马克斯克鲁维酵母的筛选鉴定与应用

本试验从新疆天润公司西山奶牛场原料乳中分离、纯化出三株生长好、生物特性优良的酵母．通过形态特性观察、生化特性试验、DNA鉴定,其中一株鉴定为马克斯克鲁维酵母,可应用于奶啤、乳清饮料发酵,产品风味独特。     

脆壁克鲁维酵母生产乳糖酶发酵条件的优化

通过试验研究了一株产乳糖酶脆壁克鲁维酵母的发酵培养基成分及培养条件,最终确定了该株酵母的最佳发酵培养条件。结果表明,此株脆壁克鲁维酵母发酵生产乳糖酶的最佳培养基成分为：乳糖4％,酵母粉3％,MnCl2 1mmol／mL;最佳培养条件：接种量10％,温度28℃,初始pH7-7．5,摇床转数180r／min,培养时间36h。在此条件下培养,乳糖酶活力达1100u／mL或4140u／g干菌体。     

脆壁克鲁维酵母生产乳糖酶发酵条件的优化

通过试验研究了一株产乳糖酶脆壁克鲁维酵母的发酵培养基成分及培养条件,最终确定了该株酵母的最佳发酵培养条件.结果表明,此株脆壁克鲁维酵母发酵生产乳糖酶的最佳培养基成分为:乳糖4%,酵母粉3%,MnCl2 1mmol/mL;最佳培养条件:接种量10%,温度28°C,初始pH 7-7.5,摇床转数180 r/min,培养时间36 h.在此条件下培养,乳糖酶活力达1100 u/mL或4140 u/g干菌体.     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定与培养基筛选

从陕西省关中地区患多发性浆膜炎和关节炎猪场的32个样品中分离到6株细菌,并对其进行了形态观察、菌落纯培养、生化特性鉴定、PCR检测等,最终确定分离菌株均为副猪嗜血杆菌.该结果表明,关中地区存在副猪嗜血杆菌病流行;对副猪嗜血杆菌分离株最适培养基进行了筛选,将分离菌株分别接种于LB、TSA、巧克力琼脂等固体培养基上,接种12 h后通过观察菌落大小,筛选出最适合副猪嗜血杆菌生长的固体培养基TSA(加0.1 g/L NAD和50 mL/L的犊牛血清)和固体培养基巧克力琼脂(加0.8 g/L NAD).同时,将副猪嗜血杆菌分离菌株接种于LB、TSB等液体培养基中,培养至16h后,每隔4h分别取样,通过与麦氏比浊管对比确定菌液中的菌数,筛选出最佳液体培养基为TSB(加0.1 g/L NAD和50 mL/L的犊牛血清).     

温度对乳酸克鲁维酵母产重组皱胃酶的影响

为了研究变温培养对乳酸克鲁维酵母GG799生物量和产酶量的影响,试验以乳酸克鲁维酵母GG799的生物量、产酶量和发酵周期为衡量指标,研究温度的变化对上述指标的影响,从而确定变温培养模式.结果表明:采用两阶段温度控制方式,即发酵初期(0～22 h)采用32 ℃发酵,发酵进行22 h后采用28 ℃进行发酵,到达稳定期的时间为40 h,最大细胞生物量为19.8 g/L,最高产酶量为1 197 U/mL.结果说明与单一温度发酵相比,变温发酵使乳酸克鲁维酵母GG799的产酶量和生物量均有所提高.     

红酵母类胡萝卜素的分离与鉴定

对比6种红酵母细胞的破壁方法,结果表明:酸-热法为红酵母细胞破壁的最佳方法.对红酵母细胞自溶条件分析后证实温度是影响细胞自溶的主要因素.利用薄层层析法和高效液相色谱法对一种红酵母色素进行分离,经鉴定发现其中共有3种类胡萝卜素,分别为β-胡萝卜素、红酵母烯和圆酵母红素.     

病死动物腐败过程中优势菌种的筛选与分离鉴定

本研究旨在筛选出病死动物无害化处理罐中参与动物尸体腐败的优势菌种,为研发加速动物尸体腐败的微生物制剂提供理论依据。收集病死动物无害化处理罐中动物尸体腐败液,按照10倍递增稀释方法,在参与动物尸体腐败的微生物菌群中成功筛选出一株优势菌种,采用传统分离鉴定方法和分子生物学鉴定方法对优势菌种进行鉴定。结果表明,优势腐败菌种为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌,其16S rRNA基因序列与Bacillus subtilis strain 22（FJ435215.1）的同源性为99.53%。     

鸡组织中沙门氏菌的分离鉴定与药物筛选

为了快速筛选出对沙门氏菌敏感的药物用于临床,减少盲目用药带来的经济损失.本研究通过无菌采集具有典型沙门氏菌感染病症鸡的肝脏和脾脏,进行细菌分离、PCR试验、革兰氏染色试验、生化试验、第二次PCR试验、药敏试验,结果表明沙门氏菌对硫酸庆大霉素、环丙沙星和头孢唑啉钠最为敏感,其次是诺氟沙星和青霉素钠,四环素也有一定敏感性,...     

一株产脂肪酶菌株的分离筛选及鉴定

采用梯度稀释涂布法及平板筛选法从松树林下分离到12株产脂肪酶菌株.复筛到一株产脂肪酶性能较好的菌株TS-2,在30℃、180rpm条件下培养48h脂肪酶活为4.8U/mL.综合菌落形态、生长特性镜检形态及5.8S rDNA-ITS区序列系统进化分析证明所分离的菌株TS-2为解脂耶氏酵母酵母(Yarrowia lipol...     

牛流产沙门氏菌的分离与鉴定

流产沙门氏菌是一种能引起牛发生流产的病原体,给养牛生产带来很大的经济损失.试验从流产胎儿真胃内容物中分离到一株致病菌,在实验室经微生物学诊断,鉴定为流产沙门氏菌.药敏试验结果显示,该菌株对环丙沙星、链霉素、庆大霉素、阿莫西林、阿米卡星、阿奇霉素等表现高度敏感.     

Separation and identification of bovine lymphocyte populations

Various methods for separation of lymphocyte populations have been modified and adapted for use in isolating and identifying bovine lymphocytes. Ficoll diatrizoate (F-D) with a specific density of 1.084 was found to be superior to those with densities of 1.080 and 1.077 which were developed originally for the mouse and human mononuclear cells, respectively. F-D with a density of 1.084 attained a lymphocyte (absolute number) recovery rate of 92% whereas those with densities of 1.080 and 1.077 yielded 81% and 71% recovery rate of lymphocytes, respectively. Subsequent separation of T lymphocytes was achieved best by nylon wool column whereas separation of B lymphocytes was attained best by complement-mediated depletion of T lymphocytes with the T lymphocyte specific monoclonal antibody (MAb), BLT-1. The former yielded 95 +/- 3% T lymphocytes with 47 +/- 9% recovery rate, and the latter gave 96 +/- 3% B lymphocytes with 71 +/- 9% recovery rate. In comparison, direct panning of F-D gradient separated mononuclear cells with goat anti-bovine IgG coated plates yielded 80% B lymphocytes with 31% recovery rate and indirect panning of MAb BLT-1 treated F-D gradient-separated mononuclear cells with goat anti-mouse IgG coated plates yielded 89% T lymphocytes with 35% recovery rate.     

鹅副黏病毒的分离与鉴定

从鹅体内分离到一株副黏病毒（DG01株）,该病毒具有血凝活性且血凝活性能被新城疫标准阳性血清和鹅副黏病毒阳性血清所抑制,能使SPF鸡胚、非免疫鸭胚和鹅胚100％死亡。电镜观察见病毒颗粒呈多形性,多为圆形有囊膜,直径在200nm左右;ELD50为10^8.6／ml,MDT为56h,ICPI为1．94。对DG01株通过RT-PCR方法,扩增出F基因,鉴定为基因Ⅶ强毒株,测序结果与CH2000同源率为91．8％,因此确定DG01株属于禽副黏病毒Ⅰ型（APMV-1）的基因变异强毒株。动物接种试验表明DC01株对鸭无致病性,对鹅、鸡、鸽具有100％的发病率和致死率。     

鲜牛奶中细菌的分离纯化及其药物敏感性分析

为了解鲜牛奶中细菌的分布情况及其对抗生素的敏感状况,实验对30份采自河北张家口地区某养殖场的新鲜无菌牛奶进行细菌分离鉴定,并分别用青霉素(16μg/ml)、氯霉素(32μg/ml)、克林霉素(4μg/ml)、红霉素(8μg/ml)、四环素(16μg/ml)、庆大霉素(16μg/ml)、环丙沙星(4μg/ml)、头孢噻吩(32μg/m)l进行药敏实验。结果显示30份牛奶样品中共分离得到111株菌,分别为葡萄球菌31株、沙雷氏菌14株、假单胞菌12株、芽孢杆菌11株、肠杆菌5株、不动杆菌4株、奇异变形杆菌3株、微球菌3株、巨球菌3株、肠球菌4株、其它菌21株。其中耐青霉素16μg/ml的为50株,耐氯霉素32μg/ml的为23株,耐克林霉素4μg/ml的为46株,耐红霉素8μg/ml的为37株,耐四环素16μg/ml的为38株,耐庆大霉素16μg/ml的是7株,耐环丙沙星4μg/ml的为8株,耐头孢噻吩32μg/ml的为40株。通过实验可知,细菌类型主要有葡萄球菌、沙雷氏菌、假单胞菌等;8种抗生素中,庆大霉素、环丙沙星、氯霉素的抑菌效果较好,而青霉素、克林霉素、红霉素、四环素、头孢噻吩的抑菌效果相对较差。     

猪鼠伤寒沙门氏菌的分离和鉴定

某哈尼族村民食用发病未治愈的病猪,食用后有15人发病,2人因未及时治疗死亡,其余13人经用抗生素等药物治愈。选择与被食病猪临床症状相似的1头病猪进行病理剖检,主要病变有眼结膜苍白、皮下有出血点,呈散在分布,心外膜、心内膜有出血点,肝脏可见出血斑、脾脏边缘梗死、肾脏外观土黄色等;采集病猪脏器和病人曾食用的肉,经细菌分离鉴定,均分离到鼠伤寒沙门氏菌。     

香蕉茎叶中乳酸菌的分离和鉴定

从海南热带地区的香蕉茎叶中分离出3株高产酸菌,利用经典分类法即在形态学、生理生化特性等方面对其进行了细菌学鉴定,结果表明,3株菌分别为植物乳杆菌(Lactobacillus planetarium)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)和乳酸片球菌(P.pentosaceus)。对这3株菌产酸性能的测试结果表明,植物乳杆菌HN1和短乳杆菌HN2产酸速率大于乳酸片球菌HN3。     

发酵构树叶中乳酸菌的分离、鉴定

试验是从不同时期的发酵构树叶中分离乳酸菌,并筛选出4株生长良好的菌株,菌株编号分别为A1、A2、A3、A4。从菌落特征、形态特征及生理生化特性对其进行鉴定,判定结果分属于乳酸杆菌和球菌,为乳酸饲料添加剂的制备提供前提条件。     

奶牛乳房炎无乳链球菌的分离与鉴定

利用THB固体培养基和色素培养基初步筛选出奶牛乳房炎中无乳链球菌,以分离的12株疑似菌的基因组DNA为模板进行PCR扩增,对扩增产物进行分析,结合选择培养的生理生化特性对分离菌进行鉴定。结果表明,12株疑似菌中有8株为无乳链球菌.     

鸡源芽孢杆菌的分离鉴定及小鼠毒性试验研究

本试验从鸡肠道分离出 42 株菌种,通过对菌种菌落培养特性、形态观察、生理生化试验,初步鉴定出 8 株为芽孢杆菌.用这 8 株菌对小白鼠进行为期 20 d 的正常量和加倍量的饲喂,结果表明,试验组小白鼠均未出现中毒现象,所选用的 8 株细菌均较安全,可作为动物微生态制剂的菌种应用.     

牛红细胞膜与大豆凝集素特异结合蛋白的分离与鉴定

为了分离鉴定红细胞膜上能与大豆凝集素特异结合的蛋白质,本试验以荷斯坦奶牛的红细胞和大豆凝集素(SBA)纯品作为实验材料,采用低渗溶血的方法提纯红细胞膜,EP-40裂解红细胞膜蛋白,通过免疫共沉淀(Co-IP)获得能与大豆凝集素特异结合的蛋白,最后用液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)联用的方法筛选出15类可能与大豆凝集素结合的蛋白,其中以骨架蛋白为主,还包括一些催化酶类蛋白和功能调节蛋白。结果为进一步研究大豆凝集素的凝血机理提供理论依据。