金顶侧耳种质资源的遗传多样性鉴定及农艺性状评价

以20个金顶侧耳(Pleurotus cituinopileatus)菌株作为研究材料,其中8株为栽培菌株,12株为野生菌株。利用ISSR分子标记技术分析金顶侧耳菌株种内遗传多样性,并对其菌丝长速、生物学效率、子实体形态等多个农艺性状进行评价。结果表明:20个金顶侧耳菌株具有丰富的遗传多样性,10条ISSR引物共扩增出92条条带,平均多态性条带频率为98.91%;在相似度0.65水平上绝大部分菌株按照中国北方和南方来源地不同聚为两大类群,显示较强的地域性。金顶侧耳平板上的菌丝长速与生物学效率(产量)不存在显著相关性,而生物学效率(产量)与采收时间显著负相关,菌盖直径、菌盖厚度及菌柄直径三者显著正相关,亲缘关系较远的菌株的农艺性状差异较大。根据评价结果,筛选出采收时间短、生物学效率高的菌株Pc6、Pc7及菌盖大、菌肉厚的菌株Pc13等携带优势性状菌株,可作为下一步育种研究的亲本材料。     

利用简单重复序列分子标记分析我国侧耳栽培菌株的遗传多样性(英文)

采用FIASCO方法,从糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株ACCC 50838分离简单重复序列分子标记(Simple sequence repeat,SSR),所得标记用于分析我国52个侧耳(平菇)栽培菌株多样性,对于SSR标记相同的菌株再进行ISSR PCR分析。结果表明:18个SSR标记在供试菌株中的等位基因的数量为3～12个,多态性指数(PIC)为0.34～0.84;除了2组(ACCC50618,ACCC 50866和ACCC 50915;ACCC 50249和ACCC50476)共5个菌株之外,其他47个菌株都能利用这18个SSR标记进行有效的鉴别。SSR标记相同的的菌株,其ISSR、体细胞不亲合性和出菇性状(温型、菌盖颜色)也相同,这些菌株可能是同物异名。利用这18个SSR标记分析52个菌株的遗传多样性,相似性指数为0.755～0.9995。根据相似性指数进行聚类分析,52个菌株分成两个大的类群,分别为糙皮侧耳(P.ostreatus)和肺形侧耳(P.pulmonarius)。结合这些栽培菌株的农艺性状和SSR分子标记的聚类分析结果,我国平菇栽培菌株的遗传多样性非常丰富。研究表明SSR分子标记技术在平菇遗传多样性和菌株鉴别中具有广泛的应用前景。     

巨大革耳遗传多样性的ISSR分析

为确定巨大革耳种质资源问的亲缘关系,本文应用ISSR分子标记技术,对来源不同地区的野生或栽培的9个巨大革耳菌株进行遗传多样性分析。从20个引物筛选获得4个ISSR多态性引物对巨大革耳菌株扩增,获得23条多态性条带,多态性比率为85．19％;对扩增结果进行聚类分析,当遗传距离为20％时,9个菌株聚为2类：I类包括C．m0002菌株;Ⅱ类包括其它的8个菌株。其中C．m0002菌株与其它8个菌株的遗传距离很远。经栽培出菇实验,结果表明,C．m0002菌株的子实体似多脂鳞伞（黄伞）,是同名异种;其它8个菌株均为巨大革耳。ISSR分析的结果与子实体形态特征一致。     

芥菜种质资源的RAPD和ISSR分析

利用RAPD和ISSR标记对28份芥菜种质资源进行遗传多样性分析,20个RAPD引物共扩增出162条清晰的谱带,其中140条显示多态性,平均每个引物扩增出7.0条多态性谱带.18个ISSR引物共扩增出143条清晰的谱带,其中多态性谱带124条,平均每个引物扩增出6.9条多态性谱带.基于RAPD和ISSR两种标记,利用UPGMA分别构建了28份芥菜资源的聚类树状图.结果表明,RAPD和ISSR分别聚类以及两种标记混合聚类均将28份芥菜种质分为3类:第Ⅰ类群中包括了15份种质;第Ⅱ类群中包括了9份种质;第Ⅲ类群中包括了4份种质.     

2株野生猴头菇的生物学特性、驯化和栽培模式研究

猴头菇野生资源丰富,可作为新品种选育的重要来源。以采集到的2株野生猴头菇为材料,基于内转录间隔区(ITS)序列进行鉴定,并开展生物学特性分析、驯化出菇试验和栽培模式研究。结果表明,2株野生菌株均为猴头菇,蔗糖、酵母粉、KH₂PO₄ 0.15%+MgSO₂ 0.1%分别为2个菌株通用的最适碳源、氮源和元素,最适培养温度均为20～25℃。2株野生猴头菇均可驯化出菇,与栽培菌株相比,2个野生菌株的子实体较大,菇形好,肉质紧密,产量高。其中野生驯化菌株A的平均生物学效率高达110.43%。2个野生菌株的最优栽培模式均为棚内立体床架摆放式栽培。本试验结果可为猴头菇野生菌株的驯化栽培提供参考,同时为今后猴头菇育种提供新的种质资源。     

25株草菇菌株的遗传多样性

为选育出更多适于寒区生产的草菇菌株,从6个草菇生产省引进了25株草菇(Volvariella volvace)菌株,利用表观形态与ISSR分子标记相结合技术对不同来源的草菇菌株进行遗传多样性分析。结果表明,利用c PDA培养基,在30℃恒温培养条件下,依据草菇的表观形态将25个供试草菇菌株划分成4个组群。利用ISSR分子标记聚类分析,相似水平在0.90时可将25个供试草菇菌株细分为8个组群。18号菌株在2种鉴别方法上的归类有差异,有待于栽培农艺性状进一步验证。     

蘑菇分离菌株(S1、S2)的ISSR分析

利用简单重复序列间扩增多态性（ISSR）对12株蘑菇属菌株（其中菌株S1、S2为河北康保分离的菌株，具自主知识产权）和3株属外参照菌株进行了遗传多样性分析，构建了遗传相关聚类图。本研究结果表明，河北康保分离的两株菌株S1和S2与现存生产上应用的同类菌种存在明显差异，同时也表明ISSR分子标记在蘑菇品种的鉴别和菌株亲缘关系分析上具有较好的适用性。     

基于ITS和ISSR标记的灵芝遗传多样性和群体结构分析

以来自不同地理区域的48个灵芝种质资源为试材,采用ITS和ISSR分子标记的方法,研究了灵芝遗传多样性,以期利用遗传信息数据较理想地显示出不同灵芝菌株的遗传多样性。结果表明：通过进行ITS序列扩增测序,将48个灵芝菌株分为赤芝(35个)、无柄灵芝(11个)、四川灵芝(1个)、古巴栓孔菌(1个)。5条ISSR引物共扩增得到53条条带,多态性条带比率为96.23%,Nei′s基因多样性为0.27,Shannon′s信息指数为0.43。ISSR标记遗传相似系数约为0.70,将48个灵芝菌株分为3组,其中第1组为11个无柄灵芝,第2组为菌株29“盆景1”,其他菌株为第3组,说明2种标记结合分析能够更加准确分析不同菌株间的亲缘关系。菌株16和17同为赤芝,且ISSR分子标记遗传相似系数达0.98,推测可能为同一品种,为生产中出现的同物异名现象。该研究选取的用于PCR扩增的ISSR引物,多态性较好、稳定性较高,能有效鉴别出无柄灵芝与其他灵芝,并揭示种质的遗传多样性和群体遗传结构,可为灵芝种质资源保护及优质种质材料选育提供参考依据,以期更好地推动灵芝产业健康发展。     

砧用南瓜种质资源形态学性状与SSR标记分析

搜集了设施黄瓜嫁接栽培中常用的47 份砧用南瓜种质资源,利用63 个形态标记和40 对南瓜SSR 标记,对其进行遗传多样性及亲缘关系鉴定。结果表明,砧用南瓜的8 个质量性状（嫩瓜皮色、瓜形、主蔓色、瓜面斑纹、叶面白斑、叶形、嫩瓜斑纹和嫩瓜斑纹色）和23 个数量性状的多样性指数大于1.00;SSR 标记共检测到167 个等位变异,平均每个SSR 位点的等位基因数为4.18 个,变幅2 ~ 8 个,平均多样性指数为0.62,变化范围0.16 ~ 1.18。非加权算术平均法（UPGMA）聚类分析表明,砧用南瓜63 个形态学性状将47 份种质划分为4 个类群,大部分品种集中于一个类群中;40 对多态性SSR 标记将所有种质划分为3 个类群,大部分品种的分子标记与形态学标记的聚类结果相似。已搜集的47 份砧用南瓜种质资源遗传多样性并不丰富,亲缘关系较近;SSR 标记CMTm11 具有极高的多态性,可用于砧用南瓜种质分子标记辅助选择;嫩瓜皮色等8 个质量性状和大部分数量性状都可以作为形态标记辅助种质资源评价及新品种选育。     

云南芋种质资源遗传多样性的AFLP分析

 采用荧光标记引物的AFLP分子标记技术, 用筛选出的“3 + 2”引物组合, 对48份云南芋种进行遗传多样性分析, 3对引物共扩增出184个DNA位点, 平均每对引物可检测出56.3个多态性位点,多态性位点高达91.8% , 云南芋种质资源在DNA分子水平上表现出极为丰富的遗传多样性。聚类分析表明: 野生种质和栽培种质的亲缘关系较远, 栽培种质基于AFLP标记的分类结果与形态性状基本一致, 少数材料差异较大。     

北方地区黑木耳部分主栽品种与野生菌株遗传多样性SSR分析

收集并采集黑木耳(Auricularia auricula-judae)野生菌株与主栽品种23份,以设计的10对SSR引物对其遗传多样性进行分析。结果表明,10对引物对23个菌株扩增的多态性信息含量在0.050~0.320,均值为0.216,Shannon信息指数0.100~0.690,均值0.455,引物MR005扩增效果最好,多态性最为丰富。对黑木耳23个菌株的聚类分析表明,北方地区黑木耳主栽品种与野生菌株可划分为4类,大部分主栽品种和野生菌株聚到了第三大类群(主栽类群),说明北方地区黑木耳栽培品种与野生菌株间遗传背景差异不大。     

中国栽培平菇的酯酶同工酶分析

采用电泳技术对我国大规模栽培的64个平菇商业菌株进行酯酶同工酶分析。结果表明，我国栽培平菇菌种多样性丰富，64个菌株有44个酶谱类型，不同菌株有各自特有的酯酶同工酶酶谱。聚类分析表明，供试菌株在60％相似水平上分为6大类：第一类包括以白黄侧耳为代表的21个菌株；第二类包括以德国引进菌株为代表的6个未定种名菌株；第三类包括7个白黄侧耳与佛罗里达侧耳杂交的杂交种及4个未定种名菌株；第四类包括以佛罗里达侧耳为代表的5个菌株；第五类包括以糙皮侧耳为代表的14个菌株；第六类包括以肺形侧耳为代表的7个菌株。     

金顶侧耳与黄白侧耳性亲和特性的研究

研究了金顶侧耳 (Pleurotuscitrinipileatus)与黄白侧耳 (Pleurotuscornucopiae)的性亲和性及其杂交菌株的特性 ,结果表明 :金顶侧耳与黄白侧耳相互亲和 ;获得的 2株杂交菌株CC - 1、CC - 2的生长最适宜温度分别为 2 3 38～ 2 4 6 2℃、 2 3 6 1～ 2 4 19℃ ,而其亲本金顶侧耳 (0 5 79)和黄白侧耳 (MH0 0 30 1)交配型基准株的最适宜生长温度分别为 2 4 0 3～2 6 37℃、 2 4 2 7～ 2 6 33℃ ,杂交菌株的最适宜生长温度均低于亲本菌株     

冀中南毛木耳栽培菌株的鉴定和优良菌株筛选

以10个毛木耳栽培菌株为试验材料,通过拮抗试验和ISSR分子标记对不同的毛木耳菌株进行鉴别,并研究其原种菌丝生长速度、子实体等农艺性状。结果表明:10个毛木耳菌株的遗传相似系数在0.59~0.93;在遗传相似系数0.75左右时,10个毛木耳菌株可以将10个菌株分为4类:第1类为"黄耳10号""北京8号""北京1号";第2类为"川黄耳1号";第3类"川白耳1号""川耳5号""上海1号""琥珀木耳";第4类为"43-1"和"毛9722",通过出耳试验筛选出耳片厚、商品性状好、产量和生物学效率高的毛木耳菌株"北京1号",其生物学效率为343.47%;其次是"北京8号",其生物学效率为292.77%,这2个毛木耳菌株为适宜冀中南地区栽培的优良菌株。     

异迟眼蕈蚊取食对不同侧耳菌株酶活性的影响

选择6个时间点（1、3、5、7、9、24 h）研究异迟眼蕈蚊（Bradysia difformis）幼虫取食对小白平（白色）、8801（灰色）、黑平（黑色）3个糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）菌株,淡红侧耳（P. djamor,红色）、金顶侧耳（P. citrinopileatus,黄色）共5个侧耳（Pleurotus spp.）菌株的菌丝4种酶（SOD、CAT、PAL、LOX）活性的影响,结果表明：在实验范围内,各菌株的SOD活性与对照相比,小白平极显著升高,金顶侧耳差异不显著;8801菌株在1 h极显著升高,在5、9 h显著升高;黑平在3、24 h极显著升高;淡红侧耳在1、3、7、9 h极显著升高,在5h显著升高。各菌株CAT活性与对照相比,小白平差异均不显著;8801仅在9h极显著升高;黑平在9、24h极显著升高;淡红侧耳在3、7、24 h极显著升高;金顶侧耳在1、5 h极显著升高,在5 h时其酶活性增加2倍以上。各菌株PAL活性与对照相比,小白平和8801差异均不显著;黑平在5、9、24 h极显著升高,在7 h显著升高;淡红侧耳仅在5 h显著升高;金顶侧耳在5...     

金顶侧耳酯酶同工酶多样性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对20个金顶侧耳菌株酯酶同工酶进行了研究。结果表明:金顶侧耳酯酶同工酶酶谱具有丰富的多样性。共检测出14条酶带,其中迁移率相同酶带3条。迁移率不同酶带有11条,多态性为78.6%;聚类分析的树状图中,相似系数0.80时,可将供试菌株分成七大类。     

不同杏鲍菇品种种质鉴定及原生质体单核体杂交育种

以7个生产上常用的杏鲍菇菌株为试材，采用拮抗试验、酯酶同工酶技术、ISSR分子标记技术对不同杏鲍菇菌株进行鉴别分类；进而利用原生质体单核体杂交育种技术，将不同种类、不同交配型菌株进行单单杂交，筛选出杂交成功且具有锁状联合的杂交菌株，对比杂交菌株与亲本菌株的菌丝生长速率、农艺性状等，以期为杏鲍菇的实际生产与栽培提供优良种质资源。结果表明：拮抗反应、酯酶同工酶、ISSR的研究结果一致，将7个杏鲍菇菌株分为3类，第1类为12、16、1208、1219、1287菌株；第2类为1283菌株；第3类为1284菌株。通过原生质体单核体杂交技术，获得24个杂交菌株；与亲本对比，筛选出了5个菌丝生长速率、菇体质量显著优于亲本的菌株，分别为ZJ5、ZJ8、ZJ11、ZJ17、ZJ22菌株。     

糙皮侧耳杂交后代遗传多样性分析

以糙皮侧耳Pleurotus ostreatus白色菌株P1和深灰色菌株P2为亲本,通过单孢菌株配对杂交获得40个杂交组合。出菇记录杂交后代子实体颜色,提取42个样本的全基因组DNA,用ISSR进行遗传多样性分析。结果表明:6条ISSR引物共扩增出45条带,其中多态性条带34条,多态性比率为75.56%,有效等位基因数为Ne=1.4858,遗传多样性指数H=0.2725,香农信息指数I=0.4021。聚类分析后发现,在0.6889水平上聚为4类,聚类结果与子实体颜色关系不大,表明糙皮侧耳杂交后代存在丰富的遗传变异。分类结果将有利于更好的利用这些丰富的育种资源。     

杏鲍菇多孢分离菌株ISSR、RAPD分子标记及体细胞不亲和性分析

通过杏鲍菇多孢分离菌株的ISSR、RAPD分子标记和体细胞不亲和性分析,体细胞不亲和性分析得出子代杏1、杏3、杏4与出发菌株湘杏98有拮抗线,杏1、杏2、杏3、杏4四株子代均有明显的拮抗线。16条ISSR引物和19条RAPD引物分别扩增出99、154个条带,多态性条带分别占48.48%、61.00%;相似系数变异范围分别为0.63~0.86、0.57~0.83。湘杏98、杏2、杏3在2种标记的聚类结果上存在差异。体细胞不亲和性分析从表型上(拮抗线有无)反应了菌株的遗传变异。RAPD标记遗传相似系数小于ISSR标记,表明ISSR标记更适合亲缘关系较近的种群间遗传多样性分析。     

糙皮侧耳种质主要农艺性状的遗传多样性及聚类分析

对筛选出的22份糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)种质资源农艺性状进行了遗传多样性和聚类分析,结果表明这些种质存在丰富的遗传多样性,其中多样性指数最高的是菌盖厚度(1.96cm)和菌柄直径(1.94cm);7个数量性状都存在较大的变异,变异系数幅度为13.16%~35.57%,遗传多样性指数平均为1.83;菌盖颜色和菌柄硬度2个质量性状的多样性指数平均为0.78;基于各种质间主要农艺性状的遗传差异,将22份糙皮侧耳种质资源分为3大类群。第Ⅰ类群原基形成时间长,产量较低;第Ⅱ类群种质资源菌柄软、颜色深,产量较高;第Ⅲ类群为高产型类群,该类群种质资源原基形成时间短、菌柄硬、产量高。