妊娠失败牛外周血中干扰素刺激基因和细胞因子的表达分析

为了探究牛人工授精后妊娠失败的原因,本研究分析了妊娠失败牛外周血干扰素刺激基因和细胞因子等的表达变化。试验选取11头健康状况良好、体况相近的未孕奶牛,采集人工授精后0d、18d和28d的血液样本,结合28d血清PAG检测和42d直肠触诊,对确定为妊娠失败牛的血液样本进行分析。结果表明,与0d相比,人工授精后18d血液RSAD2、MX1和RTP4 mRNA的表达均呈上调趋势,但无显著差异;18d时IL-2mRNA的表达显著高于0d,IL-10和CCL8 mRNA的表达显著低于0d,IFN-γ、IL-4和CXCL10 mRNA的表达均呈上调趋势,但无显著差异。说明妊娠失败与胚胎发育早期母体免疫失调及妊娠识别能力不足有关。     

地中海水牛人工授精效果研究

[目的]为了解意大利地中海水牛冻精的授精效果及其在我国生长适应情况。[方法]利用国内首次引进意大利地中海水牛冻精与我国现有的摩拉、尼里——拉菲和本地水牛进行人工授精,试验选取自然发情的摩拉水牛20头,尼里水牛16头,本地水牛32头,年龄在2.5~9岁之间,采用直肠把握子宫角深部输精法,配种后40 d应用B超进行早期妊娠诊断怀孕情况。[结果]：摩拉、尼里——拉菲和本地水牛受胎率分别为50.00%、75.00%、56.25%,平均人工授精配种受胎率为58.82%,品种间人工授精受胎率差异不显著（P〉0.1）。[结论]表明引进地中海水牛冻精开展杂交组合,改良我国现有的水牛品种,提高其生产性能是切实可行的。     

ISG15和OAS1在奶牛早期妊娠阶段外周血中的表达规律

本研究旨在揭示干扰素刺激基因ISG15和OAS1在中国荷斯坦奶牛早期妊娠阶段外周血中的表达规律,为利用干扰素刺激基因进行早期妊娠诊断提供理论和方法上的指导。试验用青年母牛共27头,其中自然发情牛10头,同期发情牛17头;人工授精后0、14、18、21和28d采集外周血并分离总白细胞或白细胞亚类(淋巴细胞、单核细胞、NK细胞);采用荧光定量PCR检测ISG15和OAS1的相对表达量。结果表明:人工授精后18d妊娠牛外周血中ISG15和OAS1的相对表达量均显著高于空怀牛;ISG15在妊娠牛中一致上调(平均3.92倍),空怀牛中一致下调(平均1.46倍);OAS1在妊娠牛中平均上调3.49倍,空怀牛平均下调1.28倍。自然发情条件下,妊娠牛外周血中ISG15和OAS1的相对表达量均显著高于空怀牛,同期发情条件下两个基因在表达趋势上与之类似,但差异不显著;进一步分析显示:人工授精后18dOAS1在妊娠牛淋巴细胞中的表达显著高于空怀牛,其中妊娠牛中OAS1一致上调表达,平均上调2.14倍,空怀牛中OAS1一致下调,平均下调1.80倍。研究提示:人工授精后第18天妊娠牛与空怀牛之间ISG15的差异表达比OAS1更明显;自然发情状态下,妊娠牛与空怀牛之间两个基因差异表达情况比同期发情状态下更明显;相对于外周血总白细胞,妊娠牛与空怀牛外周血淋巴细胞中ISG15、OAS1的差异表达倍数更低。综上表明,利用外周血中ISG15的表达水平可望能够在人工授精后18d对自然发情奶牛较为准确地做出早期妊娠诊断;对于ISG15、OAS1在外周血免疫细胞亚类中的表达分析,为深入研究奶牛早期妊娠识别的分子机制奠定了基础。     

酶免疫分析法诊断家畜妊娠研究进展(续上期)

1．2水牛黄右军等（1994）采用EIA法测定了87头杂种水牛，对头摩拉水牛的脱胎乳孕酮含量，初步掌握了水牛发情、配种、妊娠、空怀和流产等不同生殖状态孕酮变化规律。将配种后第21d和27d次取奶样测定孕酮浓度均达到或超过1．7×10~(-9)g／mL者判为妊娠牛，前高后低者（不达者）为空怀牛，对64头配种水牛进行测定，1个月后直检复查，空怀确诊率为97.390（36／37），妊娠确诊率为88．9％（24／27）。与国内外EIA法诊断奶牛妊娠结果基本一致。[11]1．3羊李学斌等（1993）应用ELISA法测定绵羊血清中干扰体液免疫反应的因子，发现在配种后48…     

地中海水牛冻精引进及其推广应用效果

为进一步丰富我国乳用良种水牛遗传资源、扩大种源、促进中国水牛杂交改良和水牛奶业的发展,文章对近几年引进意大利地中海水牛冻精对我国几个地方品种水牛(摩拉水牛、尼里/拉菲水牛、摩拉×尼里水牛以及本地水牛等)人工授精的情况进行资料汇总。结果表明:地中海杂交水牛平均情期受胎率为58. 82%,各杂交组合间差异不显著(P0. 05),杂交后代生长发育正常。地中海×摩拉、地中海×尼里/拉菲杂交公牛染色体数为2n=48+XY,母牛染色体数均为2n=48+XX;地中海×本地水牛杂交后代染色体有三种类型,分别为2n=48、2n=49、2n=50。各种杂交组合的怀孕期在309. 40~322. 89 d之间,平均为(314. 11±12. 07) d,杂交后代初产年龄最早为887 d,最晚为1 185 d,平均为(1 029. 71±130. 32) d。第一泌乳期平均泌乳天数为(316. 24±55. 62) d,总产奶量为(2 036. 18±590. 89) kg,305 d产奶量为(2 086. 16±383. 08) kg。地中海杂交水牛乳成分主要指标均略高于《广西食品安全地方标准》。说明地中海水牛能适应我国气候环境,并且杂交改良效果显著。     

桑枝叶代替部分青贮甘蔗尾对摩拉水牛公牛生产性能和血液指标的影响

为了探讨桑枝叶代替部分青贮甘蔗尾对肉牛生产性能和血液指标的影响,试验选择8月龄、体重相近的健康河流型摩拉水牛公牛27头,随机分为3组,每组9头。对照组饲喂全混合日粮Ⅰ,其中青贮甘蔗尾40%,未添加桑枝叶;试验组1饲喂全混合日粮Ⅱ,其中青贮甘蔗尾28%、桑枝叶12%;试验组2饲喂全混合日粮Ⅲ,其中青贮甘蔗尾16%、桑枝叶24%。预试期7 d,正式期50 d,测定各组试验水牛的末重、平均日增重、平均日采食量、料重比及血液指标,并计算分析经济效益。结果表明:试验组2水牛的平均日增重、平均日采食量均显著高于对照组和试验组1(P0.05);试验组1,2水牛的料重比显著低于对照组(P0.05);3组试验水牛血液中白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板数(PLT)以及血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、总胆固醇(T-CHO)、丙二醛(MDA)含量和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)活性,以及总抗氧化能力(T-AOC)、ALB/GLB、AST/ALT均差异不显著(P0.05);试验组2水牛的净收入最高,比对照组和试验组1分别提高了41.82%、16.22%。说明用桑枝叶代替部分青贮甘蔗尾制备成发酵全混合日粮能够显著提高水牛的生长性能和经济效益。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗对猪血液指标的影响

为确定猪繁殖与呼吸综合征疫苗对猪血液指标的影响,制定科学有效的疫苗免疫程序,选取42头未免健康断奶仔猪,随机分为4组,对照组(A组)、弱毒苗免疫组(B组)、灭活苗免疫组(C组)和弱毒苗+灭活苗联合免疫组(D组)。分别于免疫前、免疫后14、28、42、56、70d以前腔静脉采血进行血常规分析。结果显示,免疫后,D组白细胞数始终高于B组,并于免疫42d后显著高于其他3组(P0.01);免疫28d后,D组淋巴细胞数显著高于B组(P0.01);各组红细胞数、血红蛋白浓度、中性粒细胞数及中值细胞数均呈现缓慢上升趋势,且D组的高于其他3组(P0.05)。表明同时免疫弱毒苗+灭活苗能够更好的刺激猪血液细胞增殖。     

党参提取物对母猪繁殖性能和血液指标的影响

试验研究日粮中添加不同质量浓度的党参提取物对母猪繁殖性能及血液指标等方面的影响。选用54头1~4胎健康状况良好母猪作为试验猪,随机分为3组,每组3个重复,每重复6头。日粮中党参提取物添加量各设0、0.05%和0.10%3个添加量水平。试验从母猪妊娠27 d开始到断奶后7 d结束,分为4个阶段,分别为妊娠中期(妊娠30~81 d)、妊娠后期(妊娠82~114 d)、分娩哺乳期(哺乳1~21 d)和离乳空怀期(断奶1~7 d)。试验基础日粮为常规玉米-豆粕型日粮,参照中国瘦肉型猪饲养标准(2004)及NRC(1998)猪饲养标准,并结合猪场实际生产配制而成。试验结果表明:党参提取物显著能提高母猪的采食量(P0.05);能显著提高仔猪初生质量(P0.05);对母猪血液白细胞计数、红细胞计数和血红蛋白都有一定程度的提高作用,其中对妊娠前期提高血液白细胞计数的影响差异极显著(P0.01);对母猪血清雌二醇E2、催乳素(PDL)及孕酮(P)有一定程度的降低作用。综合各方面指标来看,在母猪日粮中添加0.10%的党参提取物效果最佳;对促进母猪繁殖性能和提高血液指标都有良好的效果。     

地中海水牛杂交后代生长性能测定初报

[目的]为了解地中海水牛引进我国后,在广西地区的气候适应性及其生长发育情况。[方法]本试验选取地中海杂交后代水牛32头,对其生长发育前期阶段(0～12月龄)的体重、体斜长、体高、胸围、腹围等参数进行连续跟踪测定,并对其的生理生化相关指标进行了测定。[结果]地中海水牛及其杂交后代水牛之间的体温、呼吸、脉搏等生理数值和各项血液生化指标没有差异(P>0.05),并与先前引进的摩拉、尼里及其杂交水牛数值相似;地中海水牛与摩拉、尼里和本地的杂交后代初生重是差异不显著的(P>0.05),随着月龄的增长,地中海水牛与摩拉、尼里杂交后代的各月龄体重增长速度比地中海—本地杂交水牛高,但差异不显著(P>0.05),而地×摩、地×尼杂交水牛在0～12月龄之间的生长速度基本相同;地×摩、地×尼和地×本的杂交水牛1～12月龄的体高、体斜长、胸围和腹围变化趋势大体一致。[结论]地中海水牛引进我国后,不仅能够完全适应我国南方地区尤其广西的环境气候条件,而且表现出良好的生长优势。     

非洲白犀牛血液常规参数的测定

本研究测定了石林龙晖野生动物科研中心饲养的非洲白犀牛的红细胞数、血红蛋白、红细胞比积、平均红细胞体积、平均血红蛋白含量、平均血红蛋白浓度、红细胞宽度变异系数、红细胞宽度标准差、血小板数、平均血小板体积、白细胞数、淋巴细胞绝对值、中间细胞绝对值、粒细胞绝对值、淋巴细胞百分比、中间细胞百分比、粒细胞百分比、大血小板百分比、血小板比积、血小板分布宽度。通过比较分析,雌、雄犀牛在红细胞数、大血小板百分比差异性显著（O．01〈P〈0．05）。其他雌、雄犀牛各项参数差异性不显著（P〉0．05）。雄性白犀牛与公乌蒙马相比,二者的血红蛋白差异性不显著。雌性白犀牛血液中的红细胞数与母乌蒙马的红细胞数差异性不显著。雌、雄白犀牛与安西牛的红细胞数和血红蛋白差异性不显著。因此,在诊断白犀牛血液常规指标时可参考乌蒙马和安西牛相关血液常规指标。     

饲用甜高粱青贮对绵羊血常规及血清内毒素浓度的影响

本试验旨在探索饲用甜高粱青贮育肥肉羊,对其健康的影响,为甜高粱的开发利用提供技术支持。选取体况一致的3月龄杜泊羊、小尾寒羊各12只,随机将同一品种试羊等数分为2组,分别饲喂裹包青贮(玉米青贮或甜高粱青贮),青贮料自由采食,精饲料及苜蓿颗粒按动物体重的1%及0. 5%补饲。在试验期第30、60、90天,晨饲前用注射器经颈静脉采血,测定血常规和内毒素浓度。结果显示:白细胞数目(WBC)及平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)高于正常值,其余血常规参数均在正常范围之内。在饲喂60天和90天时,杜泊羊血液白细胞数目(WBC)显著高于小尾寒羊(P 0. 05),在饲喂90天时杜泊羊血小板数目(PLT)显著高于小尾寒羊(P 0. 05);红细胞数目(RBC)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白浓度(HGB)随着饲喂时间的增加而增加,且杜泊羊饲喂甜高粱青贮(DG)组和小尾寒羊饲喂玉米青贮组(HY)饲喂90天时显著高于30天(P 0. 05);但血小板随着饲喂时间的增加而减少,且DG和小尾寒羊饲喂甜高粱青贮组(HG)饲喂90天时显著低于30天(P 0. 05);血液内毒素浓度未发生显著变化。表明饲喂甜高粱青贮与玉米青贮相比并未对绵羊健康产生影响,可作为绵羊优质饲粮进行推广。     

广西水牛唾液和血清生殖激素在发情周期的变化规律及相关性分析

[目的]对广西水牛发情周期唾液和血液中雌激素(E2)和孕酮(P4)的浓度变化规律及相关性进行了分析,为进一步探讨水牛发情规律来指导生产提供依据。[方法]采用酶联免疫分析方法(ELISA)测定发情母水牛血液和唾液中E2(雌二醇)和P4(孕酮)的浓度变化,并对血液和唾液的激素变化规律进行了相关性分析。[结果]广西水牛血液和唾液中的E2和P4呈波动性变化,结果表明,发情前期,唾液中P4浓度一直维持在6.57.1ng/mL,第13天达到11.09ng/mL以上,随后快速下降。唾液中E2浓度在发情前期第35天出现一个峰值178.528pg/mL,在1417d唾液中E2浓度显著升高,出现第二个峰值达到120.57pg/mL。唾液E2和P4浓度的变化趋势和血清E2和P4浓度的变化趋势基本一致,相关性较好。母水牛唾液和血清样品的P4浓度相关性显著(R=0.4080;P0.05),母水牛唾液和血清标本的E2浓度相关性显著(R=0.5113;P0.05)母水牛唾液E2和P4浓度相关性非常显著(R=0.7754;P0.01)。[结论]唾液和血液中的这两种激素水平起伏变化基本趋于一致,其相关性显著,可以作为监测水牛发情及预测排卵的可靠指标之一。     

PAGmRNA在奶牛血液中表达的研究

本试验采用半定量RT-PCR的方法,检测和分析了牛PAG基因mRNA在妊娠牛及空怀牛血液中的表达规律。结果发现,PAG基因mRNA在妊娠21d的母牛及空怀牛血液中都有表达,而妊娠牛表达量显著高于空怀牛（P〈005）。这说明配种后21d奶牛血液中PAG基因的表达量可以作为奶牛早期妊娠诊断的依据。     

不同品种奶水牛全泌乳期产奶量及乳成分的分析

为了解在相同的饲料、气候及饲养管理条件下,不同品种奶水牛全泌乳期产奶量及乳成分含量,记录摩拉、尼里-拉菲、3品种高代杂交以及摩拉×本地低代杂交4个品种奶水牛全泌乳期的每日产奶量,定期采集生水牛乳并测定其总乳固形物、蛋白、脂肪、非脂乳固形物及乳糖含量。结果表明:尼里-拉菲的泌乳高峰期时间最长,每日产奶量及乳成分产量的绝对值最高,其次是3品种高代杂交水牛、摩拉水牛和摩拉×本地低代杂交水牛;各品种水牛常乳期85 d内,乳总乳固形物、蛋白质、脂肪含量较稳定;在85～105 d以后含量逐渐增加,非脂乳固形物含量在整个常乳期均较为稳定,乳糖含量则出现先增加后降低的趋势;常乳期每日产奶量与乳蛋白质、脂肪、总乳固形物、非脂乳固形物含量存在显著的负相关(P0.01)。     

圈养华南虎血常规正常参考值的初步研究

以建立华南虎血液血常规指标的正常参考值范围为目的,选取国内各动物园和繁育基地饲养的健康华南虎采集血液样本作为研究对象,采用全自动(兽用)血常规分析仪的电阻抗法和射频技术测定血常规指标[白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)等]。华南虎血液血常规指标的正常参考值范围(95%概率):WBC(5.45—18.92)10^9/L、RBC(5.95—10.21)10^12/L、HGB(102—187)g/L、PLT(24—621)10^9/L等,不同性别间华南虎血常规各项指标差异不显著(P>0.05),与其他虎亚种相关血常规指标存在差异。华南虎血常规指标正常参考值范围不同于其他虎亚种,建立华南虎血常规指标正常值对华南虎的饲养管理、疾病诊治预防和保育繁殖研究工作很有必要。     

湘西黄牛妊娠前后血常规变化研究

为了探讨湘西黄牛妊娠前后血常规各指标的变化情况,试验选取9头湖南省地方品种(湘西黄牛),采用Mindray BC-2800兽用全自动血液细胞分析仪进行血常规各参数检测。结果表明:妊娠后血细胞比容、中性粒细胞数目及百分比极显著降低(P<0.01),淋巴细胞数目显著升高(P<0.05),单核细胞数目及百分比、血小板数目显著降低(P<0.05),红细胞分布宽度变异系数升高,但差异不显著(P>0.05)。湘西黄牛妊娠后血容量明显增加,红细胞、白细胞、血小板数目呈下降趋势,而红细胞数目的减少和平均红细胞体积的降低导致血细胞比容显著降低和红细胞分布宽度变异系数升高,初步推断湘西黄牛妊娠早期有贫血倾向。     

中国水牛与摩拉、尼里-拉菲水牛杂交后代泌乳特性的研究

本文分析了云南省大理州家畜繁育指导站奶水牛场2000～2011年摩×本F1、摩×本F2和摩×尼×本三元杂水牛(170头)及摩拉水牛(11头)不同胎次的泌乳期和产奶量资料,比较了不同杂交组合及不同胎次泌乳高峰日和最高日产奶量,拟合了第一个泌乳期的二次方程曲线和Wood模型.结果表明,摩×本F1、摩×本F2及摩×尼×本三元杂水牛的各泌乳期总平均泌乳天数分别为378.98±11.78d、297.50 ±25.10d和267.26±18.41d;摩拉水牛第一个泌乳期内泌乳高峰出现在产后30d左右,摩×本Ft、摩×本F2及摩×尼×本三元杂水牛不同胎次的泌乳高峰分别出现在产后15～35d;摩×本F1和摩×本F2的平均日产奶量极显著低于摩拉水牛与摩×尼×本三元杂水牛(P＜0.01),摩×本F2的平均日产奶量极显著高于摩×本F1(P＜0.01),摩×尼×本三元杂水牛的平均日产奶量与摩拉水牛差异不显著(P＞0.05);Wood模型与实际泌乳曲线的拟合度较高.     

繁殖母羊的氧化应激和氧化损伤研究

本试验旨在探究不同生殖阶段、胎次繁殖母羊的氧化应激及氧化损伤状态。试验1选取体重、体况相近的2~3胎空怀期、妊娠期(30、60、120 d)、分娩及哺乳期(21 d)的崇明白山羊各5只;试验2选取后备、1胎、2~3胎、4~5胎、6胎及以上的崇明白山羊母羊各5只。分别采集血样,测定血清自由基代谢指标[皮质醇、过氧化氢(H2O2)含量]、抗氧化指标[总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性]、氧化损伤指标[丙二醛(MDA)、8-异前列腺素-F2α(8-ISO-PGF2α)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)、蛋白质羰基化(PC)含量]。结果表明:试验1,从空怀期至哺乳期,血清皮质醇、H2O2含量呈先上升后降低的趋势,在分娩时达最高值,较空怀期显著提高(P0.05);血清T-AOC、SOD活性逐渐增强,且哺乳期21 d较空怀期显著提高(P0.05);血清MDA、8-ISO-PGF2α、PC含量先增加后趋于平稳,且在分娩时达最高,较空怀期显著提高(P0.05),血清8-OHDG含量逐渐增加,哺乳期21 d达到最高,较空怀期显著提高(P0.05)。试验2,随着母羊胎次的增加,血清中皮质醇含量无显著变化(P0.05),4~5胎、6胎及以上血清H2O2含量显著高于其他胎次(P0.05);血清TAOC无显著变化(P0.05),血清SOD及GSH-Px活性逐级递减,6胎及以上较后备母羊下降显著(P0.05);血清MDA、8-ISO-PGF2α、8-OHDG和PC含量逐渐增加,6胎及以上显著高于其他胎次(P0.05)。综上所述,伴随着妊娠的进行,母羊体内的自由基代谢逐渐增强,与此同时,体内的抗氧化水平也相应提高以维持氧化-抗氧化体系平衡,但在妊娠后期至哺乳期激增的活性氧自由基破坏了自由基稳衡体系,导致氧化应激和氧化损伤;随着母羊胎次的增加,抗氧化能力逐渐减弱,高胎次母羊氧化损伤严重。     

意大利地中海水牛同期发情-人工授精试验效果的研究

为了繁育纯种地中海水牛,试验采用"促黄体素释放激素A3+氯前列醇+促黄体素释放激素A3"同期化处理国外引进的地中海育成水牛,并用引进的地中海水牛冻精进行人工授精。结果表明:经同期化处理的地中海水牛发情率为87.07%,淡、旺季发情率差异不显著(P0.05);情期受胎率为37.39%,旺季配种受胎率显著高于淡季;淡季母牛48 h内排卵率为59.72%,旺季为81.13%,差异显著(P0.05)。间隔一定时间重复处理不影响发情率和受胎率。地中海水牛同期发情-人工授精效果与摩拉水牛、尼里-拉菲水牛、本地水牛的处理效果基本一致。     

繁殖技术在盈江县水牛改良中的应用

文章对1997-2005年人工授精技术、2002年胚胎移植技术、同期发情技术在盈江县水牛生产中的应用效果进行了总结.结果1997-2005年盈江县应用水牛人工授精改良德宏水牛11 431头/次,受胎率50.81%;改良二品种杂交水牛660头/次,受胎率40.16%,德宏水牛的受胎率高于(P＞0.05)二品种杂交水牛,但差异不显著(P＞0.05);用国产氯前列烯醇(PG)0.6mg/头·次处理后,水牛的同期发情率经产水牛高于青年水牛,(P＞0.05),杂交水牛高于德宏水牛(P＞0.05),体重401～530kg水牛高于体重300～400 kg水牛(P＜0.05);发情明显水牛的可用率极显著高于发情不明显的水牛(P＜0.01).经超排所获4枚可用鲜胚分别移植3头受体,90 d检查时的妊娠率为33.33%,但最终未产犊.