚状体成苗培养有明显的促进作用。     

诸葛菜花器组织培养及其植株再生

诸葛菜的花瓣、萼片、花丝在ＭＳ附加６—ＢＡ与２，４—Ｄ的培养基上培养７～１０ｄ，诱导形成愈伤组织。愈伤组织在ＭＳ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ３ｍｇ／Ｌ的分化培养基上培养７ｄ左右分化出芽，每块愈伤组织形成３～４个芽。花托、花序轴切段在分化培养基上可直接出芽形成植株。     

在油菜组织培养中激素及基因型对下胚轴分化的影响

以不同基因型的油菜种子为实验材料,以下胚轴为外植体,采用不同配比激素组合的培养基诱导芽苗分化。通过对芽苗分化率的方差分析明确了组织培养中激素对植株再生的影响大于基因型,且激素与基因型之间着显著的互作效应。ＭＳ＋６－ＢＡ２￣４ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ）．６ｍｇ／Ｌ为地芽苗分化的最佳培养基。     

大豆花药培养几个问题的研究

本文研究了大豆花药培养中的培养基、基因型、激素配比、糖分种类及浓度、取材时期、预处理温度、接种方式、有机添加物等因素对愈伤组织诱导频率的影响。认为大豆花药在培养基上的脱分化启动具有群体效应，合适的取材时期是单核中晚期。高浓度蔗糖能抑制体细胞愈伤组织的产生，而愈伤组织的分化则需要较低的蔗糖浓度。愈伤组织在Ｂ＿５＋０．５ｍｇ／１ＮＡＡ＋１．０ｍｇ／１ＫＴ＋１％蔗糖和改良ＭＳ＋０．１ｍｇ／１ＩＢＡ＋０．１ｍｇ／１ＧＡ＿３＋０．４ｍｇ／１ＮＡＡ＋０．５ｍｇ／１ＢＡ＋０．５ｍｇ／１ＫＴ＋０．５ｍｇ／１ＺＴ＋０．５ｍｇ／ｌ生物素＋２％蔗糖等培养基上分化出了芽，在改良ＭＳ＋０．５ｍｐ／１ＩＢＡ＋０．５ｍｇ／１ＢＡ＋０．５ｍｇ／１ＫＴ＋０．５ｍｇ／１ＺＴ＋５％蔗糖＋１％麦芽糖等培养基上产生了胚状体。     

海南粗榧扦插繁殖研究

报道了海南粗榧扦插繁殖的初步结果。试验表明，ＩＢＡ促进海南粗榧半木栓化枝条生根有效，１０００￣１５００ｍｇ／Ｌ处理２ｈ，插条生根率可达７０．０％￣８３．３％，平均发根条数为４．０￣３．８，扦插基质以椰糠为好，其生根率分别是河沙和沙混土的１６１．７％和３００％。侧枝扦插较直生枝易生根。     

木菠萝试管繁殖

取木菠萝茎为外植体，诱导丛生芽的产生，以ＭＳ为基本培养基，附加１．０ｍｇ／Ｌ ＢＡＰ和０．５ｍｇ／Ｌ激动素中进行培养。产生的丛芽再分切接种于相同的新鲜培养基中培养，又可产生５－７个新芽，诱导生根培养基：１／２ＭＳ每升附加１．０ｍｇＮＡＡ或１．０ＩＢＡ。最后将培养出的完整的植株移栽温室内成活后，再移栽于田间。     

饲用高粱和粒用高粱胚愈伤组织诱导和植株再生

９５２０３饲用高粱和粒用高粱胚愈伤组织诱导和植株再生──（Ｐ．Ａｒｔｉ等），ＣｅｒｅａｌＲｅｓｅａｒｃｈＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９４，Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．１～２，７１～７７（英文）在含２．５ｍｇ２．４－Ｄ／Ｌ的改良ＬＳ培养基上，在２５℃黑暗...     

绿宝石喜林芋叶片培养及植株再生

结果表明：诱导绿宝石喜林芋叶片产生愈伤组织频率最高的培养基是ＭＳ＋ＢＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋２．４－Ｄ１．０ｍｇｇ／Ｌ。最适于愈伤组织分化的基本培养基是Ｎ６；３ｍｇ／Ｌ的ＢＡ、ＺＴ和ＫＪ均能诱导愈伤组织产生不定芽，其中以ＢＡ为好；ＣＨ对愈伤组织的分化有促进作用。Ｎ６＋ＢＡ７ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ对不定芽的增殖效果较好，３０ｄ可增殖９．４倍。１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ诱导生根效果好。试管苗     

印楝愈伤组织培养和植株再生

用印楝幼嫩枝条和叶片,在含有ＢＡ（０￣０．５ｍｇ／Ｌ）和ＮＡＡ（０￣２ｍｇ／Ｌ）的ＭＳ培养基中,于２５℃±２℃下暗培养１５￣２５ｄ,可诱导产生愈伤组织。愈伤组织生长出现２个生长峰,愈伤组织生长期和培养基中激素组成影响双峰产生时间,但不愈改变愈伤组织生长的双峰性质。在诱导不定芽培养基中,于２５℃±２℃下光培养１５￣３０ｄ,愈伤组织产生不定芽分化。愈伤组织不定芽分化与愈伤组织来源和不定芽诱导培养基的激