南方四季杨组培再生体系的建立

以南方四季杨幼嫩叶片和茎段为外植体进行组织培养,探讨基本培养基、生长素、细胞分裂素等因素对其离体再生的影响,结果表明：叶片不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA025mg/L+NAA009mg/L+琼脂5g/L+蔗糖30g/L,分化率可达9907%;茎段诱导愈伤组织最佳培养基为1/2MS+6-BA01mg/L+ NAA01mg/L+ IAA01mg/L+琼脂5g/L+蔗糖30g/L,诱导所得的愈伤组织在分化培养基上可以再分化出大量再生芽;用1/2MS+IBA005mg/L+IAA01mg/L +琼脂5g/L+蔗糖30g/L作为生根培养基培养15d,生根率可达100%;生根苗移栽后全部成活。     

红刺玫愈伤组织诱导的遗传转化体系建立(英文)

以红刺玫无菌苗为初始材料,通过探讨外植体、培养条件,以及激素配比浓度和暗培养时间对愈伤组织分化芽的影响,建立了红刺玫叶片愈伤组织诱导的再生体系:MS为初始培养基,暗培养21 d,愈伤组织诱导率达到100%。分化培养基为MS+TDZ 1.5 mg/L+NAA0.05 mg/L,暗培养8 d,芽分化率达48%;通过遗传转化条件优化,建立了以红刺玫愈伤组织为转化受体,通过根癌农杆菌介导,以红刺玫的DFR-RNAi为表达载体,GUS为标记基因的遗传转化体系,转化效率达到50%。     

胡萝卜再生体系及高效遗传转化体系的建立

胡萝卜是一种重要的世界性蔬菜，其丰富的营养成分、高β－胡萝卜素及鲜食特性，使之成为植物反应器的理想作物。本研究以栽培品种“新黑田五寸人参”为材料，研究了胡萝卜组织培养及遗传转化体系。得到了如下结论，愈伤诱导培养基及继代培养基为B5附加0.5mg/L2,4-D和0.5mg/L 6-BA，最适于转化的外植体为弱光下萌发的7－10天龄无菌苗之下胚轴，最适卡那霉素浓度为100mg/L，添加低浓度的乙酰丁香酮（25μM）有利转化，抗性植株再生时，除去抗生素有利于植株再生。     

绿色草莓再生体系的建立

建立高效、稳定的绿色草莓再生体系是构建其遗传转化体系的基础。本研究以绿色草莓匍匐茎茎尖为外植体,置于不同培养基中进行初代培养获得试管苗。在含有不同配比植物生长调节剂的培养基中对叶龄为30 d的试管苗叶盘进行脱分化处理。以叶盘诱导产生的愈伤组织为试验材料,探究不同植物生长调节剂对愈伤组织产生不定芽的影响。结果表明,最适用于绿色草莓初代培养的培养基是MS+0.2 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg/L赤霉素(GA₃),在此培养基中绿色草莓离体茎尖成活率最高,生长状况最好;诱导叶盘脱分化、愈伤组织再分化和诱导不定芽生根的适宜培养基分别是MS+1.5 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+2.0 mg/L噻苯隆(TDZ)、1/2 MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L吲哚丁酸(IBA)和1/2 MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L吲哚乙酸(IAA),其出愈率、再分化率和生根率分别为100%、91.0%、100%。本研究建立了以绿色草莓匍匐茎茎尖为试验材料获得试管苗的组织快繁体系和以叶盘为外植体经脱分化、愈伤组织再分化2个阶段...     

洋葱组织培养及遗传转化研究进展

分析了诱导洋葱愈伤的外植体、培养基配方,以及诱导成苗、生根的培养基等因素,综述了有关洋葱标记基因和目的基因的遗传转化情况,并对遗传转化体系的建立,转基因和基因编辑技术在洋葱研究中存在的问题,提出了今后的研究方向,以期为洋葱组织培养的优化提供参考。     

蝴蝶兰高效再生体系与遗传转化体系的建立

为建立蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis)再生体系和遗传转化体系,对蝴蝶兰进行人工授粉,成熟后将胚播种于诱导培养基上诱导原球茎或不定芽。探讨外源调节剂的种类及浓度,并筛选卡那霉素浓度以及除菌剂的种类及浓度。结果表明:当6-BA浓度为5 mg·L~(~(-1)),NAA浓度为1 mg·L~(-1)时,原球茎的诱导效率最高。当6-BA浓度为1.5mg·L~(-1),同时添加0.5g·L~(-1)活性炭和40mL·L~(-1)椰汁时,壮苗效果最佳。卡那霉素的筛选浓度为4mg·L~(-1),除菌剂的种类为阿莫西林克拉维酸钾(7∶1),除菌浓度为100mg·L~(-1)。     

梅花再生体系建立及遗传转化初步探究

梅花是蔷薇科李属植物,观赏性强。虽然梅花在我国传统文化中一直有耐寒的美称,但是实际上耐寒梅花品种很少。要在较短时间内改良梅花的品性,必须建立梅花再生体系,采用植物遗传转化技术,改变梅花基因,获得优良品种。     

红掌组织培养再生体系的建立研究

[目的]建立红掌的组织培养再生体系。[方法]以红掌幼嫩叶柄为材料,筛选红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根时的最佳激素配比。[结果]红掌叶柄愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,此时愈伤组织诱导率可达80.0%;不定芽分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT,此时分化率可达96.7%;生根的最佳培养基为MS+1.0mg/L IBA,此时生根率可达86.7%。[结论]为红掌的快速繁殖提供了技术依据。     

籼稻遗传转化高频再生体系的建立

选用21个籼稻品种进行成熟胚离体培养试验，结果发现大多数品种可通过添加一定配比的外源植物激素使愈伤组织诱导率大大提高，继代培养基中添加KT NAA可明显改善愈伤组织的生长状况；连续继代可显著提高愈伤组织的再分化率；预分化培养后转入再分化培养可显著提高愈伤组织再分化率，建立了一套适于籼稻遗传转化的高频再生离体培养体系。     

马铃薯叶片愈伤组织再生体系的建立

以8个马铃薯品种(系)为试材,进行叶片离体再生研究。结果表明,云薯501愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA310 mg/L,愈伤诱导率为100%,诱导不定芽分化的优化培养基为MS+6-BA 3 mg/L+GA310 mg/L,芽的分化率为86.3%;会-2的愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA310 mg/L,愈伤诱导率为95.7%,诱导不定芽分化的优化培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.02 mg/L+GA310 mg/L,芽的分化率为65.4%。上述2个品种适宜用作马铃薯转基因实验的载体,其他6个马铃薯品种(系)的愈伤诱导率很低,有的品种(系)没有愈伤组织产生,不能作为马铃薯基因转化的载体。     

唐古特瑞香愈伤组织培养与再生体系建立

以唐古特瑞香幼嫩叶片为材料,进行愈伤组织诱导与植株再生试验,以期建立唐古特瑞香再生体系,为其无性系的快速繁殖奠定基础。将幼嫩叶片进行表面灭菌后接种于初代培养基中,初代培养时,存在褐化现象,愈伤诱导前需进行除褐培养,除褐后的外植体经愈伤诱导、不定芽分化、增殖培养、生根培养和幼苗出瓶移栽的试验过程,筛选出了最佳培养方案。除褐培养基以MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+PVP 200 mg·L^-1效果较好,在此培养基上连续转移3次后褐变消失。愈伤诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L^-1+2,4-D 2.0 mgL^-1,诱导率95.5%;芽苗分化培养基为MS+ZT 2.0 mg·L^-1+TDZ 0.1 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,分化率93.2%,平均芽数为8.66条;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+IBA 0.3 mg·L^-1,增殖倍数为12.21,平均苗高4.81 cm;生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg·L^-1,生根数平均为3.83条,生根率为88.72%以上;组培苗移栽于珍珠岩中生长良好,成活率达90%以上。本研究初步建立了唐古特瑞香再生体系,为其无性繁殖奠定了理论基础。     

加工番茄遗传转化再生体系的建立

加工番茄种子出芽后7~8 d,子叶剪成约0.2~0.4 cm,0.3~0.5 cm的小块,以MS B5为基本培养基,附加IAA0.2 mg/L分别与0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mg/L的6-BA/ZT/TDZ组合;6-BA2.0 mg/L分别与0.0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L的IAA/IBA/NAA组合。经诱芽比较,在不同浓度6-BA/ZT/TDZ与0.2mg/LIAA组合中,出芽率最高的培养基为MS ZT1.0 mg/L IAA0.2 mg/L和MS TDZ2.0 mg/L IAA0.2 mg/L。在不同浓度的IAA/IBA/NAA与6-BA2.0 mg/L组合中,IAA明显优于NAA和IBA,筛选出MS 2.0 mg/L6-BA 1.0 mg/LIAA为最佳生芽培养基。以1/2MS添加NAA//BA0.0,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L进行生根比较,再生芽在MS 0.5 mg/L IBA生根培养基上生根最好,并发育成完整的小植株。     

108杨叶片再生体系的建立

[目的]研究欧美杨108离体叶片再生技术,为遗传转化研究提供科学依据。[方法]研究了外植体的消毒方法和不同激素组合对叶片再生和不定芽生根的诱导效果。[结果]茎段外植体消毒的最佳处理为：75%乙醇溶液消毒10s＋0.1%升汞消毒10min,污染率和褐化率均低,成活率较高;叶片诱导分化培养基以MS＋6-BA0.6mg/L＋NAA0.2mg/L效果最好,诱导率100%,平均不定芽诱导数为26.43个;最佳生根培养基为1/2MS＋IBA0.3mg/L或1/2MS＋IAA0.3mg/L,生根率可达100%,生根数分别为4.83条和5.20条。[结论]以108杨叶片为外植体,建立了108杨的高效再生体系。     

芍药遗传转化再生体系的建立

以芍药为研究对象,建立芍药高效的遗传转化再生体系,试验筛选最佳结果为:以茎段为外植体,用HgCl2消毒15min,基本培养基为1/2MS,抗坏血酸(100mg·L-)1,诱导愈伤阶段的植物生长调节剂(PGR)配比为ZT(2.0mg·L-1)+IAA(0.4mg·L-)1,胚状体分化阶段不加植物生长调节剂PGR;生根阶段为IAA(0.4mg·L-)1。抗性筛选时适宜的卡那霉素Km浓度为4mg·L-1,遗传转化受体为胚性愈伤组织。     

芍药遗传转化再生体系的建立

以芍药为研究对象,建立芍药高效的遗传转化再生体系,试验筛选最佳结果为：以茎段为外植体,用HgCl2消毒15min,基本培养基为1／2MS,抗坏血酸（100mg·L^-1）,诱导愈伤阶段的植物生长调节剂（PGR）配比为ZT（2．0mg·L^-1）＋IAA（0．4mg·L^-1）,胚状体分化阶段不加植物生长调节剂PGR;生根阶段为IAA（0．4mg·L^-1）。抗性筛选时适宜的卡那霉素Km浓度为4mg·L^-1,遗传转化受体为胚性愈伤组织。     

紫花苜蓿NFF2高效组织培养再生体系的建立

生物技术是紫花苜蓿等牧草产量和品质遗传改良的重要途径之—.高效、稳定的再生体系是苜蓿基因工程技术利用的关键,而紫花苜蓿的再生受基因型和环境条件等影响很大,苜蓿不能稳定的高频再生始终是苜蓿基因工程跨越发展的瓶颈.本试验以易于被农杆菌转染的紫花苜蓿品种NFF2无菌苗的叶柄为外植体,研究了不同激素种类和配比等不同培养条件对其愈伤组织诱导的影响,以及不同分化培养基对愈伤组织分化的影响,以期建立一套紫花苜蓿NFF2的高频、稳定的再生体系.结果表明:以叶柄为外植体,最佳愈伤组织诱导培养基为改良SH (SH2K)+1.0mg/L 2,4-D+0.2 mg/L KT;最佳愈伤组织继代培养基为BOi2Y;最佳愈伤组织分化培养基为MSO;成苗培养基可以用1/2MS.     

野生花卉厚叶岩白菜组织培养及再生体系的建立

[目的]建立厚叶岩白菜的完整再生体系,并为研究其遗传转化奠定基础。[方法]以野生厚叶岩白菜的叶片为外植体,通过筛选培养基与激素配比,初步建立其离体培养再生体系。[结果]厚叶岩白菜愈伤组织的最佳诱导培养基为：改良MS＋NAA0．50mg／L＋6-BA0．50mg／L-4-水解酪蛋白100．00mg／L＋0．2％PVP;分化培养基为：改良MS＋NAA0．50mg／L＋IBA0．10mg／L＋6-BA0．50mg／L;生根培养基为：1／2MS＋IBA0．50mg／L＋NAA0．01mg／L。15d后移植幼苗的叶片由嫩绿变成深绿,30d后移植幼苗长出新叶,叶片中心偏红,成活率达到95％,且幼苗生长健壮。[结论]通过对培养基组分、激素配比及环境因子的筛选,为野生厚叶岩白菜初步建立了一个实用的离体培养再生技术体系。     

陕西卫矛组织培养再生体系的建立

为建立陕西卫矛高效再生体系,以幼茎为外植体诱导愈伤组织,在成功继代愈伤组织的基础上,进行愈伤组织再分化培养研究。采用正交设计方法,考察了6-BA、NAA及Ca2+3个因素对陕西卫矛愈伤组织再分化率的影响。结果表明:再分化培养基中添加3mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+5mmol/L Ca2+,能明显提高陕西卫矛愈伤组织的再分化率。     

大豆遗传转化方法及再生体系研究进展

转基因技术作为现代生物技术之一,在基因功能研究和转基因育种方面取得重要进展。大豆基因组测序之后,大豆功能基因组学发展迅速,挖掘控制重要性状的基因用于转基因育种受到广泛关注。随着转基因大豆新品种培育重大专项的实施,我国建立了基因克隆、遗传转化、功能研究、转基因品系安全评价等转基因育种研究技术体系和监管体系。其中,转基因大豆遗传转化技术体系的研究取得了较快的进展,主要集中在高效、稳定遗传转化再生体系的建立和优化,大豆遗传转化方法的探索和优化等方面。对大豆遗传转化体系、转化方法和转化效率等因素进行阐述,可为大豆基因功能研究和转基因新品种培育相关研究提供参考。