胚胎干细胞分离培养研究进展

胚胎干细胞(ESCs)是一种高度未分化,能自我复制、自我更新,在体外连续传代并保持未分化状态和具有发育全能性的细胞.文章从研究概况、体外分离培养、生物学特性、鉴定方法、影响ESCs分离培养的因素、存在问题以及应用前景等方面对胚胎干细胞进行了概述.     

胚胎干细胞的研究进展

胚胎干细胞来源于附植前胚胎的内细胞团或附植后胎儿的原始生殖细胞具有发育全能性的细胞。本文从它的研究概况、生物学特性、胚胎干细胞的分离培养与建系等方面做一概述。     

饲养层细胞对胚胎干细胞的影响及其分离培养的影响因素

胚胎干细胞及其相关研究是生命科学领域中最有活力、最有影响力、最有应用前景的研究方向之一，它与遗传工程，转基因技术等相结合具有重大的理论意义与实践价值。饲养层细胞在胚胎干细胞分离培养的过程中起着异常重要的作用。作者结合实践经验就饲养层细胞对胚胎干细胞的影响进行了概述，介绍了饲养层细胞的分类，并分析了饲养层细胞分离培养的影响因素。     

胚胎干细胞分离和克隆影响因素的研究进展

胚胎干细胞ES是从早期胚胎或原始生殖细胞中分离出来的能够在体外进行传代培养,而不分化的全能性细胞,ES细胞最主要的生物学特征是具有发育的全能性或多能性,ES细胞能在体外培养、增殖、传代、冻存和诱导分化,是研究生物发育、行为和建立人体疾病模型的理想工具,本文重点论述了影响胚胎干细胞分离和克隆的因素。并展望了胚胎干细胞的应用前景。     

鱼类胚胎干细胞的研究进展

胚胎干细胞是存在于早期胚胎或原始生殖嵴,具有发育全能性和无限增殖能力的一类细胞。作为实验材料,该类细胞已广泛应用于基因的表达与调控、细胞分化的机制、动物克隆及转基因动物生产等研究领域。与其他哺乳动物胚胎干细胞的研究相比,虽然鱼类胚胎干细胞的研究起步较晚,但近年来该领域的研究进展迅速。本文综述了鱼类胚胎干细胞的分离培养、生物学特性、体外分化能力及嵌合体形成等方面的研究进展。     

畜禽胚胎干细胞的研究及其应用价值

综述了畜禽胚胎干细胞的生物学特性，主要畜禽胚胎干细胞的已有成果及培养早期胚胎干细胞的技术要点，并展望了人们对畜禽胚胎干细胞的应用前景。     

鱼类胚胎干细胞的研究进展

胚胎干细胞是存在于早期胚胎或原始生殖嵴,具有发育全能性和无限增殖能力的一类细胞.作为实验材料,该类细胞已广泛应用于基因的表达与调控、细胞分化的机制、动物克隆及转基因动物生产等研究领域.与其他哺乳动物胚胎干细胞的研究相比,虽然鱼类胚胎干细胞的研究起步较晚,但近年来该领域的研究进展迅速.本文综述了鱼类胚胎干细胞的分离培养、生物学特性、体外分化能力及嵌合体形成等方面的研究进展.     

分化抑制物对动物胚胎干细胞克隆率的影响

胚胎干细胞是从动物胚胎内细胞团或原始生殖细胞分离的具有全能性的细胞，在遗传学、发育生物学和细胞工程领域具有广阔的应用前景。抑制胚胎干细胞分化和促进胚胎干细胞增殖是克隆胚胎干细胞的关键，本文介绍了饲养层、条件培养基、分化抑制因子对哺乳动物胚胎干细胞分离与克隆的影响，并探讨了白血病抑制因子影响胚胎干细胞克隆的机理，认为在饲养层中添加分化抑制因子能有效提高胚胎干细胞克隆率。     

畜禽胚胎干细胞的研究及其应用价值

综述了畜禽胚胎干细胞的生物学特性,主要畜禽胚胎干细胞的已有成果及培养早期胚胎干细胞的技术要点,并展望了人们对畜禽胚胎干细胞的应用前景.     

昆明小白鼠胚胎干细胞分离培养的影响因素

为了研究影响胚胎干细胞(ESC)体外分离克隆的因素,试验采用3~5日龄大鼠心肌细胞制成心肌细胞条件培养基(RH-CM),比较了4种培养体系对小鼠胚胎干细胞体外培养的影响,并分析比较了不同饲养层对胚胎干细胞分离克隆造成的影响。结果表明:添加重组鼠白血病抑制因子和心肌细胞条件培养基在胚胎贴壁率、内细胞团(ICM)形成率和原代胚胎干细胞集落形成率以及抑制分化的过程中起到的作用显著优于未添加任何诱导成分的培养基;作为饲养层,小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离培养胚胎干细胞的效果优于小鼠睾丸支持细胞(MS)。     

Perspectives on avian stem cells for poultry breeding

Stem cells have prulipotency to differentiate into many types of cell lineages. Recent progress of avian biotechnology enabled us to analyze the developmental fate of the stem cells: embryonic stem cells / primordial germ cells (PGCs). The stem cells were identified in the central area of the area pellucida of the stage X blastoderms. These cells could be applied for production of germline chimeras and organ regeneration. Generation of medical substrate in transgenic chickens has considerable interests in pharmaceuticals. Sex alteration of the offspring should be enormously beneficial to the poultry industry. Fertilization of the sex‐reversed sperm could lead to sexual alteration of the offspring. These strategies using stem cells / PGCs should be one of the most powerful tools for future poultry breeding.     

胚胎干细胞及种系嵌合体的研究进展

胚胎干细胞是着床前的囊胚内细胞团或早期胎儿的原始生殖细胞经体外分化抑制培养建立的多能性细胞系 ,具有与胚胎细胞相似的形态特征和分化潜能 ,体外培养时保持未分化状态 ,可以传代增殖。改变维持胚胎干细胞不分化的培养条件 ,胚胎干细胞可自发分化成多细胞结构。在一定诱导下 ,胚胎干细胞可向多个方向分化 ,并生成多种功能细胞。胚胎干细胞注入到胚泡期胚胎或与桑椹期胚胎聚合 ,可以参与包括性腺在内的各种组织的嵌合体的形成。胚胎干细胞在细胞分化与调控 ,胚胎发育 ,遗传病 ,肿瘤 ,免疫和组织或器官移植等研究中显示着广泛的应用前景。而种系嵌合体的获得是实现 ES细胞途径的决定步骤 ,低的种系嵌合率则是制约 ES细胞应用的关键。提高供体 PGCs在受体生殖腺中的比例 ,缩短 ES细胞的体外培养时间 ,以及注入早期发育阶段的受体胚胎等都能提高种系嵌合率。文章从多个方面综述了胚胎干细胞的最新研究成果 ,并着重以禽类 ES细胞为例论述了种系嵌合体的检测方法 ,种系嵌合率的影响因素以及提高种系嵌合率的方法     

畜禽遗传资源保护方法的研究进展

畜禽遗传资源作为生物多样性的重要组成部分,正面临着严峻的考验,对其开展保护工作是一项迫在眉睫更是必须持之以恒的任务。作者对目前畜禽遗传资源保护的主要方法和技术,包括活体保护及利用冷冻技术、基因文库技术、体细胞克隆技术和分子遗传标记等技术保护,特别是对近年新发展起来的诱导多功能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)技术在畜禽遗传资源保护方面的应用作了概述,以期进一步对畜禽遗传资源保护奠定基础。     

家禽训练免疫研究进展

微生物耐药是威胁人类健康、动物保健和食品安全的重大问题。为减少耐药性及动物源食品的药物残留,迫切需要探索预防和治疗疾病的替代机制,其中之一便是激活先天免疫系统对病原体攻击产生强而持久的非特异性免疫应答,这一过程称为训练免疫,即先天免疫记忆。愈来愈多的研究表明,天然免疫细胞甚至组织驻留干细胞对某些感染和疫苗接种具有保护免受再感染的免疫记忆功能,即先天免疫系统也表现出适应性免疫特征。在兽医研究领域,通过改善先天免疫系统提高家禽抗病能力的概念并不新颖,但极少有可用的、有目的的针对训练免疫的应用研究。通过训练免疫途径增强动物免疫力是一个值得关注的崭新领域,将为设计新型广谱疫苗和寻找新的药物靶点开辟新的途径。笔者综述了训练免疫领域的最新进展,阐述了家禽训练免疫调控及未来研究方向。     

CRISPR/Cas9系统在家禽中应用研究进展

CRISPR/Cas系统是一种在细菌和古细菌中发现的获得性免疫系统,由规律成簇间隔短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）和CRISPR相关蛋白（CRISPR-associated proteins,Cas）组成。在此基础上改造获得的CRISPR/Cas9基因定点编辑技术可通过设计小的单链引导RNA（single guide RNA,sgRNA）对目标基因进行定向编辑。家禽作为农业经济动物,能够快速高效地生产蛋和肉产品,是世界范围内重要的蛋白质来源,也是极具价值的脊椎动物发育生物学模型。但是受限于卵生动物特点,家禽的受精卵与蛋黄表面紧密结合,未受精的卵子非常难取出,对家禽单细胞阶段受精卵进行靶向遗传修饰的可行性较低,因而家禽功能基因及转基因研究进展较为缓慢。CRISPR/Cas9基因定点编辑技术相较于其他基因编辑系统操作简单,靶向效率高,极大地推动了家禽功能基因的研究进展,是目前筛选和验证家禽功能基因的最有效的工具之一。文章综述了近年来CRISPR/Cas9在家禽细胞、生长发育和性腺分化、家禽疾病、家禽胚胎编辑和转基因家禽制备上的研究进展,以期为CRISPR/Cas9在家禽上的深入研究和应用提供参考。     

维生素D3的免疫功能及其对家禽免疫细胞和免疫因子的调节

维生素D3是一种新的神经内分泌-免疫调节剂,主要表现为对单核/巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、胸腺细胞的增殖分化及细胞功能具有重要影响。维生素D3与T淋巴细胞、B淋巴细胞和巨噬细胞分泌抗体、淋巴因子、补体和单核因子等功能紧密相关。但关于维生素D3对家禽免疫细胞、免疫因子调节的研究甚少。本文就维生素D3的免疫功能及其对家禽T淋巴细胞、抗原呈递细胞(APC)和免疫因子调节的研究现状和展望作一综述。     

畜禽体外培养细胞生长规律研究

本研究利用组织块贴壁培养法对鲁西黄牛、蒙古马、北京鸭和狼山鸡等4个品种体外培养细胞的生长、分化规律进行了研究。通过绘制其生长曲线和在激光共聚焦显微镜下拍摄细胞生长过程,初步分析成纤维细胞的生长、分化规律。试验结果表明,4个品种的细胞生长曲线均呈明显的“S”形,家畜和家禽的细胞潜伏期和停滞期的长短以及细胞群体倍增时间均有明显差异,蒙古马和狼山鸡体外培养细胞的单个细胞分裂期也有显著差异,蒙古马为97 min,而狼山鸡为85 min。本试验构建的4个品种成纤维细胞系不仅使畜禽遗传资源在细胞水平永久保存下来,而且为分子生物学研究提供宝贵材料。     

Poultry production and constraints in Eastern Province of Rwanda: case study of Rukomo sector,Nyagatare district

A study was conducted in Rukomo sector, Nyagatare district, to determine the status of poultry production. A structured questionnaire was used to collect data from 100 poultry farmers randomly as 20 farmers from each of the five cells. Data were analyzed using SPSS version 16 and presented in chart and tables. The majority of the farmers (84%) reared their poultry in free range system while 10% practiced semi-intensive and only 6% did intensive production. Only 12% of the respondents kept exotic poultry breeds. The breeding stock were mostly obtained from local markets (63%) and the average flock size was about 1–10 birds per homestead (70%). The confinement of poultry at night was either in the main domestic house (33%), in kitchen (32%), or in separate poultry house (35%). Flock records were rare and kept by only 9% of respondents. Poultry products were reportedly at high demand by 87% of respondents and 89% farmers reported profit from their enterprises. Lack of veterinary and financial assistance was reported by 72% of respondents. Newcastle disease (57%) was the main health constraint followed by ectoparasites and internal worms. Many farmers (50%) were in dire need of veterinary assistance and financial support to improve their poultry enterprises. Poor management practices were reported to be one of the crucial factors leading to poor production. Lack of quality feeds (38%) and feeding of poultry, credit (20%), and poor market accessibility (19%) were the main challenges reported.     

Colonization strategy of Campylobacter jejuni results in persistent infection of the chicken gut

Although poultry meat is now recognized as the main source of Campylobacter jejuni gastroenteritis, little is known about the strategy used by the bacterium to colonize the chicken intestinal tract. In this study, the mechanism of C. jejuni colonization in chickens was studied using four human and four poultry isolates of C. jejuni. The C. jejuni strains were able to invade chicken primary cecal epithelial crypt cells in a predominantly microtubule-dependent way (five out of eight strains). Invasion of cecal epithelial cells was not accompanied by necrosis or apoptosis in the cell cultures, nor by intestinal inflammation in a cecal loop model. C. jejuni from human origin displayed a similar invasive profile compared to the poultry isolates. Invasiveness of the strains in vitro correlated with the magnitude of spleen colonization in C. jejuni inoculated chicks. The C. jejuni bacteria that invaded the epithelial cells were not able to proliferate intracellularly, but quickly evaded from the cells. In contrast, the C. jejuni strains were capable of replication in chicken intestinal mucus. These findings suggest a novel colonization mechanism by escaping rapid mucosal clearance through short-term epithelial invasion and evasion, combined with fast replication in the mucus.