湖南省农业科学院农业生物技术研究综合报告

回顾了湖南省农业科学院农业生物技术研究的历程、内容及取得的主要成绩,并提出了21世纪初始10 a研究重点应放在水稻分子连锁遗传图谱构建、水稻转基因分子标记辅助选择育种、分子标记鉴定杂交种子纯度及外源DNA导入等方面.     

简讯

“外源DNA导入水稻的研究”项目通过鉴定由湖南省教委下达,湖南农学院承担的“外源DNA导入水稻的研究”于7月9日在湖南农学院通过了成果鉴定,专家认为,该项研究首次采用具有与受体亲缘关系远的珍珠粟作为供体,泸红早一号作受体,比较全面地研究了外源DNA浸渍萌动种子及幼龄秧苗的方法,该项成果达国内先进水平。水稻育种自矮秆水稻品种选育成功及三系配套应用于生产后,多年来产量水平一直处于徘徊状态,主要是矮秆源窄,以品种间杂交为主,因此,需要扩大亲本范围,为此,1987年湖南省教委下达了“外源DNA导入水稻”的科研课题,探索外源DNA导入技术应用于水稻     

用浸胚法将外源DNA导入水稻的研究进展

系统地概述了将外源DNA采用浸胚法导入水稻的理论基础、原理、转导机理,浸胚处理及后代分之验证方法;总结了1989以来我国育种工作者采用该方法将外源DNA导入水稻所选用的供体、受体及所创建的水稻新种质类型;报道了笔者用浸胚法将空心莲子草DNA导入水稻增强其耐旱性和创建水稻新种质的研究进展。     

作者风采——洪亚辉

洪亚辉,女,湖南益阳人,教授,硕士生导师。1978年毕业于湖南农学院。近年来主持和参与了多项国家和省级重点科研课题的研究,取得了较大成就。特别是通过外源DNA的导入技术获得了一系列非常有价值的水稻新品系,其中,高蛋白优质早稻在全国反响很大。近年来主持的“高梁DNA导入水稻的研究”获省教育厅科技进步一等奖、省科技进步三等奖;“外源DNA的导入技术”获省教育厅二等奖、     

外源DNA导入水稻后代变异性的SSR分析

采用花粉管通道法,将高粱DNA导入水稻,获得了34个稳定的变异品系,从60对SSR引物中筛选出17对,对供体高粱、受体水稻及其外源DNA导入后代稳定材料进行了SSR分析,结果表明,高粱DNA导入水稻可以引起广泛的变异,在分子水平上产生了遗传多样性,聚类分析可将其分为五类,各类有其特有的遗传变异性。接受外源DNA三个片断,两个片断及一个片断的株系分别被聚成一类,与其他类的遗传差异分别为0.467,0.389及0.347,变异程度依次递减;未接受外源DNA两个片断的株系被聚成另一类。因此,接受外源DNA片断的多寡是水稻后代稳定品系变异程度的基础,也是它们分类的标准。     

利用花粉管通道法将外源DNA导入玉米的研究进展

综述了外源DNA通过花粉管通道导入玉米的研究进展.详细阐述了利用花粉管通道法将外源DNA导入玉米中的转化方式、导入后代的变异以及变异机理;介绍了利用花粉管通道法将外源总DNA和目的基因导入到玉米中的研究现状;提出了利用花粉管通道法导入外源DNA应注意的问题,以及今后的研究方向.     

外源DNA导入水稻的育种效果研究

以外源DNA处理水稻萌动种子或秧苗,从其变异后代选育了19个稳定株系。分析结果表明,19个株系的产量、农艺性状、米质、抗性以及光合特性等项指标,品系同存在明显的差异,并且与受体品种的差异极其明显;采用外源DNA导入技术,对水稻育种具有极其明显的成效。外源DNA导入技术与常规育种方法相结合,将能培育出符合育种目标的农作物新品种。     

利用花粉管通道法将外源DNA导入水稻之研究进展

外源DNA直接导入技术以DNA片断杂交假说为理论基础,直接将目的基因或带有目的性状供体遗传物质(总DNA)通过花粉管通道法导入水稻植株,创造大量的变异材料,通过筛选获得目的性状的后代和新品种。由于简单、易行、不受受体植物种类的限制,已被越多的育种者所接受,在水稻的抗病、米质、丰产性上等各方面广为应用。介绍了外源DNA导入方法、外源基因导入类型、后代遗传变异特点及影响花粉管通道法导入的因素,优点、局限性进行了分析,同时提出了问题和展望。     

外源DNA导入水稻的初步研究

设计了不同药剂和接种方法处理的胚培法将玉米DNA导入水稻的试验,对导入后代进行单株产量的分析结果表明:a.水稻采用一般胚培法(MS+DNA+胚)导入玉米DNA,未能产生主要经济性状(单侏产量)的有利变异;b.胚经不同药剂(丙酮、氯化钙和十二烷基硫酸钠)处理后,能促进外源DNA的导入;c.采用4%丙酮浸胚12h后。再接种到培养基(MS+DNA)上的方法,导入效果较好。     

人参DNA导入水稻引起变异研究

采用花粉管通道技将人参DNA导入水稻"补血黑糯"获得D2代变异植株,利用12条染色体上的400多对SSR引物对供体、受体及变异后代进行了DNA检测,证实其中代材料出现补血黑糯不具有的带型,表明人参基因已经导入补血黑糯中.     

外源DNA导入诱导水稻高蛋白质变异的研究

为探明外源DNA导入水稻,其后代蛋白质含量的变化规律,采用浸种法,将大豆、高梁、玉米的DNA导入水稻品种0146,91-264,对其籽粒蛋白质量含量进行逐代分析。结果发现,后代蛋白质含量出现广泛变异,并分离出度蛋白含量的优良单株,各世代蛋白质含量的变异系数随种植世代的增加而变小,并趋于稳定。研究证实。利用该方法能选育出蛋白质含量高的水稻新品种。     

外源DNA导入番茄方法的研究

本文研究了外源DNA导入番茄的方法，研究结果表明采用子房注射法导入外源DNA比花粉管通道导入法更简便宜行。     

玉米DNA诱导的水稻变异株特异序列分析

为了解外源DNA导入对受体水稻基因组DNA序列的影响,探索受体基因组发生碱基变异的规律,为外源DNA诱导水稻变异的研究提供数据。利用改良的花粉管通道法将玉米基因组DNA导入水稻受体日本晴中,获得的2个水稻变异株B1和B2,经AFLP分析,得到14条特异条带,对其序列分析发现:14条特异序列测序共得到3 791个碱基,其中有144个碱基发生了突变,碱基总突变率为3.80%。特异带的产生是由于限制性内切酶识别序列的碱基或选择性碱基发生突变,或DNA片段的插入或缺失所致。发生单碱基突变的频次显著高于双碱基突变、连续三碱基突变和连续多碱基插入或缺失。发生碱基置换的位点频率(87.04%)显著高于碱基的插入(3.70%)和缺失(9.26%)。在碱基置换中,转换的频率(76.47%)显著高于颠换(23.53%)。上述结果表明,外源DNA导入水稻细胞可诱导受体碱基发生突变,且发生碱基置换的位点频率最高,在碱基置换中以转换为主。     

大豆直接导入外源DNA后代变异的观察

采用花粉管通道法,将外源DNA 直接导入植物的技术,已用于棉花、水稻等作物的品种改良。雷勃钧、刘德璞先后报道,将野生大豆DNA 导入栽培大豆,引起后代性状变异。王丕武报道,将花生DNA 导入大豆中,获得了性状显著变异的D_2代株系。1990年我所将花生DNA 和矮生云豆DNA 导入栽培大豆中,现已筛选出变异稳定的品系。     

水稻外源DNA导入的遗传变异研究

本研究采用“大量注射直接导入法”(经检索国内外文献,在水稻上此法系初次使用)将农垦58S的外源DNA导入籼稻品种晚40中,考察其后代结果:D_1代部份单株性状发生变异,D_2代出现籼粳亚种间性状的重组类型,D_3代重组性状基本趋于稳定。证明直接在籼稻中导入粳稻外源DNA,可实现部分DNA片段与受体植株染色体重组。从而获得育种所需要的籼粳亚种间中间类型材料。此法在育种实践中具有较高的实用价值。     

外源DNA处理小麦种苗和颖花及其诱导变异的研究初报

采用外源DNA导入技术，研究了DNA种苗浸渍对小麦种子发芽的影响，颖花滴注对结实率的影响以及外源DNA导入受体诱导变异的效果。结果表明，外源DNA浸种对发芽生根有不良的影响。浸种时DNA稀释液的浓度不应大于0.1×ssc。DNA液颖花滴注可获得较高的结实率。外源DNA导受体后产生了具有目的性状的变异（如粒色、芒长、不育性等）和非供体性状的变异（如株带蜡质、抽穗迟等）。而且大麦DNA导入小麦后，成功地获得了高抗白粉病变异株。     

湖南农学院学报1992(第18卷)总目次

农学湖南杂交水稻气候生态适应性研究 ,.气候生态条件对杂交水稻物质生产特性的影响···……湖南农学院水稻生态生理研究室(1):1~9外源DNA导入水稻的育种效果研究·~~·~·····“······“·…伏军徐国庆罗弘洪亚辉(1):n~17光敏感核不育水稻农垦585雄性不育性的遗传学研究·································……盛孝邦(1):18~28外源DNA导入水稻的初步研究························……张福泉万文举重延瑜洪亚辉(2):241~247湖南省烤烟综合栽培技术研究 1.栽培因子对…     

黑龙江垦区生物技术产业发展思考

1 黑龙江垦区生物技术产业发展现状 1.1 从事生物技术研究的单位 黑龙江省农垦科学院水稻研究所从1999年开始,利用外源DNA导入和分子标记辅助育种,现已建成黑龙江垦区水稻生物技术育种实验室,拥有800万元的开展生物技术育种的仪器和设备;通过该项技术育种,已有一个品种通过黑龙江省农垦总局品种审定委员会审定.     

GeneFinderTM核酸染料对玉米花粉管通道导入路径的研究

花粉管通道法是一种借助于植物自身卵细胞或受精卵为转化对象的直接转化技术,是一种颇具特色的转基因技术。本试验将GeneFinderTM核酸染料加入外源DNA中,通过紫外成像仪对外源DNA导入后不同时期玉米花丝在亮度上的对比差异来观察外源DNA不同时间段所通过的路径变化,因而为研究外源DNA导入路径提供了一种新的试验方法。     

辐照外源DNA导入大豆的研究初报

本研究采用软X射线和60Coγ射线照射外源DNA,通过花粉管通道将外源DNA直接导入大豆.结果表明:不同的射线、不同的剂量照射使DNA的紫外吸收值发生变化,并影响导入后代的出苗率,使后代在第一代发生变异.