EDS76双毒株油佐剂灭活疫苗的研制及免疫原性测定

首先以ＥＤＳ７６－ＮＥ_４和ＥＤＳ７６－ＢＣ两个毒株的鸭胚培养物混合或单独分别接种鸡，证明混合接种的鸡，其ＨＩ价高于单独接种的鸡。应用混合培养物（ＨＡ价≥１∶３２７６８）制成３批灭活油佐剂ＥＤＳ７６疫苗，接种鸡６万只以上，接种鸡未出现不良反应，接种后１５、２１、３５和６０天时，鸡的平均ＨＩ价分别为７．５、８．３、９．３和８．０。     

ND和EDS－76二联灭活苗的研制及其免疫抗体消长规律的观察

应用ＮＤＬａＳｏｔａＮ７９株和ＥＤＳ－７６Ｈ９３１株，分别接种鸡胚和鸭胚增殖病毒．血凝价分别达到≥１：１２８０和≥１：１００００时，收取病毒．经福尔马林灭活．按一定比例加入吐温８０、司本８０、硬脂酸铝和白油，高速搅拌均匀，制成ＮＤ和ＥＤＳ－７６二联疫苗。该苗具有良好的免疫力，其中两种病毒无相互干扰性，接种鸡群无不良反应。疫苗置４～８℃和１５～３０℃分别保存８和６个月不破乳．不分层，颜色无变化。用联苗接种６０００余只父母代种鸡，接种后２５天．ＮＤ和ＥＤＳ－７６抗体可先后达到高峰，接种后９个月，鸡群ＮＤ和ＥＤＳ－７６抗体平均效价仍分别保持在７．０和５．６ｌｏｇ２水平上。对１６～１８周龄产蛋母鸡（皮下注射１ｍｌ／只）应用２０万羽份的联苗证明，疫苗安全．效力确实，使用方便．效益显著。     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅲ）

用同胚培养的含ＮＤＶ、ＩＢＶ胚液制备的二联油乳剂灭活苗，经免疫效力试验表明，用５０倍稀释的鸡二联灭活苗，０．５ｍｌ／只剂量免疫１８日龄鸡，４周后试验免疫鸡分别进行ＮＤＶ、ＩＢＶ强毒攻击，攻毒保护率在５０％以上，证明０．５ｍｌ剂量含有５０个半数保护量（５０个ＰＤ５０），ＮＤＨＩ抗体≥１：１６，ＩＢＶＮ抗体≥１：８便可保护。三批疫苗免疫１８日龄鸡，０．５ｍｌ／只组免疫鸡体现人有效抗体可维持１６周以上，     

鸡新城疫,减蛋综合征,传染性支气管炎三联油佐剂灭活苗的研究…

用新城疫病毒克隆７９株，减蛋综合征病毒ＮＥ４株和传染支气管炎病毒Ｍ１株分别接种于鸡胚和鸭胚，并收取其鸡，鸭胚尿囊液毒，经甲醛灭活，按一定经例配比，以矿物油为佐剂制成三联油佐剂灭活苗。本苗接种于产蛋后备鸡，免疫后７天产生免疫应答，免疫后３０天保护率达９０％－１００％，免疫后六个月攻毒，ＮＤ和ＩＢ保护率１００％，ＥＤＳ７６为９５％。１９９２－１９９４上半年，本苗在江苏，安徽，山东等省的一些鸡场免疫十万     

鸡产蛋下降综合症油乳剂灭活苗的免疫及攻毒保护试验

对应用当地分离病毒株研制的鸡产蛋下降综合症系列油乳剂灭活苗进行了免疫试验。结果表明,免疫后,鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）油乳剂灭活苗、鸡新城疫（ＮＤ）－产蛋下降综合症二联油乳剂灭活苗及鸡新城疫－鸡传染性支气管炎（ＩＢ）－产蛋下降综合症三联油乳剂灭活苗免疫组的血清ＥＤＳ７６ＨＩ抗体迅速上升,维持４个月后仍在６．８－８（ｌｏｇ２）以上,并且能够抵抗强毒的攻击。证明所研制的ＥＤＳ７６油苗、ＮＤ－ＥＤＳ７６二联油苗、ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联油苗对ＥＤＳ７６具有良好的免疫作用,能够抵抗ＥＤＳ７６强毒的攻击并产生高而持久的血清ＨＩ抗体。此外,对ＮＤ－ＥＤＳ７６二联苗、ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联苗免疫组的血清ＮＤＨＩ抗体测定结果表明,上述二联苗、三联苗能产生与接种ＮＤ油苗一样良好的ＮＤ免疫效果,在免疫后１３０天时,其血清ＨＩ抗体仍高达９－１１（ｌｏｇ２）以上,与对照组有极显著的差异     

鸡新城疫—减蛋综合征蜂胶佐剂灭活二联苗的研究

首次用蜂胶作为佐剂，研制出鸡新城疫－减蛋综合征（ＮＤ－ＥＤＳ）二联灭活 ，在开产前１个月左右，用该苗按０．５ｍｌ／只的剂量皮下或肌肉注射免疫蛋鸡，接种后２０ｄ测ＮＤ抗体（ＨＩ法）效价为６．２５－７．０（ｌｏｇ２，）ＥＤＳ－７６抗体（ＨＩ法）效价为６．５－８．０，用ＮＤ－ＥＤＳ油乳剂灭活二联苗做对照，进行免疫持续期平行测定对比试验，免疫后１８０ｄ，蜂胶苗免疫组鸡的ＮＤ抗体滴度为８．５－８．７，ＥＤＳ     

用吐温80制备新城疫病毒乳化灭活疫苗

用１０％（Ｗ／Ｖ）吐温８０和０．０５％（Ｖ／Ｖ）福尔马林制备新城疫病毒（ＮＤＶ）水－油－水乳化（ＷＯＷＥ）灭活疫苗，其抗原亚单位平均分子量为３０７ＫＤ，油与水的比例为１：２，乳化的ＮＤＶ可单独应用，也构成ＷＯＷＥ四联疫苗。用４４．７μｌ去污剂处理的ＮＤＶ尿囊液（ＮＤＶ－ＡＦ）为一个剂量的单价苗，用其免疫５周龄商品鸡后７周攻毒，可获完全保护。用１７８．６和８９．３μｌ去污处理的ＮＤＶ－ＡＦ苗接种４周     

鸡传染性法氏囊病B_（－2），D_（78），TAD弱毒苗对青海流行野毒的效力试

对鸡传染性法氏囊病弱毒苗Ｂｕｒｓｉｎｅ－２，Ｄ_（７８），ＴＡＤ进行复制，免疫２１日龄雏鸡，１４天后ＡＧＤ抗体阳性率达９０％～１００％，用从本地分离的Ｓ_（－９３０２）强毒１：１０囊乳剂０．２ｍｌ／只滴鼻、点眼、口服攻毒，结果对照组１００％发病，５０％死亡，试验组１００％保护，获得较好的免疫效果。     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立

将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ，病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单隆抗体的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭＣＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ２ａ，后２株属于ＩｇＧ１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均     

禽用生物制品外源病原监测研究：鸡新城疫LaSota活苗中污染IBV的检测研究

使用ＳＰＦ鸡制备的抗ＮＤＶ（新城疫病毒）高免血清可中和ＮＤＶ种毒或鸡新城疫疫苗ＬａＳｏｔａ株１０~７ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ（即１０个使用剂量），并具有高度持异性。对于ＮＤＶ疫苗实验室模拟污染ＩＢＶ传染性支气管炎病毒）研究表明，用ＮＤＶ高免血清中和ＮＤＶ疫苗１０个使用剂量后，可检测到ＩＢＶ１０~（－６）污染水平。对于某生药厂ＮＤＶＬａＳｏｔａ疫苗中疑似ＩＢＶ污染的样品进行检测，排除了ＩＢＶ污染。文章同时证明了免疫胚接种ＮＤＶＬａＳｏｔａ毒后胎儿表现出类似感染了ＩＢＶ的病变。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)干扰新城疫病毒(NDV)增殖现象的研究

ＩＢＶ毒株Ｈ１２０、Ｈ５２、ＭＡ５对ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ的干扰实验证明ＩＢＶ特异性干扰ＮＤＶ增殖。１）采取不同顺序的同胚接种法：ＩＢＶ接种之后再接种ＮＤＶ;或ＮＤＶ接种之后再接种ＩＢＶ,及ＩＢＶ,ＮＤＶ同时接种,ＩＢＶ均干扰ＮＤＶ的增殖。２）ＮＤＶ接种３６小时之内,干扰现象最为明显,Ｈ１２０,Ｈ５２的干扰能力稍强于ＭＡ５。３）ＮＤＶ血清中和实验结果显示,不同顺序同胚接种ＮＤＶ、ＩＢＶ时,ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ不影响ＩＢＶ的增殖能力。同胚增殖ＩＢＶ,ＮＤＶ的关键是控制ＮＤＶ、ＩＢＶ的接毒量及选择合适的收毒时间。     

灭活苗接种部位对鸡免疫应答的影响

笼养商品蛋鸡在２、５和９周龄时喷雾免疫新成疫－传染性支气管炎（ＮＤ／ＩＢ）二联弱毒苗作为基础免疫，１６周龄时，在胸，翼，腿部肌肉或颈背部皮下接种ＮＤ／ＩＢ二联灭活苗，实验鸡接种前及接种后每隔８周用ＥＬＳＩＡ二联灭活苗。实验鸡接种前及接种后每隔８周用ＥＬＩＳＡ检测ＮＤＶ和ＩＢＶ特异性血清抗体直至４８周龄，皮下或翼部肌肉免疫接种后，１６周产生较高的ＮＤ特异性抗体；然而，由于接种前的基础免疫在这些组之间     

鸡新城疫、减蛋综合征、传染性支气管炎三联油佐剂灭活苗的研究Ⅰ、三联灭活苗对鸡免疫试验

用新城疫病毒克隆７９株，减蛋综合征病毒ＮＥ＿４株和传染性支气管炎病毒Ｍ＿（４１）株分别接种于鸡胚和鸭胚，并收取其鸡、鸭胚尿囊液毒，经甲醛灭活，按一定比例配比，以矿物油为佐剂制成三联油佐剂灭活苗。本苗接种于产蛋后备鸡，免疫后７天产生免疫应答，免疫后３０天保护率达９０％～１００％，免疫后六个月攻毒，ＮＤ和ＩＢ保护宰为１００％，ＥＤＳ＿（７６）为９５％。１９９２～１９９４上半年，本苗在江苏、安徽、山东等省的一些鸡场免疫十万余只鸡，均获得满意效果。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病三联油乳剂灭活疫苗研制及应用

用新城疫病毒（ Ｎ Ｄ Ｖ） Ｌａ Ｓｏｔａ 株、鸡传染性支气管炎病毒 （ Ｉ Ｂ Ｖ） Ｍ４ １ 株接种鸡胚, 收获含毒鸡胚尿液。用传染性法氏囊病病毒 （ Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ） 地方强毒 Ｈ Ｂ９ ０ ９ 株接种３０ ～４０ 日龄肉用鸡, 发病后取囊组织 （ 或收集 Ｉ Ｂ Ｄ 典型发病鸡囊组织） 制备成含毒组织悬液。将三种病毒液按一定比例混合, 制备成三联油乳剂灭活苗。三联苗免疫１８ 日～２８ 日龄雏鸡, 免疫后２１ 天攻毒测保护力, 三种传染病保护率均在９０ ％ ～１００ ％ , Ｎ Ｄ Ｈ Ｉ抗体≥１∶３２ , Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ Ａ Ｇ Ｐ阳性率１００ ％ , Ｉ Ｂ Ｖ Ｎ 抗体≥１∶８ , 疫苗免疫期可达４ 个月以上。疫苗在４ ℃～８ ℃保存期为１８ 个月, １０ ℃～２０ ℃保存为６ 个月, 该疫苗在全省不同地区、不同品种鸡应用１５ 万羽份, 取得理想免疫效果。     

鸡产蛋下降综合症—新城疫—传染性支气管炎三联油乳剂灭活疫苗试制

近年来,随着养禽业的发展,多联灭活疫苗越来越受到广大用户的青睐。鸡产蛋下降综合征（ＥＤＳ７６）,鸡新城疫（ＮＤ）,鸡肾型传染性支气管炎（ＩＢ）,是严重危害养禽业的病毒性传染病。为了有效的预防这三种传染性疾病发生,减少免疫接种次数,我们研制了ＥＤＳ－ＮＤ－ＩＢ（肾型）三联油乳剂灭活苗。试制３批分别测定安全与效力,结果安全性良好;免疫鸡２１ｄ后攻击ＮＤＶ、ＩＢＶ强毒均获８／１０以上保护。对免疫鸡２１ｄ分别测定ＮＤ、ＥＤＳ７６血凝抑制（ＨＩ）抗体的几何平均滴度（ＧＭＴ）,测ＩＢＷ９３的血清中和抗体效价…     

鸡减蛋综合征的研究Ⅱ.鸡减蛋综合征病原的分离和鉴定

用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种１０－１２日龄鸭胚盲传，分离到一株ＥＤＳ－７６·ＥＸＫ２病毒。自第３代起至第１０代，均从鸭胚尿囊液中检出血凝素，凝集鸡红细胞的特性可被ＥＤＳ－７６阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集免红细胞。应用第３和第４代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡，成功地复制了ＥＤＳ－７６。攻毒后３５天内１１只试验鸡的总产蛋数无明显变化，产蛋率为８５～９４％，     

BWEL-SPF鸡群对鸡传染性法氏囊病强毒的敏感性试验

用三种不同鸡传染性法氏囊病强毒株,对ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡群１－１０个家系３周龄鸡进行敏感性试验,观察比较鸡群各家系对不同敏感性,测定不同毒株的毒价。广西强毒株（ＩＢＤＶ－ＧＸ株）〈ＬＤ５０为１０＾５．０／０．２ｍｌ;湖南强毒株,ＬＤ５０为１０＾５．２／０．２ｍｌ;吉林强毒株（ＩＢＤＶ－ＪＬ株）,ＬＤ５０为１０＾５．５／０．２ｍｍｌ,以１００ＬＤ５０攻毒剂量,对ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡１￣１０家系的致死率为     

鸡减蛋综合症和新城疫二联油佐剂灭活苗的制备及其应用（摘要）

将鸡减蛋综合症（ＥＤＳ—７６）Ｈ株和新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ弱毒株分别接种鸭胚和鸡胚，收获胚液（ＨＡ价分别达２１５和２１１以上），福尔马林灭活后配制成ＥＤＳ—ＮＤ二联油佐剂灭活苗，经无菌与安全性检验、免疫效力测定和田间应用结果表明：该苗安全性良好，于蛋鸡开产前一个月左右皮下或肌肉注射０．５ｍｌ／羽，免疫后２１天ＨＩ抗体效价均达１：２１０，免疫期达６个月以上。     

中药对人工感染IBDV鸡产生免疫抑制的调节作用

２２０只非免疫鸡随机分为Ａ,Ｂ,Ｃ,Ｄ,Ｅ５组,每组４４只。Ａ组给中药２次,Ｂ组５次,Ｃ、Ｄ、Ｅ组不给中药。于１４日龄对Ａ,Ｂ,Ｃ组人工感染传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）,于２１日龄对Ａ,Ｂ,Ｃ,Ｄ组接种新城疫（ＮＤ）Ⅱ系疫苗,于４６日龄每组随机抽取１５只鸡均攻ＮＤ强毒。结果表明：攻ＩＢＤＶ后一周,Ｃ组的死亡率显著高于Ａ组和Ｂ组（Ｐ〈０．０５）,新城疫Ⅱ系苗免疫后,Ｂ组鸡新城疫血凝抑制（ＨＩ）抗体效     

禽脑脊髓炎灭活油乳剂疫苗的研制

将ＡＥＶ－ＶＲ株接种于６日龄ＳＰＦ鸡胚卵黄囊，孵化至１６日龄时迫杀，采集鸡胚绒毛尿囊膜、尿囊液、胚体称重，研磨、离心取上清液加入福尔马林灭活，以灭菌ＰＢＳ（ｐＨ７．２）稀释成１：１、１：１０、１：２０三种浓度，加入吐温－８０制成水相，另以白油、司斑－８０和硬质酸铝煮沸灭菌制成油相，搅拌混合制成不同浓度的灭活油乳剂疫苗，分别免疫２日龄ＳＰＦ雏鸡，安全可靠．用ＡＥＶ－ＶＲ、ＡＥＶ－１１４３、ＡＥＶ－ＮＨ９３７三株混合毒做攻毒试验证明１：１稀释的灭活苗效果最好，保护率可达１００％．用ＡＥＶ－ＶＲ，ＡＥＶ－１１４３、ＡＥＶ－ＮＨ９３７及以上三株混合毒同法制成１：１浓度的灭活油乳剂疫苗，分别免疫２日龄商品雏鸡后用其相应的毒株做攻毒试验，表明该疫苗是安全的，而且可使免疫鸡抵抗ＡＥＶ的感染，具有良好的免疫效果．