滇重楼新病毒ParV1的分子变异分析及致病性测定

为明确云南省引起滇重楼（Paris polyphylla var. yunnanensis）病毒病的病原,以昆明市发现的花叶、斑驳症状的滇重楼叶片为样品,进行透射电镜观察、高通量测序和反转录（RT-PCR）检测。结果表明,观察到大小约（700～1 000）nm×13 nm的线状病毒粒子;基于高通量测序结果设计特异性引物进行RTPCR扩增并克隆,得到1条全长为10 066个核苷酸（nt）的病毒序列,将该病毒暂命名为Paris virus 1(ParV1);BLAST比对分析表明,ParV1与马铃薯Y病毒属（Potyvirus）中的浙贝母花叶病毒（Thunberg fritillary mosaic virus,TFMV）具有最高为65.1%、68.9%的核苷酸及氨基酸（aa）序列同源性;多序列比对分析显示,ParV1多聚蛋白与potyviruses具有49.6%～65.1%的nt序列同源性及47.1%～68.9%的aa序列同源性;基于多聚蛋白氨基酸序列构建的系统发育树表明,该病毒与TFMV亲缘关系较近且聚为一个单独的分支。综上所述,确定ParV1属于Potyvirus的一种新病毒。将含P...     

滇重楼最佳授粉期的研究

[目的]优选滇重楼的最佳授粉期。[方法]采用TTC法测定花粉的活力,并采用联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性,根据研究滇重楼花粉活力变化规律及柱头可授性优选滇重楼的最佳授粉期。[结果]滇重楼花粉囊开裂时活力最高为68.2%,前2 d内,花粉活力下降不明显。第4天开始,活力明显下降,但仍然具有一定的活性。柱头的活性在花粉囊开裂后5 d内最强,滇重楼的授粉应选择在这5 d内进行。[结论]该研究优选了滇重楼的最佳授粉期,为滇重楼的进一步开发利用提供了依据。     

不同处理方法对重楼种子萌发的Meta分析

应用Meta分析方法,通过中英文数据库筛选了1990—2019年关于重楼(Paris polyphylla)种子萌发的文献24篇,得到78个独立试验组,分析温度、机械、生长素、复合处理对重楼种子萌发的影响,并探讨较高海拔下重楼种子繁育的可能性。结果表明,恒温处理促进重楼种子萌发是一种简单可靠的方法,恒温、变温、沙藏方式的交互处理能够有效提高重楼种子发芽率(相对发芽率为0.61)。生长素使用不当会抑制重楼种子萌发。在相同处理条件下,滇重楼[Paris polyphylla Sm. var. yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz]比华重楼[Paris polyphylla Sm. var. chinese(Franch.)H. Hara]具有更好的发芽效率和稳定性。针对适宜重楼生长的较高海拔生境下种子发芽相关研究缺乏,需要针对较高海拔重楼繁育技术进行研究。     

滇重楼辣椒轻斑驳病毒分离物的鉴定及全基因组序列分析

滇重楼(Paris polyphylla var. yunnanensis)是多年生草本植物,其药用部位为地下根茎,是一种重要的中药材。为明确侵染滇重楼的病毒病原,对采自云南省曲靖市的滇重楼进行透射电镜观察、DASELISA和RT-PCR技术检测。在透射电镜下观察到杆状病毒粒子,大小为(200～300)nm×(20～36)nm。对采集到的7份病样进行DAS-ELISA检测,结果表明,其中5份病样呈阳性。通过RT-PCR技术扩增、克隆获得1个全长为6 357 bp的曲靖分离物PMMoV-QJ的全基因组序列。将PMMoV-QJ的全基因组序列与国内外已经报道的10个PMMoV分离物进行同源性分析比对,其同源性为99.42%～99.81%。基于全基因序列的系统发育分析表明,PMMoV-QJ与韩国分离物亲缘关系密切。本研究明确了该分离物的亲缘关系,从分子水平鉴定该分离物,为后续滇重楼病毒病的预防提供理论依据。     

滇重楼种子萌发关键技术研究

为研究滇重楼种子萌发技术,采用不同温度和不同基质对滇重楼种子进行处理,观测其对滇重楼种子萌发的影响。结果表明:18~20℃恒温条件最适宜滇重楼种子萌发,在恒温条件下,处理55 d后种子开始萌发,处理130 d后沙与基质处理种子萌发率分别为91%和95%;变温(室温)条件下,种子所需萌发时间较长,处理120 d左右种子才开始萌发,管理成本增加,与恒温条件处理相比萌发率较低,190d试验结束时,沙与基质处理的种子萌发率分别为73%和80%。可见,恒温处理缩短萌发时间,对重楼育苗具有重要意义。     

生境对滇重楼种子发育与萌发的影响

采用石蜡切片法研究生境对滇重楼种子发育的影响,萌发法研究果实重量、种子数、种仁重量同滇重楼种子萌发率的关系。结果显示,滇重楼种子在果实成熟时,胚停留在球形胚阶段,胚的发育程度与生境无关;中等大小果实育苗可以获得较高的萌发率。     

温度对滇重楼种子萌发的影响

[目的]研究滇重楼种子萌发的最适温度条件。[方法]采用不同的温度条件(15、20、25℃)对滇重楼种子进行培养,观测其对种子萌发的影响。[结果]20℃恒温条件下,培养55 d后,种子开始萌发,100 d后萌发率为98.89%,根的生长情况也最好;15和25℃条件下培养的种子,萌发率低,萌发不整齐,根生长缓慢。[结论]20℃恒温是滇重楼种子萌发及根系生长最适宜的温度条件。     

滇重楼种子萌发及组织培养研究

研究了滇重楼种子休眠的解除方法以及外植体处理、培养条件对其幼苗生长发育的影响。结果表明,滇重楼种子在连续经过4℃低温层积4~5个月、红外光照射30 min、二次变温(4℃-40℃-20℃)处理、混合液(19 mmol/L KNO3+800 mg/L GA3)保湿7d后,休眠能得到明显解除,播种在营养钵(珍珠岩:蛭石=1:1)中60 d,萌发率可达40%;对胚根长至2 cm的萌发种子进行HgCl2消毒的最合适时间是10 min,既能控制污染率又不伤及胚芽的活性;在22℃、每天光照12 h(1 000 lx)的条件下,去除胚乳的幼芽在附加0.5 mg 6-BA和0.5 mg IAA的MS培养基上培养30 d后即可长成具有单叶的完整植株。     

三七愈伤组织对滇重楼种子萌发的影响

滇重楼为延龄草科重楼属多年生草本植物,具有抗癌、止血等功效,市场应用前景广阔,但其种子在实际生产中存在萌发周期长和萌发率低等缺点。为了缩短滇重楼种子萌发时间,提高其萌发率,在三七愈伤组织上对滇重楼种子进行暗培养和光照培养试验。结果表明,在三七愈伤组织上进行暗培养能明显缩短滇重楼种子的萌发时间,最快在第10天就开始萌发,萌发高峰期在第20~30天,平均萌发率为12.5%。     

滇重楼的种子繁殖技术

文章介绍了滇重搂的种子采收、处理、催茅和移栽的技术。     

滇重楼内生真菌的分离及其对滇重楼种子胚发育的效应(英文)

[目的]本研究旨在分离滇重楼的内生真菌并探究其对内生真菌胚发育的效应。[方法]分离滇重楼的内生真菌并进行形态学鉴定,并用石蜡切片和显微照相术研究内生真菌并探究其对滇重楼种子胚发育的效应。[结果]从滇重楼根状茎中分离到9种属于3目、5科、7属的内生真菌,即PPYEF-1,PPYEF-2,PPYEF-3,PPYEF-4,PPYEF-5,PPYEF-6,PPYEF-7,PPYEF-8和PPYEF-9。除了PPYEF-4(枝孢霉属)外,其他真菌都能促进滇重楼种子的胚发育,大多数达到极显著或显著水平;PPYEF-9(木霉属)能导致滇重楼种子发育的最长胚长和最高胚率。[结论]本文可为滇重楼内生真菌在打破滇重楼种子休眠中的应用提供参考。     

滇重楼种子休眠机理研究

【研究目的】探讨滇重楼种子休眠机理,为打破种子休眠促进滇重楼实生育苗提供理论基础。【方法】采用重量法、胚率测定、ELISA等方法对种子吸水特性、萌发抑制物及种胚休眠与发育的内源机理进行了研究。【结果】种子不存在吸水障碍,与休眠无关;滇重楼种子中存在着萌发抑制物;滇重楼种子休眠属于形态学-生理学休眠类型;内源激素ABA和GA3在滇重楼种子休眠与萌发过程中起着重要作用,ABA是引起休眠的关键因素,ABA含量的降低是滇重楼种胚发育的始动因子,GA3有助于种子的生理后熟。【结论】滇重楼种胚发育不完全、种子中存在萌发抑制物质是种子休眠的主要原因。萌发抑制物的存在可能抑制了种胚发育,而与生理学后熟过程无关。在自然条件下,滇重楼生境中较长的低温时期可能是滇重楼种子具有较长时间休眠的外界原因。     

滇重楼的花粉活力测定方法比较

[目的]为提高滇重楼的繁殖效率。[方法]将滇重楼开花植株裂开花药的花粉轻轻涂抹载玻片上,分别用碘-碘化钾(I2!KI)染色法、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法和略有改动的荧光素二醋酸酯法对滇重楼花粉活力进行测定。[结果]氯化三苯基四氮唑染色法的染色率较低,仅为27.51%;醋酸洋红染色法和荧光素二醋酸酯法的染色率较高,分别为91.30%和90.55%,而且所测数据较为接近;碘-碘化钾染色法虽然能将花粉染上色,染色率为94.80%,但染上色的花粉包含退化的花粉和失活的花粉。[结论]醋酸洋红染色法和荧光素二醋酸酯染色法的染色率较高,能较好地区分出有活力的花粉和失活的花粉,而且能较为准确地反映滇重楼花粉的生活力。     

滇重楼栽培技术及有效成分积累研究综述

综述了滇重楼繁育技术、施肥技术和病虫害防治技术以及有效成分积累规律等方面的研究进展,为滇重楼的栽培管理和有效成分积累提供了一定的参考。     

叶面肥对滇重楼光合的影响

通过喷施12种不同配方的叶面肥,研究其对滇重楼光合特性的影响。结果表明,各配方处理都能提高滇重楼的最大光合速率,其中F7、F1、F4和F10处理分别比对照提高了33.28,26.44,14.20,14.11个百分点;除F6外的其他各处理均能增加表观量子利用效率;除F7和F10外,其他各处理暗呼吸速率与对照比都有不同程度的降低;除F7外,其余处理光补偿点都与对照成正显著差异;各处理光饱和点对其影响不一致。     

滇重楼2种真菌性叶斑病的初步研究

对栽培滇重楼病害进行调查、鉴定,明确滇重楼白霉病由半知菌类的柱隔孢(Ramularia)引起,褐斑病由细交链孢菌(Alter-naria tenuis Nees)引起,并针对这2种病害提出了建议性的生态防治措施。