转人α-乳清蛋白基因克隆牛及其胚胎移植受体血常规和血清生化指标的研究

分别选择转人α-乳清蛋白基因牛(转基因组)及其胚胎移植受体(受体组)和普通牛(对照组)各5头,对3组试验牛进行颈静脉跟踪采血3次,每次间隔14d,分析血常规和血清生化指标.结果表明:在血常规指标中,转基因组牛的红细胞数和血小板显著低于对照组(P<0.05),红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白量显著高于对照组(P<0.05);受体组牛的红细胞数、血红蛋白浓度和红细胞比积均显著低于对照组(P<0.05).在血清生化指标中,转基因组和受体组牛的血清电解质K和P含量均显著小于对照组(P<0.05).转基因组牛的血脂浓度、肌酸激酶活性、天冬氨酸氨基转移酶活性和尿素氮浓度均显著低于对照组(P<0.05),而血肌肝浓度显著高于对照组(P<0.05);受体组牛的血糖浓度、总蛋白浓度和尿素氮浓度等指标均显著低于对照组(P<0.05),而天冬氨酸氨基转移酶活性显著高于对照组(P<0.05).尽管转人α-乳清蛋白基因克隆牛及其胚胎移植受体在某些血常规和血清生化指标上与对照牛存在显著差异,但所有指标均处在健康牛正常值范围内.     

蒙古马与英纯血马血液生化指标的比较研究

本文随机测定了蒙古马(Mongolian Horse)26匹、英纯血马(Thoroughbred)29匹的白蛋白、总蛋白、丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、尿素等7项血液生化指标。结果表明蒙古马各项指标中总蛋白、白蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等4项差异极显著。蒙古马中青年马的乳酸脱氢酶和碱性磷酸酶高于老龄马，总蛋白、白蛋白、尿素、碱性磷酸酶、门冬氨酸氨基转移酶、丙酸氨基转移酶等6项指标差异不显著。英纯血马中青年马的白蛋白、尿素和丙氨酸氨基转移酶低于老龄马，白蛋白、尿素、乳酸脱氢酶、丙氨酸氨基转移酶等4项指标差异不显著，总蛋白和碱性磷酸酶差异极显著。     

tlr4基因对羊肠道细菌影响的研究

【目的】通过分析tlr4基因对羊肠道主要细菌数量的影响,评价转基因羊tlr4的生物安全性。【方法】收集15只转基因羊tlr4和15只非转基因羊的粪便样本,采用传统平板培养法和实时荧光定量PCR法(quantitative Real-Time PCR,qPCR)分析转基因羊tlr4和非转基因羊肠道中主要细菌数量的变化。【结果】传统培养法的结果表明,转tlr4基因对羊肠道中大肠杆菌(E.coli)、沙门氏菌(Salmonella)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、粪肠球菌(Enterococcus)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus)的生长均有一定程度的抑制作用,在数量上转基因羊tlr4和非转基因羊的差异不显著(P0.05);qPCR法的结果表明,转tlr4基因对羊肠道中大肠杆菌、双歧杆菌、拟杆菌(Bacteroides)和粪肠球菌的数量亦无显著性影响(P0.05)。【结论】显示抗病基因tlr4处理对羊肠道主要细菌基本无显著性影响。     

波槐F1羊肉品质及抗氧化性研究

[目的]为了对波尔山羊与槐山羊杂交后代的肉品质及抗氧化性进行研究。[方法]随机选择相同放牧条件下8～10月龄、性别一致、体重接近的10只波槐F1羊和河南槐山羊进行屠宰,对其肉品质及抗氧化性进行对比分析。[结果]结果表明:波槐F1羊肌肉中氨基酸总量显著高于槐山羊(P<0.05),其中异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸等差异显著(P<0.05);波槐F1羊肌肉中的不饱和脂肪酸显著(P<0.05)或极显著地高于槐山羊(P<0.01);槐山羊肌肉中的超氧化物岐化酶的活力高于波槐F1羊,差异显著(P<0.05);其丙二醛的含量低于波槐F1羊,但差异不显著(P>0.05)。[结论]该研究为羊的育种中肉质的进一步改良提高提供理论依据。     

不同来源山羊体细胞重编程效率比较

[目的]检测克隆奶山羊(♀12003)和转基因克隆奶山羊(♂12001)作为供体细胞,对体细胞重编程效率的影响。[方法]采用慢病毒作为载体,携带多能因子来感染正常山羊(g2)、♀12003和♂12001体细胞,统计克隆形成率和碱性磷酸酶阳性克隆率。[结果]与普通山羊(g2)相比,转基因克隆奶山羊耳成纤维细胞的重编程效率低,出现的细胞克隆在传代之前容易分化;克隆奶山羊体细胞与普通山羊体细胞的重编程效率接近,转基因克隆奶山羊(♂12001)的重编程效率极显著低于克隆奶山羊(♀12003)和普通山羊(P0.01)。[结论]转基因克隆奶山羊体细胞可以被重编程为诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs),但效率较低。     

剑白香猪血液生理指标研究

[目的]研究剑白香猪不同发育阶段血液指标特性。[方法]选取2、4和6月龄剑白香猪各10头,共30头,公母各半,测定主要血液生理指标,并应用SPSS10.0软件进行统计分析。[结果]相同性别不同月龄猪只的大多数血液生理指标之间差异极显著（P〈0.01）或差异显著（P〈0.05）;相同月龄不同性别之间,除2月龄的红细胞比值,4月龄的红细胞平均血红蛋白浓度、淋巴细胞比例,6月龄的血红蛋白浓度之间差异显著外（P〈0.05）,其他血液学指标均差异不显著。[结论]该研究为剑白香猪品种改良以及医学研究提供了理论依据。     

转Bar基因稻谷对妊娠小鼠生殖及健康的影响

为评价转Bar基因稻谷对妊娠小鼠的生殖及健康的影响,将120只SPF级昆明小鼠随机平均分为两组,分别喂食不同饲量(20%、40%和60%)转基因稻谷和非转基因稻谷,饲养90 d让其自然配种受孕;妊娠14～15 d取样解剖,记录妊娠情况,采血稀释液抗凝,用全自动血液分析仪进行血液生理指标分析。结果表明:与对照组相比,亲代添加40%转基因稻谷组中小鼠的红细胞数、血细胞比容及平均红细胞血红蛋白量有显著升高(P<0.05);F1代添加20%非转基因稻谷对照组中白细胞数和血小板数显著升高(P<0.05),其他各组的各项生理指标无显著性差异,转基因组各项生理指标均在正常范围内。各剂量转基因组的生殖力与对照组相比无显著差异(P>0.05)。表明试验期内,妊娠小鼠饲喂转Bar基因稻谷,对其生殖及健康无显著影响。     

贵州白山羊和古蔺马羊脂联素基因多态性及其与繁殖性能的关联研究

[目的]阐明西南地区具有代表性的山羊品种脂联素(adiponectin)基因的多态性及其与繁殖性能之间的关系,为山羊高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据.[方法]根据牛的AMP00序列设计4对引物,采用PCR-SSCP技术检测ADIPOQ在川东白山羊、大足黑山羊、贵州白山羊、金堂黑山羊、板角山羊、成都麻羊、南江黄羊、古蔺马羊和马头山羊等9个山羊品种中的单核苷酸多态性,同时在贵州白山羊和古蔺马羊两个群体中研究脂联素基因多态性与山羊繁殖力之间的关系.[结果]4对引物中只有引物P4存在多态性.对于P4的扩增片段,在不同的山羊品种中检测到从、AG和GG 3种基因型,测序分析表明与AA型相比,GG型有一处单碱基突变(954G→A).GG型和AG型的贵州白山羊产羔数最小二乘均值分别比AA型的多0.18只(P<0.05)和0.20只(P<0.05); GG型和AG型的古蔺马羊产羔数最小二乘均值分别比从型的多0.16只(P<0.05)和0.15只(P<0.05).另外,贵州白山羊和古蔺马羊的不同基因型之间初生重的最小二乘均值均没有显著差异(P>0.05).[结论]表明ABIPOQ可能是影响贵州白山羊和古蔺马羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密连锁的遗传标记.     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对蛋鸡生产性能、血液指标和抗氧化能力的影响

[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对高产蛋鸡生产性能、蛋品质、血常规、血液生化指标以及肝脏抗氧化能力的影响。[方法]选用26周龄体质量为(1.90±0.2)kg、产蛋率一致的海兰蛋鸡120只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复5只,对照组每天灌胃等量生理盐水,试验组每天分别灌胃1、5、10、20和50 mg·kg~(-1)DON,连续灌服6周。[结果]与对照组相比,不同质量浓度DON处理组蛋白高度和哈夫单位均显著升高,白细胞(WBC)和血小板(PLT)数量均显著降低(P0.05或P0.01)。DON剂量为10 mg·kg~(-1)时,与对照组相比,蛋鸡产蛋率极显著降低(P0.01),血清中红细胞(RBC)数量、血红蛋白(HGB)含量和红细胞压积(HCT)极显著上升至最高(P0.01);DON剂量高于10 mg·kg~(-1)时,与对照组相比,血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性和尿素(UREA)浓度及肝脏组织中一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)浓度显著提高(P0.05或P0.01),蛋壳颜色和肝脏组织中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低(P0.05或P0.01),但5 mg·kg~(-1)DON组的T-AOC水平和SOD活性显著提升(P0.05)。[结论]DON会显著影响蛋鸡的凝血功能,当DON剂量达到10 mg·kg~(-1)会显著降低蛋鸡产蛋率和蛋品质,引起肝脏和肾脏组织损伤,对肝脏的抗氧化能力也具有显著抑制作用。     

体细胞核移植法获得转人乳铁蛋白基因克隆山羊妊娠的研究

[目的]探讨供体细胞类型、移植胚胎发育阶段、数量及部位对山羊转基因克隆效率的影响。[方法]利用体细胞核移植技术将转染人乳铁蛋白基因hLF的山羊胎儿成纤维细胞(GFF)和乳腺上皮细胞(GMGE)移植到MII期去核卵母细胞内,经电融合、激活、体外培养后,2~8细胞期克隆胚被移植到同期发情山羊的输卵管内,囊胚被移植到子宫角内。[结果]GFF与GMGE的妊娠率相近(输卵管移植妊娠率分别为26.47%及20.00%);在GFF,输卵管移植的妊娠率与子宫角内移植妊娠率接近(分别为26.47%及25.00%),输卵管移植胚胎平均数为21.2组的妊娠率显著高于5.93组和9.64组(40.00%及26.67%,21.43%)。[结论]供体细胞类型、移植胚胎的发育阶段及移植部位对山羊转基因克隆效率的影响不大,但对于输卵管移植,受体羊移植胚胎数量对妊娠率有明显的影响。此外,该研究还提示了利用成年羊乳腺上皮细胞制作转基因动物的可行性。     

海门山羊肌肉组织学特性的研究

[目的]研究海门山羊肌肉组织学性状对肉品质的影响。[方法]以12月龄海门山羊和波尔山羊×海门山羊F1公羊为研究对象,对海门山羊不同性别与不同部位肌肉的组织学性状进行系统的研究。[结果]海门山羊母羊股四头肌肌纤维面积及肌原纤维直径、肌节、I带、A带、H带长度极显著大于公羊（P〈0.01）,而背最长肌的肌纤维面积和肌原纤维直径、肌节、I带、A带、H带长度极显著小于公羊（P〈0.01）;同一性别不同部位肌肉之间的肌纤维显微结构与超微结构特性也存在显著（P〈0.05）与极显著差异（P〈0.01）;海门山羊公羊的肌纤维内含有大量线粒体、糖原颗粒和脂肪滴,说明其氧化代谢率高,保水性能强,柔嫩多汁,肉质优良。[结论]为海门山羊的进一步选育、开发和利用以及我国地方山羊品种评估提供了理论依据。     

海门山羊肌肉组织学特性的研究

[目的]研究海门山羊肌肉组织学性状对肉品质的影响。[方法]以12月龄海门山羊和波尔山羊×海门山羊F1公羊为研究对象,对海门山羊不同性别与不同部位肌肉的组织学性状进行系统的研究。[结果]海门山羊母羊股四头肌肌纤维面积及肌原纤维直径、肌节、I带、A带、H带长度极显著大于公羊（P〈0.01）,而背最长肌的肌纤维面积及肌原纤维直径、肌节、I带、A带、H带长度极显著小于公羊（P〈0.01）;同一性别不同部位肌肉之间的肌纤维显微结构与超微结构特性也存在显著（P〈0.05）与极显著差异（P〈0.01）;海门山羊公羊的肌纤维内含有大量线粒体、糖原颗粒和脂肪滴,说明其氧化代谢率高,保水性能强,柔嫩多汁,肉质优良。[结论]为海门山羊的进一步选育、开发和利用以及我国地方山羊品种评估提供了理论依据。     

西藏山羊DQA2基因多态性与血液免疫性状的相关性分析

[目的]了解西藏山羊DQA2基因与血液免疫性状的关系。[方法]利用PCR-RFLP对西藏山羊DQA2基因外显子2多态性及其血液免疫指标效应进行了分析。[结果]在西藏山羊中共检测到4种基因型,由3个等位基因控制。其中,BB基因型淋巴细胞数目显著高于AB型和BC型(P0.05),BB型中间细胞数目高于AB型和BC型,BB型平均血红蛋白含量低于AB型和BC型,但均差异不显著。[结论]西藏山羊BB基因型是影响血液淋巴细胞总数的重要因素,与血液免疫指标有一定的相关性,可作为抗病育种的遗传标记,也为后期的辅助选择提供了科学依据。     

低温处理下转果聚糖合成酶基因对烟草抗逆相关生理指标的影响

以转CMM-6-SFT基因烟草和非转基因烟草W38为材料,在4℃下低温胁迫8 h,分析转基因烟草中的可溶性蛋白含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性与非转基因烟草的差异。结果表明,转果聚糖合成酶基因烟草叶片中的可溶性蛋白含量、SOD活性、CAT活性、POD活性均较对照有所增加,且4℃低温下比常温下的增幅要大,且4℃下转基因材料与对照存在显著差异(P0.05)。说明转CMM-6-SFT基因烟草抗逆性增强,为利用基因工程技术改良烟草抗逆性提供重要理论依据。     

猪血球粉与鱼粉组合对异育银鲫部分生理功能的影响

[目的]研究猪血球粉与鱼粉组合对鲫鱼非特异性免疫力和血液学指标的影响,探讨以饲料原料优化组合实现猪血球粉对鱼粉的替代效果和可行性。[方法]将初始体重为（18.40±1.07）g的270尾鲫鱼随机分为6组,每组设3个重复,每重复15尾鱼。以不添加猪血球粉的饲料为对照组,其他饲料组猪血球粉含量分别为2.5%、5.0%、7.5%、10.0%、11.5%;对应的鱼粉用量分别为13.8%、10.7%、7.8%、4.8%、1.8%、0。[结果]经过83 d的养殖试验,与对照相比,当饲料中猪血球粉添加量为7.5%时,异育银鲫血清总蛋白含量显著大于对照组（P〈0.05）;添加量大于7.5%时,异育银鲫肝脏GPT酶活力低于对照而血清丙氨酸氨基转移酶活力大于对照组,差异不显著（P〉0.05）;各试验组的T-SOD、LSZ、血红蛋白、天冬氨酸氨基转移酶、尿素、葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量无显著性差异（P〉0.05）。[结论]在该试验条件下,猪血球粉替代鱼粉对鲫鱼健康无明显不良影响,但猪血球粉添加量大于7.5%时可能会对鲫鱼肝脏造成负担,影响健康。     

转人乳铁蛋白基因山羊乳对大鼠生长及代谢机能的影响

选用30只100 g左右清洁级SD大鼠,雌雄各半,随机均分为3组,转基因乳组每天2次灌胃转人乳铁蛋白基因(hLF)波尔山羊乳1 mL(蛋白含量0.93 g·mL-1),普通乳组灌胃未经任何处理的普通波尔山羊乳1 mL(蛋白浓度0.93 g·mL-1),生理盐水组灌胃等量灭菌生理盐水;自由采食、饮水,连续15 d;颈部静脉采血致死,收集血清.结果显示:灌胃转hLF基因山羊乳显著提高了雌、雄大鼠的日增重,与生理盐水组相比差异极显著(P<0.01),与普通乳组相比差异显著(P<0.05),而普通乳组与生理盐水组相比差异不显著;灌胃转基因和普通山羊乳对其他表观及生化指标均无显著影响(P>0.05).试验结果表明:短期灌胃转hLF基因山羊乳能够促进大鼠的生长,但对大鼠的代谢机能没有显著影响.     

富硒乳酸菌对四氯化碳诱导的大鼠肝损伤的保护作用

[目的]本试验旨在探讨富硒乳酸菌(SL)对四氯化碳(CCl4)诱导肝脏纤维化大鼠的保护作用。[方法]首先制备富硒乳酸菌,然后用CCl4诱导建立大鼠慢性肝损伤模型。应用HE染色、天狼星红染色进行病理分析,应用自动生化分析仪测定大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,通过Real-time PCR法测定Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、α-平滑肌蛋白(α-SMA)及炎症相关基因的表达水平。[结果]SL显著降低了CCl4诱导肝纤维化大鼠的血清ALT(87.3 U·L~(-1))、AST(98 U·L~(-1))活性和MDA(2.42 nmol·mg~(-1))含量(P0.05),但增加了GSH-Px(37.9 U·mg~(-1))、SOD(202U·mg~(-1))活性和GSH(3.36 mg·g~(-1))含量(P0.05)。SL抑制了CCl4诱导的肝脏炎症和坏死。此外,SL显著降低了CCl4诱导肝损伤大鼠的α-SMA、CollagenⅠ、转化生长因子(TGF-β1)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)及炎症相关基因的表达(P0.05)。[结论]SL通过缓解肝脏氧化应激,降低肝内炎症反应来保护CCl4诱导的肝脏纤维化。     

大米蛋白替代鱼粉对团头鲂生长、肠道消化吸收功能以及氨基酸代谢的影响

[目的]本文旨在探究大米蛋白替代鱼粉以及补充微囊或者晶体赖氨酸对团头鲂生长、肠道消化吸收功能以及氨基酸代谢的影响。[方法]制备了4组等氮等能的饲料,分别为鱼粉组(FM)、大米蛋白组(RPC)、大米蛋白添加微囊赖氨酸组(MRPC)和大米蛋白添加晶体赖氨酸组(CRPC)。将鱼饱食投喂8周,每日投喂3次。[结果]FM组团头鲂每日生长指数和饲料效率显著高于RPC组(P0.05),而与其他各组间差异不显著(P0.05)。RPC组肠道蛋白酶、脂肪酶、Na+,K+-ATP酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶和γ-谷氨酰转肽酶的活性显著低于FM组(P0.05),而MRPC与CRPC组和FM组间差异不显著(P0.05)。RPC组肝脏天门冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶活性显著低于其他组(P0.05),而琥珀酸脱氢酶活性显著高于其他组(P0.05)。RPC组血浆中蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、总蛋白和白蛋白含量显著低于其他各组(P0.05),而尿素氮含量显著高于其他组(P0.05)。此外,FM组血浆中牛磺酸水平显著高于其他各组(P0.05)。各组间肠道淀粉酶、肝脏黄嘌呤氧化酶以及血浆谷草和谷丙转氨酶活性无显著差异(P0.05)。[结论]大米蛋白替代鱼粉对团头鲂生长、肠道消化吸收功能以及氨基酸代谢有一定影响,但在饲料中补充微囊或者晶体赖氨酸可以弥补这一缺陷。     

微生物发酵饲料对乐至黑山羊生产性能、养分消化率与血液生化指标的影响

为了研究微生物发酵饲料对山羊生产性能、养分消化率和血液生化指标的影响,选择体重为11.60±2.45 kg的乐至黑山羊断奶羔羊,采用随机区组试验设计,按体重大小,将其分为4个区组,每个区组24头,随机地分到3个处理组（1个对照组和2个试验组）,每个处理8个重复,每个重复4头羊;对照组精料为场里原有精料（基础精料）,试验Ⅰ组精料为50%基础精料+50%微生物发酵饲料,试验Ⅱ组精料为100%发酵饲料,粗料为青贮玉米秸和油菜颖壳,各组相同。结果发现：与对照组相比,试验Ⅰ组提高日增重1265%（P＜0.05）;试验Ⅰ组和Ⅱ组日粮干物质、粗蛋白、粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的消化率均高于对照组（P＜0.05）,降低血清尿素氮含量（P＜0.05）和发病率（P＜0.01）;各组血清中总蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶含量差异不显著（P>0.05）;试验Ⅰ组的经济效益比对照组高4472%,而试验Ⅱ组的采食量、日增重和经济效益低于对照组。说明山羊精料中添加50%的微生物发酵饲料,可提高山羊日增重和养分消化率,增强抗病能力;提高经济效益,具有推广应用价值。     

膨化饲料中蛋白水平对大规格鳙生长、消化酶活性和抗氧化能力的影响

[目的]本文旨在探讨饲料蛋白水平对大规格鳙(Aristichthys nobilis)生长、血液生化指标和抗氧化酶活性的影响。[方法]以鱼粉、豆粕为主要蛋白源,制备蛋白水平质量分数分别为20%、24%、28%、32%、36%和40%的6种膨化饲料饲养鳙8周。[结果]鳙的生长性能(增重率、特定生长率、饲料效率)均在饲料蛋白水平32%时达最佳值;当饲料蛋白水平在28%时,蛋白质效率和蛋白质保留率表现最好;饲料蛋白水平对鳙的肥满度具有显著影响(P0.05),而对肝体指数和脏体指数均无显著影响(P0.05)。饲料蛋白水平对鳙前、中肠淀粉酶活性均无显著影响(P0.05),当蛋白水平为28%时,后肠淀粉酶活性显著高于其他试验组(P0.05);饲料蛋白水平对鳙前、中、后肠脂肪酶活性均无显著影响(P0.05);中后肠蛋白酶活性随饲料蛋白水平的提高呈先升后降的趋势,均在蛋白水平为28%时达最高,且显著高于其他组(P0.05),而前肠蛋白酶活性无明显变化(P0.05)。36%和40%蛋白组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性显著高于其他组(P0.05);32%蛋白组葡萄糖和补体C_3含量显著高于其他组(P0.05),而饲料蛋白水平对鳙血清中总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和溶菌酶(LZM)均无显著影响。丙二醛含量及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性都在28%蛋白组达最佳值,但与32%蛋白组无显著差异(P0.05)。[结论]以特定生长率和蛋白质效率为指标,采用二次曲线模型分析表明鳙膨化饲料中蛋白质的适宜需求水平为29.28%～32.44%。