兽医临床诊断中心

<正>中心实验室总面积近1000m~2,设计布局严格按照省级兽医实验室的标准执行,除了标准要求的各功能实验室外,还建有60m~2的洁净实验室一间、20m~2的远程诊断实验室一间。2015年4月取得计量认证资质,证书编号:2015121569V。实验室拥有荧光定量PCR仪、梯度PCR仪、酶标仪、凝胶成像系统、台式高速冷冻离心机、超低温冰箱等先进仪器设备,可开展畜禽疫病的远程诊断、病理学和细菌学检测、药敏试验、病毒的病原学和血清学检测等科研和对外检测服务及防治技术指导工作。     

基于TT51-1水稻种子标准曲线检测的可靠性分析

为了分析在同一个实验室的2台不同型号的实时荧光定量PCR仪(扩增曲线和标准曲线的相关参数)可比性,在常规条件下,使用同一批号的试剂,将标准品及同一水稻种子样品TT51-1在2台荧光定量PCR仪上进行扩增,对标准曲线的参数及分析结果进行比对,分析其一致性。结果表明,作为单一的检测系统,运用同一批号试剂对相同标准品及待检样品的试验中,2台实时荧光定量PCR仪测定的结果差异没有统计学意义(P0. 05)。通过对标准曲线的相关参数和待检测样品的检测结果的分析,可以判定实验室存在的2台实时荧光定量PCR仪检测的结果的一致性,可确保检测结果可靠。     

Jabber协议与H.264标准在农业远程诊断中的应用研究

阐述了将Jabber协议与H.264标准应用于农业远程诊断的工作原理和各级系统框架,设计并实现农民与专家远程音频、文字、白板等即时通信。系统测试表明,基于Jabber协议与H.264标准的农业远程诊断技术能够实现专家和农户间的双向视频沟通,能帮助农户远程诊断农业病虫害,而且系统在运行过程中消耗网络带宽较少,运行稳定。     

两种仪器对羊毛细度检测结果的比对分析

利用激光细度测定仪和显微投影仪分别检测了国际毛纺协会实验室提供的标准毛条、实验室比对毛条、随机抽取的含脂毛共20个样品的细度,对检测结果比对分析发现,两种方法均可达到羊毛细度检测标准的要求;认为具有相同检测项目的不同仪器间进行比对试验是一种简单易行,及时找到系统误差的好方法;同时得出,在目前多数毛纺织企业和检测机构尚无激光细度仪时,可完全采用显微投影仪进行检测.     

转基因油菜RT73品系特异性检测标准分子协同实验验证

对构建的适于转基因油菜RT73品系特异性检测标准分子pEASY-RT73在普通PCR和实时荧光PCR检测中的适用性进行了实验室间协同实验验证。对8家实验室结果的统计分析表明,标准分子pEASY-RT73对转基因油菜RT73品系特异性检测及油菜内源基因HMG和PEP检测具有高特异性。在普通PCR扩增中,标准分子对PEP和RT73品系特异性序列的检测下限均为20拷贝,对HMG基因的检测下限为50拷贝;在实时荧光PCR扩增中,HMG和RT73品系特异性序列的检测下限均为10拷贝,PEP检测下限为50拷贝。虽然各实验室所用仪器和试剂有较大差异,但对检测结果影响不大。因此,标准分子pEASY-RT73可稳定的作为新型标准物质用于转基因油菜RT73品系特异性普通PCR和实时荧光PCR检测。     

四种转基因玉米新型质粒标准分子协同实验验证

构建了分别适于转基因玉米GA21、TC1507、T25和Bt11品系特异性双重PCR检测标准分子,并对其在定性PCR检测体系中的适用性进行了实验室间协同实验验证。对7家实验室返回结果的统计分析表明,标准分子pBt11、pTC、pT25和pGA分别对转基因玉米Bt11、TC1507、T25和GA21品系具有高特异性。4个标准分子在zSSⅡb和对应品系特异性序列单一PCR检测体系中检测下限均为50拷贝。因此,4个标准分子均可作为新型标准物质用于相应转基因玉米品系特异性定性检测。     

小胡杨2号光合日变化及光响应曲线研究

以小胡杨2号为研究对象,采用LI-6400XT便携式光合仪对其光合日变化及光响应曲线进行研究,并用模型拟合得出相关参数值,研究结果表明:小胡杨2号净光合速率(P_n)日变化为单峰曲线,与其水分利用效率(WUE)同在12:00时达到峰值,分别为21.98μmol/(m~2·s)和3.86μmol/mmol;蒸腾速率(T_r)日变化曲线呈双峰型,胞间CO_2浓度(C_i)大致呈先下降后上升的趋势;小胡杨2号光饱和点(LSP)为1 768.87μmol/(m~2·s),光补偿点(LCP)为32.87μmol/(m~2·s),最大净光合速率(P_(nmax))为20.59μmol/(m~2·s),是一种抗旱性良好并对强光有很好适应性的杂交树种。     

如何做好兽医实验室荧光定量PCR理论与操作的有效培训

通过在线问卷调查方式,得到包含广西市、县、屠宰场、养殖场、第三方等实验室共172份实验员填写的样本数据,调查结果提示了广西兽医实验室实验员对荧光PCR仪的理论知识认知水平与实际操作熟练程度参差不齐,因此,为提高市县级、养殖场、第三方等兽医实验室荧光PCR仪培训效率、提高实验室检测水平,应建立培训返岗机制、讲师培养机制、训前调研训后测评机制, 鼓励基层实验员参与实验室培训工作, 进一步完善兽医实验室培训制度。     

农村家用圆筒形水压式沼气池水试压方法的探讨

通过对《农村家用水压式沼气池质量验收标准》(GB4751—84)的分析认为用水试压法验收按《农村家用水压式沼气池标准图集》(GB4750—84)建造的圆筒形沼气池,存在达不到最大试气压力800mm·H_2O和贮气间漏测的问题。本文试以8m~3(产气率0.25m~3/m~3·d)沼气池为例,提出了改变测试水位的水试压方法。     

兽医实验室实验员荧光定量PCR理论与操作的调查分析及培训建议

通过在线问卷调查方式,获得包含广西壮族自治区市、县级疫控兽医系统及屠宰场、养殖场、第三方检测等实验室共172份实验员填写的样本数据。调查结果显示,广西兽医实验室实验员对荧光PCR仪的理论知识认知水平与实际操作熟练程度参差不齐。因此,为提高市、县级疫控兽医系统及屠宰场、养殖场、第三方检测等兽医实验室荧光PCR仪培训效率、提高实验室检测水平,应建立培训返岗机制、讲师培养机制、训前调研训后测评机制,鼓励基层实验员参与实验室培训工作,进一步完善兽医实验室培训制度。     

东北畜禽疫病研究教育部重点实验室

正东北畜禽疫病研究教育部重点实验室于2019年由教育部批准组建(以下简称"重点实验室")。"重点实验室"主任为国家杰出青年科学基金获得者陈启军教授,现有专职研发人员40人,现有仪器设备总值4900万元,先后配备了流式细胞分选仪、激光共聚焦显微镜、生物分子相互作用仪、单四极杆质谱仪、超速离心机、正/倒置荧光显微镜、高通量荧光定量PCR仪等大型仪器设备51台(套)。"重点实验室"在辽宁省高校重大科技平台——人兽共患病研究重点实验室基础上进一步建设,围绕畜     

鹅副粘病毒GX1株的HN和F蛋白基因的克隆和序列分析

1材料与方法 1．1病毒来源鹅副粘病毒分离株GX1株由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心实验室分离保存。 1．2试剂及仪器各种PCR反应试剂、PMD-18T载体、胶回收试剂盒、限制性内切酶等均购自宝生物工程（大连）公司。仪器：恒温孵化箱、PCR反应仪、超速离心机、移液器等。     

小麦越冬 返青期苗情测定及管理措施

<正>1小麦越冬前苗情诊断1.1总茎数诊断。基本标准:1 050~1 350个/m~2,冬前总茎数为成穗数的1.5~2倍。分蘖日增量为1万~1.5万/亩。11月中旬叶面系数在1左右,在0.6以下为不足,在1.2以上则群体过大。达到1 350~1 650个/m~2的为旺长苗,中等苗、小群体苗密度一般在750~900个/m~2。1.2个体诊断。冬前苗壮:标准叶片肥厚、颜色正常、根系发达,分蘖壮冬前主茎叶片6~7片,单株分蘖5~8个,单株次生根10条以上,年前不旺长,     

二倍体与四倍体黄毛草莓的光合特性

采用LI-6400便携式光合作用测定仪和SPAD-502叶绿素仪,测定二倍体与四倍体黄毛草莓叶片的光合作用日变化、光响应及相对叶绿素含量等参数,结果表明,夏季全光照环境下,黄毛草莓的净光合速率日变化呈"双峰"曲线,有明显的"午休"现象;1天中四倍体黄毛草莓的最大净光合速率、气孔导度、蒸腾速率分别为4.15μmol/(m~2·s)、0.088 mol/(m~2·s)、3.92 mmol/(m~2·s),分别比二倍体黄毛草莓高43.6%、29.4%、16.0%;胞间CO_2浓度的变化规律与净光合速率相反,午间胞间CO_2浓度升高,说明净光合速率午间降低主要是受非气孔限制因素的影响;四倍体黄毛草莓的光响应曲线中光饱和点、光补偿点、暗呼吸速率这3个指标极显著大于二倍体黄毛草莓,四倍体黄毛草莓的相对叶绿素含量极显著高于二倍体黄毛草莓(P0.01)。因此,四倍体黄毛草莓对光的适应性和光合作用能力强于二倍体黄毛草莓。     

退火温度、DNA聚合酶和扩增仪对水稻品种真实性SSR分子检测质量的影响

SSR标记法已经被广泛应用到水稻品种真实性的鉴定中,此方法具有快速、稳定等特点。本研究对比了不同退火温度、DNA聚合酶以及PCR扩增仪等因素对水稻品种真实性SSR分子检测方法的影响,旨在探讨如何根据实验室自身情况选择适合的反应体系和反应条件来顺利地开展检测工作。结果表明,55℃退火温度的PCR产物较有利于水稻品种真实性SSR标记的检测;2种PCR仪性能比较一致,均适合水稻品种真实性SSR标记的检测;Ta KaRa及生工Taq DNA聚合酶均适合水稻品种真实性SSR标记的检测,天根Taq DNA聚合酶不适合水稻品种真实性SSR标记的检测。不同实验室,应选择以上3个适合实验条件进行组合,以提高水稻品种真实性和纯度分子检测的准确性。     

江苏省耕地开垦费征收标准研究

在了解相邻省份耕地开垦费、调查省内部分市县耕地开垦费的征收与使用情况的基础上,在苏南、苏中、苏北分开发、复垦、整理类型选择9个典型项目区,综合测算出该地区单位面积新增耕地的综合投资标准,同时考虑到耕地开垦费的上缴比例、未来物价上涨及项目类型结构变化带来的影响,最终确定江苏省的耕地开垦费征收标准为苏南50元/m~2,苏中40元/m~2,苏北30元/m~2。标准区域差异的主要原因在于地区间各类型项目结构以及各地区同类型项目难度的不同。     

光照强度·温度·湿度和二氧化碳对人参光合速率的影响

以3年生绿果期人参为研究对象,通过控制光合仪叶室光照强度、温度、湿度和二氧化碳浓度变化来测量人参叶片的光合速率,并在饱和光照强度、温度、湿度和二氧化碳浓度条件下测定不同叶位光合速率。结果表明,绿果期人参光合有效辐射补偿点在4～10 mol/(m~2·s),饱和点在280 mol/(m~2·s);适宜温度在26～29℃,温度过高或过低都不利于光合作用;相对湿度饱和点在40%,相对湿度大于40%后光合速率无显著差异;二氧化碳补偿点在100 mol/mol,饱和点在900 mol/mol,二氧化碳浓度对光合速率影响最显著;人参植株间光合速率存在显著差异,单株人参叶位间光合速率无显著差异。     

松材线虫RAPD规范化反应体系的构建

 针对随机扩增DNA多态性(RAPD)低重复性的特点,在研究松材线虫遗传多样性的过程中,对可能影响RAPD扩增结果的PCR仪型号,模板DNA,Mg²⁺,TaqDNA聚合酶引物及dNTP浓度等因素进行了实验探索,以获得最佳反应条件,构建稳定的松材线虫RAPD扩增反应体系,结果发现上述影响因子在相当大的范围内对RAPD扩增结果的影响有限,进而对在不同实验室间的RAPD结果缺乏重复性和可比性的原因进行了讨论,认为模板DNA的污染是造成这一现象的重要原因,并在此基础上提出了相应的规范化操作建议.     

转基因玉米T25数字PCR方法的建立与验证

转基因安全管理和标识制度的实施需要标准化的检测方法和转基因检测标准物质，标准物质是获得准确、可靠、可比检测结果的保证。转基因玉米T25为我国批准进口用作加工原料的转基因植物。为加强对T25的监管，以T25基体标准物质为研究对象，建立数字PCR方法，并选择8家实验室，采用数字PCR联合定值测定。结果表明，T25/Adh1二重数字PCR系统具有良好的扩增特异性。初始模板量在100～10 000拷贝·μL-1之间可获得稳定、可靠的检测结果。通过多实验室协同定值说明T25/Adh1二重数字PCR方法准确、可靠。T25基体标准物质的量值为1.001 2，相对不确定度为0.001 6。研究表明建立的T25/Adh1二重数字PCR方法可以用于转基因玉米T25的定量检测，为转基因成分定量检测提供了物质基础和技术保证。     

不同种源黄芪光合特性研究

以14个种源黄芪1年生苗为材料,采用TPS-2型便携式光合仪测定其光合特性,对其指标数值进行比较以及主成分和聚类分析,旨在筛选出黄芪综合性状优质种源.研究结果表明:不同种源间黄芪各光合指标均存在显著差异,净光合速率、蒸腾速率、水分利用率、气孔导度和胞间CO_2浓度变化范围分别为2.68~12.68μmol·s~(-1)·m~(-2)、1.85~4.46 mmol·s~(-1)·m~(-2)、0.85~5.06μmol·mmol~(-1)、165.33~550.33μmmol·s~(-1)·m~(-2)和319.00~371.00μmol·mol~(-1);采用主成分分析表明,将黄芪光合性状简化为2个主成分,累计贡献率为94.36%;其聚类分析结果表明,将14份不同种源黄芪分为5个大类.