桦褐孔菌菌丝营养特性研究

通过不同的碳源、氮源、微量元素和维生素对桦褐孔菌菌丝生长影响的试验研究，表明桦褐孔菌菌丝生长的最适碳源为麦芽糖和葡萄糖，氮源的不同处理对菌丝生长的影响差异不显著，最适微量元素为ZnSO4与MnSO4，维生素对菌丝生长的影响差异性不显著。     

桦褐孔菌袋料栽培初探

采用不同培养基对桦褐孔菌进行人工驯化栽培,其中3种配方可得到其菌核,并以桦木屑培养基产量最高,平均干重为17.24g,生物学效率为3.83%,同时对人工菌核和野生菌核的体外抗肺癌细胞NCI-H460的活性进行了测定。     

高三萜含量桦褐孔菌菌核栽培

在桦褐孔菌(Inonotus obliquus)栽培料中添加茉莉酸甲酯,筛选提高菌核总三萜含量的栽培料和菌株,并研究不同浓度茉莉酸甲酯对桦褐孔菌菌丝生长和菌核形成的影响。结果表明：采用3号栽培料(36%桦树木屑、30%杂木屑,20%玉米芯、10%麦麸、2%大豆粉、1%蔗糖、1%石膏),添加0.92μmoL·L^-1茉莉酸甲酯后栽培桦褐孔菌1号菌株,每袋菌核产量(21.9 g)和总三萜含量(70.22 mg·g^-1)均较高。     

木蹄层孔菌子实体提取物体外抑菌活性研究

首次采用滤纸扩散法和平板涂布法对木蹄层孔菌Fomes fomentarius（L：Fr．）Kick．子实体的水、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、石油醚等提取物进行了抑菌活性研究。结果表明,木蹄层孔菌各提取物对白色念珠菌JLC31680、白色念珠菌JLC31681、大肠杆菌ATCC 8099、金黄色葡萄球菌ATCC6538均有不同程度的抑制作用。其中水提物与其他5个提取物相比,对金黄色葡萄球菌ATCC6538的抑制作用最强,其次对大肠杆菌ATCC8099,当浓度为100mg·mL^-1时,抑制率分别为95．54％和73．80％,最小抑菌浓度（MIC）分别是50mg·mL^-1、25mg·mL^-1。对白色念珠菌JLC31680和白色念珠菌JLC31681的抑制作用也较为明显,当浓度为100mg·mL^-1时,抑菌率分别为33．06％和26．67％,最小抑菌浓度（MIC）分别是12．5mg·mL^-1、50mg·mL^-1。甲醇提取物与其他5个提取物相比,对大肠杆菌ATCC8099和金黄色葡萄球菌ATCC6538的抑制作用最强,当浓度为50mg·mL^-1时,抑菌率分别为99．39％和95．10％,最小抑菌浓度（MIC）是12．5mg·mL^-1、25mg·mL^-1,且均有量效关系。     

桦褐孔菌多糖的药理活性与化学结构研究进展

桦褐孔菌(Inonotus obliquus=Fuscoporia oblique)是一种著名的民间药用真菌,多糖是其重要的活性成分之一。就近年来桦褐孔菌多糖的化学结构和药理活性的研究进展进行综述,旨在为桦褐孔菌多糖的进一步研究提供参考。     

桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核及野生菌核成分比较

以桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核及野生菌核为材料,对它们的粗蛋白、粗脂肪、灰分、粗纤维、粗多糖和几种主要矿质元素进行了研究。结果表明,人工培养菌丝体的一般营养成分明显高于人工培养菌核和野生菌核,特别是粗蛋白、粗多糖、灰分含量较高。人工培养菌丝体、菌核的矿质元素含量均明显高于野生菌核,其中人工培养菌核的Ca、Cu、Zn含量高于人工培养菌丝体,而Mg、P含量却相对较低。     

桦褐孔菌发酵菌粉成分分析

对桦褐孔菌(lnonotus obliquus)发酵菌粉中的各种成分进行了较全面的分析.结果表明发酵菌粉中营养成分较丰富,其中粗蛋白、总氨基酸含量分别为25.73％和15.18％.菌粉中不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚油酸和油酸为主,还含有丰富的甾醇、酚类物质和多种矿质元素.用桦褐孔菌发酵菌粉提取粗多糖,得率为28.55％、多糖的分子量主要集中在2～40 kDa,单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为:1.3:1.0:20.4:2.1,多糖产品中含有酸性多糖,糖苷键主要是a型.     

桦褐孔菌多糖的体外抗氧化作用研究

Inonotus obliquusis placed in theBasidiomycotina, Hymenomycetes , Aphyllophoralesand Polyporaceae[1]. The mushroomis a wood-decaying fungus that grows under the bark oflive standing trees such as birch, el m andJapanese alder , or on the dry trunks of thesetrees after felling . In Russian folklore ,I .obliquusis considered a medicinal fungus andhas been widely used to prevent and treatdiseases and tumors affecting the digestivesystem ( e . g . gastric , intestinal and livercancers ) , cardio…     

桦褐孔菌诱变菌株过氧化物同工酶研究

对桦褐孔菌菌株JL01及经JL01诱变后的3个菌株（JLZ1、JLZ2、JLC1）的菌丝体过氧化物同工酶进行了研究。结果表明,JLZ1、JLZ2、JLC1比JL01多4条酶带且酶带颜色深浅不同,4个菌株间的相似系数在0．60～1．00,说明诱变菌株较出发菌株遗传基因有所改变,3个诱变菌株之间的遗传差异较小。     

桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖的降血糖比较试验研究

目的是探讨桦褐孔苗人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖的降血糖作用。方法：采用四氧嘧啶（200mg／kg体重）腹腔注射复制小鼠高血糖模型。分别给予小鼠应用桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖提取物按不同剂量灌胃，葡萄糖氧化酶法测定各组的血糖水平。结果：桦褐孔菌菌丝体多糖提取物不同剂量组对四氧嘧啶型高血糖模型小鼠的血糖均有抑制作用，对正常小鼠无明显降血糖作用。桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖三者的降血糖作用无显著性差异。结论：桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖提取物对四氧嘧啶型高血糖模型小鼠均有降血糖作用。对正常小鼠无明显降血糖作用。     

桦褐孔菌菌丝体与子实体蛋白质营养价值评价

采用国际上通用的营养价值评价方法,对桦褐孔菌菌丝体与子实体蛋白质的营养价值进行全面评价。结果表明,桦褐孔菌子实体中蛋白质的氨基酸含量分别比菌丝体和鸡蛋模式高45．9％和49．1％,其菌丝体的氨基酸评分、化学评分、必需氨基酸指数、生物价、营养指数和氨基酸比值系数分分别为75．0,44．5,92．2,88．8,24．7和52．0,营养价值比子实体高。     

桦褐孔菌纤维素酶基因的克隆与原核表达

成功获得了桦褐孔菌(Inonotus obliquus)JL 01菌株的内切葡聚糖酶(IO-EG)和β-葡萄糖苷酶(IO-BGL)的cDNA全长序列.eg2基因cDNA序列全长(ORF)为1149 bp,编码382个氨基酸,bgl2基因cDNA序列全长(ORF)为2583 bp,编码860个氨基酸;成功构建了30a-eg2和30a-bgl2大肠杆菌表达菌株,诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析表明两个菌株均表达蛋白,且蛋白以包涵体形式存在,为桦褐孔菌高效外源基因表达系统的建立提供了基础.     

没食子酸对金黄色葡萄球菌抑菌活性及机制研究

以金黄色葡萄球菌为供试菌,利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,细胞膜渗透性测定,SDS-PAGE蛋白谱变化等方法对没食子酸的抑菌活性及其机制进行研究,进而验证没食子酸的药效作用。实验结果显示,没食子酸对金黄色葡萄球菌作用其抑菌圈直径为13mm;其对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.01mg.mL-1;当药物作用5h时,实验组的电导率与对照组相比增加了6.38%;大分子的OD值随着作用时间的增加而逐渐增大,当培养至8h时,实验组大分子物质吸光值的变化率达到最大,比对照组增加了74.4%。SDS-PAGE蛋白谱变化实验表明,没食子酸对金黄色葡萄球菌作用20h后,其总蛋白量没有明显变化。上述结果表明,没食子酸对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌活性,能影响金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性。其抑菌机制是通过破坏细菌细胞膜的完整性来实现的。     

不同产地桦褐孔菌无机元素的ICP-MS分析

以不同产地桦褐孔菌为试材,研究采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析方法,对桦褐孔菌中无机元素进行测定,并对数据进行相关性及主成分分析,以期为桦褐孔菌药材的质量控制及安全性评价提供依据。结果表明:检测的桦褐孔菌药材中21种元素,元素之间有一定的相关性,Fe、Mg、Ca的含量亦较高,多数样本重金属及有害元素的含量符合要求;主成分分析选出4个主因子,得出Fe、Al、Ca、Mg、Co、Mn、Ti、Sb和Be是桦褐孔菌的特征无机元素。     

桦褐孔菌不同生长时期胞外酶活性变化

以桦褐孔菌(Inonotus obliquus)菌株JL01为试验材料,研究其在代料栽培期间9种胞外酶活性的变化规律.结果表明,羧甲基纤维素酶、滤纸纤维素酶和半纤维素酶活性在菌丝生长阶段较低,菌核形成及菌核成熟阶段较高;漆酶、愈创术酚氧化酶、邻苯二酚氧化酶和过氧化物酶活性在菌丝生长阶段高于菌核形成阶段;蛋白酶和淀粉酶活性在菌丝生长时期及菌核成熟时期相对较高.     

桦褐孔菌ISSR-PCR反应体系优化与建立

采用改良CTAB法提取了桦褐孔菌总DNA,确定ISSR最适25 μL反应体系为模板DNA浓度15 ng·μL-1,dNTPs 浓度150 μmol· L-1,引物浓度25 μmol·L-1,Taq DNA聚合酶浓度2.0 U,Mg2+浓度1.4 mmol· L-1,10×buffer 2.5 μL,其余用ddH2O补足;确定ISSR扩增程序为:94℃预变性5 min,35个循环:94℃变性1 min、45℃～51℃退火1 min(退火温度因不同引物而定)、72℃延伸1 min,最后72℃延伸5 min,4℃保存.筛选出16条ISSR引物,并成功应用引物UBC842完成了21株桦褐孔菌的ISSR-PCR反应.     

超声提取桦褐孔菌子实体多糖及多糖对癌细胞作用的研究

采用正交试验优化桦褐孔菌子实体多糖的超声提取工艺条件,并对提取多糖的抗肿瘤活性进行研究。结果表明,桦褐孔菌多糖超声提取的最佳工艺条件为超声时间70min,温度80℃,频率20kHz,加水量12倍水,其多糖在体外对肝癌HEPG2细胞株具有明显的抑制作用,并可诱导肿瘤细胞凋亡,体内实验发现多糖可显著抑制小鼠S180肉瘤的生长,并具有增强免疫作用。     

桦褐孔菌对肺癌细胞抗增殖和诱导凋亡观察

用MTT法测定桦褐孔菌抗突变活性成分Inotodiol,对人肺癌A549细胞株的增殖抑制作用,20mg.L-1～80mg·L^-1桦褐孔菌的抗突变活性成分Inotodiol对人肺癌A549细胞株有抑制增殖作用,且表现出浓度和时间依赖关系。在倒置显微镜下、HE染色光学显微镜下、AO/EB双染色荧光显微镜下、透射电子显微镜下观察,肿瘤细胞均有体积变小、有凋亡小体。桦褐孔菌的抗突变活性成分Inotodiol可抑制人肺癌A549细胞株的增殖和诱导肿瘤细胞凋亡。