不同动物粪源葡萄球菌耐药性调查及耐药基因检测分析

【目的】研究新疆霍城县不同动物粪源葡萄球菌对临床常用抗菌药物的耐药情况。【方法】新疆霍城县主要的规模化养殖场分别采集猪、鸡、牛及羊的粪便。采用琼脂稀释法对分离出的葡萄球菌进行最小抑菌浓度测定。通过PCR方法检测相应耐药基因。【结果】不同动物粪源葡萄球菌对被检抗菌药物耐药严重程度依次为猪粪源葡萄球菌＞鸡粪源葡萄球菌＞羊粪源葡萄球菌＞牛粪源葡萄球菌;鸡粪源葡萄球菌及猪粪源葡萄球菌对苯唑西林、四环素耐药率均超过80%。牛粪源葡萄球菌对庆大霉素和阿米卡星敏感率达100%。ermB基因是猪粪源葡萄球菌和鸡粪源葡萄球菌中检出率最高的林可胺类耐药基因,检出率分别是70.8%和93.5%;femA基因是羊粪源葡萄球菌和牛粪源葡萄球菌中检出率最高的β-内酰胺类耐药基因。【结论】新疆霍城县不同动物粪源葡萄球菌对被检抗菌药物的耐药程度不同,多药耐药情况严重,在养殖过程中应考虑耐药情况需合理使用抗菌药物。     

新疆乌鲁木齐市宠物源葡萄球菌耐药性及其相关耐药基因的检测

为了解新疆乌鲁木齐市宠物源葡萄球菌对临床常用抗菌药物的耐药情况及携带耐药基因的情况,采用琼脂稀释法对乌鲁木齐市某宠物医院分离鉴定的154株宠物源葡萄球菌进行临床常用10种抗菌药物耐药性检测,并用PCR方法检测葡萄球菌9种耐药基因:喹诺酮类(norA)、大环内酯-林可胺类(ermB)、四环素类(tetA、tetM)、β-内酰胺类(mecA、femA)和氟苯尼考类(cfr、fexA和fexB)。耐药性检查结果表明葡萄球菌对苯唑西林、四环素、左氧氟沙星和氟苯尼考的耐药率在50%以上,宠物源葡萄球菌多重耐药集中在4~5类,且耐药谱型多样化。基因检测结果显示fexA(31.2%)基因的检出率最高,其次是ermB(26.7%),未检出cfr、fexB和tetA基因。新疆乌鲁木齐市宠物源葡萄球菌普遍存在耐药和多重耐药情况,其中氟苯尼考耐药基因fexA检出率最高,揭示宠物源葡萄球菌耐药情况严重,应根据药敏试验及基因检测结果,合理选用抗菌药物,并加强对耐药菌的监测。     

赛鸽源致病性多重耐药海豚葡萄球菌分离鉴定

为确定长春市某鸽舍赛鸽暴发眼炎、肺炎的原因,从赛鸽肺脏、眼部渗出物分离培养获得1株致病菌。经过形态学观察、生化特性与耐药性分析、Partial kat(Catalase)基因与16S rRNA基因序列分析,确定该菌为凝固酶阳性、β内酰胺酶阳性海豚葡萄球菌,具有多重耐药特性。该病菌对氨苄西林、青霉素G、复方磺胺恶唑、甲氧苄氨嘧啶、克林霉素、红霉素、达福普丁、环丙沙星、四环素均耐药,对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、头孢西丁、苯唑西林、替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺、莫匹罗星、利福平敏感。动物试验证实,该菌株可以引起幼鸽的肺炎和眼部炎症。     

2016-2018年临床分离铜绿假单胞菌的耐药情况分析

目的 分析2016年至2018年湖南省脑科医院铜绿假单胞菌的临床分布情况、耐药情况以及耐药菌株Ⅰ类整合子基因。方法 选取湖南省脑科医院2016年1月1日至2018年12月31日临床送检各类标本中分离出795株铜绿假单胞菌作为分析对象,就铜绿假单胞菌的临床分布情况以及耐药情况统计分析,2018年ICU分离的13株多重耐药菌株采用PCR扩增检测Ⅰ类整合子。结果 铜绿假单胞菌分布科室主要为神经外科（24.53%）,其次为呼吸内科（22.26%）和重症医学科（13.21%）;铜绿假单胞菌对临床常用的20种抗生素耐药率和敏感率0-100%不等,多重耐药呈上升趋势;13株多重耐药菌株6株Ⅰ类整合子阳性。结论 及时统计细菌分布情况、药物的耐药率、敏感率,并对其进行分析,可以为临床合理用药提供依据,有效预防和控制感染。     

新疆焉耆县不同生长期猪不同部位携带葡萄球菌的耐药性比较

【目的】比较新疆焉耆地区某猪场不同生长期猪只鼻腔和直肠携带葡萄球菌的耐药情况。【方法】通过微量肉汤法,对不同部位分离的葡萄球菌进行11 种抗菌药物的药敏试验。【结果】分离出332株直肠菌(83.0%,332/400)和137株鼻腔菌(68.5%,137/200)。2月龄仔猪直肠菌对四环素、苯唑西林、氧氟沙星、利福平、青霉素5种药物的耐药率高于鼻腔菌;鼻腔菌对氟苯尼考的耐药率极显著高于直肠菌(P﹤0.01)。妊娠猪直肠菌对克林霉素、利福平、阿莫西林/克拉维酸3种药物的耐药率极显著高于鼻腔菌(P﹤0.01);鼻腔菌对四环素、苯唑西林、头孢噻呋3种药物的耐药率极显著高于直肠菌(P﹤0.01),对青霉素的耐药率显著高于直肠菌(P﹤0.05)。仔猪直肠菌对庆大霉素、克林霉素、苯唑西林、头孢噻呋4种药物的耐药率显著高于妊娠猪直肠菌(P﹤0.05),妊娠猪直肠菌仅对利福平、阿莫西林/克拉维酸2种药物的耐药性略高于仔猪直肠菌;仔猪鼻腔菌对四环素、克林霉素、氟苯尼考3种药物的耐药率极显著高于妊娠猪鼻腔菌(P﹤0.01);妊娠猪源菌对头孢噻呋的耐药率极显著高于幼畜源菌(P﹤0.01),所有分离株均对阿米卡星敏感。【结论】该猪场分离的葡萄球菌耐药情况较为严重,而直肠菌的耐药情况更加严重。猪场临床用药以药敏试验结果为依据选择敏感药物及时治疗,提高仔猪成活率和育成率。     

一株猪源沃氏葡萄球菌的分离鉴定及耐药特性分析

 采用含16μg/mL亚胺培南选择剂的MH琼脂培养基,从外观健康猪新鲜粪便中分离培养获得1株耐亚胺培南细菌。该菌镜检为粗大的球杆状革兰氏阳性菌,生化发酵赖氨酸、七叶苷和木糖醇均为阳性,对10种常规抗生素均呈高度耐药,具有“超级细菌”的特点。经聚合酶链式反应（PCR）扩增、克隆及测序分析该菌株16S rRNA,将其初步鉴定为沃氏葡萄球菌(Staphylococcus warneri)。鉴于猪与人类健康关系密切,该结果提示应加强对猪源细菌耐药性监测及基础研究。     

1株兔肺源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药分析

为了解四川某养兔场疑似金黄色葡萄球菌感染病例的病原菌及其药物敏感性,采集兔肺脏的化脓灶样品进行细菌分离纯化、染色镜检、培养特性、生化试验、16SrDNA序列鉴定及分离菌株的药敏试验和耐药基因检测。结果表明,分离鉴定出1株对小鼠具有致病性的金黄色葡萄球菌,药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌分离菌株具有多重耐药性,仅对头孢哌酮、头孢拉定、头孢噻吩、哌拉西林4种药物敏感,其他15种药物均耐受。耐药基因PCR检测结果显示,meca、aac(6′)/aph(2′)、 aph(3′)-III、 ant(4′,4′′)、 plw043耐药基因呈阳性,耐药表型和基因型相一致。     

猪体内金黄色葡萄球菌及凝固酶阴性葡萄球菌耐药性调查及耐药基因分布研究

2010年从广东省不同地区230头猪的淋巴结样品中分离鉴定出90株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌19株,凝固酶阴性葡萄球菌71株.采用琼脂稀释法检测其对14种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法检测13种耐药基因的携带情况,运用统计学方法分析猪体内金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性和耐药基因分布情况的差异.结果显示葡萄球菌对大环内酯类、林可胺类和四环素类抗生素的耐药率较高(>80%).金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌对多数药物耐药情况及耐药基因的携带情况差异不显著,但对苯唑西林的耐药率及linA、ermB基因的携带率差异显著(P<0.05),凝固酶阴性葡萄球菌明显高于金黄色葡萄球菌.     

猪源大肠杆菌耐药性及相关耐药基因检测

【目的】 研究新疆阿克苏地区某规模化猪场猪源大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药情况及相关耐药基因携带情况,分析耐药表型与耐药基因之间的关系。【方法】 采用琼脂稀释法,对分离鉴定的443株猪源大肠杆菌进行猪场常用6大类13种抗菌药物最小抑菌浓度的测定。采用PCR方法,检测13种抗菌药物相应的4大类10种耐药基因。【结果】 该猪场猪源大肠杆菌对被检的8种抗菌药物耐药率超过70.0%,其中对恩诺沙星、链霉素、大观霉素、金霉素、土霉素的耐药率高达90.0%以上,对阿米卡星、安普霉素、头孢噻呋、多黏菌素E具有较好的敏感性,耐药率未超过25.0%;多药耐药结果以7~9耐为主,占63.6%。除tetK外,对被检的其他9种耐药基因均有检出,以携带floR(66.4%)和ant(3″)-Ia(66.4%)耐药基因为主。【结论】 新疆阿克苏地区某规模化猪场猪源大肠杆菌至少对被检的1种抗菌药物表现为耐药,且多药耐药情况严重,耐药谱广,耐药基因携带率高,应从基因水平对耐药大肠杆菌进行传播机制的监测。     

156株犬源大肠杆菌耐药谱型分析

[目的]为临床上选择抗菌药物、预防和治疗犬大肠杆菌病提供依据。[方法]采用药敏纸片法,进行156株犬源大肠杆菌对头孢曲松和氟苯尼考等8种抗菌药物的敏感性试验,以确定其耐药谱型。[结果]156株大肠杆菌对头孢曲松、庆大霉素、小诺霉素、林可霉素、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、妥布霉素和左旋氧氟沙星的耐药率分别为83.3%、66.7%、73.7%、84.6%、76.3%、88.3%、63.5%、80.8%。[结论]耐药谱型以头孢曲松/庆大霉素/小诺霉素/林可霉素/磺胺间甲氧嘧啶/氟苯尼考/左旋氧氟沙星和头孢曲松/妥布霉素/林可霉素/磺胺间甲氧嘧啶/氟苯尼考/小诺霉素/左旋氧氟沙星为主,分别占33.97%（53/156）和30.13%（47/156）。     

奶牛生乳中洛菲不动杆菌的分离鉴定与耐药性分析

对29份外观正常的奶牛生乳乳样进行乳品质分析和细菌学检测,利用16SrDNA序列分析鉴定乳样中分离的菌株,并进行14种药物的敏感性试验。结果表明,10份乳样有细菌检出,其中4份乳样中分离得到洛菲不动杆菌;药物敏感性结果表明,洛菲不动杆菌对复方新诺明具有较强的耐药性;乳品质分析结果表明,该4份乳样体细胞数(SCC)偏高,乳成分和部分理化性质与其他正常乳无明显区别。     

奶牛乳房炎源性金黄色葡萄球菌分离株N_2的耐药性分析及其基因特征

以乳房炎源性金黄色葡萄球菌分离株N2为研究对象,采用纸片扩散法分析了耐药性,应用刚果红法检测了生物被膜形成能力,利用PCR法扩增了8种生物被膜形成基因和9种肠毒素基因。结果表明,金黄色葡萄球菌分离株N2具有广泛的耐药性,仅对苯唑西林高度敏感,具有较强的生物被膜形成能力,携带除bap外所有的被测生物被膜相关基因和sea、sec、seg、sei 4种肠毒素基因。结果表示金黄色葡萄球菌分离株N2可能存在多种侵袭方式,在临床上难以防治,为进一步以该菌株为研究材料进行相关研究奠定了基础。     

奶牛乳房炎源性金黄色葡萄球菌分离株N_2的耐药性分析及其基因特征

以乳房炎源性金黄色葡萄球菌分离株N2为研究对象,采用纸片扩散法分析了耐药性,应用刚果红法检测了生物被膜形成能力,利用PCR法扩增了8种生物被膜形成基因和9种肠毒素基因。结果表明,金黄色葡萄球菌分离株N2具有广泛的耐药性,仅对苯唑西林高度敏感,具有较强的生物被膜形成能力,携带除bap外所有的被测生物被膜相关基因和sea、sec、seg、sei 4种肠毒素基因。结果表示金黄色葡萄球菌分离株N2可能存在多种侵袭方式,在临床上难以防治,为进一步以该菌株为研究材料进行相关研究奠定了基础。     

可形成生物膜的禽源产色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性研究

从发病鸡关节腔内分离获得1株革兰氏阳性球菌,根据细菌形态、生理生化特性、动物试验,结合16S rRNA基因核苷酸序列测定、系统进化树分析及生物膜半定量检测,确定该分离菌株为可形成生物膜的的产色葡萄球菌,该菌在正常条件下不致病。药物敏感试验和耐药基因检测发现,该菌对磺胺六甲、阿奇霉素、米诺环素等8种药物敏感,对环丙沙星、头孢噻肟钠和复方新诺明中敏,而对万古霉素等13种药物低敏甚至不敏感。检测到该分离菌株包含氨基糖苷类、四环素类和磺胺类的6个耐药基因,说明这是一株多重耐药菌株,推测其耐药性与生物膜的形成有密切关系。     

猪源屎肠球菌tetM基因的检测

用微量肉汤倍比稀释法测定了猪源屎肠球菌对四环素等抗生素的敏感性,用PCR和DNA测序方法检测了屎肠球菌中四环素类耐药基因(tet基因),并分析了试验菌对四环素类的耐药机制。结果表明:14株猪源屎肠球菌对四环素、多西环素、环丙沙星、红霉素全部耐药,4株对头孢噻呋耐药;在14株屎肠球菌中,分别有13株和9株含tet L和tet M基因,其中有9株同时携带tet L和tet M基因;猪源屎肠球菌主要存在主动外排和核糖体保护两种耐药机制,其对四环素类的耐药性主要与携带tet M和tet L有关。     

不同温度对病死猪生物降解效果的影响

[目的]探讨不同温度下病死猪的生物降解效果.[方法]将2头病死猪进行粉碎处理后随机分为3组:试验Ⅰ组(60～70℃发酵)、试验Ⅱ组(75-85℃发酵)、对照组(常规自然发酵),测定各处理组细菌、病毒、重金属及主要营养成分含量.[结果]发酵第3天试验Ⅰ组和Ⅱ组大肠杆菌数分别比对照组减少30.37％和43.24％,第8天试验Ⅰ组和Ⅱ组大肠杆菌数分别比对照组减少54.08％和76.13％,差异极显著(P＜0.01).第3天,试验Ⅰ组和Ⅱ组霉菌数分别比对照组减少52.47％和64.14％,第8天试验Ⅰ组和Ⅱ组分别比对照组减少57.89％和98.90％.试验Ⅰ组、Ⅱ组放线菌数在第5天和第8天都比对照组明显减少.第5天试验Ⅱ组病毒检测结果均为阴性;试验Ⅱ组各重金属含量均比对照组低,而干物质、氮、钙、磷含量均比对照组高.采用75 ～85℃发酵病死猪的生物降解效果最好.[结论]该研究结果可为进一步研究病死猪的生物降解作用提供理论依据.     

猪源屎肠球菌tetM基因的检测

用微量肉汤倍比稀释法测定了猪源屎肠球菌对四环素等抗生素的敏感性,用PCR和DNA测序方法检测了屎肠球菌中四环素类耐药基因(tet基因),并分析了试验菌对四环素类的耐药机制。结果表明:14株猪源屎肠球菌对四环素、多西环素、环丙沙星、红霉素全部耐药,4株对头孢噻呋耐药;在14株屎肠球菌中,分别有13株和9株含tet L和tet M基因,其中有9株同时携带tet L和tet M基因;猪源屎肠球菌主要存在主动外排和核糖体保护两种耐药机制,其对四环素类的耐药性主要与携带tet M和tet L有关。     

氟虫腈在甘蓝及土壤中的残留动态研究

通过对甘蓝及土壤中氟虫腈残留量的气相色谱(GC-ECD)分析,比较了济南、昆明两种植区的甘蓝及土壤中氟虫腈的残留动态。结果表明,在济南、昆明两地种植的甘蓝中,氟虫腈的半衰期基本一致(约0.7d),而在两地的土壤中,则存在显著性差异(半衰期分别为1.60d和4.96d)。高低剂量施药分析结果表明,低剂量2次施药、3d后采收与3次施药、7d后采收,氟虫腈的残留量均低于1×10-4mg.kg-1。     

南坪水库不同坝址选取方案的比较及可行性分析

实地调查了南坪水库库区和坝址选址的地质条件,对3种不同坝址地质进行了分析,结果得出方案3工程地质条件相对较好,且库容条件较好,运行管理较方便,因此,将其作为推荐方案。通过对南坪水库不同坝址选取方案的可行性分析,提出了安全、经济、合理的南坪水库地质条件,确定水库的建设标准及规模、类型,为其他同类工程建设提供了参考。