1日龄雏鸡中超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN—γ的体外诱生

为研究超抗原（SAg)在禽类诱导的免疫机理和进一步揭示MDV（马立克氏病病毒）感染的免疫学规律，采用NO－释放法，设计用雏鸡骨髓巨噬细胞为靶细胞检测1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN－γ体外诱生的动态变化。结果发现，超抗原SEB（SAG－SEB）可提高脾与胸腺淋巴细胞IFN－γ体外诱生水平，其中，高剂量（1ng/只）引起短时加强后下降，而低剂量（0.01ng)则出现缓升缓降现象，而MDV接种则抑制脾与胸腺淋巴细胞IFN－γ体外诱生，SAg-SEB能增强雏鸡细胞免疫，主要表现于接种初期（1－10dPI)，而MDV却在接种后1－25d间降低细胞免疫，说明超抗原SEB和MDV虽然均可引起鸡T细胞增殖，但对鸡免疫细胞IFN－γ的体外诱生作用不同。     

1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ的体外诱生

为研究超抗原(SAg)在禽类诱导的免疫机理和进一步揭示MDV(马立克氏病病毒)感染的免疫学规律,采用NO-释放法,设计用雏鸡骨髓巨噬细胞为靶细胞检测1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ体外诱生的动态变化.结果发现,超抗原SEB(SAG-SEB)可提高脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ体外诱生水平,其中,高剂量(1 ng/只)引起短时加强后下降,而低剂量(0.01 ng)则出现缓升缓降现象;而MDV接种则抑制脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ体外诱生; SAg-SEB能增强雏鸡细胞免疫,主要表现于接种初期(1-10 d PI),而MDV却在接种后1-25 d间降低细胞免疫;说明超抗原SEB和MDV虽然均可引起鸡T细胞增殖,但对鸡免疫细胞IFN-γ的体外诱生作用不同.     

雏鸡接种超抗原SEB和MDV后免疫细胞TNF-α的体外诱生

超抗原由某些细菌、病毒、支原体和寄生虫产生，其中金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)中SEB具有代表性；已知超抗原(SAg)可大量激活人和小鼠T细胞(CD4^ 和CD8^ )和抗原递呈细胞(APC)，并诱导IL-1、IL-2、IL-6、TNF、IFN-γ等Th-1细胞因子，乃至免疫无反应、细胞凋亡和免疫抑制；超抗原SEB诱导CD8^ T细胞成为细胞毒性T细胞，启动NK细胞的细胞因子产生，有研究发现，SEB具有双相激活作用，高剂量诱导迅速，低剂量诱导长期而长期的激活状态。     

超抗原SEB与MDV对雏鸡胸腺细胞IL-2生成能力的影响

将1日龄雏鸡分组接种高剂量金黄色葡萄球菌肠毒素（SEB）1ng/只、低剂量SEB0.01ng/只和马立克氏病病毒（MDV）京-1株，分别于接种后1，5，10，15，20，25d，应用MTTI地检测雏鸡胸腺细胞IL-2的生成能力，结果表明，高、低浓度SEB对IL-2生成有不同影响，高剂量SEB诱导其短暂升斋，而低剂量SEB诱导其大幅升高且持续时间较长，而MDV明显降低胸腺IL-2的生成能力，其原因可能是高剂量SEB诱导雏鸡胸腺细胞VβT细胞增殖后的细胞凋亡和免疫无反应性，低剂量SEB促进IL-2生成；对感染MDV11日龄雏鸡接种SEB0.1ng/只后，可降低死亡率，说明一定浓度的SEB具有利于降低MD致死率的作用。     

鸡T淋巴细胞IL—2的体外诱生及活性检测

经Ｌ１６正交试验选择，并经实验验证，鸡脾脏Ｔ淋巴细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）体外诱生和活性检测的最优水平组合及适宜条件的２．５μｇ／ｍＬ伴刀豆蛋白Ａ，ＩＬ－２体外诱生时间２０ｈ，１×１０＾７／ｍＬ淋巴细胞、１０％小牛血清、靶细胞培养时间４８ｈ，４×１０＾６／ｍＬ靶细胞，靶细胞接触时间３６ｈ，５ｍｇ／ｍＬＭＴＴ，ＭＴＴ加入时间３ｈ和甲替溶解时间２ｈ；胸腺Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２体外诱生和活性检测的最优水平     

雏鸡人工感染马立克氏病强毒后白细胞介素2及其受体的变化

１日龄雏鸡人工感染马立克氏病强毒后，脾脏Ｔ淋巴细胞白细胞介素２诱生活性比健康对照雏鸡显著降低，胸腺Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２诱生活性虽见降低但无统计学显著性差异。脾脏和胸腺Ｔ淋巴细胞白细胞介素２受体诱导表达显著减少。     

鸡T淋巴细胞IL－2的体外诱生及活性检测

经Ｌ１６（４５）正交试验选择，并经实验验证，鸡脾脏Ｔ淋巴细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）体外诱生和活性检测的最优水平组合及适宜条件为２．５μｇ／ｍＬ伴刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）、ＩＬ－２体外诱生时间２０ｈ、１×１０７／ｍＬ淋巴细胞、１０％小牛血清、靶细胞培养时间４８ｈ、４×１０６／ｍＬ靶细胞、靶细胞接触时间３６ｈ、５ｍｇ／ｍＬＭＴＴ、ＭＴＴ加入时间３ｈ和甲溶解时间２ｈ；胸腺Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２体外诱生和活性检测的最优水平组合及适宜条件为５μｇ／ｍＬＣｏｎＡ、ＩＬ－２体外诱生时间４８ｈ，余同脾脏Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２体外诱生及活性检测。比较试验表明，ＭＴＴ比色分析法和３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法有显著的直线回归关系。     

雏鸡应用益生素后细胞免疫功能和IL-2诱生活性的动态变化

益生素因其促进机体健康和保健功能不仅在医学上得到应用，而且在畜牧业上也逐渐受到重视，并在其提高宿主的生物屏障和抗病能力等研究中已取得一定的进展。但是，对益生素的详细作用机理，尤其是增进免疫作用的机理仍缺乏深入系统的研究。因此，本项研究对雏鸡应用益生素后T细胞免疫功能及其IL-2诱生活性的动态变化进行了检测，为益生素的应用及开发提供重要的科学依据。     

雏鸡在感梁IBDV后血浆cAMP,cGMP和IL—2水平变化

在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０－５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ＩＬ－２水平动态变化。结果表明：示免疫攻毒鸡（Ａ组）、免疫攻毒鸡（Ｂ组）和未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）在ＩＢＤＶ攻毒前１天血浆ＣＡＭＰ和ＣＧＭＰ水平Ｂ组明显高于Ａ和Ｃ组,ＣＡＭＰ／ＣＧＭＰ幽会同样是Ｂ组高于或明显高于Ａ和Ｃ组,ＩＬ－２水平三组之间无明显差异。在攻毒后的头５天内,Ｂ和Ｃ组ＣＡＭＰ明显升高,而Ａ组     

vMDV感染雏鸡Mφ活性及IL-1体外诱生活性的变化

本研究以AA肉用雏鸡为试验动物,采用MTT法研究了马立克氏病(vMDV)感染雏鸡后巨噬细胞(Mφ)活性和白细胞介素1(IL-1)体外诱生活性的变化。结果表明:1日龄雏鸡vMDV强毒感染后,巨噬细胞活性和白细胞介素1体外诱生活性显著降低(P<0.05),提示雏鸡受vMDV攻击后,Mφ功能受损,IL-1生成减少,与马立克氏病(MD)及马立克氏病肿瘤的发生和发展有关。     

重组鸡IL-2的抗球虫作用

鸡白细胞介素2(Ch IL-2)是一种重要的细胞因子,对Ch IL-2的抗球虫作用做了初步研究,分别在14日龄和21日龄给实验雏鸡胸部肌肉注射不同剂量的重组Ch IL-2蛋白,28日龄口服接种1×105个活球虫卵囊,结果表明,重组Ch IL-2蛋白能降低相对卵囊产量、减少盲肠病变、提高相对增重。其中以注射250μg重组Ch IL-2蛋白的试验组抗球虫效果最好,相对卵囊产量为23.26%,盲肠病变记分分别为0.4,相对增重率为97.80%,综合抗球虫指数(AC I)达到192.8。抗球虫效果良好,明显的优于其他试验组。     

胸腺九肽对鸡脾淋巴细胞增殖转化及IL-2基因表达与分泌的影响

采用MTT比色法、相对半定量RT-PCR法和放射免疫测定（RIA）法研究了不同浓度的胸腺九肽对离体培养的鸡脾淋巴细胞增殖转化、IL-2基因表达与分泌的影响。结果表明，用10ng／mL和lng／mL胸腺九肽处理鸡脾淋巴细胞8h后，能显著增加由ConA诱导的淋巴细胞增殖转化反应，显著提高IL-2基因的表达水平以及细胞培养上清液中的IL-2含量（P〈0．05）；100ng／mL的胸腺九肽虽有增强脾淋巴细胞增殖转化反应以及提高IL-2基因表达和分泌能力的趋势，但与对照组无显著差异（P〉0．05）。提示，胸腺九肽能增强鸡脾淋巴细胞的增殖转化反应，并主要在基因转录水平上促进IL-2的合成与分泌，其作用与弃3量大小有关。     

鸡白细胞介素2分子单克隆抗体的研制

以含有鸡白细胞介素2（ChlL-2）基因的重组真核表达质粒pcDNA3．1-ChlL-2免疫6周龄BALB／c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2／0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克隆。共获得2株特异性分泌抗鸡IL-2分子的杂交瘤细胞株,分别命名为1H10和1E6,其腹水ELISA效价分别为1：6400和1：3200,亚类鉴定结果均为IgM。重组质粒pcDNA3．1-ChlL-2转染COS-7细胞,以上述单克隆抗体（mAb）检测表达产物,结果表明,2株mAb均能与表达产物反应;Western blot分析结果显示,2株mAb均与原核表达鸡IL-2蛋白发生特异性反应。本研究所制备的抗鸡IL-2分子mAb可为建立简单、快速的鸡IL-2检测方法提供可能,并为鸡IL-2生物学特性和禽类细胞免疫机理的研究提供材料。     

白细胞介素2对固始鸡十二指肠黏膜免疫增强作用

以父母代固始鸡为试验材料,用添加不同剂量的白细胞介素2(IL-2)佐剂的鸡志贺氏菌苗对试验鸡进行分组免疫,应用免疫组织化学技术,通过Owin图像处理系统对鸡十二指肠内分泌型免疫球蛋白A(SIgA)阳性细胞反其分泌物的分布和阳性面积进行系统分析.结果表明,SIgA阳性细胞主要分布于十二指肠肠黏膜的固有膜及肠腺腔中,在志贺菌组中添加IL-2能够提高SIgA细胞的分泌,从而提高动物体的免疫能力,且以IL-2的添加剂量在50μg时对增加志贺菌苗的免疫性效果最佳.     

Intein融合表达鸡IL-2蛋白的多克隆抗体制备

鸡白介素-2(chIL-2)是一种对T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞复制与分化起重要作用的细胞因子,并在机体天然免疫和获得性免疫的发生与维持中发挥重要作用。本研究中,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366bp)克隆连接到pTYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362bp的Intein基因融合在同一开放阅读框内,编码相对分子质量约为71 000的chIL-2-Intein融合蛋白。诱导表达chIL-2-intein融合蛋白,应用chitin-sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chIL-2-intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western blot分析抗体特异性。结果,应用纯化的chIL-2-intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测。     

中药复方对热应激下猪肠道组织IL-2 IL-10和黏液IgA含量影响

随着我国畜禽集约化养殖业的不断发展,应激性疾病,尤其是热应激已经成为我国养殖业中的重要疾病之一[1]。动物胃肠道不仅是消化、吸收营养物质的场所,也是动物体内免疫器官[2]之一,即肠壁内有大量的淋巴组织如上皮内淋巴细胞(iIEL)、固有层淋巴细胞(LPL)和Peyer's淋巴小结等,且     

Inhibition of in vitro lymphocyte blastogenesis by chicken alpha-fetoprotein

Chicken alpha-fetoprotein (ch-AFP), purified from fetal chicken serum and embryo extracts, respectively, was examined for its immunomodulatory effect in vitro. Significant (P less than 0.05) suppression of the allogeneic mixed lymphocyte reaction (MLR) was observed, when these preparations were added to one-way mixed lymphocyte cultures (MLC) in quantities of 62.5-1000 micrograms/ml. Suppression of the MLR was depending on the presence of ch-AFP for at least 16 h after initiation of the MLC, suggesting that this fetal protein was acting mainly in the early phase of lymphoblastogenesis. Serum of chicken embryos (12th and 15th day of incubation), day-old chickens, and of 10-week-old chickens of four different inbred lines were also found to exert suppression of the MLR. From these data, it is hypothesized that ch-AFP plays an immunoregulatory role by maintaining a certain stage of self tolerance during differentiation of the avian immune system.     

不同光照条件下褪黑素对鸡鸭外周血中白介素含量变化的影响

为探讨不同褪黑素水平对禽类机体免疫系统的调节作用,本试验通过控制不同光照时间分3组(分别是短光照组6h,对照组12h,长光照组18h)饲养鸡45只、鸭45只,采用放射免疫法(RIA)测定血清中褪黑素(MLT)和白介素(IL-2、IL-6)含量,研究不同褪黑素水平对鸡、鸭血清中IL-2,IL-6含量变化的影响。结果表明:短光照组的鸡、鸭血清中褪黑素水平明显升高;长光照组血清中褪黑素水平明显降低,且与对照组相比,差异显著;短光照组鸡、鸭血清中IL-2含量由于褪黑素水平的升高而有不同程度的升高,长光照组的则有不同程度的降低,分别与对照组相比,差异显著;IL-6含量随光照时间变化不明显。结论:由于控制光照时间使内源性褪黑素水平不同,褪黑素水平对鸡、鸭外周血IL-2含量有显著影响,对IL-6含量影响不明显。