有机磷农药降解酶的研究进展

有机磷农药污染严重,利用有机磷农药降解酶是治理有机磷农药残留的新技术,综述了有机磷农药降解酶的作用机理、基因、应用等方面的研究现状。     

几种农药对棉花过氧化氢酶过氧化物酶活性的影响

通过在棉花生育期喷施不同种类农药 ,试验测定棉叶内过氧化氢酶、过氧化物酶活性的变化趋势。结果发现 ,喷施农药后 ,棉叶的过氧化氢酶、过氧化物酶均一定程度表现出“涨落现象” ,表明了在本地区特有的农业环境条件下 ,农药可能会影响植物的正常生理代谢过程。     

酶抑制法测定有机磷农药含量

通过测定乙酸-1-萘酯在酯酶(蚕蛹酶、鸡肝酶和面粉酶)催化下水解生成的乙酸被有机磷农药抑制前后pH值的变化,推算出有机磷农药对酯酶的抑制率,从而检测出有机磷农药的含量.以ΔpH值为指标,经由单因素试验得出最佳酶促反应条件:反应时间30 min、反应温度35 ℃、固蓝B盐1 mL、乙酸-1-萘酯3 mL.结果发现蚕蛹酶活性最高,且农药对酶的抑制具有选择性,混合酶液未出现特异性提高.     

酶抑制法速测技术在农药残留检测中的应用

<正>目前,常用的农药按化学结构大致可分为以下几类:有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类等。针对这些农药,农药残留速测技术可分为仪器分析法、免疫分析法、生物传感器法、活体检测法、酶抑制法、实验室自动化等,其中酶抑制法是目前应用最广、最成熟的农药残留速测技术。一、酶抑制法在我国农药中,70%为有机磷农药,而在我国生产使用的有机磷农药中,70%为剧毒、高毒类农药,而且     

猪肝酯酶农药敏感性及其与胆碱酯酶的对比研究

【目的】探讨猪肝酯酶(PLE)对农药的敏感性,为农药残留快速检测提供新的敏感酶源。【方法】以乙酸-1-萘酯为底物,考察PLE酶促反应的最适温度、p H及几种农药的最佳作用时间,同时比较了PLE对几种特异性酶抑制剂的敏感性;以电鳗乙酰胆碱酯酶(ACh E-ee)、马血清丁酰胆碱酯酶(BCh E-hs)为对照酶源,采用酶抑制法,绘制5种有机磷农药(敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、辛硫磷、毒死蜱)和5种氨甲酸酯类农药(灭多威、克百威、丁硫克百威、残杀威、涕灭威)的抑制曲线,并计算相关半抑制率(IC50),比较各种酶的农药敏感性。【结果】猪肝酯酶酶活测定方法的最佳温度、时间、p H分别为35℃、15 min、7.0;农药最适作用时间为15min;猪肝酯酶对双(4-硝基苯基)磷酸酯敏感性最高,毒扁豆碱次之,盐酸多奈哌齐最低;与胆碱酯酶相比,猪肝酯酶对供试的多数有机磷农药和氨甲酸酯类农药的IC50更低,,敏感性更好。【结论】猪肝酯酶具有良好的农药敏感性,可以作为酶抑制法农药残留快速检测的候选酶源。     

常用农药残留快速检测法

一、酶抑制法有机磷与氨基甲酸酯农药共为神经系统乙酰胆碱脂酶抑制物,因此可以利用农药靶标酶-乙酰胆碱酯酶(AChE)受抑制的程度来检测有机磷和氨基甲酸酯类农药。该方法目前已开发出了相应的各种速测卡和速测仪。检测时,蔬菜     

农药残留检测用植物酯酶筛选研究

目的:选用4种块茎马铃薯、红薯、茨菇、芋头提取植物酯酶,研究其检测有机磷农药的最佳条件,拟选取适宜的植物酶源;方法:使用酶抑制法,研究4种块茎中提取出的植物酯酶对农药敌敌畏、敌百虫、甲胺磷、辛硫磷灵敏度及其最低检测限;结果:4种植物酯酶均对农药敌百虫的灵敏度最好,最高可达37.184,检测限也低于国家标准;结论:因此,该酶可作为新的有机磷农药残留检测用酶。     

浅谈食用农产品农药残留检测技术应用及优化措施

<正>1中国现阶段在食用农产品农药残留中检测技术的方法1.1酶抑制检测技术酶抑制检测技术能够检测出有着病虫害防治作用的常规农药。农产品在栽培阶段，由于果农、菜农借助这一类的农药对病虫害进行防治，所以就会使农药残留显著超标。有病虫害防治作用的大多数农药包括有机磷以及氨基甲酸酯。酶抑制检测技术具体检测原理为借助酶在有机磷及脂类农药方面有着极强灵敏性的特点，来判断农产品里面的农药有没有出现超标。     

阴沟肠杆菌WJ-1中甲氰菊酯降解酶基因pytZ的克隆、表达和重组酶特性研究

【目的】农药降解酶通常比农药降解菌更能耐受异常环境,具有更宽广的降解谱。为获得高产率和高质量的农药降解酶,在实验室前期获得阴沟肠杆菌WJ-1和证实具有农药降解酶基因pytZ的基础上,本研究拟将阴沟肠杆菌WJ-1农药降解酶基因pytZ重组表达于受体菌Escherichia coli BL21。并对重组菌农药降解酶的生理生化特性进行深入研究。【方法】通过PCR技术扩增获得阴沟肠杆菌WJ-1农药降解酶基因pytZ,构建pMD19重组质粒,再与pET-24a(K+)表达载体进行连接,构建基因工程菌E.coli BL21/pET-24a(K+)-pytZ。将重组菌进行摇瓶培养。使用不同温度、pH值、IPTG浓度探讨重组酶酶促反应动力学参数。【结果】获取得到基因工程菌E.coli BL21/pET-24a(K+)-pytZ。30℃和IPTG诱导浓度为0.8 mmol/L时,摇瓶培养48 h后可以获得最高的农药降解酶产量,酶活力达到15.3 U/mL。重组菌农药降解酶的酶促反应最优温度为35℃,25～45℃热稳定良好;重组菌农药降解酶的酶促反应最优pH值为8.0,pH 7.0～9.0酸碱稳定良好;重组菌农药降解酶对底物甲氰菊酯的反应动力学参数,米氏常数K_m为0.076 mmol/L,最大反应速率V_(max)为3.023 mmol/(L·min)。【结论】利用基因工程菌Escherichia coli BL21/pET-24a(K+)-pytZ生产得到更大量的甲氰菊酯降解酶,纯度更高,具有更好的温度和pH值适应性,反应动力学参数显示其降解效率更高。     

微生物降解有机磷农药的研究进展

综述有机磷农药降解微生物的种类、降解机理及代谢途径、有机磷降解酶、降解酶基因克隆与表达等研究现状,并探讨有机磷农药微生物降解的发展趋势。     

常用农药残留快速检测法

一、酶抑制法有机磷与氨基甲酸酯农药共为神经系统乙酰胆碱脂酶抑制物,因此可以利用农药靶标酶-乙酰胆碱酯酶(AChE)受抑制的程度来检测有机磷和氨基甲酸酯类农药。该方法目前已开发出了相应的各种速测卡和速测仪。检测时,蔬菜     

果蔬农产品中农药残留检测的研究进展

长期以来,由于人们对农药知识认识不足,使用不规范,使得农产品中的农药残留量较高,存在较大的安全隐患,严重影响了人们的健康。为了保障人们的生命健康,农药残留检测技术应运而生。该文对农药残留检测技术中的色谱法、质谱法、超临界流体色谱法、毛细管电泳色谱法、酶抑制法、酶联免疫法进行了概述。     

昆虫解毒酶解毒机理及其在农药污染治理中的应用

根据有关文献资料,综合评述了昆虫解毒酶的解毒机理及其在农药污染治理中的应用前景。昆虫解毒酶是昆虫在农药的长期施用下,体内产生的可代谢包括农药在内的成千上万种化合物的一类酶,该酶在消除农药的环境污染方面有良好的应用前景,为实现农药污染的生物治理提供了新思路。     

蔬菜农药残留快速检测技术研究

为了快速检测蔬菜中农药残留问题,应用农残速测仪,以绿健公司生产的试剂为检测试剂,对蔬菜中农药残留快速检测技术进行优化研究。结果表明:12种农药对乙酰胆碱酯酶的抑制率与农药浓度之间呈负相关,随着浓度的下降,酶抑制率也降低;有11种农药检出限低于国标的检测限,只有丁硫克百威比国标稍高;对酶、底物和显色剂的用量进行优化,酶加75μL,底物和显色剂各加50μL为最优组合。研究结果可以为基层开展农药残留检测提供技术支持。     

拟除虫菊酯类农药半抗原合成及酶联免疫分析

酶联免疫分析(ELISA)是农药残留检测的一种重要方法,具有方便快速、特异灵敏等优点.主要介绍了拟除虫菊酯类农药半抗原的合成方法,对拟除虫菊酯分子的环丙烷、氰基和芳香环进行修饰;对拟除虫菊酯水解产物进行修饰;增加一个连接臂作为半抗原.同时介绍了酶联免疫分析的研究进展,对拟除虫菊酯类农药半抗原的合成及酶联免疫分析进行了讨论和展望.酶联免疫分析在拟除虫菊酯类农药的残留检测中将起到越来越重要的作用.     

基于酶抑制法的农药残留快速比色检测研究

我国是一个农业大国,农业生产规模巨大,对农药的需求量和产量也都十分巨大,在世界上名列前茅。通过使用农药可以降低农作物的病虫害,提高农作物产量。但是农药不能过量使用,否则就会造成农作物农药残留超标,而这些农药残留会对人体产生危害,从而引发安全问题,因此对农药残留的检测尤为重要。目前我国最常使用的农药的主要成分是有机磷与氨基甲酸酯类农药,因为这类农药对乙酰胆碱酯酶有抑制作用,根据吲哚酚乙酸酯为酶促水解反应的显色底物,制造了一种抛弃型农药残留快速检测酶片。本文对基于酶抑制法的农药残留快速比色检测进行研究分析,探讨其应用的可行性,减少我国因农药残留带来的农业安全问题。     

不同处理方法对果蔬中有机磷类农药残留的去除效果

采用清水、普通洗洁精、无限极洗洁精和淘米水,对菜花、菠菜、甜椒及生菜分别浸泡3、6、9 min,以无浸泡处理为对照,通过酶抑制率测定方法,比较各种处理方法对农药残留的处理效果。结果表明,用无限极洗洁精处理菜花3 min时,农药残留量检测值最低,酶抑制率为1.650%;用自来水浸泡菠菜3 min时,农药残留量检测值最低,酶抑制率为5.447%;用淘米水处理甜椒6 min时,农药残留量检测值最低,酶抑制率为0.026%;而用普通洗洁精处理生菜6 min时能达到最好的处理效果。     

酶抑制-比色法检测聊城市果蔬有机磷和氨基甲酸酯农药残留

参照GB/T5009 199-2003,采用酶抑制-比色法进行检测,分析山东省聊城市水果、蔬菜的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留状况。结果表明,有机磷和氨基甲酸酯农药残留以水果类为最多,其次是根茎类和果菜类,叶菜最少;在蔬菜中农药残留较多的是萝卜、蒜薹,较少的3种是菜花、辣椒、白菜;水果中农药残留较多的为柑橘,较少的为山楂;未检测出农药残留超标样品,证明果蔬安全状况已经大为改善。酶抑制-比色法存在一定的误差,还需提高酶源稳定性和灵敏性,改进样品提取工艺。     

酶抑制率法在4种蔬菜农药残留快速检测中的应用

我国是世界人口大国,也是农业大国,农产品质量关系到可持续发展目标的实现。当前农药残留快速检测技术主要有酶抑制率法、生物传感器法和免疫法等,在我国应用最多的是酶抑制率法,是检测这2类农药残留是否超标的主要方法。本文将用酶抑制率法对4种蔬菜农药残留的情况进行检测分析。     

农药残留快速检测方法有哪些特点?

<正>酶抑制法农药残留快速检测,是利用一些农药对酶的抑制作用进行农药分析的方法。常用的酶类有胆碱酯酶和羧酸酯酶等。主要检测有机磷或氨基甲酸酯类农药,具有简单、方便、快捷、成本低廉的特点,检测过程只需30min左右,是一种定性(半定量)的检测方法,适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留检测,不适用于蔬菜中其他类型农药,对某些种类农